单克隆抗体技术应用初探
单克隆抗体在医学中的应用
单克隆抗体在医学中的应用单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值，是亲和层析中重要的配体，是免疫组化中主要的抗体，是免疫检验中的新型试剂，是生物治疗的导向武器。
作为医学检验试剂，单克隆抗体可以充分发挥其优势。
单克隆抗体的特异性强，可将抗原抗体反应的特异性大大提高，减少了可能的交叉反应，使试验结果可信度更大。
单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量控制，利于标准化和规范化。
目前已有许多检验试剂盒用单抗制成，其主要用途如下：1．诊断各类病原体这是单克隆抗体应用最多的领域，已有大量的商品诊断试剂供选择。
如用于诊断乙肝病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒和各种微生物感染的试剂等。
单克隆抗体具有灵敏度高、特异性好的特点。
尤其在鉴别菌种型及亚型、病毒的变异株以及寄生虫不同生活周期的抗原性等方面更具独特优势。
2．肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的检测用于肿瘤的诊断、分型及定位。
尽管目前尚未制备出肿瘤特异性抗原的单克隆抗体，但对肿瘤相关抗原（例如甲胎蛋白和癌胚抗原）的单克隆抗体早已用于临床检验。
近年来，有人利用单克隆抗体进行肿瘤分型，对制定治疗方案和判断预后也有帮助。
用抗肿瘤单抗检查病理标本，可协助确定转移肿瘤的原发部位。
以放射性核素标记单克隆抗体主要用于体内诊断，结合X线断层扫描技术，可对肿瘤的大小及其转移灶作出定位诊断。
3．检测淋巴细胞的表面标志用于区分细胞亚群和细胞分化阶段。
例如检测CD系列标志，有助于了解细胞的分化和T细胞亚群的数量和质量变化，对多种疾病诊断具有参考意义。
对细胞表面抗原的检查在白血病患者的疾病分期、治疗效果、预后判断等方面也有指导作用。
组织相容性抗原是移植免疫学的重要内容，而应用单克隆抗体对HLA进行位点检查与配型可得到更可信的结果。
4．机体微量成分的测定应用单克隆抗体和免疫学技术，可对机体的多种微量成分进行测定，如诸多酶类、激素、维生素、药物等；对受检者健康状态判断、疾病检出、指导诊断和治疗均具有实际意义。
单克隆抗体制备及应用研究
单克隆抗体制备及应用研究随着科学技术的不断进步，单克隆抗体已经成为生物医学领域中广泛应用的一种重要工具。
单克隆抗体是指由一种单一的B细胞克隆所产生的抗体分子，其在结构、特异性和亲和力方面均具有高度一致性。
这种高度的一致性使得单克隆抗体在诊断和治疗等方面具有极大的潜力。
一、单克隆抗体制备的方法单克隆抗体的制备可以分为体外和体内两种方法。
体外制备是指在外体条件下使用克隆技术对B细胞进行限制性扩增和鉴定，然后从中筛选出单克隆抗体，再进行体外扩增和纯化。
体内制备是指将基因重组到特定的动物模型中，通过抗原刺激和筛选，得到单克隆抗体。
对于体外制备方法，最常用的技术是杂交瘤技术。
这种技术是将与目标抗原免疫的B细胞与骨髓瘤细胞进行杂交，得到一个能够不断分裂并产生单克隆抗体的细胞系。
通过克隆技术，筛选得到特异性高、亲和力强的克隆细胞，进而获得单克隆抗体。
另外，还有一种名为脾细胞融合技术的方法。
该方法是将由脾细胞产生的抗体与骨髓瘤细胞进行融合，得到能够不断生长并产生单克隆抗体的细胞系。
该方法的优点是获得的单克隆抗体特异性较高，且更适用于一些难以用杂交瘤技术得到的抗原。
二、单克隆抗体在医学领域中的应用单克隆抗体在医学领域中具有广泛的应用。
它们可以用于疾病的诊断和治疗，以及药物的研发等方面。
在疾病的诊断方面，单克隆抗体可以用来检测各种疾病的生物标志物，如肿瘤标志物、病毒标志物等。
例如，临床上常用的肝癌标志物甲胎蛋白，是由单克隆抗体检测技术得到的。
