畜禽肉蛋及水产中4种氟喹诺酮类药物残留的快速测定_张鑫
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测黄 立（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650032）摘 要：建立了猪肉、牛肉、鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类共15种兽药残留量的快速检测方法。
样品经过Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液-2.5%乙酸乙腈溶液提取，经氯化钠、无水硫酸钠除水盐析后取乙腈相用高含碳量的C18吸附粉吸附净化，再用0.1%甲酸水乙腈（75+25）定容后上机检测。
结果显示，本方法测定三类混合药物的回收率在63.9%～104.0%，RSD在1.1%～12.2%，检测快速、灵敏度高、重复性好，定性定量准确可靠，适用于猪肉、牛肉及鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类药物残留的快速检测。
关键词：液相色谱-串联质谱法；磺胺；四环素；喹诺酮Rapid Detection of Multiple Types of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry MeatHUANG Li(Kunming Institute for Food and Drug Control, Kunming 650032, China) Abstract: A rapid method was established for the determination of 15 veterinary drug residues of sulfonamides, tetracyclines and quinolones in pork, beef and chicken. The samples were extracted by Na2EDTA-Mcllvaine buffer-2.5% acetic acid acetonitrile solution, and the acetonitrile phase was purified by adsorption with high carbon content C18 adsorbent powder after dehydration salting by sodium chloride and anhydrous sodium sulfate, and then fixed with 0.1% formic acid aqueous acetonitrile (75+25) and detected on the machine. The results showed that the method determines the recovery of the three types of mixed were 63.9%～104.0%, RSD were 1.1%～12.2%, rapid detection, high sensitivity, good repeatability, accurate and reliable qualitative and quantitative, suitable for the rapid detection of sulfonamides, tetracyclines, quinolones drug residues in pork, beef and chicken.Keywords: liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamide; tetracycline; quinolone合理使用兽药可以提高畜禽养殖效率，节省成本，缩短出栏周期，进而增加收益，但越来越多的人为追求经济效益滥用药物，导致了一些兽药以残留的形式流入人体，从而对身体健康造成威胁[1]。
浅析氟喹诺酮类兽药残留检测方法
３ 氟喹诺酮 类药物残 留的检测方法
目前 ，常用 于氟 喹诺酮 类药 物残 留 的检 测方 法 可分 为４ 液相色 谱法对 猪 肉组织 中恩诺沙 星和环 丙沙 星残 留量 进行 检 大类 ：微 生物法 、仪器分 析法 、化学发 光与 电化学发光 分析 测 ，结 果 环丙 沙星 、恩 诺沙 星 的质量 浓度 在 ２ｇＬ～１ ０ ｇＬ ／ ０ ／ ｇｋ 。 法及免疫分析法。其中仪器分析法常见的有高效液相色谱法 范 围内呈线性关 系 ，它们 的最低定量限均为２／ｇ （ＰＣ Ｈ Ｌ ）、液一 质联用分析法 （ ＣＭ ）、高效毛细管电泳法 ３ ２ ２ 高效液相 色谱 一 Ｌ／Ｓ ．． 质谱联 用法 （ ｃ Ｍ ） 随着研究 的深 Ｌ— Ｓ （ Ｐ Ｅ）等 ；免疫 分析检测法包括 间接竞 争Ｅｉ 测定法 、免 入 和对食 品安全越 来越 高 的重 视 ，定 性准 确 ，灵 敏度更 高 的 ＨＣ ｌａ ｓ 疫传感器分析法 、免疫亲和色谱 （ＡＣ）分析法等【 。 Ｉ ｌ 液质联 用技 术渐渐 被人 们采纳 ，这种 技术不 仅可 以更精 确 的
