2019年探究长春西汀对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用word版本 (3页)
洛伐他汀在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中作用的实验探究
ｏｆｆ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ．Ａｆｔｅｒ Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ ｗａｓ ａｄ皿ｎ主ｓｔｅｒｅｄ，ｓｅｒｕｌｌｌ Ｃｒ，ＢＵＮ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ６．３４％、
１１．６２％（ｐ＜Ｏ．０５）ｒｅＳｐｅｃｔｉｖｄｙ ｃｏｍｐａｌ硝试ｔｈ Ｉ／Ｒ ４ｈ ｇｒｏｕｐ；Ｔｈｅ ｅ）（ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭｃＰ一１ ｉｎ
单核细胞趋化蛋白一ｌ在肾脏缺血再灌注中表达呈动态变化。洛伐他汀可在一定程 度上降低ＭｃＰ一１的表达，减轻肾功能损害，提示洛伐他汀除了具有降伐他汀；肾脏；缺血再灌注；ＭＣＰ一１
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０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ａ跚ｎ洫ｅ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｂｎ ｏｆ ｒｎｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｈ—ｌ
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ｏｃｃａｓｉｏｎ．Ｗｅ ｃ甜ｄ。＿ｂｓｅｍ ｔｈｅ ｅｘｐｆｅＳＳ渤ｏｆ ＭｃＰ—ｌ ｉｎ—
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（ＭＣＰ一１）ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｓ’ｋｉｄｒｌｅｙ ｔｉｓＳｕｅ ｆｏｕｏ丽ｎｇ ｒｅｎａＩ ｉＳｃｈｅｒｌｌｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ（Ｉ／Ｒ）．Ａｔ ｔｈｅ
ｓａｎｌｅ ｔｈｅ，ｔｏ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｖ弧１１９ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｒｎｅｃｈａｎｉ锄ｓ ｏｆ Ｌ０、ｍｔａｔｉｎ ｏｎ Ｉ，Ｒ ｉ１１ｊｕｒｙ ｉｎ． ｗｅｒｅ湖一 ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｆ ｒｅｄｕｃｈｇ ｔｈｅ ｓｅｍｍ ｃｈｏＬｅｓｔｅｒｏｌ ｌｅｖｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｓｉｘｔｙ ｍａｌｅ ＳＤ ｒａｔｓ ｄ（粥ｄｙ ｄｉｖｉｄｅｄ血ｔｏ ｓ波ｇｒｏｕｐｓ：ｓｈ锄ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｒｃ眦ｐ、ｒｅｎａｌ Ｉ／Ｒ Ｏｈ ｇｒｏｕｐ、Ｉ／Ｒ ４ｈ ｇｒｏｕｐ、Ｉ／Ｒ １２ｈ、Ｉ／Ｒ ２４ｈ ａｎｄ Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ ｇｒｏｕｐ．Ａ ｍ血ｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｒｅｎａｌ Ｉ，Ｒ ｉｎｊｕｒｙ ｗａｓ ｍａｄｅ ｔｏ ｄ锄ｐ
Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤后行为能力、齿状回与海马修复及其作用..
中图分类号：R743.31单位代码：10660 UDC：611 学号：1210660170057 学科专业代码：100101 密级：公开贵州医科大学2020 届硕士学位论文（科学学位）Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤后行为能力、齿状回与海马修复及其作用机制的探讨1 Repair mechanism investigation of Noggin protein on behavioral ability, dentate gyrus and hippocampus after cerebral ischemia-reperfusion injury in mice1论文作者：龙婷婷指导教师：余资江教授朱俊德教授申请学位：医学硕士培养单位：基础医学院学科专业：人体解剖与组织胚胎学研究方向：脑缺血性损伤与修复研究起止日期：2017年09月至2020年03月论文评阅人：杨胜波教授，唐中生教授答辩委员会主席：罗亚非教授论文答辩日期：2020年05月30日二〇二〇年五月本课题受到国家自然科学基金项目资助（编号：81660243）Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤后行为能力、齿状回与海马修复及其作用机制的探讨1专业：人体解剖与组织胚胎学硕士研究生：龙婷婷导师：余资江朱俊德【摘要】目的：探讨侧脑室注射Noggin蛋白对小鼠脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)后不同时期行为能力、齿状回（Dentate gyrus, DG）结构与海马骨形态发生蛋白4（Bone morphogenetic protein 4，BMP4）、骨形态发生蛋白6（Bone morphogenetic protein 6，BMP6），以及CIRI后炎症反应、氧化应激、细胞凋亡等发病机制的影响，以期为临床缺血性脑血管疾病的预防与治疗提供新的策略。