此外，单克隆抗体还可以应用于传染病的诊断，如乙型病毒性肝炎、艾滋病等。
在治疗方面，单克隆抗体的应用也非常广泛。
它们可以用于癌症和自身免疫性疾病的治疗，如靶向肿瘤细胞表面抗原的单克隆抗体药物，可以增强免疫系统对肿瘤的攻击力。
另外，单克隆抗体还可以被用来防止器官移植排异和某些病毒感染，如丙肝等。
在药物研发方面，单克隆抗体也具有重要作用。
它们可以用来筛选和开发新的药物，如癌症免疫治疗领域的PD-1免疫检查点抑制剂，就是最近几年广泛应用的一种新型药物。
单克隆抗体药物在治疗肿瘤方面的应用
单克隆抗体药物在治疗肿瘤方面的应用一、引言随着癌症的不断增多，治疗肿瘤的方法也在不断发展。
单克隆抗体药物是治疗肿瘤的一种新兴疗法，其已经在临床实践中证明具有显著的疗效和良好的安全性。
二、单克隆抗体的概念单克隆抗体是指由同一克隆细胞株所分泌的抗体，其所有结构都是相同的。
单克隆抗体可以针对特异性抗原进行选择性结合，从而发挥其治疗作用。
三、单克隆抗体药物的治疗作用单克隆抗体药物的治疗作用是通过选择性结合靶分子，从而发挥其特定的治疗效果。
例如，单克隆抗体药物可以选择性地结合癌细胞表面的肿瘤相关抗原（TAAs），从而杀死癌细胞。
单克隆抗体药物还可以选择性地结合免疫细胞上的受体，从而增强免疫细胞的杀伤作用。
四、单克隆抗体药物在治疗肿瘤方面的应用1.催化剂单克隆抗体药物在催化器方面的应用有很大的潜力。
例如，它们可以通过选择性地结合底物和催化剂，从而增强催化反应的速率和效率。
2.免疫治疗单克隆抗体药物在免疫治疗方面也有很大的应用潜力。
例如，单克隆抗体药物可以选择性地结合癌细胞表面的TAAs，从而增强免疫细胞的杀伤作用。
此外，单克隆抗体药物还可以选择性地结合免疫细胞上的受体，从而增强免疫细胞的活性。
3.药物传递单克隆抗体药物在药物传递方面也有很大的应用潜力。
例如，单克隆抗体药物可以选择性地结合癌细胞表面的TAAs，在经过选择性的传递通道进入细胞内部后将药物释放出来，从而实现靶向治疗。
4.药物检测单克隆抗体药物在药物检测方面也有很大的应用潜力。
例如，单克隆抗体药物可以选择性地结合病变部位的细胞，从而实现对疾病的精准检测。
五、结论单克隆抗体药物是治疗肿瘤的一种新兴疗法，其已经在临床实践中证明具有显著的疗效和良好的安全性。
未来，单克隆抗体药物还将在其他领域得到广泛的应用，为人类带来更多福音。
单克隆抗体应用及原理
单克隆抗体应用及原理随着生物技术的发展，单克隆抗体的制备和应用越来越广泛，成为生物医学研究和临床诊断、治疗的重要工具。
本文将从单克隆抗体的定义、制备原理、应用领域等方面进行介绍。
一、单克隆抗体的定义单克隆抗体是指由同一种细胞克隆所分泌的抗体分子，其特异性抗原决定区域（CDR）的氨基酸序列完全相同。
相比于多克隆抗体，单克隆抗体具有更高的特异性和亲和力，能够更准确地识别和结合目标分子，因此在生物医学研究和临床应用中具有更广泛的应用前景。
二、单克隆抗体的制备原理单克隆抗体的制备一般分为三个步骤：抗原免疫、细胞融合、筛选和鉴定。
1. 抗原免疫首先需要准备目标抗原，将其注射到小鼠等动物体内，激发其免疫系统产生特异性抗体。
通常情况下，需要多次免疫，以提高抗体的免疫力和数量。
2. 细胞融合将小鼠脾细胞与癌细胞融合，形成杂交瘤细胞。
这些细胞具有小鼠脾细胞的抗体产生能力和癌细胞的无限增殖能力。
3. 筛选和鉴定通过ELISA、流式细胞术等方法筛选出产生目标抗原特异性的杂交瘤细胞。
然后通过单细胞克隆技术，将细胞分离成单个细胞，使其分别形成单克隆细胞系。
最后，通过鉴定和筛选，确定具有最高亲和力和特异性的单克隆抗体。
三、单克隆抗体的应用领域1. 生物医学研究单克隆抗体广泛应用于生物医学研究中，如分子生物学、细胞生物学、免疫学等领域。
例如，可以利用单克隆抗体对蛋白质进行检测、分离、纯化和定量分析，或者对细胞表面分子进行鉴定和分析。
