4T1小鼠乳腺癌细胞
4T1、CT26.WT细胞培养
CT26.WT小鼠结肠癌细胞形态: 成纤维细胞培养基和添加剂: RPMI-1640(GIBCO,货号添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%，1%的双抗（青霉素，链霉素）。
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。
温度：37摄度。
4T1小鼠乳腺癌细胞形态：上皮细胞培养基和添加剂：RPMI-1640(GIBCO,货号添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%，1%的双抗。
（青霉素，链霉素）气相：空气，95%；二氧化碳，(三)坏补体(1、2、3、(四)／mL。
(五)(六)传代（或，晃动菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞:一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
(七)冻存将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。
加入10%的DMSO。
以每管1～2ml分装至冻存管中。
用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。
次日保存到液氮中。
(八)注意事项玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。
分装后置4度保存;消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存;培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。
萝卜硫素对小鼠乳腺癌4T1细胞上皮-间质转化、增殖和迁移的影响研究
605欢迎关注本刊公众号·论 著·《中国癌症杂志》2021年第31卷第7期CHINA ONCOLOGY 2021 Vol.31 No.7基金资助：国家自然科学基金面上项目（81772833）。
通信作者：黄晓飞 E-mail: hxiaofei@萝卜硫素对小鼠乳腺癌4T1细胞上皮-间质 转化、增殖和迁移的影响研究谢金芳1,2，曹春雨1,2，任 雪1,2，田家俊1,2，吕亚丰1,2，黄晓飞1,21.三峡大学医学院生物化学与分子生物学系，湖北 宜昌 443002；2.三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室，湖北 宜昌 443002［摘要］ 背景与目的：组蛋白去乙酰化酶5（histone deacetylase 5，HDAC5）在乳腺癌组织中异常高表达，其与赖氨酸特异性去甲基化酶1（lysine specific demethylase ，LSD1）协同促进乳腺癌细胞增殖和迁移。
通过萝卜硫素（sulforaphane ，SFN ）下调HDAC5表达，观察其对小鼠乳腺癌4T1细胞上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition ，EMT ）、增殖和迁移的影响。
方法：采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）法分析SFN 对4T1细胞增殖的影响。
采用乳酸脱氢酶释放实验检测SFN 的细胞毒性。
采用pcDNA3.1(+)-FLAG-HDAC5质粒转染4T1细胞，通过G418筛选获得单个细胞克隆，再以蛋白质印迹法（Western blot ）鉴定HDAC5蛋白稳定高表达的单克隆细胞系。
采用划痕实验和transwell 法分析过表达HDAC5以及SFN 处理对4T1细胞迁移和侵袭的影响。
采用Western blot 检测SFN 处理对4T1细胞EMT 标志物上皮钙黏着蛋白（E-cadherin ）、神经钙黏着蛋白（N-cadherin ）、波形蛋白（vimentin ）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）表达的影响。
金纳米棒对小鼠乳腺癌细胞光热光动力协同治疗的研究
山东农业大学学报(自然科学版),2021,52(2):247-251VOL.52NO.22021 Journal of Shandong Agricultural University(Ntural Science Edition)doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2021.02.015金纳米棒对小鼠乳腺癌细胞光热/光动力协同治疗的研究胡雅晴,武云云,李兵,李奚*长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春130012摘要:为研究金纳米棒（Au NRs）对小鼠乳腺癌细胞（4T1）光热/光动力协同治疗的影响。
首先，通过调节硝酸银溶液（AgNO3）的加入量，制备6种不同长径比、不同表面电荷的Au NRs1~6。
