溴麝香草酚蓝法测定山豆根种子生活力的条件优化研究
花青素测定
四川农业大学Sichuan Agriculture University植物生理实验报吿实验四、花青素的测定一、实验目的花青素是类黄酮类色素中最重要的一种，广泛存在于植物花、果实、茎叶中，对这些器官的观赏价值和商品形状有重要价值。
本实验学习花青素的提取及测定方法。
二、实验原理花青素在酸性溶液中呈红色，其颜色的深浅与花青素的浓度成正比。
花青素酸性溶液的吸收高峰波长是530nm ，摩尔消光系数为4.62×104，故可用分光光度法测定其含量。
但是一些提取液中常有叶绿素存在，干扰测定。
因此，需同时测定提取液在620nm （可溶性糖）和650nm （叶绿素的吸收值）波长下的光密度值，并用Greey 公式准确计算出花青素的光密度值，才能计算花青素的含量。
三、材料、设备及试剂1. 材料 红花檵木叶片2. 设备 分光光度计、电子天平、50ml 具塞三角瓶、25ml 容量瓶、刀片3. 试剂 0.1 mol ·L -1的盐酸乙醇溶液（8.3ml 浓盐酸用95%乙醇稀释成1L ）。
四、操作方法1. 花青素的提取 取0.100g 红花檵木，切成1cm 见方的小块,放在三角瓶中，加 0.1 mol ·L -1盐酸乙醇溶液15ml ，在60℃水浴中暗处理，把溶液倒入25ml 容量瓶中，再加5ml 提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml 容量瓶中，再加5ml 提取液浸提15min, 把溶液倒入25ml 容量瓶中，共浸提1h ，最后定溶到25ml 。
2. 测定 以0.1 mol ·L -1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm 、620nm 、650nm 波长下的光密度值。
五、实验结果实验结果如下表A 530A 620A 650 0.656 0.085 0.248依据公式1． 计算花青素的光密度值OD λ=(OD 530-OD 620)-0.1(OD 650-OD 620)=（0.656-0.085）-0.1（0.248-0.085）=0.63122. 计算花青素含量=ODλε×V×1000000m花青素含量（nmol/g）=0.6312/4.62×104×25/0.1011×1000000=3378.422ODλ:花青素在530nm波长下的光密度ε：花青素摩尔消光系数4.62×106v:提取液总体积（ml）m:取样质量（g）1000000: 计算结果换算成nmol的倍数六、结果分析与讨论实验注意事项：1.本实验严格按照实验要求操作，在提取过程中谨慎小心，未造成液滴溅出的现象，且用盐酸乙醇反复清洗三角瓶并转移至容量瓶中，保证了实验的准确性。
肉苁蓉种子生活力快速测定方法研究
摘要 ： 用单 因素 、 采 多因素交ｇ￣ － － Ｌ￣ 交试验设计等方法， 肉苁蓉种子 生活力测定过程 中的预 处理方法四唑 染色液浓度 对 及ｐ Ｈ值进行优化 ， 初步建立 了肉苁蓉种子生活力的快速测定技 术 ， 使测定程序简化、 时间缩短 ， 并确定 ３ ℃ 下去皮直接 ８
Ｌｂ ｒｔ ｙｆ ｒ ｄｎ ｆ ｎ ａｇｒｄＭｅｉｉ ｌ ａｅ ａｓ ｅ ｉｇ１ ０ ９ ，Ｃ ｉａ ａ ｏ ｏ ｒ ｅ ｉｇｏ ｄｎ ｅｅ ｄｃ ａ Ｍ ｔ ｌ，Ｂ ｉｎ ０ ０ ４ ｈｎ ； ａ ｒ ｏＢ ｅ Ｅ ｎ ｉ ｒ ｊ
２． ｎ ｔｔ ｔ ｆＥｄ ｂ ｅ Ｆｕ ｇ ，Ｓ ａ ｇ ｉＡｃ ｄｅ ｆＡｇ ｉｕ ｔ ｒ ｌＳ ｉｎｃ Ｉ ｓｉｕ ｅ ｏ ｉ ｌ ｎ ｉ ｈ ｎ ｈａ ａ ｍｙ ｏ ｒｃ ｌｕ ａ ｃｅ ｅ，Ｓ ｎ ｈ ｉ２ ０ ｈａ ｇ ａ ０１ ６，Ｃｈｉａ； １ ｎ