2. 临床诊断单克隆抗体在临床诊断中也有重要应用。
例如，通过单克隆抗体可以快速、准确地检测某些疾病的标志物，如癌症、心血管疾病等。
同时，单克隆抗体还可以用于临床药物检测，如药物浓度监测、药物代谢鉴定等。
3. 生物制药单克隆抗体也是生物制药领域的重要组成部分。
例如，单克隆抗体可以用于制备抗体药物，如单抗药物，用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病等。
此外，单克隆抗体还可以用于制备诊断试剂盒、生物芯片等生物制品。
单克隆抗体药物的研究进展及临床应用_综述_
单克隆抗体药物的研究进展及临床应用_综述_ 单克隆抗体药物的研究进展及临床应用综述1：引言1.1 背景1.2 目的2：单克隆抗体的概述2.1 抗体的基本结构和功能2.2 单克隆抗体的定义和特点3：单克隆抗体的研究进展3.1 单克隆抗体的制备方法3.1.1 高亲和力的单克隆抗体制备方法3.1.2 人源化单克隆抗体制备方法3.2 单克隆抗体的改良和优化3.2.1 重组单克隆抗体的改良3.2.2 人源化单克隆抗体的改良3.3 单克隆抗体的选择和验证3.3.1 亲和力筛选3.3.2 特异性验证3.4 单克隆抗体的结构与功能研究3.4.1 结构分析3.4.2 功能研究3.5 单克隆抗体的药物开发3.5.1 注射剂制备3.5.2 经口给药剂型的制备3.5.3 缓控释剂型的制备3.5.4 接合物制备4：单克隆抗体的临床应用4.1 抗癌药物4.1.1 HER2阳性乳腺癌的治疗4.1.2 EGFR阳性非小细胞肺癌的治疗 4.1.3 CD20阳性淋巴瘤的治疗4.2 自身免疫性疾病治疗4.2.1 类风湿关节炎的治疗4.2.2 炎症性肠病的治疗4.3 其他临床应用5：结论5.1 单克隆抗体药物的研究进展5.2 单克隆抗体药物的临床应用前景附件：[附件名称]（可以相关研究文献、数据、图片等）法律名词及注释：1、专利法：指规定了对发明创造的保护范围的法律法规。
2、药品注册法：指规定药品注册和监督管理的法律法规。
3、临床试验管理规定：指规定了临床试验的监督与管理要求的法律法规。
4、知识产权保护条例：指规定了对知识产权进行保护的法律法规。
单克隆抗体的制备及应用实验原理
单克隆抗体的制备及应用实验原理1. 简介单克隆抗体是指由单一B细胞克隆扩增得到的抗体，在医学研究和生物制药等领域具有重要的应用价值。
本文将介绍单克隆抗体的制备方法及其在实验中的应用原理。
2. 单克隆抗体的制备方法单克隆抗体的制备需要经历以下几个步骤：2.1 免疫原的选择免疫原的选择是单克隆抗体制备的第一步。
通常选择与所需抗体结构最为相似的蛋白质作为免疫原，可以是纯化的蛋白质、重组蛋白、细胞表面抗原等。
2.2 免疫动物的免疫选择适当的免疫动物，常见的包括小鼠、大鼠、兔子等。
将免疫原与免疫佐剂混合注射到动物体内，触发免疫反应，使得免疫动物产生特异性抗体。
2.3 细胞融合将免疫动物的脾细胞和癌细胞进行融合，常用的癌细胞包括骨髓瘤细胞、淋巴瘤细胞等。
通过融合方法，使得脾细胞和癌细胞融合成为杂交瘤细胞。
2.4 杂交瘤细胞的筛选与培养对融合后的杂交瘤细胞进行筛选，常用的方法包括喷洒法、限稀稀释法等。
筛选出具有单克隆性的杂交瘤细胞后，进行培养、扩增。
2.5 单克隆抗体的纯化将培养得到的杂交瘤细胞进行离心、洗涤等操作，得到含有目标抗体的上清液。
通过柱层析、电泳等方法，对上清液进行纯化，最终得到单克隆抗体。
3. 单克隆抗体的应用实验原理单克隆抗体在实验室中有多种应用，包括免疫组化、免疫印迹、流式细胞术等。
以下将介绍单克隆抗体在这些实验中的应用原理：3.1 免疫组化免疫组化是一种检测组织或细胞中特定抗原表达情况的方法。
通过与组织或细胞中特定分子结合，单克隆抗体可以为我们提供目标抗原的定位和分布情况。
3.2 免疫印迹免疫印迹是一种检测特定蛋白质表达情况的方法。