方法：（1）324只昆明雄性小鼠按数字表法随机分为：假手术组(sham，n=108）、缺血再灌注损伤组(Ischemia/Reperfusion，I/R，n=108）、缺血再灌注损伤+Noggin治疗组(Noggin，n=108），每组再分为1d、3d、7d、14d 共4个亚组。
芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的肾保护作用及其机制研究
芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤模型小鼠的肾保护作用及其机制研究目的：研究芬戈莫德对肾缺血再灌注损伤（RIRI）模型小鼠的肾保护作用及其机制。
方法：将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、芬戈莫德组（1 mg/kg）和芬戈莫德+wortmannin组[芬戈莫德1 mg/kg+磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）特异性阻滞药wortmannin 1.4 mg/kg]，每组15只。
除假手术组外，其余3组小鼠均建立RIRI模型，术前24 h一次性经尾静脉注射相应的药物。
再灌注24 h后收集每组小鼠血清，使用全自动生化分析仪测量各组小鼠血清中血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平；光镜下观察肾组织病理变化；Western blot法检测肾组织中细胞间黏附分子1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白的表达。
结果：与假手术组比较，模型组小鼠血清中Scr和BUN 水平明显升高（P＜0.01）；肾组织出现病理性改变，肾小管上皮细胞坏死，炎性细胞浸润；肾组织中ICAM-1和MCP-1蛋白表达水平明显升高（P＜0.01），p-Akt 蛋白表达水平轻微升高（P>0.05）。
与模型组比较，芬戈莫德组小鼠除肾组织中p-Akt蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）外，其余指标均明显改善（P＜0.01）。
与芬戈莫德组比较，芬戈莫德+wortmannin组小鼠的上述指标变化均逆转（P＜0.05或P＜0.01）。
结论：芬戈莫德能减轻RIRI模型小鼠的肾损伤，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the protective effect of fingolimod on renal ischemia reperfusion injury （RIRI）model mice and its mechanism. METHODS：A total of 60 mice were randomly divided into sham operation group，model group，fingolimod group （1 mg/kg）and fingolimod+wortmannin group [fingolimod 1 mg/kg+phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K）specific blocker wortmannin 1.4 mg/kg]，with 15 mice in each group. Except for sham operation group，RIRI model was induced in other 3 groups，and those model mice were given relevant medicine via caudal vein at once 24 h before surgery. Serum of mice were collected in each group after 24 h perfusion. Serum levels of Scr and BUN were measured by automatic biochemical analyzer. The pathological changes of renal tissue were observed under light microscope. The protein expression of intercellular cell adhesion molecule-1 （ICAM-1），monocyte chemoattractant protein-1（MCP-1）and phosphorylated protein kinase B （p-Akt）in renal tissue were measured by Western blot