实验四 沙门氏菌属(Salmonella)的检验
salmonella 血清学鉴定
H抗原 第1相 a b g, m g, s, t i z 第2相 1,2 1,w [1,2] 1,2 1,7
[ ]内的O抗原可能存在或不存在。 [ ]内的H抗原可能是罕见的，正常情况下一般不存在。
沙门氏菌菌型的表示方法
血清型以数字和字母表示.
例如:查考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表. 鼠伤寒沙门氏菌: O抗（1，4，[5]，12）， 第Ⅰ相H抗原（i） 第Ⅱ相H抗原(1,2)。 它的血清型应表示为:鼠伤寒沙门氏菌（ 1，4，[5]，12：i：1，2）
位相变异试验的方法
U形管法 小玻管法 小套管法 软琼脂斜面法
59种沙门氏菌的血清列表
O1 O2 O4 O5 O7 O8 O9 O10 O11 O14 Hb Hp Hc Hr
O15 O19 O20 O27 O34 O46 O3,19 Ha Hd Hs Hf Ht Hg Hu Hh Hv Hi Hk Hm Hn Hy H6
考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表
菌名
基桑加尼沙门氏菌 维也纳沙门氏菌 埃森沙门氏菌 金斯敦沙门氏菌 鼠伤寒沙门氏菌 印地安纳沙门氏菌
原名
S. kisangani S. wien S. essen S. kingston S. typhimurium S. indiana
O抗原
1,4,[5],12 1,4.12,27 4,12 1,4,[5],12,27 1,4,[5],12 1,4,12
位相变异的解释
将一个双相沙门氏菌的菌株在琼脂平板上划线分离，所得的 菌落中，有的有第1相H抗原，有的则有第2相H抗原。若任 意挑取一个菌落在培养基上多次传代，其后代又可出现部分 是第1相而另一部分是第2相的菌落。这种两个相的H抗原可 以交相产生的现象称为位相变异。 双相菌初次分离时，单个菌落的纯培养往往只有一个相H抗 原，鉴别时常只能检出一个相，而测不出另一相。此时，可 用已知相血清诱导的位相变异试验来获得未知的另一个相H 抗原。
食品中沙门氏菌检验
在酸性条件下菌落中心产生H2S(SS培养基）
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9
• 生化反应
–乳糖（-），葡萄糖（+）/+，多数H2S+，动 力+，尿素（-）
• 抗原结构
–O抗原——特异性低、稳定、分群（组）
–H抗原——特异性高，不稳定，分型
–Vi抗原（毒力抗原）——不稳定，可阻止 “O”凝集
• 抵抗力 不强
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对人类有致病性 ▪ 肠热症——伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、
肖氏沙门菌、希氏沙门菌 ▪ 食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、
肠炎沙门菌 ▪ 败血症——猪霍乱沙门菌最常见
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2
生物学性状
形态染色
符合肠杆菌特点，革兰氏染色阴性短杆菌，无荚 膜，无芽胞，多数有鞭毛(周生毛菌)，有动力 （也有无动力的变种）。
增菌（血、骨髓）→EMB、SS→生化反应→血清 鉴定
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15
血清学诊断——肥达反应（Widal）
• 原理 用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H 抗原，以及
引起副伤寒的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝 集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效 价。（TO、TH、PA、PB）
• 方法：试管凝集法（定量） TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才 有意义
食品中肠道致病杆菌的检验
第一节 沙门氏菌检验
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1
沙门氏菌（Salmonella）是肠杆菌科中最复杂的 菌属,1880年Eberth首先发现伤寒沙门氏菌，1885 年Salmon与Smith又分离出猪霍乱沙门氏菌，以后 取名Salmon氏之名为本菌属属名。已发现近2000 个血清型，我国已发现近200个血清型。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌（Salmonella）是一类革兰氏阴性的杆状细菌，是引起沙门氏菌属感染的病原菌。
这种细菌可以引发食物中毒和伤寒症，其中食物中毒是最常见的感染途径。
因此，对沙门氏菌的快速、准确的检测非常重要。
目前，沙门氏菌的检测方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