通过将蛋白质转移到膜上，并与特异单克隆抗体结合，可以用于检测目标蛋白质的存在与定量。
3.3 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析和鉴定细胞表面标记物的方法。
通过与特定抗原结合，单克隆抗体可以进行标记，并通过流式细胞仪进行检测和分析。
3.4 免疫沉淀免疫沉淀是一种用于富集目标蛋白质的方法。
单克隆抗体的应用
单克隆抗体的应用陈丽珊1975年Kohler和Milstein首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株，获得了抗SRBC的单克隆抗体。
这是免疫学乃至医学史上的一个里程碑。
单克隆抗体的特点是：理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制，并且来源容易。
这些优点使它一问世就受到高度重视，并广泛应用于生物学和医学研究领域。
1 作为亲合层析的配体单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而能够从复杂系统中识别出单个成分。
只要得到针对某一成分的单克隆抗体，利用它作为配体，固定在层析柱上，通过亲合层析，即可从复杂的混和物中分离、纯化这一特定成分。
如用抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)亲合层析柱，就可从孕妇尿中提取到纯的hCG。
与其它提取方法(沉淀法、高效疏水色谱法等)相比，具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。
2 作为生物治疗的导向武器脂质体是由既亲水又亲油的两亲磷脂组成的连续双分子层微囊，内含水相空间，可包裹水溶性物质。
包有细胞毒剂的脂质体膜上偶联抗体，可定向攻击靶细胞，称为免疫脂质体。
这种“导向治疗”，在动物试验与体外试验中已获得满意效果。
如热敏免疫脂质体，由抗人乳癌细胞抗体经疏水长链脂肪酸修饰，抗体带上长的疏水碳链，部分插入脂质体的脂双层膜中，抗体Fab段仍暴露在膜表面，因而保持了抗体活性。
热敏免疫脂质体可特异识别靶细胞(人乳癌细胞)，并通过相变温度引起脂质体破裂，从而定向释放药物。
另外，可将化疗药物、细菌毒素、植物毒素或放射性同位素等细胞毒剂与抗肿瘤抗原的单克隆抗体直接交联，利用其导向作用，使细胞毒剂定位于肿瘤细胞把它直接杀伤。
这不仅提高了抗体的疗效，也可降低细胞毒剂对正常细胞的毒性反应。
如应用抗T细胞单抗和柔红霉素结合物，在体外对非T 淋巴细胞就无杀伤作用。
但是，要把这种方法应用于临床，目前还存在不少技术难关，包括人体对鼠源单抗的排异问题等。
单克隆抗体的应用及原理
单克隆抗体的应用及原理单克隆抗体是指由单一细胞株产生的、只针对特定抗原的抗体。
相对于多克隆抗体，单克隆抗体具有更高的特异性和稳定性，因此在医学、生物学、生物技术等领域有着广泛的应用。
本文将从单克隆抗体的原理、制备方法和应用三个方面进行介绍。
一、单克隆抗体的原理单克隆抗体的制备基于生物学中的免疫原理。
当机体受到外来抗原的侵袭时，免疫系统会产生对抗原的免疫应答，其中的一种反应是产生抗体。
抗体是一种由免疫细胞（主要是B细胞）合成的蛋白质，它可以结合到抗原表面的特定区域（抗原决定簇，Epitope），从而识别和中和抗原。
抗体的结构包括两个重链和两个轻链，每个链都含有一个可变区（variable region，V区）和一个恒定区（constant region，C区）。
V区是抗体分子中最为多样化的部分，它决定了抗体的特异性。
当抗原与B细胞表面的抗体结合后，B细胞会被激活并分化成浆细胞，进而产生大量的抗体分子。
单克隆抗体的制备过程中，需要先制备出特定的抗原。
然后，将该抗原注射到小鼠等动物体内，激活其免疫系统产生抗体。