assay. RESULTS：Compared with sham operation group，the serum levels of Scr and BUN in model group were increased significantly （P＜0.01）. Pathological changes were found in the kidney，and RIRI led to widespread renal tubular epithelial cell injury，apoptosis and inflammatory cells infiltration. The protein expression of ICAM-1 and MCP-1 in renal tissue were increased significantly （P＜0.01），the protein expression of p-Akt was increased slightly （P>0.05）. Compared with mo- del group，other indexes of fingolimod group were improved significantly （P＜0.01）except that the protein expression of p-Akt in renal tissue was increased significantly （P＜0.01）. Compared with fingolimod group，above indexes of fingolimod+wortmannin group were reversed （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：Fingolimod can obviously ameliorate renal injury induced byRIRI in mice，the mechanism of which may be associated with the activation of PI3K/Akt signaling pathway.KEYWORDS Fingolimod；Renal ischemia reperfusion injury；Mice；Phosphatidylinositol 3-kinase；Phosphorylated protein kinase B肾缺血再灌注损伤（RIRI）是临床常见的病理过程，如处理不及时可能使多个脏器受累。
预处理和后处理对大鼠后肢缺血-再灌注肾损伤的保护作用
预处理和后处理对大鼠后肢缺血-再灌注肾损伤的保护作用张彦荣;王志波;张峰;李锰;毕伟【期刊名称】《疑难病杂志》【年(卷),期】2010(009)011【摘要】目的观察肢体缺血预处理、后处理对大鼠后肢缺血-再灌注肾损伤的保护作用.方法取雄性Wistar大鼠24只,建立后肢肌肉缺血-再灌注模型,实验分为4组,每组6只,A组为假手术组,只进行常规解剖不阻断血管,15 h处理;B组为缺血-再灌注组,缺血6 h,再灌注9 h;C组为缺血前给予10 min缺血,10 min灌注,重复3次后行缺血5.5 h,再灌注8.5 h组;D组为缺血5 h 57 min,再灌注前给予1 min灌注,1 min缺血,重复3次后继续再灌注8 h 57 min.各组大鼠均取血清检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐(Cr)含量及肾组织匀浆丙二醛(MDA)含量,取肾组织石蜡包埋,HE 染色,观察其病理形态学变化.结果 B、C、D组上述指标均明显高于A组(P<0.01),C、D组明显低于B组(P<0.01),C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05).A组组织形态基本正常,C、D组组织形态学改变较B组明显减轻.结论肢体缺血预处理、后处理均可减轻实验大鼠后肢缺血-再灌注肾损伤,且无差异.【总页数】3页(P820-821,封3)【作者】张彦荣;王志波;张峰;李锰;毕伟【作者单位】050000,石家庄,河北医科大学第二医院血管外科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院血管外科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院血管外科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院血管外科;050000,石家庄,河北医科大学第二医院血管外科【正文语种】中文【中图分类】R6【相关文献】1.缺血后处理对双后肢缺血-再灌注大鼠小肠的影响 [J], 张艳;冷玉芳;薛兴;张悦;汪涛;康于庆2.亚低温缺血预处理对大鼠肠缺血再灌注肾损伤的保护作用 [J], 高卉;白育庭;周水生;周燕红;罗德生;查文良;阮明凤3.丁苯酞预处理对大鼠缺血／再灌注肾损伤保护作用的实验研究 [J], 薛建峰;段鲁勤;孙海棚4.血必净预处理对大鼠肠缺血-再灌注肾损伤的保护作用 [J], 黄燕燕5.11，12-环氧二十碳三烯酸预处理与后处理对缺血／再灌注大鼠心肌的保护作用[J], 王艳霞;芦玲巧;王晓燕;穆晶;曾翔俊;张立克;唐朝枢;郝刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
盐酸右美托咪啶对缺血再灌注肾损伤小鼠的肾小管保护作用