以下是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 传统培养分离法传统的沙门氏菌检验方法是利用富含寡糖的培养基，如XLD、SS等，以及一些选择性供氧培养基，如亚硫酸和肉汤琼脂培养基等，将样品进行培养。
通过培养，沙门氏菌会形成典型的红色或蓝绿色菌落。
然后，从菌落中挑取纯培养物，并进行生理生化反应和田纳氏试验以确定是否为沙门氏菌。
2. 免疫学方法免疫学方法是通过检测沙门氏菌特异性抗原或抗体来诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- 血清凝集试验：利用特异性沙门氏菌抗原和患者血清，在特定条件下观察血清与抗原的凝集反应，可确定是否感染沙门氏菌。
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用特异性沙门氏菌抗原或抗体和酶标记的二抗，通过检测光学密度来判断是否存在沙门氏菌。
3. 分子生物学方法分子生物学方法可以通过检测沙门氏菌的基因或DNA来快速、准确地诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- PCR（聚合酶链式反应）：通过特异性引物扩增沙门氏菌的DNA片段，然后进行凝胶电泳分析。
PCR可以提供快速、高效的沙门氏菌检测结果。
- 实时荧光PCR：使用带有荧光探针的PCR引物，通过检测荧光信号的强度来定量沙门氏菌的存在量。
- 基因芯片技术：基因芯片上固定了沙门氏菌特异性的探针，可以同时检测多个基因或DNA序列，提高检测效率。
除了上述方法，还可以利用质谱仪等仪器进行快速鉴定，甚至利用抗生素敏感试验、细菌溶解酶试验等进行进一步的鉴定和鉴别。
总结起来，沙门氏菌的检验方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
这些方法可以单独或联合使用，以提供准确、快速的沙门氏菌检测结果，对于预防和控制沙门氏菌感染具有重要意义。
沙门氏菌生化鉴定条
沙门氏菌生化鉴定条
沙门氏菌（Salmonella）生化鉴定条是一种用于快速鉴定沙门
氏菌的试剂盒。
它通常包含多个培养基和化学物质，可以通过观察沙门氏菌的生化反应来确定其存在。
沙门氏菌生化鉴定条的使用方法一般如下：
1. 首先，将待检样品中的沙门氏菌分离出培养基上。
2. 取一根已消毒的针头，取出少量菌液并涂在鉴定条上的相应孔中。
3. 按照鉴定条的使用说明，放置于适当的温度下进行培养。
4. 根据鉴定条上的指示，观察菌液在不同培养基上的反应，如颜色变化、气泡产生等。
通过观察菌液在各孔上的反应，可以快速鉴定沙门氏菌。
常见的沙门氏菌生化鉴定条有API 20E和API 20NE等。
需要注意的是，沙门氏菌生化鉴定条虽然能够提供快速的结果，但是并不是最终的确认方法。
如果需要确保结果的准确性，还需要进行进一步的分子生物学检测或培养。
同时，操作人员在使用沙门氏菌生化鉴定条时需要遵守严格的操作规范，以防止交叉感染和误判。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌，可引起许多动物和人类的肠道感染。
为了检验沙门氏菌的存在，可以采用以下一些常见的方法：1.培养方法：沙门氏菌是一种需氧的微生物，在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。
常用的培养基如VRB （XLD）琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。
培养基可以选择均匀地涂布在平板上，也可以用于液体培养。
2.表型特征：沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色，个别品系可能为粉红色。
如在VRB琼脂上，沙门氏菌会变为红色或橙色。
沙门氏菌也可以产生硫化氢，导致MS琼脂呈现黑色。
3.生化特性：沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试，如产生气泡的气液反应，碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。
这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。
4.血清学方法：采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素，以确定是否感染了沙门氏菌。
这些试验通常利用鸡血清，鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。
5. 分子生物学方法：沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行，通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。
6.抗生素敏感性试验：通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试，可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况，为临床使用合适的抗生素提供参考。
除了以上提到的方法，还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。
