吴怡慧-项目二超氧化物歧化酶(SOD)的生产详解

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超氧化物歧化酶(SOD)

超氧化物歧化酶(SOD)

广州市干部疗养院检验 科
北京京煤集团总医院检 验科 中山大学孙逸仙纪念医 院检验科 北京市昌平区医院检验 科 广州市干部疗养院检验 科 福建省福州市第一医院 肾内科 中山大学附属第三医院
戴国奎
现代医院
2011.8
2011.8 2011.10 2011.10 2011.12 2012.2 2012.9
2010.12
2
田亚平
标记免疫分析与临 床
2011.4
3
慢性肾功能不全患者的SOD与 TSGF水平分析
矽肺患者抗氧化指标超氧化物歧 化酶检测的分析 血清同型半胱氨酸和SOD水平与 急性脑梗死的相关性研究 肾透析患者超氧化物歧化酶检测 结果分析 广东地区健康成年人血清超氧化 物歧化酶(SOD)水平调查 CysC联合SOD诊断早期糖尿病肾 病的临床意义 脑血管疾病患者急性期血清SOD 水平变化及其临床意
超氧化物歧化酶(SOD)
SOD是人体内唯一以自由基为底物进行 歧化反应的酶,是自由基的清除剂,它与自 由基代谢状态呈负相关。 自由基平衡状态时血清SOD水平为:
110~215U/ml
SOD检查临床应用探讨
临床意义

评估自由基损伤的严重程度 拟定合适的干预方案 进行病人恢复情况的监测
临床标本(肿瘤)
放免法 酶免法 手工方法 生化干粉 缺点:没有注册证、或者试剂不稳定、操作不便

新方法:
比色法 试剂非常稳定(开瓶稳定30天,CV<2%)
使用SOD生化法发表的文章
序号 文章题目 邻苯三酚法检测血清超氧化物歧 化酶参考值范围的验证和建立 比色法测定超氧化物歧化酶的临 床评价及其应用研究 单位 中山大学孙逸仙纪念医 院检验科 解放军总医院生化科 通讯作者 谢文锋 发表刊物 实用医技杂志 发表日期 1

杨恪鉴超氧化物歧化酶(SOD)的生产.pptx

杨恪鉴超氧化物歧化酶(SOD)的生产.pptx

二 SOD的运用
• 2.添加剂 • 国外不少高级化妆品都添加SOD, 国内也有数家工厂或
公司在开发和生产SOD化妆品, 如大宝SOD密,康妮SOD、 SOD康舒达霜剂等。SOD作为化妆品添加剂主要有3个优点 : • (1)有明显的防晒效果 • (2)可防皮肤衰老,阻止紫褐质(老年斑)的形成 • (3)有明显的抗炎效果,对防治皮肤病有一定效果。 • 国外把SOD作为食品添加剂的例子是加在口香糖和饮料中 。我国贵州农学院已开发出刺梨SOD饮料。SOD及修饰过的 SOD还可作为外用药膏、眼药及牙膏等的添加剂
项目四:超氧化物歧化酶(SOD)的生产
任务一:SOD制备方案的制定
生药1121 第五组 2011423242
杨恪鉴
一.SOD的概况 二.SOD的运用 三.SOD的生产 四.SOD的活力测定
一. SOD的概况
• 1.SOD的概念 超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD)是一种新 型酶制剂。它在生物界的分布极广,几乎从动物到植物, 甚至从人到单细胞生物,都有它的存在。SOD被视为生命 科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是 氧自由基的自然天敌,是机体内氧自由基的头号杀手,是 生命健康之本。全球118位科学家发表联合声明:自由基 是百病之源,SOD是健康之本。体内的SOD活性越高,寿 命就越长。
三.SOD的生产
• 4.将沉淀溶入pH7.8,0.05mol/L的磷酸缓冲液5mL中,然 后6000r/min离心15min,放弃沉淀,取上清液,用凝胶 sephacylS-200进行纯化,然后超滤浓缩。
• CuZn-SOD的可见光最大吸收波长都在680 nm左右, 这反 映了酶分子中Cu2+的光学特性。