盐酸右美托咪啶对缺血再灌注肾损伤小鼠的肾小管保护作用卜林;陈艳【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2016(026)010【摘要】目的缺血再灌注肾损伤(IR)是围手术期常见的疾病,本研究通过构建缺血再灌注肾损伤模型,观察右美托咪啶(Dex)注射对受损肾小管的保护作用及机制.方法将60只小鼠随机分为对照组、IR模型组和IR+Dex组(简称Dex组),制备IR模型后24 h分别处死3组小鼠取肾组织.用全自动生化分析仪测定血肌酐(Scr)及尿素氮(BUN).采用HE染色观察各组小鼠肾组织的形态,评定肾小管损伤程度;免疫组织化学染色测定低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达.结果对照组的肾小管结构与形态均正常.IR模型组肾小管损害明显、HIF-1α及MCP 1表达均增高.而Dcx组肾小管损害程度较轻,HIF-1 α及MCP-1表达均较IR模型组减低,肾小管上皮细胞低氧程度及炎症反应均较IR模型组明显减轻.Dex组小鼠的血肌酐及尿素氮水平较IR模型组明显降低.结论 Dcx可以通过抑制炎症反应、减轻肾小管上皮细胞低氧程度从而减轻IR小鼠肾小管的损害,保护肾脏功能.【总页数】5页(P1-5)【作者】卜林;陈艳【作者单位】徐州医学院附属医院重症医学科,江苏徐州221003;徐州医学院附属医院肾脏内科,江苏徐州221003【正文语种】中文【中图分类】R692;R-332【相关文献】1.肾损伤分子-1在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的保护作用 [J], 霍文谦;张克勤2.松弛素对缺血再灌注小鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用 [J], 雷奎; 苟中富; 王建新3.松弛素对缺血再灌注小鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用 [J], 雷奎; 苟中富; 王建新4.二乙酰胺三氮脒对肢体缺血再灌注模型小鼠肾损伤的保护作用及其机制 [J], 王建军; 刘亚楠; 王建辉; 刘燕; 李颖; 王瑞雪; 杨秀红5.Apelin在急性肾损伤中对肾小管上皮线粒体的保护作用 [J], 王丽妍; 关毅鸣; 刁宗礼; 刘文虎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
氟西汀预处理对缺血再灌注小鼠海马DNA损伤修复蛋白Ku80和XRCC1的影响
氟西汀预处理对缺血再灌注小鼠海马DNA 损伤修复蛋白Ku80和XRCC1的影响王志坚,王晓敏 (嘉兴学院医学院解剖教研室,浙江 嘉兴 314001)[摘 要] 目的:探究氟西汀预处理对脑缺血再灌注(I /R )小鼠DNA 损伤修复蛋白Ku80和XRCC1的影响㊂方法:将120只小鼠,随机分为假手术组(Sham )㊁缺血再灌注组(I /R )和氟西汀组(Fluo ),每组各40只㊂采用线栓法建立I /R 小鼠模型,在术前1周给予连续灌胃氟西汀[10mg /(kg ㊃d )]处理,其他组给予相同量的生理盐水灌胃㊂在再灌注2h ㊁12h ㊁24h 和48h 分别进行TTC 染色,通过Western blot 测定DNA 损伤修复蛋白定位和变化㊂结果:与Sham 组相比,再灌注24h 脑梗死面积出现明显增加,再灌注2h DNA 损伤及修复蛋白Ku80和XRCC1表达明显下调㊂与I /R 组相比,Fluo 组在灌注12h ㊁24h 和48h 脑梗死面积明显减小,再灌注2h 开始DNA 损伤及修复蛋白Ku80和XRCC1表达明显上调㊂结论:氟西汀预处理后,再灌注小鼠海马DNA 损伤修复蛋白Ku80和XRCC1表达增加,改善了再灌注小鼠海马DNA 损伤修复功能㊂[关键词] 氟西汀;I /R 小鼠;DNA 损伤修复;Ku80;XRCC1基金项目:浙江省基础公益科技计划研究项目[项目编号:LGD19C090002]Effects of fluoxetine preconditioning on DNA damage repair pvoteins ku 80and XRCCI in hippocam⁃pus of ischemia -reperfusion mice WANG Zhi -jian ,WANG Xiao -min (Department of anatomy ,medical college ,Jiaxing University ,Jiaxing 314001,China )Abstract :Objective To investigate the effects of fluoxetine preconditioning on DNA damage repair proteins KU80and XRCC1in mice with cerebral ischemia reperfusion (I /R).Method 120mice were randomly divided into Sham group (Sham),I /R group (I /R)and fluoxetine group (Fluo).40mice in each group.The mouse Model was established by suture method.Fluoxetine [10mg /(kg㊃d)]was given continuously one week before