兽 药 应 用
中国畜牧兽 医文摘
２ １年 ０１
２卷 ７
第３ 期
浅析氟喹诺酮 类兽药残 留检测方法
将 ，、 Ｊ武 ・
（ 南大 学荣昌校 区，重庆 西
４ ２６ ） ０ ４ ０
［ 要］ 解决兽 药残留监 控 问题是提 高动物源性食 品质 量，保障食品安全 的关键 性环节之一 ，因此在食 品检 验 中建立 一 摘 些 方便 快捷 的检测方 法显得 尤为重要 。本 丈以兽 药氟喹诺酮类为例 ，系统 阐述 了目前在临床检测 中 已经建立的有关 氟喹诺酮类 药物 残留的检 测技 术 ，以期能为其他药物残 留检测提供参考方 向。
超高效液色谱相法检测鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留
氟喹诺酮类药物是一种广谱抗生素,具有高效、低毒等特点,常用于动物饲料中,可促进动物生长,降低动物发病率[1]。
因其在畜牧养殖业中广泛应用,容易在动物性食品中造成药物残留,而长期食用具有抗生素残留的动物性食品,容易引起许多问题,严重时会对人体中枢神经系统及心血管系统造成危害,甚至致癌[2-3]。
目前,鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的检测主要通过高效液相法、液质法等,液相法操作简便有效,但传统的常规液相法通常耗时较多,工作效率低,随着超高效液相色谱在检测工作中的广泛应用,工作效率得到了极大的提高。
本文中使用甲酸乙腈对样品进行提取,经超高效液相法分析,对超高效液相法检测鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的结果进行汇总分析。
1仪器与试剂1.1仪器超高效液相色谱仪Agilent 1290,电子天平PL402-L ,电子天平AV412,高速冷冻离心机Bilguge stratos 等。
1.2试剂乙腈(色谱纯,Fisher ),甲酸(Fisher )。
1.3标准品环丙沙星(中国兽医药品监察所,99.8%),恩诺沙星(中国兽医药品监察所,99.9%),沙拉沙星(中国兽医药品监察所,99.6%),达氟沙星(QCC ,99.6%)。
2方法2.1色谱条件流动相:0.1%甲酸溶液:乙腈(V/V )=82:18;柱温:30℃;检测波长:激发波长280nm,发射波长450nm ;流速:0.3ml/min ;进样体积:5μl ;色谱柱型号:Agilent Eclipse Plus C18RRHD 色谱柱,1.8μm,2.1×150mm 。
2.2提取取鸡蛋,打碎去壳搅匀,称取2.00g ,置于50ml 离心管中,加入8ml 1%甲酸乙腈溶液,涡旋混匀,振荡5min ,10000r/min 离心5min ,将上超高效液色谱相法检测鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留侯耀杰(甘肃省兽药饲料监察所,甘肃兰州730030)中图分类号：TS207.5文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2018）01-0011-03摘要:超高效液相法检测鸡蛋中四种氟喹诺酮类药物残留,样品经1%甲酸乙腈提取后,荧光检测器检测分析。
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物是一类广泛应用于人类及动物医药领域的抗菌药物，包括诸如氟苯尼考、氟哌酸、氟氧氟嗪等。
在兽药的使用中，为了保证食品中不残留过多的药物，国家制定了一系列的标准和方法来检测氟喹诺酮类药物的残留。
国标是指国家发布的关于特定物品或行为的规范和标准，是行业内进行质量控制和监督的重要依据。
对于氟喹诺酮类药物残留检测而言，国标主要涉及以下几个方面的内容：1. 检测方法：国标要求制定适用于氟喹诺酮类药物残留检测的方法，包括样品的采集、处理、提取、分离和定量等方面的技术要求。
这些方法通常采用高效液相色谱仪（HPLC）或质谱仪（MS）等仪器设备进行分析，以确保准确度和可靠性。
2. 检测限值：国标规定了氟喹诺酮类药物在食品中的残留限值，即食品中允许存在的最大药物残留浓度。
这些限值根据食品的种类、人们对该食品的摄入量以及药物的毒性等因素来确定，旨在保证食品的安全性和合规性。
3. 样品类型：国标规定了适用于氟喹诺酮类药物残留检测的样品类型，包括肉类、乳制品、水产品、蔬菜等。
针对不同的样品类型，可能需要不同的样品处理和预处理方法，以确保药物残留的有效提取和准确测定。
4. 检测设备和操作要求：国标还规定了氟喹诺酮类药物残留检测所需的设备和操作要求，包括仪器的性能指标、试剂的选择和使用、流程的标准化等。