这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在，还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。
总之，通过上述的方法，可以对沙门氏菌进行有效的检验，从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。
沙门氏菌的检验流程及每一步检验过程的作用
沙门氏菌的检验流程及每一步检验过程的作用下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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沙门菌的检验技术ppt课件
沙门氏菌前增菌培养基
缓冲蛋白胨水(BPW) 肉汤： 是基础增菌培养基，不含任何抑制成
分，有利于受损伤的沙门氏菌复苏。使受 损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状 态。2003版本标准仅用于加工食品或冷冻 食品的前增菌。
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（二）选择性增菌
范围
• 本标准规定了食品中沙门氏菌 （Salmonella ）的检验方法。
• 本标准适用于食品中沙门氏菌 的检验。
设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他还有：
★冰箱：2 ℃～5 ℃。
★无菌培养皿
★恒温培养箱
★无菌吸管
★均质器
★无菌毛细管
★振荡器
★ pH 计或pH 比
★电子天平：感量0.1g
按照显色培养基的说明进行判定。
返回
沙门氏菌分离培养基
使用BS、XLD、HE、沙门氏菌显色培养基
2003版本国标：BS、DHL（或HE、WS、SS） FDA：BS、XLD、HE AOAC：BS、XLD、HE ISO：phenol red brilliant green琼脂、BS或HE
为了最大可能的检出沙门氏菌，原则上 必须使用两种以上选择性分离培养基。
色管或精密pH 试
★无菌锥形瓶:容量500mL， 纸
250 mL
★全自动微生物生
★无菌试管
化鉴定系统
培养基和试剂
缓冲蛋白胨水（BPW ） 蛋白胨水、靛基质试剂
四硫磺酸钠煌绿（TTB） 氰化钾（KCN ） 培养
增菌液
尿素琼脂
亚硒酸盐胱氨酸（SC）增 菌液
赖氨酸脱羧酶试验培养基
亚硫酸铋（BS ）琼脂 HE 琼脂 木糖赖氨酸脱氧胆盐
沙门氏菌的实验报告
沙门氏菌的实验报告沙门氏菌的实验报告引言：沙门氏菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，尤其是在动物体内。
它是引起人类食物中毒的主要病原菌之一。
为了更好地了解沙门氏菌的特性和对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验。
实验一：沙门氏菌的分离与培养我们从市场购买了一份新鲜鸡蛋，并在实验室中进行了分离与培养的操作。
首先，我们将鸡蛋表面进行消毒处理，然后用无菌的工具将鸡蛋壳上的细菌刮取到培养基上。
接着，我们将培养基置于恒温箱中，控制温度和湿度，以促进沙门氏菌的生长。
经过一段时间的培养，我们成功地分离出了纯净的沙门氏菌菌落。
实验二：沙门氏菌的形态观察为了观察沙门氏菌的形态特征，我们使用了光学显微镜对其进行了观察。
在显微镜下，我们发现沙门氏菌呈杆状或球状，大小约为0.5至1.5微米。
沙门氏菌具有鞭毛，使其能够在液体中快速移动。
此外，我们还观察到沙门氏菌菌落呈灰白色或淡黄色，有时会形成粘液。
实验三：沙门氏菌的生长条件为了确定沙门氏菌的适宜生长条件，我们进行了一系列的实验。
首先，我们将沙门氏菌接种于不同温度的培养基上，发现其最适宜生长的温度为37摄氏度。
此外，我们还研究了沙门氏菌在不同pH值下的生长情况，结果显示其最适宜生长的pH值为6.5至7.5。
这些实验结果为控制沙门氏菌的生长提供了重要的参考。
实验四：沙门氏菌的致病机制为了研究沙门氏菌对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验来探索其致病机制。
首先，我们将沙门氏菌接种于小鼠体内，并观察其对小鼠的影响。
结果显示，被感染的小鼠出现了食欲不振、腹泻和发热等症状。
进一步的实验表明，沙门氏菌通过侵入人体细胞并释放毒素来引起病症。
这些实验结果为预防和治疗沙门氏菌感染提供了重要的依据。
实验五：沙门氏菌的控制方法为了控制沙门氏菌的传播和感染，我们进行了一些实验来研究其控制方法。
首先，我们发现煮沸可以有效地杀死沙门氏菌，因此在食物加工过程中要确保充分的加热。
此外，我们还研究了一些抗生素对沙门氏菌的抑制作用，结果显示某些抗生素可以有效地抑制其生长。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。
下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 培养分离沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。
常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。