operation,and the other groups were given the same amount of normal saline.TTC staining was performed at 2h,12h,24h and 48h respectively the localization and changes of DNA damage repair proteins were determined by western blot.Results Compared with Sham group,the infarct size was signif⁃icantly increased after 24h reperfusion.The expression of KU80and XRCC1were significantly decreased after 2h reperfu⁃pared with I /R group,the area of cerebral infarction was significantly decreased at 12h,24h and 48h.The expres⁃sion of KU80and XRCC1was up-regulated at 2h after reperfusion.Conclusion The expression of KU80and XRCC1in hippo⁃campus DNA damage repair protein was increased after fluoxetine pretreatment,which improved the function of hippocampusDNA damage repair.Key Words :Fluoxetine;I /R Mice;DNA damage repair;KU80;XRCC1 脑缺血再灌注损伤是一种临床常见疾病,患者缺血再灌注后常常会导致残疾甚至是死亡[1],对患者和社会构成了极大的负担㊂再灌注时脑中神经元常常出现DNA 的破坏,同时DNA 的修复能力也降低,进一步导致受损神经元死亡[2]㊂以往研究表明,氟西汀对抑郁症患者认知,神经功能的改善有作用[3],在脑缺血再灌注损伤中的作用尚未十分明确㊂本文主要探究氟西汀预处理对脑缺血再灌注(I /R)小鼠DNA 损伤及修复蛋白Ku80和XRCC1的影响㊂1 材料与方法1.1 动物和分组:C57成年健康小鼠120只,从浙江大学动物中心购买㊂适应性饲养1周后,随机编号,分成3组:假手术组(Sham)㊁缺血再灌注组(I /R)和氟西汀组(Fluo),每组各40只,本次研究经过本院医学伦理委员会同意㊂1.2 方法1.2.1 主要试剂:氟西汀(苏州礼来公司),Western blot 试剂(碧云天),K80和XRCC1抗体㊂1.2.2 建立I /R 模型及给药:根据改良Longa.Zea 氏法制作I /R 模型[4]㊂小鼠麻醉后,固定消毒剃毛,颈正中线处切口,分离各层组织,暴露右侧颈部动脉㊂分别找出颈内动脉(ICA)㊁颈外动脉(ECA)和颈总动脉(CCA),结扎CCA 和ECA,ICA 靠CCA 处打一个活结,然后上端用小动脉夹夹住,CCA 上开一个小口,插入线栓,线栓经过ICA 慢慢到大脑中动脉,阻断大脑供血㊂缺血2h 后立刻取出鱼线,结扎缝合,并进行消毒处理㊂将小鼠放置于温暖的环境㊂假手术组只暴露动脉血管,并不结扎血管,不插入鱼线阻断供血,其他步骤相同㊂1.2.3 TTC染色:取各组小鼠新鲜大脑,置于-30℃冰箱速冻10min,取出后冠状切,厚度约2mm,1%TCC染色浸泡,置于37℃水浴30min后取出拍照㊂计算小鼠脑梗死体积比㊂1.2.4 Western blot:处死小鼠,迅速取脑,并分离缺血侧的海马组织,提取总蛋白,凝胶电泳(80V,40min与110V, 70min),经过转膜封闭,加入抗体XRCC1和Ku80孵育过夜,第2天加入羊抗兔二抗,显影定影,用软件分析灰度值㊂1.3 统计学分析:应用Gragh Pad Prism5统计学软件分析数据,多组之间比较采用单因素方差分析,计量数据以均数±标准差(x±s)表示,P<0.05为差异有统计学意义㊂2 结果2.1 各组小鼠脑梗死体积比:由表1可知,与Sham组相比, I/R组在2h㊁12h㊁24h㊁48h后脑梗死体积明显上升,而Fluo 组在灌注24h开始出现明显下调,差异具有统计学意义(P< 0.05)㊂氟西汀预处理后,I/R组小鼠脑梗死体积减少㊂见表1㊂表1 脑梗死体积比(x±s,%)组别2h12h24h48h Sham组3±0.245±0.364.5±0.363±0.32 I/R组12±0.60①15±0.66①20±0.83①18.2±0.61①Fluo组11±0.8814±0.4012±0.99②12±0.76② 注:与Sham组比较,①P<0.05;与I/R组比较,②P<0.052.2 各组小鼠DNA损伤修复蛋白的变化:与Sham组相比, I/R组在2h㊁12h㊁24h㊁48h后DNA损伤修复相关蛋白XRCC1和Ku80表达上升,而Fluo组再灌注2h就开始出现明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05),见表3㊁表4㊂表3 各组小鼠海马XRCC1的含量测定(x±s)组别2h12h24h48h Sham组1.0±0.020.9±0.10.87±0.041.02±0.12 I/R组0.77±0.13①0.56±0.16①0.47±0.03①0.53±0.05①Fluo组1.05±0.08②0.78±0.14②0.83±0.19②0.86±0.06② 