接着，从动物的脾脏等淋巴组织中分离出B细胞，并将其与肿瘤细胞融合，形成一种称为杂交瘤（hybridoma）的细胞。
杂交瘤细胞既具有B细胞的抗体合成能力，又具有肿瘤细胞的无限增殖能力。
在一系列的筛选和鉴定过程中，可以筛选出只针对特定抗原的单克隆抗体细胞株，进而大规模制备单克隆抗体。
二、单克隆抗体的制备方法单克隆抗体的制备主要包括以下几个步骤：1. 抗原的制备：首先需要准备出特定的抗原，可以是蛋白质、多肽、糖类、药物等。
2. 动物免疫：将抗原注射到小鼠等动物体内，激活其免疫系统产生抗体。
注射的方式有多种，如皮下注射、腹腔注射、静脉注射等。
3. B细胞的分离：从动物的脾脏等淋巴组织中分离出B细胞，可以使用离心、梯度离心等方法。
4. 杂交瘤的制备：将B细胞与肿瘤细胞融合，形成一种称为杂交瘤的细胞。
杂交瘤细胞既具有B细胞的抗体合成能力，又具有肿瘤细胞的无限增殖能力。
单克隆抗体药物的开发与应用研究
单克隆抗体药物的开发与应用研究一、引言单克隆抗体（Monoclonal Antibody, mAb）药物是一种新型的生物制剂，它是由单一的抗体分子构成的一种高度特异性、高亲和力的药物。
自1986年第一个mAb药物上市至今，已有多达70多个mAb药物进入市场，包括治疗癌症、炎症、自身免疫性疾病、心血管病、感染性疾病、神经系统疾病等各种领域。
mAb药物的研究和应用也成为当今国际生物医药领域的热点之一。
二、单克隆抗体药物的研究与开发1.单克隆抗体的制备技术单克隆抗体的制备技术主要包括杂交瘤技术和酶标记技术两种。
其中，杂交瘤技术是最早产生单克隆抗体的方法，它利用骨髓瘤或肿瘤细胞与淋巴样细胞的融合，从而产生长期稳定的细胞系，这些细胞系能够一直产生相同的克隆抗体。
而酶标记技术则是利用单克隆抗体与对应的抗原结合，从而检测抗原的存在。
2.单克隆抗体的特征及应用单克隆抗体具有许多优越的特点，如高度特异性、高亲和力、长时间保持生物活性等，因此其应用也十分广泛。
其中，治疗肿瘤是目前mAb药物最主要的应用领域之一。
目前市面上已上市的抗肿瘤单克隆抗体药物主要包括三大类：IgG1型单克隆抗体、IgG2型单克隆抗体和IgG4型单克隆抗体。
此外，单克隆抗体还可以用于其他许多领域，如自身免疫性疾病、感染性疾病、神经系统疾病等。
三、单克隆抗体药物的优势与不足1.优势单克隆抗体药物的优点主要为：高特异性，选择性很大，药物效果较为稳定；抗体能够识别和结合到细胞膜上表达的抗原，在靶向治疗方面具有很大的优势；据临床使用情况显示，其安全性相对较高，副作用小等。
2.不足单克隆抗体药物的不足主要为：有些疾病领域仍存在不可回避的局限性，如治疗神经系统疾病等；由于其生产成本很高，价格相对昂贵，使其在临床上应用受到一定制约。
四、结论随着生物技术的不断发展，越来越多的mAb药物将会进入市场，并有望成为治疗各种疾病的有效手段。
而在单克隆抗体药物的研究和开发中，需要进一步研究其机制性能、疗效、副作用等方面，以便更好的发掘其疗效。
单克隆抗体的制备与应用
单克隆抗体的制备与应用单克隆抗体是一种高度特异性的生物分子，能够识别并结合特定的抗原，对于现代生命科学研究和临床医学诊治具有重要意义。
一、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备主要包括以下几个步骤：（1）选择合适的免疫原：免疫原应具有较好的生物学活性、易于纯化，并且可以诱导动物产生足够的免疫反应。
常用的免疫原包括蛋白质、多肽、糖类、DNA等。
（2）免疫动物：将免疫原注射到小鼠、大鼠、兔子等动物身上，诱导其产生免疫反应。
此过程需要严格控制免疫剂量及免疫间隔时间，以保证动物身体内产生充分的免疫反应。
（3）筛选克隆：从免疫动物获得脾细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，生成杂交瘤细胞。