这些要求有助于确保检测结果的准确性和可比性。
氟喹诺酮类药物残留的检测国标的制定和执行，对保障食品安全、合规经营和消费者权益具有重要意义。
遵循国标的要求进行药物残留检测，可以有效监控食品中的氟喹诺酮类药物残留情况，减少潜在的食品安全风险，保障公众健康。
同时，对于相关行业从业人员而言，了解并遵守国标的要求也是履行职责、提升专业素养的必要条件。
超高效液相色谱法检测鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留
贵州农业科学2018,46(1):104〜108Guizhou Agricultural Sciences[文章编号]1001-3601(2018)01-0028-0104-05超高效液相色谱法检测鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留孙思，王安波，杨梅，汪俭，刘文峰*(黔东南州农产品质量安全检测中心，贵州凯里556000)[摘要]为寻求快速、高效和低成本的样品分析方法，在高效液相色谱法基础上通过前处理条件及色谱条件的优化，建立快速检测鸡蛋中恩诺沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星残留的超高效液相色谱法(U P L C)，即选用1%磷酸-乙腈作为提取溶液、水饱和正己烷作为除脂溶液、W a t e r s O a s i s H L B柱为固相萃取柱及1/4提取液过柱、89%(0.05 m o l/L磷酸/三乙胺）：11%(乙腈）的流动相比例，并对建立的方法进行验证。
结果表明：利用新建立的U P L C检测，4种氟喹诺酮类药物在0. 2〜50哗/k g线性范围良好（i?2> 0.999 7)，经添加低中高3种不同浓度的混和标准液进行回收率和变异系数分析，其回收率在85. 7%〜94. 3%，变异系数为1. 50%〜3. 77%，最低检测限为0. 17〜0.59吨/k g，定量限为0.81〜2.O l j u g/k g。
该方法易于操作，准确度和精密度高，能满足大批量鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留检测需要。
[关键词]鸡蛋；氟喹诺酮；超高效液相色谱法；药物残留[中图分类号]S481+.8 [文献标识码]ADetermination of Four Fluoroquinolone Residues in Eggs by UPLCS U N S i,W A N G A n b o,Y A N G M e i,W A N G J i a n,L I U W e n f e n线*(Qiandongnan Inspection and Testing Center fo r Quality S afety o f Agricultural Product，K aili，Guizhou556000, China)A b s t r a c t：The UPLC method to rapidly detect Enrofloxacin,Ciprofloxacin,Danofloxacin and Sarafloxacin residues in eggs was built by simplified pre-treatment and optimized chromatographic condition based on HPLC to explore a rapid,efficient and low cost method of detecting fluoroquinolone residues in eggs.The UPLC method includes 1 %phosphoric acid -acetonitrile for extraction,water saturation n-hexane for degreasing,Waters Oasis HLB column for solid-phase extraction,1/4 extract for purification and mobile phase ratio of 89%L-phosphoric acid/triethylamine：11 %acetonitrile.Results：The linear range of four fluoroquinolones is good between 0. 2〜50 ug/kg(R z> 0. 999 7)under the UPLC method.The recovery rate,variation coefficient,minimum detection limit and quantification limit of four fluroquinolones respectively added with three different concentrations are85. 