注:与Sham组比较,①P<0.05;与I/R组比较,②P<0.05表4 各组小鼠海马K80的含量测定(x±s)组别2h12h24h48h Sham组1.35±0.121.45±0.171.48±0.091.43±0.05 I/R组0.6±0.03①0.67±0.05①0.70±0.06①0.69±0.09①Fluo组1.15±0.04②1.18±0.18②1.20±0.08②1.22±0.06② 注:与Sham组比较,①P<0.05;与I/R组比较,②P<0.053 讨论 脑缺血后,大脑许多结构和功能均发生改变,此时若脑组织再次充血,即再灌注,脑组织的损伤不但得不到任何缓解,反而更加严重,主要表现在炎性反应㊁氧化应激和细胞凋亡等方面,其中很严重的是神经细胞发生代谢障碍,尤其是DNA 损伤修复能力受到干扰,进一步导致细胞走向死亡㊂XRCC1和Ku80是哺乳动物DNA修复的关键蛋白[5-6],检测二者表达可以反映DNA损伤修复的功能㊂ 氟西汀是突触间隙5-HT再摄取的抑制剂,常用于抑郁症的治疗[7],近年研究证明,氟西汀对I/R后神经功能的恢复㊁学习记忆能力有一定的帮助,对I/R后抑郁也同样有着治疗效果[8]㊂本研究结果显示,与I/R组相比,Fluo组脑梗死面积明显减小,再灌注2h开始DNA损伤及修复蛋白Ku80和XRCC1表达明显上调㊂说明氟西汀预处理后,再灌注小鼠海马DNA损伤修复蛋白Ku80和XRCC1表达增加,改善了再灌注小鼠海马DNA损伤修复功能㊂4 参考文献[1] Versteilen AM,Di Maggio F,Leemreis JR,et al.Molecular mechanisms of acute renal failure following ischemia/reperfusion [J].Int J Artif Organs,2004,27(12):1019-29.[2] Muthupalani S,Ayata C,Samson LD.Aag-initiated base ex⁃cision repair promotes ischemia reperfusion injury in liver,brain, and kidney[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2014,111(45): E4878-86.[3] 周 波,肖 军,吴景芬,等.氟西汀对脑卒中后非抑郁患者神经功能康复的影响[J].中国临床康复,2003,7(3): 374-375.[4] Bederson J B,Pitts L H,Tsuji M,et al.Rat middle cerebral artery occlusion:evaluation of the model and development of a neurologic examination[J].Stroke,1986,17(3):472-476. [5] León-Mejía G,Quintana-Sosa M,de Moya Hernandez Y,et al.DNA repair and metabolic gene polymorphisms affect genetic damage due to diesel engine exhaust exposure[J].Environ Sci Pollut Res Int,2020,27(6):1.[6] Abello A,Régnier V,Arnaiz O,et al.Functional diversifica⁃tion of Paramecium Ku80paralogs safeguards genome integrity during precise programmed DNA elimination[J].PLoS Genet, 2020,16(4):e1008723.[7] Ramsteijn AS,Jašarevic'E,Houwing DJ,et al.Antidepres⁃sant treatment with fluoxetine during pregnancy and lactation mod⁃ulates the gut microbiome and metabolome in a rat model relevant to depression[J].Gut Microbes,2020,23:1-19.[8] Bertoni S,Arcaro V,Vivo V,et al.Suppression of inflamma⁃tory events associated to intestinal ischemia-reperfusion by5-HT1A blockade in mice[J].Pharmacol Res,2014,81:17-25.[收稿日期:2020-04-29 编校:王丽娜]。
右美托咪啶对肾缺血再灌注损伤的保护作用
Dex对肾缺血再灌注损伤肾保护的作用机制
▪ Sugita等发现大鼠再灌注期持续输注Dex可以通过抑制iNOS的表 达减少细胞损伤。Lempiainen等的研究表明Dex可能通过上调 p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化诱导其下游介质eNOS的活化， 从而对肾I/R损伤进行保护。