然后，通过光热升温实验和细胞内/外ROS生成实验对Au NRs的光热和光动力性质评估，并对光诱导细胞损伤分子机制探究。
结果表明，在NIR激光的照射下，Au NRs具有相似的温度升高水平，并显示出良好的光热性能。
关于光动力学性质，细胞毒性评估表明，Au NRs在不同表面电荷的影响下对4T1细胞具有不同的杀伤效果。
表面电荷的强度使Au NRs具有不同程度的细胞内在化和ROS生成能力，从而引起细胞损伤。
因此，Au NRs对癌细胞具有光热/光动力协同治疗的作用，在癌细胞的光治疗方面，显示出巨大的潜力。
关键词:金纳米棒;乳腺癌;协同治疗中图法分类号:Q599文献标识码:A文章编号:1000-2324(2021)02-0247-05Study on the Photothermal/Photodynamic Synergistic Therapy for Breast Cancer Cells from Mice by Gold NanorodsHU Ya-qing,WU Yun-yun,LI Bing,LI Xi*School of Chemistry and Life Science/Changchun University of Technology,Changchun130012,ChinaAbstract:To study the effect of gold nanorods(Au NRs)on the photothermal/photodynamic synergistic treatment of mouse breast cancer(4T1)cells.First,six Au NRs with different aspect ratios and surface charges were prepared by adjusting the amount of silver nitrate solution(AgNO3).Secondly,the photothermal and photodynamic properties of Au NRs were evaluated through the photothermal heating experiment and the intracellular/extracellular ROS generation experiment,and the molecular mechanism of light-induced cell damage was explored.The results show that under the irradiation of NIR laser, Au NRs have a similar temperature rise level and show good photothermal performance.Regarding the photodynamic properties,the cytotoxicity evaluations show that Au NRs have different killing effects on4T1cells under the influence of different surface charges.The strength of the surface charge makes Au NRs have varying degrees of cell internalization and ROS generation capabilities,which can cause cells prehensive analysis shows that Au NRs has a photothermal/photodynamic synergistic therapy effect on cancer cells,and shows great potential in the phototherapy of cancer cells.Keywords:Gold nanorods;breast cancer;synergistic therapy癌症已成为世界面临的最严重的公共卫生问题之一。
4t1细胞
4T1细胞的生物学功能及其机制
4T1细胞的生物学功能包括抗肿瘤和免疫调节
• 抗肿瘤：4T1细胞能够识别和清除肿 瘤细胞，抑制肿瘤的发生和发展 • 免疫调节：4T1细胞能够产生免疫分 子，调节免疫应答，维持免疫稳态
4T1细胞的生物学功能机制包括细胞因 子产生和细胞间相互作用
• 细胞因子产生：4T1细胞能够产生细 胞因子，如干扰素-γ、白介素-2等，发 挥免疫调节作用 • 细胞间相互作用：4T1细胞与其他免 疫细胞相互作用，如与CD8+ T细胞协 同作用，清除肿瘤细胞
4T1细胞研究对医学 发展的意义
• 4T1细胞研究对医学发展的意义包括理论基础和临床应用 • 理论基础：研究4T1细胞有助于揭示免疫系统与疾病之间的关 系，丰富医学理论 • 临床应用：研究4T1细胞为疾病治疗提供新的思路和策略，推 动医学发展
• 通过4T1细胞研究，有望为疾病治疗和医学发展带来新的突破与 创新
04
T1细胞与疾病关系的研究
4T1细胞与肿瘤发生发展的关系
研究4T1细胞与肿瘤发生发展的关系有助于揭示肿瘤免疫逃逸机制