将杂交瘤细胞进行分离、克隆和筛选，最终获得单克隆细胞系。
（4）制备单克隆抗体：将单克隆细胞系进行扩增，并通过细胞培养和大规模发酵获得充足的单克隆抗体产物。
二、单克隆抗体的应用（1）免疫诊断：通过单克隆抗体对特定分子的识别和结合能力，可以用于免疫诊断。
例如，通过检测患者体液中特定抗原的单克隆抗体结合情况，可以诊断疾病，并对病情进行判断。
（2）药物研发：单克隆抗体在药物研发中具有广泛的应用前景。
例如，在抗肿瘤药物的开发中，单克隆抗体可以针对肿瘤细胞特异性抗原，实现有选择性地杀伤肿瘤细胞。
（3）免疫治疗：单克隆抗体可以作为一种抗体治疗手段，对病原体或某些癌细胞进行特异性杀伤。
例如，在肿瘤治疗中，单克隆抗体能够选择性地结合癌细胞表面的受体，阻断其信号传递，从而抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
（4）生物学研究：单克隆抗体可以用于生物学研究中的诸多方面。
例如，通过单克隆抗体对特定蛋白的结构和功能进行研究，可以深入了解其生物学特性和作用机制。
三、单克隆抗体的前景与挑战单克隆抗体拥有广泛的应用前景，近年来，其在医学、生命科学研究领域得到了广泛的应用。
然而，单克隆抗体的研发仍面临着一些挑战。
（1）制备难度：单克隆抗体的制备要求高度的技术和设备支持，需要在动物免疫、细胞融合、细胞培养等环节中严格把控。
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－２０２－中国科技信息２００９年第２４期 ＣＨＩＮＡ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＩＮＦＯＲＭＡＴＩＯＮ Ｄｅｃ．２００９健康与生物医药１９７５年英国科学家Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ成功的建立了单克隆抗体技术，因此在１９８４年获得诺贝尔医学和生理学奖。单克隆抗体（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＭｃＡｂ，简称单抗）技术是将产生抗体的单个Ｂ淋巴细胞同肿瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并以此生产抗体的技术。单克隆抗体具有性质纯、效价高、特异性高、少或无血清交叉反应等特点，另外单克隆抗体用永生的杂交瘤细胞株来分泌抗体，不需要不断免疫动物。由于它上述的性质，使它在许多学科领域得到应用，尤其在疾病的诊断与治疗方面，单抗已占生物药品市场的２０％［１］的份额。１．单克隆抗体在疾病诊断中的应用利用单抗进行疾病的诊断目前主要表现在人类疾病和畜禽传染病的诊断方面，尤其在一些感染性疾病和肿瘤的诊断方面。主要通过鉴定病原体或肿瘤抗原来诊断人是否感染疾病［２］。将病原体或肿瘤的抗原分离，免疫实验动物获得免疫细胞，再同骨髓瘤细胞杂交建立相应的杂交瘤细胞株，分泌单克隆抗体，可以同病原体或肿瘤抗原发生特异性的抗原－ 抗体反应，通过免疫荧光试验或ＥＬＩＳＡ试验对疾病进行诊断。比如，气性坏疽病的诊断，气性坏疽病病程发展迅速，后果严重，常为两种以上细菌混合感染，因此病原学诊断往往不能及时作出。邵刚［３］等人研制的抗ａ毒素ＭｃＡｂ ＥＬＩＳＡ试剂，经初步试验证明具有良好的特异性和敏感性，能够直接从组织标本中准确地检出微量的ａ毒素，方法简便、快速， 结果稳定，再经临床上实际标本考验可望为诊断气性坏疽病或判断创伤部位有无产气荚膜杆菌的感染提供一个简便有效的方法。利用单克隆抗体进行诊断畜禽传染病也已经被广泛应用，将病原微生物的抗原分离， 同骨髓瘤细胞杂交建立相应的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体可以同病原微生物发生特异性的抗原－抗体反应。例如，由中国兽药监察所研制成功，并于１９９１年通过国家验收的猪瘟单克隆抗体诊断试剂，