7% 〜94. 3%,1.50% 〜 3. 77%,0. 17 〜0.59 jug/kg and0. 81 〜2. 01 jug/kg separately.The established UPLC method with advantages of easy operation,high accuracy and high precision can be used in detection of fluoroquinolone residues in m a s s e g g s.K e y w o r d s：e g g；f l u o r o q u i n o l o n e；U P L C；d r u g 氣唾诺酮类药物（F l u o r o q u i n o l o n e s,F Q N s)是一类人工合成抗菌药，抗菌效果极强，其中，恩诺沙星（E n r o f l o x a c i n，E N R)、环丙沙星（C i pr o f l o x a c i n, C I P)、达氟沙星（D a n o f l o x a c i n，D A O)和沙拉沙星(S a r a flox aci n，S A R)在畜禽生产中被广泛应用[1]。
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物
3超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物张梦雪1,刘松雁1,王志恒1,高庆辉1,刘冰1,张琼2(1.石家庄市畜产品质量监测中心050000;2.石家庄市动物卫生监督所050000)摘要:目的建立鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留测定的液相色谱-串联质谱检测方法。
方法样品准确称量后加入1%乙酸乙腈,涡旋提取,冷冻离心,加入正己烷冷冻离心,过C18固相萃取柱,采用液相色谱-串联质谱法检测鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留,采用空白基质加标法配制标准曲线,使用同位素内标法定量。
结果4种氟喹诺酮类药物残留分离较好,线性范围为1~50μg/L ,回收率为80.15%~108.55%,相对标准偏差在(n=6)小于6.10%。
结论该方法简单、快速、准确,可以满足检测需求,适合测定鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留测定。
关键词:鸡蛋;氟喹诺酮类;液相色谱-串联质谱法蒽诺沙星(Enrofloxacin)、环丙沙星(Ciprofloxacin )、沙拉沙星(Sarafloxacin )、达氟沙星(Danofloxacin )均属于氟喹诺酮类药物,自1962年氟喹诺酮类药物问世,氟喹诺酮类药物因抗菌效果好,应用范围广,被广泛应用于动物生产中的疾病防治。
但由于氟喹诺酮类药物会在动物产品中残留蓄积,若在动物疾病防治过程中药物使用不当或者过量,会导致动物产品中残留过量,人食用后会造成对该药物的耐药,影响日后疾病的治疗效果,长期食用还可能造成肝脏、关节损伤及致癌等后果,所以氟喹诺酮类药物残留问题引起了人们的关注。
我国允许蒽诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星兽用,但规定了最高残留限量。
本方法根据日常工作需求,建立了4种氟喹诺酮类药物:蒽诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星的液相色谱-串联质谱法。
1材料与方法1.1仪器液相色谱-串联质谱仪(AB,Sciex 5500,ESI )、酸度计(梅特勒,S210),电子天平(上海津平,YP202,d=0.01g )、电子天平(sarto ⁃rius,CP225D,d=0.1mg ),涡旋混合器(IKA,MS3digital )、多道涡旋混匀仪(heidolph )、冷冻离心机(ROTINA 公司,380R )、氮吹浓缩仪(Horizon technology )、固相萃取仪(PRESSURIZED SPE MANI ⁃FOLD )、冰箱(美菱)。
高效液相色谱测定鸡蛋中4种喹诺酮类药物
高效液相色谱测定鸡蛋中4种喹诺酮类药物
杨娜娜;王庚南;刘静;刘聚祥
【期刊名称】《河北农业大学学报》
【年(卷),期】2014(037)006
【摘要】建立了鸡蛋中诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、恩诺沙星残留量测定的高效液相色谱法.样品经磷酸盐缓冲液提取,PLS固相萃取柱净化后,以流动相洗脱,反相液相色谱分离测定.结果表明:4种喹诺酮类药物在50～1 000 ng/g范围内呈线性相关,检出限为10 ng/g,定量限为50 ng/g,平均回收率为60％～70％,日内、日间相对标准偏差均小于10％.
