交叉配血试验操作流程图(微柱凝集法)
交叉配血试验操作流程图（微柱凝集法）
交叉配血试验前第一次核对供、受者交叉血样
配查输血申请单预约用血的供血者（相同血型、种类及用血量）
交叉血标本与输血申请单核对
找供血者交叉血标本（注意血袋编码数字核对）
分别在检测试剂卡主侧（受者血清＋供者红悬液）、次侧（供者血清＋受者红悬液）管中加样
在输血申请单上记录供血者血袋码、血液种类及用血量
分别配制供、受者交叉血0.5-0.8%红细胞悬液
使用血型专用离心机按预定程序离心
结果判定
查找、分析原因 进一步检测或重新配血 填写输血记录单，医护人员当面核对无误后发血 交叉配血试验不相容 交叉配血试验相容 在供血者血袋上记录受血者信息
再次核对供、受者交叉血样及血袋上信息
标本清理与保存，记费
阿克苏市人民医院输血科
输血科交叉配血操作流程
输血科交叉配血操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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交叉配血试验工作的检验流程
交叉配血试验工作的检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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凝聚胺交叉配血试验 ppt课件
操作
❖ 1. 取试管两支，标明主侧次侧，主侧管加受 血者血清(血浆)1滴，和供血者3～5％红细胞 悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管受血者 3～5％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)l滴， 加供血者血清(血浆)1滴。
❖ 2. 各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或 参照说明书。
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【注意事项】
❖ 1.可以用含EDTA抗凝血浆代替血清使用。 ❖ 2.若受血者血清(血浆)含肝素，如洗肾患者，
须多加4～6滴Po1ybrene溶液以中和肝素。 ❖ 3.试剂使用前请放置至室温平衡后再行操
作。
12
❖ 4.在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试 验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒 冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现， 建议进行交叉配血试验操作时室温保持在 22℃左右，最后滴加Resuspending时，将 试管立即置入37℃水浴中，轻轻转动试管混 合，并在30秒内观察结果。
实验三 凝聚胺法交叉配血
医学检验系 张晨光
1
目的：掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。
原理：聚凝胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶
解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷， 有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红 细胞的Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的吸 引力。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生 紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电 荷，使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使 非特异性凝集消失。
灵敏度高；但费时，准确性和稳定性差。
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❖ 4.卡式配血（微柱凝胶法）已成为国际安
交叉配血试验50384精编PPT课件
实验原理
天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。可以检查供、受者血清中是 否存在破坏对方RBC 的IgM抗体(ABO 血型中抗A 抗B抗体以IgM抗体为主)。 实验步骤 取二试管， 分别注明“主”、“次”字样， 主侧滴入供血者红细胞悬液 一滴和受血者血清一滴；次则滴 入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清 一滴。混匀后 1000rpm离心1min， 取出观察结果。 如两侧均 无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。 低离子聚凝胺介质交叉配血试验 实验原理
Байду номын сангаас
实验原理
微柱凝胶介质交叉配血试验 实验原理 利用抗原抗体特异性反应的作用→通过离心技术→利用凝胶的 微孔过滤作用，将发生凝集反应的RBC阻滞于凝胶之内，而未 凝集的单个RBC则穿过微孔运动至柱底→从而区分有无凝集。 实验步骤 见PPT所述。结果判定肉眼直接观察。
实验注意事项
实验注意事项
1.器材、试剂、反应温度、 离心、标本等注意事项同ABO 血型鉴定。 2.血清优于血浆；不用溶血标本；配血后，标本置冰箱内保存至少7天 。 3. RBC要用生理盐水洗干净。 4.溶血现象， 实质是阳性结果， 为配血不合。 5. ABO血型系统同型而不容，应首先排除ABO血型鉴定是否有误。 6.盐水介质法仅能检测 IgM型RBC血型抗体，不能检测 IgG型 RBC抗体。凝聚胺法 可以检查出IgG 型的血型抗体 7.临床输血进行交叉配血试验时，应当首先进行盐水介质法试验，再进行聚凝胺介 质法试验。 8. 聚凝胺介质法试验尽快观察结果(<3min)
交叉配血试验50384精 编PPT课件
演讲人
目录
01
【实验器材和药品】
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
输血科微柱凝胶法交叉配血试验标准操作规程
输血科微柱凝胶法交叉配血试验标准操作规程1目的建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验标准操作规程,确保微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验操作的准确性和规范性。
2原理微柱凝胶卡采用分子排阻层析原理在微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，而未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3适用范围适用于建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验4操作程序4.1试剂：4.1.10.9%生理盐水；4.1.2微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡4.2器材：4.2.1LDZ4-1.2台式普通离心机4.2.2微柱凝胶法专用孵育箱：FYQ型免疫微柱孵育器4.2.3微柱凝胶法专用离心分离机：TD-3A型血型血清学离心机4.2.4IOU1、50Ul的微量移液器。
4.2.5玻璃或塑料试管（IOXI2mm或12X15mm）4.2.6一次性枪头4.3样本要求：抗凝全血3ml,本实验室为EDTA-K2抗凝。
4.4方法4.4.1选择微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡，观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，然后将卡平行至室温（15°C-28℃）,平衡后用TD-3A型血型血清学离心机离心2-3min o做好标记：填写病人姓名、血型和配血日期，去除卡中微柱凝胶管上的密封铝膜。
4.4.2制备红细胞悬液：分别将受血者及供血者的抗凝血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机IoOOXg60SeC（3479转/分离心60SeC）,将红细胞吸出后，用0.9%生理盐水稀释成1%的溶液【10UI红细胞沉淀溶于InIIO.9%生理盐水中工取50Ul1%受血者或供血者红细胞悬液加于相应的微管。
4.4.3将已达室温的待检的全血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机离心IOOOXg2-3min（3479转/分离心2-3min）,确保加入反应体系中的血浆不含有任何颗粒性成分，取50UI受血者及供血者血浆加于相应的微管。
5.用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序