Ｃｉｔ ｃ ｅ ｄ ｓｒｉｏａ ｓ ｅ ｉｂ ｌｔ ｓ ｐ ｍａ ｌ ｓａ ｌｓ ｄ ｂ ＂ ｅ ｔ ｗｈ ｃ ｒ ｇ ｅ ｓ ｗａ ｉ ｌｆｅ ｎ ｓａｎ ｈ ｅｅｔｃ ｌ ｅ ｄ ｖａ ｉｉｙ ｗａ ｒ ｒ ｙ ｅ ｔｂ ｉｈｅ ｙ Ｉ ｉ ｉ ＴＣ ｔ ｓ ， ｉｈ ｐ ｏ ｒ ｓ ｓ ｓｍｐｉ ｄ ａ ｄ ｉ ｒ ａ ｔｏ ｉ ｓ ｃ ｔｓ ｏ ｔ Ｔｈ ｐ ｉ ｍ Ｈ ａ ｕ ｎ Ｃ ｓ ｌ ｔ ｎ ｏ ｃ ｎｒ ｔｏ ｓ ６． ｎ ｅ ｃｉｎ ｔｍｅ ｗａ ｕ ｈ ｒ． ｅ ｏ ｔ ｍｕ ｐ ｖ ｌ ｅ ａ ｄ ＴＦ ｏ ｕｉ ｃ ｎ ｅ ｔａｉｎ ｗａ ４ ａ ｄ ０．３ ｏ ％ 一 １ ０％ ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ｔ３ Ｃ． ． ｅ ｐ ｃｉ ｅｙ ａ ８ ｏ Ｋｅ ｒ Ｃｉｔ ｎ ｈ ｅ ｅｔ ｏ ａ；ｓ ｅ ｉｂ ｌｔ ｙ ｗｏ ｄｓ： ｓａ ｃ ｅｄ ｓ ｒｉ ｌ ｃ ｅ ｄ ｖ ａ ｉｉ ｙ；ｒ ｐ ｄ ｄ ｔｒ ｎ ｔｏ ａ ｉ ｅｅ ｍｉ ａｉ ｎ
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导目录植物材料的采集、处理与保存..................................... 实验一拟南芥种植和形态观察................................... 实验二植物细胞的活体染色和死活的鉴定......................... 实验三植物原生质体的分离和融合............................... 实验四植物叶面积测定原理、方法和步骤......................... 实验五植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）..................... 实验六植物组织水势的测定（小液流法）......................... 实验七植物根系活力的测定（TTC法）............................ 实验八根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定..................... 实验九离体叶绿体的制备以及完整度的测定....................... 实验十叶绿体色素的提取、分离和理化性质....................... 实验十一植物叶片光合速率的测定（改良半叶法）................. 实验十二氧电极法测定植物组织的光合与呼吸速率................. 实验十三小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率. (37)实验十四谷物淀粉含量的测定（旋光法）......................... 实验十五类似生长素对种子萌发的影响........................... 实验十六赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成........ 错误！未指定书签。
实验十七植物种子生活力快速测定............................... 实验十八植物光周期现象的观察................................. 实验十九植物抗逆性的测定（电导仪法）....... 错误！未指定书签。