【总页数】5页(P101-105)
【作者】杨娜娜;王庚南;刘静;刘聚祥
【作者单位】河北农业大学动物医学院,河北保定071000;河北农业大学动物医学院,河北保定071000;河北农业大学动物医学院,河北保定071000;河北农业大学动物医学院,河北保定071000
【正文语种】中文
【中图分类】S831.4+9
【相关文献】
1.超高效液相色谱–串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物残留量的研究 [J], 李莉;张晶;吴春燕;陈娟;马岩;邓亚婷;陈海燕;陈建蓉
2.高效液相色谱法快速测定鸡蛋中5种氟喹诺酮类药物残留 [J], 王成真;刘戎;张嘉
慧;沈祥广;杜小溪;匡徐;冯可莹
3.超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物 [J], 张梦雪; 刘松雁; 王志恒; 高庆辉; 刘冰; 张琼
4.超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应 [J], 黄碧慧
5.超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应 [J], 黄碧慧
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高效液相色谱荧光法检测鸡肉中4种氟喹诺酮药物残留
高效液相色谱荧光法检测鸡肉中4种氟喹诺酮药物残留乔坤云;孙涛;刘圣红;赵子刚【摘要】采用高效液相色谱荧光法对鸡肉中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星4种氟喹诺酮类药物残留进行了检测。
鸡肉样品加一定量的磷酸缓冲液(pH=7)匀浆提取,离心、固相萃取 C18小柱净化,收集洗脱液,经膜过滤,供高效液相色谱分析检测。
按样品处理方法对鸡肉样品做添加回收试验,添加浓度分别为：环丙沙星：0.025、0.05、0.10 mg/mL,达氟沙星：0.004、0.008、0.016 mg/mL,恩诺沙星：0.0205、0.041、0.082 mg/mL,沙拉沙星：0.0225、0.045、0.09 mg/mL；方法回收率为：78.7%~100.3%；变异系数 RSD 为：3.86%~4.84%；标准曲线结果：4种组分在浓度为0.025~0.20 mg/mL 范围内线性关系良好,相关系数均在0.9999。
结论：高效液相色谱荧光法同时检测环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星4种氟喹诺酮类药物残留方法准确、可靠,符合实验要求。
%A certain amount of phosphate buffer (PH=7)was added to the chicken sample,after ho-mogenate extraction,centrifugation and purification of solid phase extraction C18 column,collecting elu-ate,membrane filtration,it could be analyzed.The method recovery was 78.7%-100.3%,the coefficient of RSD was 3.86%-4.84%.The 4 components in the range of 0.025-0.20g/mL were linear,with correla-tion coefficient of 0.9999.This method is accurate,reliable,and can meet the test requirements.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P43-46)【关键词】高效液相色谱;荧光检测器;氟喹诺酮;鸡肉【作者】乔坤云;孙涛;刘圣红;赵子刚【作者单位】新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，乌鲁木齐830091;新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，乌鲁木齐 830091;新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，乌鲁木齐 830091;新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，乌鲁木齐 830091【正文语种】中文氟喹诺酮(FluoroquinolonesFQNa)药物是在喹诺酮环结构的6位引入氟、7位引入哌嗪环而得到的一类衍生物，仅在R1、R2、R3位取代基不同[1]。
