转录因子互作

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转录因子和基因互作的验证

转录因子和基因互作的验证

转录因子和基因互作的验证
转录因子是一类能够结合到DNA上并影响基因转录活动的蛋白质。

在细胞内,转录因子与DNA结合形成复合物,可以激活或抑制基因的转录。

转录因子与其靶基因之间的互作关系对于细胞的正常发育、生长和分化都至关重要。

为了验证转录因子和基因之间的互作关系,科学家通常使用多种方法。

其中一种常用的方法是基因敲除或过表达。

通过将特定的基因敲除或过表达,可以观察到转录因子与该基因之间的互作关系是否发生变化。

例如,如果敲除某个基因导致转录因子的活性下降,那么可以推断出该基因可能是转录因子的目标基因之一。

另外一种验证转录因子和基因互作的方法是染色质免疫共沉淀。

这种方法允许科学家检测转录因子是否与某个特定的DNA序列结合。

这种技术可以用于检测转录因子与某个靶基因的互作关系,也可以用于检测转录因子与其他调节因子之间的相互作用。

此外,还可以使用萤火虫素酶报告基因系统(luciferase reporter system)来验证转录因子和基因之间的互作关系。

这种方
法利用萤火虫素酶的荧光信号来检测基因转录活性的变化。

通过将转录因子的DNA结合结构区域与萤火虫素酶基因结合,科学家可以观察到转录因子是否能够激活或抑制基因转录。

总的来说,验证转录因子和基因互作的方法非常多样化,包括基因敲除、染色质免疫共沉淀和萤火虫素酶报告基因系统等。

这些方法都有助于我们理解转录因子和基因之间复杂的互作关系,为研究生命
科学提供了重要的工具和技术。

rna结合蛋白与转录因子结合

rna结合蛋白与转录因子结合

rna结合蛋白与转录因子结合RNA结合蛋白是一类与RNA分子相互作用的蛋白质。

与DNA结合蛋白相似,RNA结合蛋白可以通过与RNA分子的特定序列或结构相互作用来调控基因的转录、剪切和稳定性等过程。

转录因子则是一类与DNA结合并调控基因转录的蛋白质。

RNA结合蛋白与转录因子的相互作用,对于细胞基因表达的调控具有重要的意义。

本文将详细介绍RNA结合蛋白与转录因子的相互作用以及其在基因调控中的作用机制。

一、RNA结合蛋白与转录因子结合的作用机制RNA结合蛋白与转录因子之间的相互作用可以通过多种方式实现,其中最常见的方式是通过RNA序列或结构的识别。

RNA序列是指RNA分子中碱基的排列顺序,而RNA结构则是指RNA分子在三维空间中的构象。

RNA结合蛋白通常通过与RNA分子的特定序列或结构相互作用来实现与其结合。

一般来说,RNA结合蛋白通过其结构域(例如RRM域、KH域等)与RNA序列或结构相互作用。

转录因子与RNA结合蛋白的结合也可以通过RNA分子介导的方式实现。

在这种情况下,RNA分子可以作为桥梁,连接转录因子和RNA结合蛋白。

具体而言,在转录因子结合位点上形成的DNA/RNA复合物中,RNA分子与转录因子的DNA结合域和RNA结合蛋白的RNA结合域相互作用。

这种方式可以增强或抑制转录因子的活性,从而影响基因的转录。

二、RNA结合蛋白与转录因子结合的生理功能RNA结合蛋白与转录因子的结合在基因调控中扮演着重要的角色。

通过结合RNA分子,RNA结合蛋白可以参与转录的调控,包括转录起始、终止、增强子和抑制子的识别等过程。

转录因子则通过与RNA结合蛋白的结合来改变其活性,从而调节基因的转录。

1.促进转录的调控RNA结合蛋白与转录因子结合可以促进基因的转录。

例如,在一些启动子区域中,RNA结合蛋白可以与转录因子共同结合,形成转录复合物,从而增强转录因子的结合与活性。

这种互作可以提高多个细胞因子信号通路的敏感性,从而增强特定基因的转录水平。