宁夏产中药材水飞蓟种子生活力等指标的测定
宁夏产 中药 材 水 飞 蓟 种 子 生活 力等 指标 的测 定
董 琳 ，付 雪艳 ， 洪峰 ， 力 生 权 徐
（ 宁夏 医学 院 ， 宁夏 银 川 ７ ０ ２ ） Ｉ ５ ０ １
摘要： 目的 通过 对种 子生活力等指标 的测定 ， 为完善水飞蓟种子检验 标准操 作规程提 供 实验依据 。方法 采 用 ２３５一 ，，
８５ ｌ
９４ ４
溶 出和有效成分 分解 等缺 点。优选 出 的工艺 简单 、 操作 控制 容
易 、 定性 好 ， 合于工业化生产。 稳 适
１ ．０ ７ ４６
１ ７４ ７． ３ ０ ３８ ６ Ｄ
Ｋ Leabharlann １ ．７ ７５ ９ ０８５ ８
Ａ
ｌ ．７ ７ ＯＯ ０９５ ． ６
优化方案
２ ０ ，４（ ） １ ． ０ ５ ２ １ ：４ 显著影 响因素 ， 其最佳提取 条件为 ： Ａ Ｂ ｃ Ｄ 。即 ７ ％ 乙醇 ，０ ０ １ ［ 刘 剑 刚 ， 雁 鸣 ， 文 龙 ， ． 花 总 黄酮 抗 炎 作 用 的实 验 研 究 ［ ］ ４］ 谢 邓 等 菊 Ｊ． 倍溶剂用量 ， 超声 ４ ｒｉ， 取 ４次 。 ０ ｎ提 ａ 巾 同 天 然药 物 ，０ ４，（ ）２ ２ ２０ ２ ４ ：３ ． ２ ４ 最优参数的微调 称取菊花粉末 ５０ｇ加 ７％ 乙醇 ５ １浸 ． ． ， ０ ０ｎ ， Ｊ Ｓ． 化 Ｉ 泡 ３ ｉ ， ０ｒｎ后 超声 回流提 取 ３ ｉ ４ ｉ， ａ ０ｒｎ或 ０ｍｎ 趁热 过滤 ， ａ 提取 ４ ［ 国家药典 委 员会．中国药 典 ，Ｉ部 ［ ］ 北京 ： 学 ： 业 出 版社 ， ５］ ２０ ： 录 Ｖ ． ０５附 Ｂ 次， 合并滤液至 ２０ ｒ ０ ｄ容 量瓶 中。药 渣用 ７ ％ 乙醇洗 涤 ２～ ｒ ０ ３ 次， 并入滤液 ， ， 放冷 乙醇定容 ， ， 摇匀 精密量取样 品液 ５０ｒ ， ２ ． ｄ 置 ５ ｒ
羌活种子质量控制方法研究
M T ra d i t i on a l C h i n e s e Medici ne I nn o va ti o n a n d D e v e l o p m e n t虫医药剑新兰发屋表3姜黄素类化合物抗凝血与抗血栓作用的统计学差异比较+P<0．05．++P<0．014讨论由于姜黄素类物质的水溶性很小(50斗m ol／L)，为均匀性考虑，本实验中试药均先采用无水乙醇溶解，再加水稀释成含醇5％的溶液，溶液性质稳定，同时采用5％的乙醇作为阴性对照，以保证该方法的科学性及可重复性。
本研究证明姜黄素类化合物具有较好的抗凝血及抗血栓作用，可能为姜黄活血化瘀的主要药效物质，其原理可能与激活纤溶酶有关。
现代药理研究还表明姜黄素类化合物具有较强的抗氧化及降血脂作用，故姜黄素类化合物可用以开发新型的溶栓药，特别适合高血脂伴有血栓性疾病的患者；同时由于其安全范围广，新制剂的适宜人群亦会较广，病人的顺应性预期良好。
血浆复钙时间、凝血酶时间、体外溶栓实验等均表明去甲氧基姜黄素的抗凝血及抗血栓作用较强。
本实验结果与Kiuchi F及Chen Y K等对姜黄素类化合物生物活性的研究报导结论相一致。
Simon A及Guang Liang等对姜黄素类化合物的结构与活性研究均表明B一二酮结构为生物活性的主要相关基团。
结合文献报导及本研究结果我们推测B一二酮结构为姜黄素类化合物抗凝血及抗血栓作用的主要活性基团，去甲氧基姜黄素的不对称结构与P一霄共轭的共同作用会对B一二酮结构的电子云分布造成影响，间接增强了13一二酮结构的活性，从而呈现较强的抗凝血及抗血栓活性。