单克隆抗体技术应用初探李慧英 紫琅职业技术学院 ２２６００２摘 要综述了单克隆抗体技术在疾病诊断、治疗和食品卫生等领域的应用。关键词单克隆抗体技术；应用；疾病；食品卫生
不仅能识别猪瘟强毒抗体和猪瘟弱毒（疫苗）抗体，又能排除牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）和绵羊边界病病毒（ＢＤＶ）所产生的非特异性抗体。因此，它既可用于猪瘟免疫监测，又可用于猪瘟的诊断［４］。又如，于维军［５］的研究证实在患有白血病（ＥＢＬ）的牛所有肿瘤细胞和外周血液淋巴细胞（ＰＢＬ）中存在着肿瘤相关抗原（ＴＡＡ），且在一些被牛白血病病毒感染但无临床症状的牛ＰＢＬ中也存在ＴＡＡ，而正常牛组织中不存在ＴＡＡ，因此ＴＡＡ可作为患有ＥＢＬ牛淋巴肉瘤细胞中的一种有益肿瘤标志，通过使用ＴＡＡ的单克隆抗体来检测ＥＢＬ牛的肿瘤细胞和ＰＢＬ中的ＴＡＡ，作出对ＥＢＬ牛的生前诊断。证明，抗ＴＡＡ的单克隆抗体不仅能对ＥＢＬ牛的诊断，而且对筛选具有肿瘤潜在危险的ＢＬＶ感染牛都是一种有用的诊断工具。２．单克隆抗体在疾病治疗中的应用目前利用单抗对疾病进行治疗已取得了很大的成果，主要是将单抗同药物耦联，再与病原体或肿瘤的特异抗原结合后发挥作用［６］。２．１单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用目前，应用单抗隆抗体技术治疗肿瘤主要是通过两大途径。２．１．１ 非结合型单抗隆抗体治疗肿瘤肿瘤抗体（非结合型单抗）与肿瘤抗原结合，直接抑制肿瘤细胞的生长繁殖或杀死肿瘤细胞。单独用单抗的主要优点是它们的毒副作用小、相关产物安全。其抗肿瘤作用主要通过：（１）与相应抗原结合引起ＡＤＣＣ效应，使肿瘤细胞死亡；（２）促发细胞内信号系统的改变，促进细胞凋亡；（３）抑制肿瘤细胞增殖，促进其分化；（４）对病毒、毒素等的中和作用。目前有一定效果的非结合型单抗有包括抗ＣＤ的抗体如ＣＤ２０、Ｄ２２、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、Ｃ－１苷脂ＧＤ３等抗原的单抗［７］。２．１．２ 结合型单克隆抗体治疗肿瘤目前国际上与肿瘤治疗相关的抗体研究主要集中在将抗体与耦联物作用后直接杀伤肿瘤细胞，利用抗体促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成等方面［８］。抗体与耦联物相结合即为结合型单克隆抗体，目前耦联物主要是化学药物、酶、放射性核素、毒素和生物诱导剂等。单抗与抗肿瘤药物通过药物分子上特殊的功能基团如羟基、巯基、氨基等相偶尔，抗肿瘤药物主要通过抑制细胞ＤＮＡ或蛋白质合成、干扰破坏细胞核酸或蛋白质功能、抑制细胞有丝分裂等方式来杀伤肿瘤细胞， 而单抗的特异性客观上造成了这些药物对增殖旺盛细胞的“选择性杀伤”，极大地限制了这类药物的进一步应用和发展，从而达到增效减毒的作用。而抗体与酶的结合物利用抗体与肿瘤细胞表面抗原的特异性结合，将前体药物的专一性活化酶与单抗耦联，导向输入到靶细胞部分，再注入前体药物，使其在酶的作用下转化为活性药物，进而杀伤肿瘤细胞。目前研究较多的肿瘤放射免疫治疗是将单抗与放射性核素耦联而成，将放射性核素导向肿瘤组织，通过内照射杀伤肿瘤细胞，然而这种放射性的治疗主要用于实体瘤或全身多部位转移的肿瘤。目前结合型单抗的研究国内外正处于发展与完善阶段，抗肿瘤结合型单抗也时有报道，发展前景较好。２．２单克隆抗体在治疗阿尔茨海默病中的应用阿尔茨海默病（ＡＤ）［９］是一种严重危害人类健康的退行性脑病， 亦称早老性痴呆。可引起脑功能逐渐衰退， 其典型的症状为记忆力、抽象思维、定向力等障碍及人格改变， 同时伴有智力衰退， 社会活动能力减退。