蛋白质与dna互作的4种方法

蛋白质与dna互作的4种方法

蛋白质与dna互作的4种方法蛋白质与DNA互作是细胞内基本的生物学过程之一,涉及多种分子机制和调节因素,并在细胞的生存、发育和功能方面发挥着至关重要的作用。

下面介绍4种常见的蛋白质与DNA互作的方法。

1. DNA结合蛋白质DNA结合蛋白质是特殊的蛋白质,它们能够通过与DNA的特定序列结合来实现一系列的生物学功能。

这种DNA结合蛋白质具有可变的DNA结合域,这些域可以根据它们所处的生物环境而发生变化,从而使它们能够识别和结合具有特定序列的DNA。

这种蛋白质与DNA 的相互作用可以发生在许多细胞生物学过程中,如DNA复制、DNA修复、DNA重组、基因表达和细胞分化等。

2. 转录因子转录因子是一类介于蛋白质和DNA之间的分子,它们能够识别和结合DNA的调节区域,并调节基因表达的过程。

这些蛋白质可与DNA序列中的高度保守的核苷酸序列结合,形成一个蛋白质-DNA复合体,从而影响基因的转录。

转录因子的结合可以促进或抑制基因的转录、调节基因表达,并且可以通过多种信号通路来影响转录的语言。

3. DNA修复酶DNA修复酶是一种与DNA复制、修复和重组相关的特殊蛋白质。

当DNA发生损伤或错误时,它们可以与DNA的断裂或缺失端点结合,修复DNA中的错误部分,从而恢复正常的基因表达和蛋白质功能。

这种蛋白质与DNA的相互作用具有高度的特异性和灵活性,这使它们能够对DNA上不同类型的故障进行处理。

4. 核糖核酸酶核糖核酸酶是一种在DNA复制、RNA合成和蛋白质合成中发挥关键作用的蛋白质。

这些蛋白质能够在DNA或RNA上识别特定的核酸序列,结合并剪切核酸的特定区域,从而影响基因表达和蛋白质合成过程。

核酸酶在细胞内的作用相当重要,能够影响RNA和蛋白质的构成与功能,从而对基因的表达和细胞的功能产生直接影响。

转录因子互作 plant cell

转录因子互作 plant cell

转录因子互作 plant cell转录因子是一类能够结合到DNA序列上并调控基因转录的蛋白质。

它们在植物细胞中起着重要的调控作用。

植物细胞中的转录因子互作是指不同的转录因子之间相互作用,形成复杂的调控网络,以确保基因的表达能够适应不同的环境和生理需求。

转录因子互作可以发生在细胞核内或细胞核外。

在细胞核内,转录因子之间可以直接相互作用,形成复合物,通过结合到DNA上的特定序列,调控靶基因的转录。

这些转录因子之间的互作可以增强或抑制转录的活性,从而对基因表达产生调控效果。

细胞核外的转录因子互作则是指转录因子与其他蛋白质之间的相互作用。

这些蛋白质可以是共转录因子,它们与转录因子合作,共同调控基因的转录。

也可以是转录因子与其他信号转导通路中的蛋白质相互作用,以实现信号的传递和基因表达的调控。

植物细胞中的转录因子互作网络非常复杂。

一个转录因子可以与多个其他转录因子相互作用,形成复杂的调控网络。

这种互作网络的形成是基因表达调控的重要机制之一。

通过转录因子之间的互作,基因表达可以在不同的生理条件下发生变化,以适应环境的变化和细胞内外的信号。

转录因子互作在植物细胞中起着重要的调控作用。

它们参与调控植物的生长发育、逆境响应和代谢调控等重要生理过程。

例如,转录因子互作可以调控植物的开花时间和开花品质。

在光周期调控中,一些转录因子通过相互作用来调控植物的开花时间。

另外,转录因子互作也参与植物对逆境的响应。

在逆境胁迫下,转录因子之间的互作可以调控逆境响应基因的表达,以提高植物的逆境耐受性。

除了在细胞内的互作,转录因子互作还可以发生在细胞间的互作。

植物细胞之间可以通过一种称为质孔连通的结构相互连接。

转录因子可以通过质孔连通,在不同的细胞之间进行信号传递和基因调控。

这种细胞间的转录因子互作在植物的生长发育和逆境响应中起着重要的作用。