参考文献(略)羌活种子质量控制方法研究①蒋舜媛1孙辉2周毅1龚艺2(1．四川省中医药科学院，四川成都610041；2．四川大学环境科学与工程系，四川成都610065)摘要：本文通过对羌活与宽叶羌活种子的千粒重、种子含水量、种子生活力等主要的测定方法进行了系统的比较研究，以筛选适宜的测定方法来控制羌活药材种子的质量。
用溴麝香酚蓝探究不同氧气浓度对苹果呼吸的影响
1、溴麝香草酚蓝溶液是一种指示剂，较低浓度的CO2使其由蓝变绿，较高浓度CO2使其由蓝变绿再变黄．一实验小组用图示的实验装置在25℃条件下，多次进行如下操作：①打开阀门A和B、推注射器1的活塞，然后关闭A和B．②一段时间后，拉注射器2的活塞，促进两个瓶中的气体流动．观察溴麝香草酚蓝溶液的变色情况．（阀门A和B关闭时，整个装置是密封的）
请完成下列问题：
（1）此实验的目的是
探究25℃条件下氧气浓度对苹果呼吸作用的影响．
（2）如果向苹果瓶中注入一定量的N2，一段时间后溴麝香草酚蓝溶液几乎不变色．这种情况下苹果的代谢特点是
苹果呼吸作用弱
；
（3）当向苹果瓶内注入的氮气很少或很多时，溴麝香草酚蓝溶液将会变黄，其原因是：
当向苹果瓶内注人的氮气很少时，苹果瓶内氧气浓度很高，苹果有氧呼吸强，放出的CO
2多；当向苹果瓶内注人的氮气很多时，苹果瓶内氧气浓度很低，苹果无氧呼吸强，放出的CO2也较多．
（4）此实验结果可在于实际生活中用于
水果、蔬菜等的贮藏
，理由是
适当控制环境中氧气的浓度，可使细胞呼吸处于较低水平，从而延长苹果的贮藏时间
2、为证实叶绿体有放氧功能，可利用含有水绵与好氧细菌的临时装片进行实验
实验条件应为：光照、无空气、临时装片中有NaHCO3溶液
NaHCO3溶液是为了提供光合作用需要的二氧化碳的，碳酸氢钠是补充剂。
3、某同学用韭黄研磨后的提取液进行色素分离,在滤纸条上将出现几条明显色素带?
韭黄是指缺少叶绿素韭菜，
正常情况4条是叶绿素a 叶绿素b 叶黄素胡萝卜素
韭黄缺少叶绿素
只有2条叶黄素胡萝卜素。
四唑染色法测定抗肿瘤中药半枝莲种子生活力的研究
第６ 期
２１ 年 ６ ０１ 月
种
子
（ｅｄ Ｓｅ）
四唑 染 色 法 测 定 抗 肿 瘤 中药 半柳 ， 梁耀 丹 ， 陈 韵
（ 广西药用植物园， 广西药用资源保护与遗产改 良重点实验室， 南宁 ５ ０２ ） ３０３ Ｓ ｕ ｙ ｏ ｃ ｔｌ ｒａ ｂ ｒ ａ ａＳ ｅ ａ ｉ ｔ ｙ Ｔ Ｃ Ｔ ｓｉ ｇ Ｍｅｈ ｄ ｔ ｄ ｎ Ｓ ｕ ｅｌ ｉ ａ ｂ ｔ ｅ ｄ Ｖｉｂｌ ｙ ｂ Ｔ ｅ ｔ ｔｏ ａ ｉ ｎ
Ｔ Ｃ溶 液在 ４ 烘 箱 中进行 染色 ， 察其 染色 时 间 。 Ｔ ５ｑ Ｃ 观
１ ３ ２ 染 色影 响 因子 正 交试验 ．．
文章编号 ： １０ 一 ７ ５ ２ １ ）６ １ － ０ ｌ ４ ０ （０ １ ０ １００ ２
半枝 莲 是 一种 常见 的抗 肿瘤 中药 ， 临 床 上应 用 在
１ ３ ３ 半枝 莲种子 生 活力 与种子 发 芽率 的 关 系 ．．
根 据 直线 回归 方程 通式 Ｙ：ａ ｘ及 相关 系数 ｒ ＋ｂ ＝
ＳＡ Ｓｘ Ｓｙ 算 其直线 回归方 程 和相 关系数 ， Ｐ ／ Ｓ × Ｓ计 按
收稿 日期 ：０ １— ３— ６ ２ １ ０ ２ 基金项 目： 西 壮族 自治 区 中 医 院管 理 局 自筹 经 费科 研 课 题 （ ｚｃ 广 ｇｚ １ ２ ） ０４ 。
Ｈ ＵＡＮＧ ｎ ｆ ｎ，Ｐ Ｙａ －ｅ ＡＮ ｕ －ｉ Ｃｈ ｎ Ｉ ｕ，ＬＩ ＡＮＧ ｏ ｄ ｎ，ＣＨＥ Ｙｕ Ｙａ － ａ Ｎ ｎ