交叉配血（凝聚胺法）试验操作规程（SOP）1. 目的：交叉配血；检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型2. 原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体1. 目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型2. 原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。
3. 适用范围：配血、免疫性抗体检查、红细胞血型鉴定、特殊的研究4. 所需材料：聚凝胺试剂、定型血清、谱细胞、洁净试管、滴管、离心机5. 操作程序：（以交叉配血为例）5.1以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞 1 —3次，配成3-5%的悬液。
5.2交叉配血试验：主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。
次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。
阳对：2滴抗-D血清加1滴RH（ +）3-5%的RBC悬液。
5.3每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。
自身对照：2滴患者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。
5.4 分别加2 滴Polybrene 应用液，混合放置15 秒。
5.5 离心3400转/分15 秒，弃上清，控干。
5.6 观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。
5.7 每管各加2 滴解聚液，轻轻混合10 秒，观察结果并做记录。
5.8 结果判定：10 秒内若为Polybrene 引起的聚合应该会散开，判为阴性。
若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。
6. 注意事项：6.1可以用EDTA血浆代替血清6.2 加入解聚液后应该在3 分钟之内观察结果6.3 解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度。
微柱凝胶法血型鉴定操作规程
微柱凝胶法1 标本： EDTA-K2抗凝血 2.0ml2原理：2.1 人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质为血凝反应）；2.2 检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶；2.3 凝胶间隙具有分子筛作用。
凝集的红细胞（结合的）被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。
未凝集的红细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部；2.4 微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗 B 试剂检测红细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。
3操作：3.1 在 A1 孔悬空加入 50ul 标准 A1 红细胞，在 B 孔悬空加入50ul 标准 B 红细胞，再在两孔中各加入 50ul 样品血浆。
3.2 在 A、 B、 D、C、 E、 Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液 10ul3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9 分钟3.4离心结束后在白色背景前观察结果4结果判断：A 孔阳性B 孔阴性为 A型;A 孔阴性 B孔阳性为 B型; A 孔阴性 B 孔阴性为 O型 ;A 孔阳性 B 孔阳性为 AB型。
凝集强度描述阴性100%（全部）的红细胞沉在微管的底部+/-100%1/31+80%（大部分）的红细胞沉在微管的下端2/3之内2+80%（大部分）的红细胞沉在微管的上端2/3之内3+80%（大部分）的红细胞沉在微管的上端1/3之内4+凝集的细胞处于微管的顶部DP（双群）红细胞同时位于微管上部和微管底部H（溶血）微管中液体出现透明红色5.注意事项5.1 严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。
5.2 应先加红细胞悬液，然后再加血浆。
5.3 为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。
5.4 严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。
5.5 未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放 4℃冰箱保存 1 周。
5.6 判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
6.方法评价卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。
09 微柱凝胶法交叉配血操作规程---作业指导书
1.1 微柱凝胶试剂卡的准备观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，将卡放置平衡至室温，使用前置离心机3000r/min 1 min离心。
1.2 检测标本的准备
1.2.1 待检标本的准备：将受（供）血者全血标本，离心分离红细胞与血浆（血清），取上清（该上清不得有絮状物或沉淀）。
1.2.2 红细胞悬液的制备：将受（供）血者标本制备1%红细胞低离子介质（LIM）悬液。
操作步骤
2.1 将准备好的抗人球蛋白检测卡做好标记（主、次侧）。
2.2 撕开卡封膜,于反应腔中主侧管加供血者1% 红细胞LIM悬液50μl，加受血者血浆清）50μl；于反应腔中次侧管加受血者1% 红细胞LIM悬液50μl，加供血者血浆（血清）μl
2.3 将加样后的检测卡，置37℃中孵育15分钟。
3.4 细菌污染、纤维蛋白析出，抗凝不佳的血，可产生假阳性。
3.5 离心速度过快、时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。
3.6 大多数抗体达到10-30 min即可致敏相应红细胞，但Jk、Fy抗体孵育时间需≥30min。
微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程
微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程The manuscript was revised on the evening of 2021微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程一．准备工作1.微柱凝胶试剂卡的准备观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
2.检测标本的准备3.红细胞悬液的制备取被检者压积红细胞50微升，加入1毫升红细胞稀释液（盐水），外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。
二．操作步骤1．将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。
2．将受血者血清1滴（或50μl）与献血者红细胞悬液10μl先后加入主侧管中。
3．将献血者血清1滴（或50μl）与受血者红细胞悬液10μl先后加入次侧管中。
4．加样后的试剂卡，置37℃孵育器中孵育15分钟。
5．使用专用离心机离心5分钟，取出肉眼观察结果。
三．结果判定1．阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与献血者血型相合。
2．阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合。
四．注意事项1.红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。
尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
2.血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。
3.如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。
4.每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
5.试剂卡应放在18-25℃储存，如若长期放在4℃冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。