超氧化物歧化酶在啤酒生产过程中的研究及应用

超氧化物歧化酶在啤酒生产过程中的研究及应用

超氧化物歧化酶在啤酒生产过程中的研究及应用一、前言啤酒是一种受欢迎的饮料,其生产过程中涉及到多种酶的作用。

其中,超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的酶,在啤酒生产过程中具有重要的作用。

本文将探讨超氧化物歧化酶在啤酒生产过程中的研究及应用。

二、超氧化物歧化酶的概述超氧化物歧化酶是一种可以将有害的超氧自由基转变为无害分子氧和水分子的重要抗氧化酶。

SOD广泛存在于细胞质、线粒体和叶绿体等细胞器中,并且在各种生物体内都有发现。

SOD可以被分为三类:Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD,它们主要存在于不同类型的细胞中。

三、超氧化物歧化酶在啤酒生产中的作用1. 去除自由基在啤酒发酵过程中,会产生大量自由基,这些自由基会对啤酒品质造成影响。

而SOD可以去除这些自由基,保证啤酒的品质。

2. 提高酵母菌的抗氧化能力在啤酒发酵过程中,酵母菌会受到氧化应激的影响,从而导致发酵速度慢、产量低等问题。

而SOD可以提高酵母菌的抗氧化能力,减轻氧化应激对发酵过程的影响。

3. 促进啤酒的稳定性SOD可以降低啤酒中自由基和过氧化物含量,从而促进啤酒的稳定性。

四、超氧化物歧化酶在啤酒生产中的应用1. 添加SOD制剂将SOD制剂添加到啤酒生产中,可以有效地去除自由基和过氧化物,并提高啤酒品质。

目前市场上已经有多种不同类型的SOD制剂可供选择。

2. 基因工程改良通过基因工程技术改良啤酒发酵菌株,使其能够表达更多的SOD,从而提高其抗氧化能力和稳定性。

这种方法需要较高的技术水平和成本投入。

3. 优选原料选择富含SOD的原料,如大麦芽、啤酒花等,可以在一定程度上提高啤酒的抗氧化能力和稳定性。

五、结论超氧化物歧化酶在啤酒生产中具有重要的作用,可以去除自由基、提高酵母菌的抗氧化能力和促进啤酒的稳定性。

目前,SOD制剂添加、基因工程改良和优选原料等方法已经被应用于啤酒生产中,取得了很好的效果。

未来,随着技术的不断发展和研究深入,超氧化物歧化酶在啤酒生产中的应用前景将会更加广阔。

sod在食品工业中的应用及提取工艺

sod在食品工业中的应用及提取工艺

sod在食品工业中的应用及提取工艺
SOD(超氧化物歧化酶)是一种重要的酶类物质,具有强大的抗氧化作用,可以有效地清除体内自由基,保护细胞不受氧化损伤。

在食品工业中,SOD主要应用于保健食品、功能性食品以及肉制品等方面,其应用可以增强食品的抗氧化能力,延长食品的保质期。

SOD的提取工艺主要有以下几种方法:
1.超声波法提取:将含有SOD的物质加入适量的水中,利用超声波的作用将SOD 分离出来。

2.酸解法提取:将含有SOD的物质加入酸性溶液中,利用酸性条件下SOD的不稳定性,将SOD进行分离。

3.酶解法提取:将含有SOD的物质加入酶解液中,通过酶的作用将SOD分离出来。

4.离子交换法提取:利用离子交换树脂对含有SOD的物质进行分离,从而得到纯度较高的SOD。

目前,在食品工业中常用的SOD提取方法是酸解法和酶解法,这两种方法提取的SOD纯度较高,且产量较大,适用于商业生产。

实验三超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活性测定

实验三超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活性测定

七、思考题,完成实验报告
1 什么是分段盐析,为什么要分段盐析籽粒
2. 主要试剂 1、0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8),500mL 2、氯仿-乙醇混合液:氯仿:无水乙醇=3:5 3、丙酮:用前需预冷至4-10℃ 4、0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH10.2) 5、0.1mol/LEDTA溶液
2.3 仪器 恒温水浴锅、 冷冻高速离心机、 可见分光光度计、 研钵、玻棒、烧杯、量筒,等。