• 通过研究4T1细胞与肿瘤细胞之间的相互作用，有助于揭示肿瘤免疫逃逸的机制 • 为肿瘤免疫治疗提供新的思路和策略
4T1细胞与肿瘤发生发展的关系包括促进和抑制
• 促进：4T1细胞具有侵袭性和转移性，能促进肿瘤的发生和发展 • 抑制：4T1细胞具有免疫调节功能，能抑制肿瘤的生长和扩散
4T1细胞研究面临的 挑战与问题
• 4T1细胞研究面临的挑战与问题包括实验技术和临床应用 • 实验技术：研究4T1细胞需要先进的实验技术，如基因编辑、 细胞培养等 • 临床应用：4T1细胞治疗需要克服安全性、有效性等问题，实 现临床转化
• 通过克服4T1细胞研究面临的挑战与问题，有望为医学发展作出 贡献
抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌影响的研究
抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌影响的研究侯超;胡志希;曾柏荣;李琳;陈龙娇【摘要】目的观察抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌的影响.方法建立4T1乳腺癌小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组、环磷酰胺组和抗癌防移片组,分别给予药物或生理盐水,动态观察给药期间小鼠生活状况.给药4周后处死小鼠,测定小鼠体质量增加百分数,测量剥离瘤体积,计算瘤体积抑制率以及计数肺转移瘤灶个数.结果与模型组比较,抗癌防移片组小鼠肿瘤生长缓慢,肺转移瘤灶数量明显减少(P＜0.05);与环磷酰胺组比较,抗癌防移片组药物毒副作用小(P＜0.05),生活质量高,但其抑瘤防转移作用不及环磷酰胺(P＜0.05).结论抗癌防移片能抑制4T1小鼠乳腺癌生长与转移,改善小鼠生存质量.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2014(034)004【总页数】4页(P6-9)【关键词】抗癌防移片;4T1小鼠乳腺癌;肿瘤体积;瘤体积抑制率;肺转移瘤灶数【作者】侯超;胡志希;曾柏荣;李琳;陈龙娇【作者单位】湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学第一附属医院,湖南长沙410007;湖南中医药大学,湖南长沙410208;广州中医药大学,广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R737.9乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，复发与转移是导致女性患者死亡的主要原因。
研究证实，25%以上的乳腺癌一开始即发生血行远处转移，而通过淋巴道转移途径的机会则更多[1]。
目前临床上防治乳腺癌复发与转移，主要采用化疗与内分泌治疗，但由于药物的毒副反应和耐药性，严重影响了治疗的效果。
而抗肿瘤中药由于作用的多靶向性、毒副作用低且价廉，越来越受到患者的欢迎。
抗癌防移片系曾柏荣教授有效验方，以扶正祛邪为基本治则，调补肝脾、行气活血、祛痰化湿为治疗大法，用于临床防治乳腺癌术后复发与转移，收效明显[2]。
为了证实该复方制剂的疗效并为其临床应用提供实验依据，我们观察了抗癌防移片对BALB/c小鼠4T1乳腺癌移植瘤模型的抑瘤防移效果及其毒副作用，现将方法与结果报道如下。
鞘内注射天麻素对小鼠皮肤癌痛的影响解析
痛行为学观察于接种肿瘤细胞后观察左后趾 外观变化。于小鼠接种前、鞘内注射前３０ ｍｉｎ、鞘内 注射后１５、３０、６０、９０、１２０和１５０ ｒａｉｎ时测定热缩足
万方数据
５９０
组别
接种前
鞘内注射前————
主堡盎竖堂盘查！！！！堡！旦箜！！鲞笠！塑
表１四组小鼠各时点ＴｗＬ的比较（Ｓ，ｎ＝８，ｉ±ｓ）
１５ ３０ ６０ ｌｏｓｓ
Ｆｕｎｄ ｇｓｕ
ＧＡＳＴＲＯＤＩＮ；Ｓｋｉｎ
ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；Ｐａｉｎ；Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ，ｓｐｉｎａｌ Ｐｒｏｊｅｃｔ
ｏｆ Ｓｏｃｉａｌ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ
ｐｒｏｇｒａｍ：Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｕｐｐｏｒｔ
Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ Ｃｉｔｙ，Ｊｉａｎ—
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ（ＳＨ２０１４０７８）
Ｍｅｔｈｏｄｓ
４
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ ｇａｓｔｒｏｄｉｎ
ｏｎ
ｓｋｉｎ
ｃａｎｃｅｒ
ｐａｉｎ ｉｎ
ｍｉｃｅ．
Ｔｈｉｒｔｙ．ｔｗｏ ｆｅｍａｌｅ Ｂａｌｂ／ｃ ｍｉｃｅ，ａｇｅｄ ８ ｗｅｅｋｓ，ｗｅｉｇｈｉｎｇ
ａ