▪ 缺血期肾缺氧会导致细胞内抗氧化酶（超氧化物歧化酶，过氧化 氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等）活性降低、氧自由基清除减少、 体内活性氧物质（ROS）增多；再灌注期重新氧合时，线粒体中 未偶联的分子氧不完全还原又产生大量活性氧物质。
Dex对肾缺血再灌注损伤肾保护的作用机制
▪ 鄢娜等发现Dex预处理可以提高大鼠肾I/R后肾对氧自由基的清除 能力，提高总抗氧化能力，减少乳酸堆积情况，进而起到对肾及 肝的保护作用。Cakir等也在大鼠I/R后肾组织中发现超氧化物歧 化酶和过氧化氢酶及过氧化产物丙二醛表达上升，而预先使用 Dex可以减少再氧合时活性氧物质的大量合成。
Dex对肾缺血再灌注损伤的保护作用
▪ 2018年Li等发现Dex预处理（缺血前40 min静脉注射Dex10 μg/kg）减少了小鼠I/R诱导的肾纤维化病变程度，缓解急性肾损 伤向慢性肾脏疾病迁延转化。体外实验中Gu等对人肾小管上皮细 胞（HK-2cell）采用氧糖剥夺（OGD）方式模拟缺血期、常氧+ 完全培养基环境模拟再灌注期，经细胞毒性检测发现：
右美托咪啶对 肾缺血再灌注 损伤的保护
副标题
前言
▪ 右美托咪定（Dex）是一种α2肾上腺素能受体激动剂，因其具有 镇静作用良好、呼吸抑制较小、血流动力学稳定、抗交感神经作 用等特性而广泛应用于临床麻醉。肾移植和肾部分切除等手术中 阻断肾血流可能会引起肾缺血再灌注（I/R）损伤，通过扰乱肾血 流动力学、引发内皮细胞和肾小管细胞损伤、炎症等综合作用导 致急性肾损伤（AKI）和慢性肾病（CKD）的发生，影响患者术 后康复。
缺血预处理对常温下肾脏缺血再灌注损伤的保护作用
缺血预处理对常温下肾脏缺血再灌注损伤的保护作用孙翔;王道仁;曹润福【期刊名称】《实用临床医学》【年(卷),期】2003(004)005【摘要】目的:探讨缺血预处理对大鼠常温缺血再灌注损伤是否有保护作用.方法:SD 大鼠分为3组,假手术组(S组),缺血再灌注组(IR组),预处理组(PC 组).于再灌注24 h取血、尿及肾组织标本,行血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、尿微量白蛋白(UALB)、尿al-微球蛋白(Ual-M)测定及形态学检查.结果:(1)血Scr、BUN、MDA、尿UALB、Ual-M:PC 组明显低于IR组(P＜0.05).(2)血SOD、NO:PC组明显高于IR组(P＜0.05).(3)形态学:IR组可见大量肾小管坏死,超微结构多呈不可逆性改变.PC组肾小管坏死较少,超微结构多为可逆性改变.结论:缺血预处理对常温下大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用.【总页数】3页(P20-22)【作者】孙翔;王道仁;曹润福【作者单位】江西医学院第一附属医院泌尿外科,江西,南昌,330006;江西医学院第一附属医院泌尿外科,江西,南昌,330006;江西医学院第一附属医院泌尿外科,江西,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤保护作用的研究进展 [J], 师梅;李荣山2.PKC和HSP70表达在缺血预处理大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用 [J], 刘少青;沈秀萍;迟玉友;尹洪山;李刚;苏庆国3.不同缺血预处理方案对大鼠肾脏缺血再灌注损伤组织HSP70表达的研究 [J], 张立元;刘剑华;张林;尹忠诚4.缺血预处理对于小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 管瑀;李磊;田野5.IL-1β在缺血预处理对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤中第二窗保护作用的实验研究[J], 张广伟;徐文超;杜信毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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探究长春西汀对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用
肾缺血再灌注(IR)是一常见的临床问题，肾移植、肾部分切除术、肾部分血管
成形术、休克复苏等均可造成不同程度的肾IR损伤，是造成急性肾衰竭和移植肾功能恢复延迟的主要原因。
其病理损伤机制比较复杂，主要涉及氧化应激、
炎症因子的释放和细胞凋亡等。
长春西汀是从夹竹桃科小蔓长春花提取的生物碱，临床上一直用于缺血性脑血管疾病的治疗和预防，它在脑、肝等IR损伤中的保护作用已被报道，但其在肾IR的作用还是未知的。
本研究旨在探讨长春西汀在肾IR损伤中的保护作用。
1 材料与方法
1.1 材料健康雄性昆明白小鼠，体质量30～40g(滨州医学院动物实验中心)。
长春西汀注射液购自山东瑞阳制药有限公司。
小鼠肿瘤坏死因子(TNF-)、白细
胞介素-1(IL-1)、IL-6酶联免疫吸附试验试剂盒购自达科为生物技术有限公司。
超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
BCA 蛋白水平测定试剂盒购自烟台赛尔斯生物技术有限公司。
1.2 方法
1.2.1 动物分组和模型制备将小鼠分成4组：(1)假手术组(n=8);(2)IR组
(n=8);(3)长春西汀低剂量干预组(n=8);(4)长春西汀高剂量干预组(n=8)。