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药物名称 环丙沙星 恩诺沙星 沙拉沙星 达氟沙星 图1 四种氟喹诺酮类药物混合对照品谱图 收实验
* 冻干鱼粉加 4 倍重量的纯水溶胀 10 min，再进行添加回
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第 28 卷增刊 2009 年 12 月
分析试验室 Chinese Journal of Analysis Laboratory
药物名称 环丙沙星
药物名称 环丙沙星 达氟沙星 恩诺沙星 沙拉沙星
鸡蛋中添加四种氟喹诺酮类药物回收率 添加浓度 w / （ ng / g） 平均回收率 / % 10 ， 20 10 ， 20 10 ， 20 2， 4 83. 6 ， 86. 5 92. 7 ， 92. 2 87. 9 ， 90. 2 88. 3 ， 89. 6
表1 四种氟喹诺酮类药物标准曲线方程及相关系数 保留时间 / min 8. 387 10. 023 11. 622 18. 256 线性方程 相关 系数 表3
2. 2
添加回收实验
在猪肉、兔肉、鸡肉、鸽肉基质中添加三种浓 度的氟喹诺酮类药物混和对照品溶液，鸡蛋、鱼 肉基质中添加两种浓度的对照品溶液，均平行添 加三份，统计平均回收率列于表 2 ～ 4 中。畜禽肉 基质的添加回收率在 70. 2% ～ 90. 5% 之间，鸡蛋 的添加回收率在 83. 6% ～ 92. 7% 之间，鱼肉的回 收率为 71. 1% ～ 84. 1% 。图 3 为空白猪肉中添加 四种氟喹诺酮类药物混合对照品 200 ng / g（ 达氟沙 星 40 ng / g） 的添加回收谱图。
药物名称 环丙沙星 恩诺沙星 沙拉沙星 达氟沙星 表4
鱼肉基质中添加四种氟喹诺酮类药物回收率 添加浓度 w / （ ng / g） 10 ， 100 10 ， 100 10 ， 100 2， 20 平均回收率 / % 鲫鱼肉基质 71. 1 ， 79. 1 75. 7 ， 80. 8 73. 9 ， 78. 5 77. 2 ， 83. 4 冻干鱼粉基质 75. 8 ， 80. 3 76. 6 ， 82. 5 75. 2 ， 79. 4 78. 2 ， 84. 1
作步骤复杂，不利于进行批量检测。本研究在文献 方法的基础上建立了一种同时检测 4 种氟喹诺酮类 药物残留量的快速方法，适用于猪肉、鸡肉、鸽肉 和鸡蛋，优化并简化了提取和净化过程，方法简便， 灵敏快速，能满足国内外检测限量要求。 1 实验材料及方法 1. 1 仪器与试剂 Waters 2695 高效液相色谱仪， 配荧光检测器；
［1 ］ 中华人民共和国农业部公告第 235 号. 动物性食品 2002 中兽药最高残留限量， ［2 ］ European Union Commission. Desision No. 2002 /657 / EC，implenenting Council Dirctive 96 /23 / EC concerning the performance of analytical methods and the inter-
［3 ～ 11］
C18 固 相 萃 取 小 柱 （ 100 mg， 3cc ） ； 离 心 机 （ ALC PK121R，Thermo ） ； pH 计 （ ZD2A，上海大 普仪器有限公司） 。 H3 PO4 （ 85% ） 、三乙胺为分析纯； 磷酸氢二 钾、NaOH 为化学纯； 乙腈、甲醇为色谱纯。盐酸 环丙沙星，纯度 100% ； 恩诺沙星，纯度 99. 9% ； 沙拉沙星，纯度 99. 8% 、甲磺酸达氟沙星，纯度 99. 9% ，购自中国兽医药品监察所。 1. 2 1. 2. 1 溶液配制 对照品 精密称取环丙沙星、恩诺沙星、 沙拉沙星、达氟沙星标准品，用 0. 02 mol / L NaOH
图2 空白猪肉
使用了不同 pH 的流动相。
图3
猪肉中四种氟喹诺酮类药物添加回收
图4
提取液对提取效率的影响
2. 3
样品前处理 文献
［12 ， 13 ］