２０—２５ ｇ，ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ
ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔ ａｆｔｅｒ ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ
ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ
ｔｈｅ
ｅｘ。
ｏｆ
ＡＳＩＣ．３ ｍＲＮＡ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｄｏｒｓａｌ ｈｏｒｎ
ｗａｓ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｏｗｎ・ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｇｒｏｕｐ
Ｇ（Ｐ＜Ｏ．０５），
4t1细胞
4t1细胞
4T1（4T1.2）细胞是一种一直被广泛研究的小鼠乳腺癌细胞株。
这种细胞株最
初来自Balb/c小鼠的乳腺实体瘤。
它具有高度的异质性不仅在细胞形态学上，在
生长速率、转移特性和抗药性等方面也表现出明显的异质性。
这使得4T1细胞成
为研究乳腺癌的良好模型。
1. 细胞特性
4T1细胞具有多种特性，包括但不限于： - 高度异质性 - 能够在小鼠体内形成
高度侵袭性的实体瘤 - 显示高转移性，可在体内形成肺转移 - 耐受药物治疗 - 能够
在体内复制多个人乳腺癌的特点，例如HER2过表达和雌激素受体阴性等
2. 应用领域
4T1细胞在乳腺癌研究领域有着广泛的应用。
研究人员通常利用这种模型来研
究乳腺癌的生长、转移机制，以及筛选抗癌药物等。
由于其高度转移性的特点，
4T1细胞也被广泛用于研究抗转移治疗方法。
此外，4T1细胞还被用于评估潜在
的免疫治疗策略，例如免疫检查点抑制剂的疗效评估。
3. 研究现状
目前，许多研究团队正在利用4T1细胞模型开展多项研究。
他们希望通过深入了解4T1细胞的特性和行为，探索乳腺癌生长和转移的机制，以及寻找更有效的
治疗方法。
一些最新的研究还试图通过基因编辑技术修改4T1细胞，以便更好地
模拟人类乳腺癌的特点，并推动相关治疗方法的发展。
4. 结语
总的来说，4T1细胞是一个重要的乳腺癌研究模型，具有高度转移性和异质性。
通过对这种细胞的研究，科学家们可以更好地理解乳腺癌的发展机制，并寻找更有效的治疗方法，为乳腺癌患者带来希望。
不同接种量荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞4T1在小鼠体内生长及肺转移的比较
［ 金 项 目 ］ 生 部 项 目 ， 验 动 物 和人 类 疾 病 动 物 模 型 资 源 扩 展 （ ０ ８２ ３ ） 十 一 五 新 药 专 项 支持 （ ０８ Ｘ ９０ ￣０ ） 基 卫 实 ２ ００ ０ ６ 和 ２０ Ｚ ０ ３５ １ 。 ［ 者 简 介 ］ 小 颖 （ ９ １一） 女 ， 习研 究 员 。Ｅ—ｍａ ： ａｙ“ｈ ｂｉ １ ３ ｃｍ 作 李 １８ ， 实 ｉ １ ０ｉｇｅｅ＠ ６ ．ｏ ｌ 【 信 作 者 ］ 连 峰 。 Ｅ—ｍ ｉ ｈ ｎｌ ｎｌ ．ｒ 通 张 ａｌ ａ ｇ ＠ｃ ｉｓｏｇ ：ｚ ｆ ａ
２１ ０ ２年 ２月
中 国实 验 动 物 学 报
ＡＣ Ａ Ｔ ＬＡＢ ＯＲＡＴ ＯＲＩ ＵＭ ＡＮＩ ＭＡＬ Ｓ Ｓ ＥＮＴ Ａ Ｓ ＮＩ Ａ Ｉ ＣＩ Ｉ Ｉ Ｃ
Ｆ ｂｕ ｒ ２ ２ ｅ ｒ ａ ｙ， ０１ Ｖ０ ＿ Ｏ Ｎ０ １ ｌ２ ．
第２ ０卷
第 １期
也
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4T1 小鼠乳腺癌细胞
Cat Number：KG338 For Research Use Only
一、组成:
二、客户自备试剂:
1、PBS (凯基货号：KGB5001)
2、Complete growth medium (凯基货号：KGM 12800-500)
3、0.25% （W/V） Trypsin-0.53mM EDTA (凯基货号：KGY0012)
三、细胞简介:
四、常见问题及解决方案:
1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。
2、细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。
次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞
活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
客户收到细胞后请务必仔细阅读细胞注意事项，确保细胞的培养条件一致，如果由于培养条件不一致导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
由于运输的情况，所以极个别细胞会出现不稳定，客户收到细胞后务必第一时间和我们联系，告知细胞具体情况，以便我们技术人员能及时有效的和老师沟通，不胜感谢！。