这主要是由于控制记忆力、语言和其他较高级功能的脑中枢部位的神经细胞大量死亡所致。其典型的病理标志为患者脑内出现大量的老年斑（ＳＰ）。β－淀粉样多肽（Ａβ）是老年斑的核心成分，能形成淀粉样沉着，在ＡＤ的发生、发展过程中起了关键性作用。Ａβ的聚集物对神经细胞有着明显的直接或间接毒性作用， 导致神经突触的减少和神经元的坏死［１０］。赵正卿［１１］的研究表明， 运用单克隆抗体技术通过主动或被动免疫在体内产生一系列单克隆抗体， 从而与体内致病抗原结合， 有效清除脑内沉积的Ａβ， 阻断Ａβ的神经毒作用，达到治疗的目的，值得近一步进入临床研究。３． 单克隆抗体技术在食品卫生中的
应用目前，单克隆抗体技术在食品生产加工以及科学研究中得到广泛的应用，食品基质中的细胞、大分子聚合物的小分子半抗原物质均能通过单克隆技术研究或检出。３．１用单克隆抗体技术快速检测食品中的农兽药随着生活水平的提高和对农兽药滥用造成危害的认识加深，人们对食品安全越来越重视，农兽药残留分析变得更加紧迫和重要。而应用免疫分析技术检测农兽药残留具有灵敏度高、特异性强、操作简便－２０３－
快速、测试费用低等优点，近年来得到迅速发展。农兽药属于小分子（Ｍ＜１０００）物质，是一种半抗原，无免疫原性，不能刺激动物产生抗体［１２］。农兽药免疫分析的关键就是要制备高特异性的抗体，以提高检测的特异性和灵敏性。必须先将其通过一定长度的碳链连接分子与大分子量载体（一般为蛋白质）以共价键相偶尔制备成人工抗原后，以人工抗原免疫动物，使动物的免疫系统发生应答反应，从而制备出对该农药具特异性的多或单克隆抗体。得到抗农药的ＭｃＡｂ以后，即可在一定的体系（一般为水相或水与有机溶剂的混剂）内，以竞争反应的形式并用农药标准物质来制备标准曲线，之后根据制备好的标准曲线即可对农药残留进行定量。也可以制备成试剂盒，方便检测，这方面国内外研究得比较多。３．２单克隆抗体技术在乳品工业中的应用单克隆抗体在乳品工业中主要用于牛奶成分分析，尤其对非正常风味牛奶的微生物与酶的鉴定；牛奶中的病原微生物和毒素的检测；加工工艺对牛奶蛋白结构的影响以及牛奶中掺物的识别。比如，杨敦启［１３］在其关于“奶粉惨杂物检测技术研究进展”的研究中就主要讲到单克隆抗体技术在检测奶粉惨杂中的应用。３．３单克隆抗体技术在酿酒工业中的应用单克隆抗体可用于检出酿酒过程中的各种污染物，用于对酿酒过程的检测。免疫学检测的步骤简单， 易于自动化， 其最大缺点是单克隆抗体的制备成本高，不过单克隆抗体的制备正成为研究的热点。另外，浑浊敏感蛋白是引起啤酒稳定性下降的主要因素之一，可以引起啤酒浑浊， 主要由蛋白质与多酚发生聚合反应而产生，它在整个啤酒酿造过程中保持着抗原性，能被抗体认别。利用ＥＬＩＳＡ 技术检测啤酒生产中的浑浊敏感蛋白，以便控制工艺条件，提高啤酒的品质。贾娟［１４］等人在酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）技术基础上，利用单克隆抗体技术鉴定区分泡沫活性蛋白和浑浊敏感蛋白，研究取得较好的效果。３．４单克隆抗体应用于食品中卫微生物的检测ＥＬＩＳＡ 法可检测食品中的沙门氏菌、军团菌、大肠杆菌等病原微生物， 其中沙门氏菌是最常见的致病菌。用ＥＬＩＳＡ 试剂盒较传统检测法更能方便、快速地检测沙门氏菌。另外，食品在储藏过程中会受到霉菌等微生物的污染，其不仅导致感官品质和营养价值的降低，更重要的是某些霉菌能产生毒素。从青霉、毛霉等霉菌中提取耐热性抗原制成抗体，用ＥＬＩＳＡ方法可检出加热和未加热的食品中的霉菌。在不远的将来，免疫学技术将会被广泛应用于食品科学研究、食品生产控制和食品安全、质量管理中。４．结论综上所述，单克隆抗体技术基于其简便、快速、特异性强、灵敏度高等特点，广泛地应用于疾病的诊断治疗和食品卫生等领域，具有广阔的应用前景。
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