将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。
沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。
2. 生化检测生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。
常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。
气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。
亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。
尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。
3. 血清学检测血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。
常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。
在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。
4. 分子生物学方法分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。
常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。
PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏菌基因的特定片段，从而进行检测。
核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。
基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。
总结：沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。
这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。
在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。
欧盟沙门氏菌检验标准
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌，可以导致食物中毒。
为了确保食品安全，许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。
欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一，其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。
以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准：
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。
2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。
3. 检测频率:对于某些高风险食品，如生肉、家禽、蛋类和蛋制品，欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。
4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被视为阳性。
5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么必须立即报告给相关的监管机构。
6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被销毁，并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。
需要注意的是，具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。
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实验四沙门氏菌属（Salmonella）的检验1 目的1.1 理解沙门氏菌属生化反应及其原理1.2 掌握沙门氏菌属血清因子使用方法1.3 掌握沙门氏菌属的系统检验方法2 原理沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。
种类繁多，少数只对人致病。
其他对动物致病，偶尔可传染给人。
主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。
在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。
食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。
目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。
本实验以蛋品为检测样品，以已知的沙门氏菌和大肠埃希氏菌为对照。
3 材料3.1 菌种沙门氏菌（Salmonella sp.）大肠埃希氏菌（E.col.）3.2 检样冻肉、蛋品、乳品等。
3.3 培养基缓冲蛋白胨水（BP）、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液、SS琼脂、EMB琼脂、亚硫酸铋琼脂（B S）、三糖铁琼脂（TSI）、蛋白胨水、尿素培养基、赖氨酸脱羧酶试验培养基、鸟氨酸脱羧酶试验培养基、丙二酸钠培养基、氰化钾（KCN）培养基、ONPG培养基、缓冲葡萄糖蛋白胨水、DHL琼脂、HE琼脂。
3.4 试剂吲哚试剂、V-P试剂、甲基红试剂、氧化酶试剂，沙门菌A—F多价诊断血清，革兰氏染色液等。
3.5 器具天平（称取检样用）、均质器或乳钵、显微镜、广口瓶、三角烧瓶、吸管、平皿、金属匙或玻璃棒、接种棒、试管架。
4 流程5 步骤5.1 前增菌和增菌沙门氏菌在食品加工过程中，常常受到损伤而处于濒死状态，因此经过加工的食品检验沙门氏菌时应进行前增菌，即用不加任何抑菌剂的培养基缓冲蛋白胨水（BP），进行增菌，使濒死状态的沙门氏菌恢复活力。
一般增菌时间为4h，增菌时间不宜过长，由于BP培养基中没有抑菌剂，时间太长了，杂菌也会相应增多。
干蛋品特殊，蛋品中的主要病原菌为沙门氏菌，其在加工过程中受到的损伤又较严重，因此应适当延长前增菌时间，一般为18～24h。
无菌操作称冻蛋取25g样品，加入盛有225mL灭菌缓冲蛋白胨水的500mL广口瓶内（瓶内预放玻璃珠若干粒），塞紧瓶口，充分摇匀。
在36±1℃培养4h（干蛋品需培养13～24h），移10ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液，在42℃培养18～24h。
同时另取10ml，加入100ml亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液内，在36±1℃培养18～24h。
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
各取25g（25ml）加入灭菌生理盐水25mL，按前法做成检样匀液，取半量，接种于100mLMM（或TTB）增菌液内，于42 oC培养24h；另半量接种于100mLSC增菌液内，于36±1 oC培养18～24h。
5.2 分离取增菌液和混合液各1环，分别划线接种于一个BS平板和一个DHL琼脂平板（或HE琼脂平板、WS或SS琼脂平板）。
于36±1 oC培养18～24h（DHL、H E、WS、SS）或40～48h（BS），观察各个平板上生长的菌落。
先观察混合菌种平板，再检查样品平板上有无可疑菌落，挑取菌种平板和样品平板上的可疑菌落进行革兰氏染色与镜检。
5.3 三糖铁高层琼脂初步鉴别将上述革兰氏阴性杆菌的可疑菌落，挑取数个接种一支三糖铁高层琼脂斜面，于36±1 oC培养18～24h，并根据表4-1初步判断是否可疑沙门氏菌。
表4-1肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果斜面底层产气硫化氢可能的菌属和种－＋ ±＋沙门氏菌属、弗劳地氏柠檬酸杆菌、变形杆菌属、缓慢爱德华氏菌＋＋ ±＋沙门氏菌Ⅱ、弗劳地氏柠檬酸杆菌、普通变形杆菌－＋＋－沙门氏菌属、大肠艾希氏菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲登斯菌属－＋－－伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏菌、志贺氏菌属、大肠艾希氏菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌属、普罗菲登斯菌属＋＋ ±－大肠艾希氏菌、肠杆菌属、克雷伯氏菌属、沙雷氏菌属、弗劳地氏柠檬酸杆菌注：+阳；－阴性；＋／－多数阳性，少数阴性。
5.4 生化试验在接种三糖铁琼脂的同时，接种蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7. 2）、氰化钾（KCN）培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基及对照培养基各1管，于36±1 oC培养18～24h，必要时可延长至48h，按表4-2判定结果。
按反应序号分类，沙门氏菌属的结果应属于A1、A2和B1，其它5种反应结果均可以排除。
表4－2 肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表反应序号 H2S 吲哚 PH7.2尿素 KCN 赖氨酸脱羧酶判定菌属A1 ＋－－－＋沙门氏菌属A2 ＋＋－－＋沙门氏菌属(少见)爱德华氏菌A3 ＋－＋＋－柠檬酸杆菌奇异变形杆菌A4 ＋＋＋＋－普通变形杆菌B1 －－－－－－－－＋－沙门氏菌属、埃希氏菌甲型副伤寒沙门氏菌、埃希氏菌、志贺氏菌属B2 －－＋＋－－－－＋－埃希氏菌埃希氏菌、志贺氏菌属B3 －－－－ ±＋＋＋＋－克雷伯氏菌族各属阴沟肠杆菌、柠檬酸杆菌属B4 －＋ ±＋－摩根氏摩根氏菌、普罗菲登斯菌属注：①三糖铁琼脂底层均产酸；不产酸者可排除；斜面产酸与产气与否均不限。
②KCN和赖氨酸可选用其中一项，但不能判定结果时，仍需补做另一项。
③＋表示阳性；－表示阴性；±表示多数阳性，少数阴性。
5.4.1 反应序号A1典型反应判定为沙门氏菌属。
如尿素、KCN和赖氨酸3项中有1项异常，按表4-3可判定为沙门氏菌。