生物技术综合实验
实验三 超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活性测定
一、目的和要求 通过植物材料(玉米)超氧化物歧化 酶(SOD)的提取及活性测定,掌握硫 酸铵盐析沉淀蛋白质及超滤浓缩蛋白质的 方法和原理。
二、实验原理
超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于植物 体内,它是一种重要的自由基清除剂,对 生物体有多种保护作用。超滤是一种蛋白 质浓缩方法,只要选择适当的滤膜可将玉 米浆中的SOD与其他小分子杂蛋白、可溶 性糖等分离。
4、SOD的沉淀分离:粗酶液中加入等体积 的冷丙酮,搅拌15min,5000rpm离心 15min,得SOD沉淀。将SOD沉淀溶于 0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8)中,于5560℃热处理15min,得到SOD酶液。
3.2 SOD活性测定 试剂(mL) 空白对照管 样品管 碳酸缓冲液 5.0 5.0 EDTA溶液 0.5 0.5 蒸馏水 0.5 — 样品液 — 0.5 混合均匀,在30℃水浴中预热5min,测定 OD480
四、操作步骤
4.1 SOD粗提液的制备
1、组织细胞破碎:称取5g大蒜蒜瓣或玉米 种子,置于研钵中研磨。 2、SOD的提取:破碎后的组织中加入2-3 倍体积的0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8), 继续研磨20min,使SOD充分溶解到缓冲液 中,然后在5000rpm下离心15min,取上清 液。 3、除杂蛋白:上清液加入0.25体积的氯仿乙醇混合液搅拌15min,5000rpm离心 15min,得到的上清液为粗酶液。

超氧化物歧化酶SOD项目投资计划与经济效益分析

超氧化物歧化酶SOD项目投资计划与经济效益分析

超氧化物歧化酶SOD项目投资计划与经济效益分析一、背景分析当前时期经济社会发展必须坚持的基本理念:实现当前时期发展目标,破解发展难题,厚植发展优势,必须牢固树立创新、协调、绿色、开放、共享的发展理念,把创新作为引领发展的第一动力,把协调作为持续健康发展的内在要求,把绿色作为永续发展的必要条件,把开放作为繁荣发展的必由之路,把共享作为和谐发展的本质要求,将五大发展理念贯穿于全面建成小康社会的全过程。

超氧化物歧化酶SOD是一种生物体防御氧化损伤的、对机体具有显著保护作用的生物酶,它广泛分布于动物、植物与微生物体内。

SOD 具有清除体内超氧自由O2-的能力,且能较好地抵御氧自由基和其他氧化物自由基对细胞质膜的毒性,维持细胞正常的生理代谢,所以其在机体保护方面起着重要的作用,也因此SOD被广泛应用于医药、食品和化妆品工业。

1)医药工业:SOD在临床应用中主要集中在炎症、自身免疫性疾病,尤其是累风湿性关节炎、肺气肿、红斑狼疮、氧中毒和老年性白内障、衰老及多种皮肤病等方面。

但医药领域对SOD安全性要求高,因此,从植物中提取的Cu,Zn-SOD由于安全性好,生产成本低,逐渐被采用。

植物含SOD资源,唯有玉米产量大。

2)食品工业:SOD可作为保健食品的功效因子、食品营养强化剂、复合型食品原料、抗氧剂、抗氧保鲜剂等使用。

目前,国际血防组织已明令禁止从血液中提取SOD做为医药保健品原料3)化妆品工业:SOD是国际科学界公认唯一能消除人体在新陈代谢过程中产生的有害自由基的活性酶,是中国卫生部批准的具有抗衰老、免疫调节、抗辐射、美容功能的物质之一。

近年来,随着中国医药、食品、化妆品工业的发展,以及科技的进步,中国超氧化物歧化酶SOD市场规模不断扩大。

2016年中国超氧化物歧化酶SOD的市场规模为2.41亿元。

超氧化物歧化酶SOD相当娇气,具有“提取难、保存难、吸收难”三大特性。

这三大难题也足足困扰了世界近40年,直到今天,SOD仍属于高、精、尖的生物科学课题。

超氧化物歧化酶脂质体的研究

超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,具有清除细胞内超氧阴离子自由基的作用,有助于维护细胞稳态。