对肉及蛋中氟喹诺酮类的检测通常 采用不同的前处理方法，本文探索了肉及蛋通用 的检测方法，简便实用。 由于猪肉纤维较粗，而鸡肉纤维细短，鸽肉 有血色素干扰，蛋和鱼肉中蛋白质含量很高，因 此基质不同对检测结果有一定影响，文献中多采 用添加正己烷去脂等方法减少基质干扰，本文采 取加大提取液体积以弱化基质影响，低温高速离 心以降低蛋白质及脂类干扰，取得了较好的效果。 振摇提取 是 常 用 的 提 取 方 法，本 文 对 猪 肉、 兔肉、鸡肉、鸽肉均采取振摇提取 15 min 以提高 提取效率，结果显示效果较好。但鱼肉及蛋液不 适合长 时 间 振 摇，一 般 涡 旋 1 min 或 中 速 振 摇 3 min即可，以防止起泡，增加柱净化难度。 2. 4 提取液的选择 由于本文研究的四种沙星类均为哌嗪喹诺酮 ， 是具有两个 pKa 的两性化合物，分别为 5. 5 ～ 6. 6
A = 2. 17 × 104 ρ － 1. 77 × 104 0. 9999 A = 1. 89 × 105 ρ － 1. 26 × 105 0. 9996 A = 4. 51 × 104 ρ － 3. 65 × 104 0. 9999 A = 1. 70 × 104 ρ － 2. 66 × 104 0. 9998
［14 ］ 和 7. 2 ～ 8. 9 ，文献 中可选用的提取液总类较 多，大体分为酸性水溶液、水不溶非极性有机溶
图5
流动相 pH 值对荧光响应强度的影响
2. 6
定量限
本方法的定量限为 10 ng / g（ 达氟沙星为 2 ng / g） ， 畜禽肉及水产回收率为 70% ～ 91% ，鸡蛋回收率 为 80% ～ 93% ，能够满足我国动物源性食品中氟 喹诺酮类最高残留限量的检测要求 。 参考文献
mail： guxun@ sh163. net 鑫 （ 1983 － ） ，女，助理畜牧师； E-
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第 28 卷增刊 2009 年 12 月
分析试验室 Chinese Journal of Analysis Laboratory
Vol. 28. Suppl. 2009 － 12
荧光检测器，激发波长 280 nm，发射波长 450 nm。 1. 4 实验原理 样品经匀浆后，试样中残留的氟喹诺酮类药 物用磷酸盐缓冲液（ pH 6 ） 提取，用 C18 固相萃取小 柱净化，流动相洗脱，洗脱液过滤上机，用高效液 荧光检测法测定。 相色谱1. 5 样品处理 取适量样品用匀浆机匀浆。准确称取匀浆后 的样品 2. 0 g，加入 20 mL 磷酸盐缓冲液，振荡提 8000 r / min 4 ℃ 低温离心 10 min，转移 取 10 min， 清液于另一 50 mL 离心管中备用。依次用甲醇、 水、磷酸盐缓冲液 3 mL 活化洗涤 C18 固相萃取小 柱。加入样品提取液 5 mL，控制 2 ～ 3 滴 / s 流速， 用 3 mL 水洗涤杂质，挤干，用 2 mL 流动相洗脱， 混匀，取 1 mL 经 0. 45 μm 滤膜过滤后供高效液相 色仪谱检测。 2 结果与讨论 2. 1 标准曲线 分别吸取一定量的 4 种氟喹诺酮类药物的储 备液于同一容量瓶中，用流动相稀释成环丙沙星、 恩诺沙星、沙拉沙星浓度为 5 、10 、20 、50 、100 、 250 ng / mL， 2、 4、 10、 20、 50 ng / mL 的 达氟沙星为 1、 混合对照品工作液。药物峰面积 A 与相应浓度 ρ （ ng / mL） 的拟合线性方程和相关系数如表 1 。
* 作者简介： 张
液调节 pH 至 6. 0 。 1. 2. 3 0. 05 mol / L 磷 酸 / 三 乙 胺 溶 液 取 浓 H3 PO4 3. 4 mL，用水稀释至 1000 mL。用三乙胺调 pH 至 2. 3 ～ 2. 4 。 色谱条件 色谱柱： C18 柱 250 × 4. 6 mm （ i. d. ） ，粒 径 5 μm； 流动相： 0. 05 mol / L 磷酸 / 三乙胺 ∶ 乙腈 = 1. 3 84∶ 16 ； 流速 1mL / min； 柱温 30 ℃ ； 进样量 20 μL；
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合对照品 10 ng / g，使用两种提取液提取，本文选 用的 pH = 6. 0 的磷酸盐提取液的提取效率较某文 献中的使用的有机溶剂提取液的提取效率高 。 2. 5 pH 流动相 pH 在 2. 3 ～ 2. 4 范围内时，荧光响应 强度较适宜，应使用 pH 计精密调节。图 5 为鸽肉 中添加四种氟喹诺酮类药物混合对照品 10 ng / g （ 达氟沙星 2 ng / g ） 的添加回收色谱图，两次进样
4 ℃ 冷藏，上机前用 溶液制成 1. 0 μg / mL 贮备液， 流动相稀释成适宜浓度的标准工作液 。 1. 2. 2 磷酸盐缓冲液 称取磷酸氢二钾 6. 8 g， 加水溶解，稀释至 500 mL，用 5. 0 mol / L NaOH 溶
有关 FQNS 多残留的检测方法国外已有诸多报 ，但是不同基质的前处理方法也不同