小鼠用氯胺酮/甲苯噻嗪(80/10mg/kg)腹腔麻醉后仰卧在手术台上，腹部备皮、消毒后正中切口，游离左右肾蒂，假手术组不夹闭，其余3组分别用无损伤血管夹
夹闭，45min后松开恢复血流，以肉眼观察肾脏颜色变化来判断肾脏缺血或再
灌注是否成功。
长春西汀低剂量和高剂量干预组分别在术前1h腹腔注射长春西汀10mg/kg和20mg/kg;假手术组和IR组同时给予等量生理盐水。
再灌注24h
后打开腹腔，下腔静脉取血分离血清，取一部分肾组织Bouin氏液固定，剩余
肾组织用冰磷酸盐缓冲液漂洗后-70℃保存。
1.2.2 组织学评价取小鼠肾组织，Bouin氏液固定24h，常规制备石蜡切片，
脱蜡水化后用 HE试剂盒染色，光镜下观察肾脏的组织形态变化。
1.2.3 血清指标检测血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平采用全自动生化分析仪(美国德灵 Dimension RXL Max)测定。
按照ELISA试剂盒说明书检测血清中TNF-、IL-1、IL-6水平。
1.2.4 肾组织中 MDA水平和SOD活性检测称1g肾组织，放入玻璃匀浆器中，
加冷生理盐水在冰上研磨成10%的组织匀浆，3 000r/min低温离心10min后取
上清液，分别按照试剂盒操作步骤对 MDA水平和SOD活性进行检测。
蛋白浓度
用BCA蛋白水平测定试剂盒检测。
1.3 统计学处理采用SPSS18.0统计学软件进行分析，计量资料采用xs表示，多组数据间的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 LSD法，以P0.05
为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 肾组织形态学变化见图1。
HE染色可见假手术组肾小球和肾小管结构正常，发现IR组肾小管排列紊乱，管腔扩张，部分刷状缘消失;肾小管上皮细胞肿胀，坏死;管腔内可见管型;肾间质炎症细胞浸润。
长春西汀干预后肾组织病理损伤
减轻，其中高剂量干预组损伤改善更显著，可见肾小管结构完整，排列整齐，
管腔内管型减少，炎症细胞少见。
2.2 4组肾功能指标变化见表1。
与假手术组相比，IR组SCr和BUN水平明显
升高，差异有统计学意义(P长春西汀干预组SCr和BUN与IR组比较明显降低，差异有统计学意义(P长春西汀高、低剂量干预组SCr和BUN差异也有统计学意
义(P0.05)。
2.3 血清中 TNF-、IL-1、IL-6结果比较见表2。
与假手术组相比，小鼠肾IR
可引起细胞因子TNF-、IL-1和IL-6表达升高，差异有统计学意义(P0.05)。
用长春西汀预处理后，与IR组相比，TNF-、IL-1和IL-6表达明显降低，差异有
统计学意义(P0.05)，高剂量组降低更显著，与低剂量组相比差异有统计学意义(P0.05)。
2.4 肾组织中 MDA水平和SOD活性变化见表3。
与假手术组比较，IR组肾组
织中 MDA水平明显升高，差异有统计学意义(P0.05)，SOD 活性明显降低，差
异也有统计学意义(P长春西汀低剂量干预组与IR组相比，MDA 水平降低，差
异有统计学意义(P0.05)，SOD活性虽有所升高，但差异无统计学意义(P高剂量干预组与IR组相比，MDA水平降低，差异有统计学意义(P0.05)，SOD 活性升高，差异有统计学意义(P0.05)。
3 讨论
本研究采用夹闭双侧肾蒂造成肾缺血45min再恢复血供的方法建立小鼠肾IR损伤模型。
术后24h，IR组小鼠SCr和BUN升高，肾组织病理损伤明显，提示肾
脏IR模型制备成功。
给予长春西汀干预后，SCr和BUN水平降低，肾组织病理
损伤减轻，由此提示长春西汀干预处理可以改善肾IR损伤程度。
肾IR损伤中
有众多的炎症介质和免疫因子参与，TNF-、IL-1和IL-6表达升高已经成为肾
IR 炎症的重要标志。
TNF-是活化单核细胞产生的多活性细胞因子，其能刺激单核巨噬细胞合成和分泌IL-1和IL-6等炎症因子。
本研究中IR组TNF-、IL-1
和IL-6表达升高，证明有炎症参与了组织损伤。
长春西汀干预组相对IR组
TNF-、IL-1和IL-6表达降低，提示长春西汀可以通过抑制炎症改善肾IR损伤。
研究表明，长春西汀作为磷酸二酯酶抑制剂，能够抑制炎症相关因子，如核转
录因子NF-B和TNF-的表达，从而降低IL-1、IL-6和IL-8等炎症因子的表达，起到保护组织的作用。
氧自由基的生成被认为是IR损伤中最重要的发病机制之一。
大量氧自由基能够攻击细胞膜的脂质和蛋白质，导致脂质过氧化，破坏组
织的结构和功能。
MDA是脂质过氧化的产物之一，能够直接反映组织损伤程度。
SOD是一种重要的抗氧化酶，能够保护细胞免受氧自由基的攻击。
本研究中与
假手术组相比，小鼠IR后肾脏中 MDA 水平升高，SOD活性降低，表明肾IR后
氧自由基产生增多，损伤了肾小管上皮细胞。
有研究表明，长春西汀另一个保
护作用机制就是它能够清除羟自由基和其他活性氧而发挥显著的抗氧化活性，
这与本研究结果相符。
本研究发现，长春西汀干预组肾组织SOD活性升高，MDA水平有所降低，由此
表明长春西汀能够保护内源性SOD活性，抑制脂质过氧化，从而发挥保护作用。
综上所述，长春西汀干预处理能够降低小鼠肾IR后的炎症和氧化损伤，保护肾功能，为临床预防治疗急性肾损伤提供了新思路。
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遇
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