如有2项异常，则按A3判定为弗劳地氏柠檬酸杆菌。
表4－3 沙门氏菌属生化鉴别表PH7.2尿素氰化钾（KCN）赖氨酸判定结果－－－甲型副伤寒沙门氏菌（要求血清学鉴定结果）－＋＋沙门氏菌Ⅳ或Ⅴ（要求符合本群生化特性）＋－＋沙门氏菌个别变体（要求血清学鉴定结果）注：＋表示阳性；－表示阴性。
5.4.2 反应序号A2可先作血清学鉴定，如A～F多价O血清不凝聚时，补做甘露醇和山梨醇试验，按表4-4判定结果。
表4-4甘露醇山梨醇判定结果＋＋沙门氏菌靛基质阳性变种（要求血清学鉴定结果）－－爱德华氏菌5.4.3 反应序号B1三糖高层斜面产酸的菌株可予以排除，不产酸的应该先作血清学鉴定。
如A～F 多价O血清不凝聚时，补做鸟氨酸、ONPG，水杨苷、棉子糖和半动力试验。
按表4-5 判断结果。
必要时按表4-6进行沙门氏菌生化群的鉴别表4－5 沙门氏菌属各生化群的鉴别赖氨酸鸟氨酸 ONPG 水杨苷棉子糖动力判定结果＋＋－－－＋沙门氏菌－－－－－－志贺氏菌属－＋＋－－－宋内氏志贺氏菌属d d d d d d 埃希氏菌属注：＋表示阳性；－表示阴性。
表4－6 沙门氏菌属各生化群的鉴别项目ⅠⅡⅢⅣⅤⅥ卫矛醇＋＋－－＋－山梨醇＋＋＋＋＋－水杨苷－－－＋－－ONPG －－＋－＋－丙二酸盐－＋＋－－－KCN －－－＋＋－注：＋表示阳性；－表示阴性。
5.5 血清学分型鉴定5.5.1 抗原的准备一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。
O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的（如 2.5%～3%）培养基上检查，O抗原在干燥环境中发育较好；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。
H抗原发育不良时，将菌株接种在0.7%～0.8%半固体琼脂平板的中央，待菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3～0.4%半固体琼脂的小玻管1～2次，自远端取菌培养后再检查。
5.5.2 O抗原的鉴定用A～F多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。
在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。
被A～F多价O血清凝集者，一次用O4、O3.10、O7、O8、O9、O2和O11因子血清做凝集试验。
根据试验结果，判定O群。
被O3.10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集试验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应根据O单因子血清的检查结果，没有O 单因子血清的要用两个O复合因子血清进行核对。
不被A～F多价O血清凝集者，先用57种或163种沙门氏菌因子血清中的9种多价O血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O群。
每种多价O血清所包括的O因子如下：O多价1 A，B，C，D，E，F群（并包括6，14群）O多价2 13，16，17，18，21群O多价3 28，30，35，38，39群O多价4 40，41，42，43群O多价5 44，45，47，48群O多价6 50，51，52，53群O多价7 55，56，57，58群O多价8 59，60，61，62群O多价9 63，65，66，67群5.5.3 H抗原的鉴定属于A～F各O群的常见菌型，依次用表7所述H因子血清检查第1相和第2相的H抗原。
表4-7 A～F群常见菌型H抗原表O群第1相第2相A a 无B g，f，s 无B i，b，d 2C1 k，v，r，c 5，Z15C2 b，d，r 2，5D（不产气的） d 无D（产气的） g，m，p，q 无E1 h，v 6，w，xE4 g，s，t 无E4 i不常见的菌型，先用163种沙门氏菌因子血清中的8种多价H血清检查，如有其中一种或两种血清凝集，则再用这一种或两种血清所包括的各种H因子血清逐一检查，以确定第1相和第2相的H抗原。
8种多价H血清所包括的H因子如下：H多价1 a，b，c，d，iH多价2 eh，enx，enz15，fg，gms，gpu，gq，mt，gz51H多价3 k，r，y，z，z10，lv，lw，lz13，lz28，lz40H多价4 1，2；1，5；1，6；1，7；z6H多价5 z4z23，z4z24，z4z32，z29，z35，z36，z38H多价6 z39，z41，z42，z44H多价7 z52，z53，z54，z55H多价8 z56，z57，z60，z61，z62每一个H抗原成分的最后确定均应根据H单因子血清的检查结果，没有H单因子血清的要用两个H复合因子血清进行核对。
检出第1相H抗原而未检出第2相H抗原的或检出第2相H抗原而未检出第1相H抗原的，可在琼脂斜面上移种1～2代后再检查。
如仍只检出一个相的H抗原，要用位相变异的方法检查其另一个相。
单相菌不必作位相变异检查。
5.5.4 Vi抗原的鉴定用Vi因子血清检查。
已知具有Vi抗原的菌型有：伤寒沙门氏菌，丙型副伤寒沙门氏菌，都柏林伤寒沙门氏菌。
6 结果综合以上生化试验和血清学分型鉴定的结果，按照表或有关沙门氏菌属抗原表判定菌型，并报告结果。