SOD脂质体是一种将SOD载入脂质体内的载体,可以改善SOD的稳定性和生物利用率,具有广泛的应用前景。

以下是SOD脂质体的研究内容:
制备方法。

SOD脂质体的制备方法包括薄膜水合法、双乳化法、超声波法、反转乳化法等。

其中,薄膜水合法是一种较为常用的制备方法,其原理是将脂质和SOD溶液混合,通过薄膜水合作用将SOD包裹在脂质体内。

特性研究。

SOD脂质体的特性研究包括尺寸分布、稳定性、药效学评价等方面。

SOD脂质体的尺寸一般在100nm以下,稳定性较好,药效学评价显示其具有较高的抗氧化活性和生物利用率。

应用研究。

SOD脂质体在医学和保健食品领域具有广泛的应用前景。

研究表明,SOD脂质体对多种疾病具有预防和治疗作用,如癌症、心血管疾病、糖尿病等。

此外,SOD脂质体还可以作为一种保健食品成分,有助于改善机体免疫力和抗氧化能力。

需要注意的是,SOD脂质体的研究需要结合多种技术手段,如荧光分析、透射电镜、动态光散射等。

同时,在SOD脂质体的应用过程中,需要充分考虑其稳定性和生物相容性,避免对人体健康产生负面影响。

超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶(SOD)简述YB 2012级生物技术摘要:超氧化物歧化酶首先由Mann和Keilin从牛红细胞中分离提取出,是生物体内一种重要的抗氧化酶,由于其具有清除生物体内超氧阴离子自由基的作用,而引起广大学者的关注。

本文概述了SOD的分类、结构、理化性质及研究进展,并对其应用前景进行了展望。

关键词:超氧化物歧化酶;SOD;理化性质生物体内低浓度超氧阴离子自由基(O-2)是维持生命活动所必需的,其浓度过高时,可引起机体组织细胞氧化损伤,导致机体发生疾病,甚至死亡。

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,简称SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基的一种重要抗氧化酶,具有抗衰老、抗癌、防白内障等作用[1],因而受到全世界学术界广泛关注,使之成为涉及分子生物学、微生物学、医学等学科领域及医药、化工、食品等生产行业的一个热门研究课题[2]。

1.SOD的分类SOD广泛存在于动、植物及微生物中[1]。

根据其结合金属种类不同,可分为三类:第一类为Cu·Zn-SOD,呈蓝绿色,相对分子量约为32kDa,主要存在于真核细胞细胞浆、叶绿体和过氧化物酶体内;第二类为Mn- SOD,呈紫红色,相对分子量约为40kDa,主要存在于真核细胞线粒体和原核细胞中;第三类为Fe-SOD,呈黄褐色,相对分子量约为38.7kDa,主要存在于原核细胞及一些植物中[2]。

2.SOD的结构1975年Richardson得到了Cu?Zn-SOD的三维结构[5],发现它是由2个基本相似的亚基组成的二聚体,且每个亚基含有1个铜原子和1个锌原子。

2个相同亚基之间通过非共价键的疏水相互作用而缔合,类似于圆筒的端面。

Cu?Zn-SOD的单个亚基活性中心结构见图1。

从图中可知Cu与4个来自组氨酸残基(His44,46,61,118)的咪唑氮配位呈现1个三角双锥畸变的四方锥构型,Zn则与3个来自组氨酸残基(His61,69,78)的咪唑氮和1个天门冬氨酸残基(Asp81)的羧基氧配位,呈畸变的四面体构型。

sod超氧化物歧化酶

sod超氧化物歧化酶SOD超氧化物歧化酶简介超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是一种重要的抗氧化酶,它能够催化超氧(O2·-)自由基的转化成较不活性的氧气(O2)和过氧化氢(H2O2),阻止细胞内自由基连锁反应的发生。