摘要 ： 采用染 色全过程观 察和 正 交试验 方法研 究 了 Ｔ ｃ浓度、 ｒ
染 色 温 度 和 时 间 对 半枝 莲 种 子 生 活 力 的 影 响 ， 讨 半枝 莲 种 子 探
山葵种子的活力测定研究
为了进一步比较各因素对山葵种子活力的影响 ， 对 表２ 所示的正交试验结果进行了极差分析 ， 分析结果见 表３ 。因素 Ａ的极差值最大 ， 为２ ７ ． ８ ， 其次为因素 Ｂ ， 极 差值为 ｌ ７ ． ２ ， 因素 ｃ的极差值最小 ， 为１ ２ ． ５ 。极差值越
大表示该 因素对试验 结果 的影 响越重 要 ， 故 上述处 理 因
３ ． 广元市玺府 开发有 限公 司 ， 四川 广 元 ６ ４ ８ ０ １ ７ ）
Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ Ｖｉ ｔ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｏ ｆ Ｗａ ｓ ａ ｂ ｉ Ｓ ｅ ｅ ｄ ｓ
Ｙａ ｎ． ｘｉ ａ ２ Ｄ Ｓ ＯＮＧ Ｃ ｈ ａ ｏ ， ，Ｗ ＡＮＧ Ｙｕ ｅ ． ｈ ｕ ａ ｚ ＳＵＮ Ｕ Ｎ Ａ Ｍａ ｏ － ｈ ｕ ａ ， Ｐ Ｅ Ｎ Ｓ ａ ｎ － ｊ ｕ ｎ ， Ｌ Ｉ Ｕ Ｙｉ ｎ － ｈ ｕ ａ ，
第３ ３卷
第 ｌ期 ２ ０ １ ４年 １月
种
子
（ Ｓ ｅ ｅ ｄ ）
・
种 子检验 ・
山葵 种 子 的活 力测 定研 究
宋 超 － － ， 王跃华 ， 孙 燕霞 ， 段茂 华 ， 任三军。 ， 刘银 花 ＇
（ １ ． 四川师范大学生命科学学院， 成都 ６ １ ０ １ ０ １ ；２ ． 成都大学生物产业学院， ｇ ￣ Ｊ ｖ ｌ 成都 ６ １ ０ １ ０ ６ ；
表 ３ 极 差 分 析
从 表 ２可 以看 出， 最 高 的种子 活力组 合 为 ８号 Ａ Ｂ Ｃ ， 即以 １ ５ ｑ Ｃ 的蒸馏 水浸 泡 ３ ０ ｈ ， 并每隔 ４ ． ５ ｈ清 洗１ 次种子， 在３ ５ ｃ ｃ 时染 色所得到的种子活力能够达 到７ ４ ． ４ ％； 而１ ３ 号组合即 Ａ Ｂ ｃ 处理过的种子的活力
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溴麝香草酚蓝法测定山豆根种子生活力的条件优化研究
山豆根是一种具有经济价值的植物，其种子是人们所需的重要的原材料之一。
因此，研究山豆根种子的生活力，对于提高种子产量和质量，具有非常重要的意义。
本研究采用了溴麝香草酚蓝法，对山豆根种子的生活力进行测定，并对测定条件进行了优化和探究。
首先，在溴麝香草酚蓝法测定中，样品的专一性非常重要。
实验中选用的山豆根种子样品表现为红棕色，呈现出良好的物理状态和抗生化性质，能够支持测试的高准确性。
其次，在测量过程中，时间和温度的条件对测试结果具有显著影响。
在本实验中，时间因素被确定为4小时，可以最大限度地减少误差，并取得了更准确的结果。
对于温度，实验结果表明，26℃- 28℃是一种合适的范围，最符合山豆根种子生存力测定的条件。
同时，在本研究中，还采用了氯化钠和咖啡因的预处理方法。
实验结果表明，添加1.5％的氯化钠可以有效地刺激种子的发芽和萌芽，将生活力值提高了10％左右。
而直接使用咖啡因水溶液，则可以减少不必要的化学反应，使测试结果的稳定性得到保证。
综上所述，通过实验表明，优化溴麝香草酚蓝法山豆根种子生活力测试的相关条件，可以提高测量结果的准确性和可靠性，为生产实践提供保障。
但是，仍然需要进一步的研究和探索，以完善山豆根种子生存力测定的方法并为生产提供更加有效的技术支持。