SOD广泛存在于生物体内,包括细菌、植物和动物。

超氧化物歧化酶的功能机制以及其对生物体的重要性已经成为研究的热点。

超氧化物歧化酶的类型超氧化物歧化酶主要有三种类型:铜锌SOD(CuZn-SOD)、锰SOD(Mn-SOD)和镁SOD(Mg-SOD)。

铜锌SOD广泛存在于细胞基质中,是最常见的超氧化物歧化酶;锰SOD主要存在于线粒体中,其活性也相对较高;镁SOD则主要存在于叶绿体中。

这三种不同类型的SOD在不同细胞器和细胞区域中发挥着重要的生物学功能。

超氧化物歧化酶的催化机理超氧化物歧化酶的催化机理是通过将超氧(O2·-)转化为氧气(O2)和过氧化氢(H2O2)来阻止细胞内部的氧化反应。

其中,铜锌SOD和锰SOD与超氧发生直接的物理反应,将超氧还原为氧气。

铜锌SOD通过铜离子的切换形成两个不同的亚型,分别为Cu2+和Cu1+,它们与超氧发生反应生成氧气和过氧化氢。

锰SOD则通过直接与超氧发生反应,将超氧转化为氧气和过氧化氢。

而镁SOD则通过将超氧转化为次氧(O2)和过氧化氢。

超氧化物歧化酶的生物学意义超氧化物歧化酶在细胞内发挥着重要的作用,是防治氧化应激的关键分子。

氧化应激是指细胞内氧化物质过量产生所引起的一系列有害反应,这些有害反应会对DNA、蛋白质和脂质等生物大分子造成损害。

超氧化物歧化酶能够将超氧自由基转化成较不活性的物质,从而有效减少细胞内的氧化应激反应,保护细胞免受自由基的损害。

超氧化物歧化酶与疾病超氧化物歧化酶在许多疾病的发生和发展中起着重要的作用。

许多疾病,如癌症、心脏病和神经退行性疾病等,都与氧化应激过程有关,超氧化物歧化酶的异常功能或缺乏会导致氧化应激反应的增加,从而增加疾病的风险。

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超氧化物歧化酶(SOD)基本知识

概念:超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD)是一 种新型酶制剂,是广泛存在于生体内各种组织的一种金属酶,是机 体细胞抵御氧化损伤最重要的酶之一,是药用酶之一,被视为生命 科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。 功能:清除体内多余的自由基;延缓由于自由基侵害而出现的衰 老现象;提高人体抵抗自由基诱发疾病的能力;能抗疲劳、甚至抗 肿瘤体内的SOD活性越高,寿命就越长。 分布: 主要分布
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项目二超氧化物歧化酶(SOD) 的生产
班级:生物制药1411 姓名:吴怡慧
目 录
1 2
酶与SDO酶的基本知识 酶的生产工艺与准备
Contents
3
4
SOD酶的检验与准备
注意事项
di
yi
zhang
jie
第 一 章 节
1、酶的基本知识
2、超氧化物歧化酶(SOD)基本知识
酶的基本知识
真核细胞细胞质 原核及真核细胞线 粒体色 黄褐色
举例
猪血、猪肝 人和狒狒肝细胞的 胞液 绿菌属、脱硫弧菌 属
主要来源:大蒜蒜瓣(含有丰富的SOD酶)
di
er
zhang
jie
第 二 章 节
1、SOD酶的提取原理 2、实训准备(材料与仪器) 3、酶的生产工艺流程图
SOD酶的提取原理

实训准备(材料与仪器)
材料:大蒜蒜瓣 氯仿-乙醇混合液 冷丙酮 磷酸缓冲溶液 (PH7.8、
仪器:一个石英砂研钵 离心管 移液管 玻璃棒 塞离心管 离心机 冷冻离心机
0.05mol/L)
SOD酶的生产工艺流程图
称取5g大蒜 蒜瓣 捣碎 加入磷酸缓 冲溶液15ml (PH7.8 0.05mol/L) 得到SOD酶沉淀 冷冻 干燥
SOD酶检验原理
连苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色 的中间产物(反应液由黄棕色变为绿色,再变为黄色,这是由于生 成的中间物不断氧化的结果)。在自氧化过程的初始阶段,黄色中 间产物的积累在滞后30-45s后就与时间呈现性关系。中间产物在 420nm处有强烈的光吸收,线性时间一般维持4min的范围内。在 有SOD存在时能催化生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积 累,通过计算就可以求出SOD的活力。 邻苯三酚自养化法测定酶活力,计算公式:
试剂: (1)PH8.30 50mol/L K2PHO4-KH2PO4缓冲溶液: 25℃下 96.5ml 1mol/LK2HPO4与 3.5ml1mol/LKH2PO4混合后 用水稀释至2000ml 仪器: (1)PH计 (2)紫外分光光度计 (3)恒温水浴槽
(4)10ml试管
(2)0.05mol/L连苯三酚溶液: (5)1cm比色皿 称取3.15g连苯三酚用 0.01mol/L盐酸溶液溶解并定 容至500ml (3)10mol/L盐酸溶液
(3)以空白管为参比,在325nm下每隔30s测1次吸光值,连续 记录3min,调节连苯三酚溶液用量,将其自氧化速率控制在 0.068-0.072D/min。经实验测得连苯三酚溶液的用量为6ul
SOD酶检验步骤
二、酶活性的测定
(1)取两支试管时加入PH值为 8.30的50mol/LK2HPO4KH2PO4缓冲溶液1.5ml,在 25+-0.5℃的恒温水浴中保温 10min,加入等体积酶液; (2)取一支加入事先预热好的 25℃连苯三酚溶液,另支空白 试管再加入10mol/LHCl,迅 速摇匀后倒入1cm比色皿中; (3)以空白管为参比,在 325nm下每隔30s测1次吸光值, 连续记录3min,调节酶液体积, 使样液中连苯三酚的氧化速度控 制在0.033-0.037D/min,记 录此时样液体积。 (4)根据公式计算出酶活性。
0.070-供试品溶液速率 0.070 50% 供试品溶液稀释倍数 x 反应液总体积 x x 100% 供试品溶液体积
单位体积活力(u/ml)=
总活力(U)=单位体积活力x原液总体积

酶活力单位意义:在25℃恒温条件下,每毫升反应液中,每分钟 制邻苯酚自氧化率达50%的酶量定义为1个酶活力单位。
SOD酶检验准备
除 杂 蛋 白
弃沉淀取上清 以6000r/min离心 15min 搅拌15min 于上清液中加入1/4 倍体积氯仿-乙醇 混合液
用凝胶Sephacryl S-200进行纯化
纯 化
弃沉淀取 上清
进行超滤浓缩得到 SOD酶
di
san
zhang
jie
第 三 章 节
1、SOD酶检验的原理
2、实训准备(材料、仪器) 3、SOD酶检验步骤
分 离
持续搅拌15min以 6000r/min离心15 min
将沉淀置于5ml磷 酸缓冲溶液中 (PH7.8、 0.05mol/ml)
以6000r/min离心15min 弃沉淀取上清液
加入等体积冷丙酮
得到粗酶液
提 取
再研磨20min 直到充分溶解 置于冷冻离心 机以6000r/min 离心15min

酶是由生物活细胞产生的具有特殊催化功能的一类生物活性物质, 其化学本质是蛋白质,故也称酶蛋白。

用于预防,治疗和诊断疾病的一类酶制剂,称为药用酶。早期主 要用于治疗消化道疾病、烧伤及感染引起的炎症等,现已广泛应 用于多种疾病的治疗。
药用酶制备通常有三种方法:直接提取法;微生物发酵法;动植 物细胞培养法 药用酶常用提取纯化方法有:水溶液法;有机溶剂法;表面活性 剂法(应用较少)
超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD) 是一种具有抗氧化、抗衰老、抗 辐射和消炎作用的药用酶。它可 催化超氧负离子(O2-)进行歧化反 应,生成氧和过氧化氢。大蒜蒜 瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有 有机溶剂沉淀的原理是有 机溶剂能降低水溶液的介电常数, 较丰富的SOD,通过组织或细胞 使蛋白质分子之间的静电引力增 破碎后,可用pH7.8的磷酸缓冲 大。同时,有机溶剂的亲水性比 溶液提取出来。由于SOD不溶于 溶质分子的亲水性强,它会抢夺 丙酮,可用丙酮将其沉淀析出。 本来与亲水溶质结合的自由水, 破坏其表面的水化膜,导致溶质 分子之间的相互作用增大而发生 聚集,从而沉淀析出。
SOD酶检验步骤
一、连苯三酚自养化速率的测定
(1)准备好两只试管,同时加入PH值为8.30的 50mol/LK2HPO4-KH2PO4缓冲溶液4.50ml,在25+-0.5℃的恒温 水浴中保温10min; (2)其中一只试管加入等体积事先预热好的25℃连苯三酚溶液, 另支试管作为空白管,加入等体积10mol/LHCl,迅速摇匀后倒入 1cm比色皿中;
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