转录因子互作在植物细胞中是一种重要的基因表达调控机制。

通过转录因子之间的相互作用,基因的表达可以在不同的生理条件下发生变化,以适应环境和生理需求的变化。

转录因子的类型及功能机制解析

转录因子的类型及功能机制解析

转录因子的类型及功能机制解析转录因子(Transcription Factor)是调控基因表达的一类蛋白质,它们可以结合DNA上的特定序列(转录因子结合位点)并降低或增强特定基因的转录活性。

由于转录因子在基因调控中起重要作用,因此,对其类型及功能机制进行深入探究有助于更好地理解基因表达的规律。

一、转录因子的分类转录因子大致可分为两类:第一类是一般转录因子(General Transcription Factors, GTFs),它们能即将基因启动子区域(Transcription Start Site, TSS)的转录酶II(Transcription RNA Polymerase II, Pol II)招募至对应的基因的TSS附近区域,该过程称为预启动复合物(Pre-Initiation Complex, PIC)的生成。

另一类则为调控性转录因子(Regulatory Transcription Factors, RTFs),它们与DNA的某些序列相结合,根据其功能性质的不同,调整基因的表达量。

一般来说,转录因子的结构可以分为四个主要部分: DNA结合结构域(DNA-Binding Domain, DBD)、转录激活结构域(Activation Domain, AD)、转录共同激活因子结构域(Transcription Co-activator, TAF)以及转录抑制结构域(Transcription Repressor, TR)。

DBD 和 AD 均与特定的 DNA 序列和共同转录因子相互作用。

TAF 和 TR可以抑制或增强有关基因的转录。

此外,一些转录因子会受到另一个蛋白质的调控,称为受体。

常见的受体有核受体(Nuclear Receptors)和去甲肾上腺素(Epinephrine)受体等。

二、转录因子的功能机制在随后进一步介绍转录因子的功能机制前,首先了解基因的启动子结构。

基因的启动子通常由数百bp(碱基对)的基因TSS序列及其周围的区域组成。

基因转录起始位点和转录因子的互作

基因转录起始位点和转录因子的互作

基因转录起始位点和转录因子的互作转录是基因表达的第一步,它起到了将DNA信息转换成RNA的关键作用。

在这个过程中,转录起始位点和转录因子的互作是非常重要的。

转录起始位点通常是一个非常小的片段,其长度通常只有几十个碱基对,但是这个位点的位置和序列是非常关键的。

转录因子是一类能够结合到DNA上并能够调控基因转录的蛋白质,它们能够结合到转录起始位点附近的序列上,并引导RNA聚合酶在这个位置开启转录。

接下来,本文将详细阐述转录起始位点和转录因子的互作机制。

1. 转录起始位点的类型在真核生物中,转录起始位点通常有两种类型:核糖体结合位点和TATA盒子。

核糖体结合位点(ribosome binding site, RBS)是细胞翻译机器中核糖体所附着的位置,它一般位于翻译前缀区域,即在1-10个核苷酸(nt)位点之内。

因此,其它一些序列如Shine-Dalgarno序列,也可以作为核糖体结合位点。

TATA盒子则是在真核生物中广泛存在的另一种启动子结构,它位于转录起始位点的-30 nt处。

这种序列是由大约25个碱基对组成,因此它和核糖体结合位点相比,看起来要更加靠前。

2. 转录因子的种类近年来,随着生命科学的发展,越来越多的转录因子被发现和研究。

除了最早发现的TFIID和TFIIB等因子外,还有许多新的因子已经被鉴定出来,如STAT、PPAR、NF-κB和CREB等因子。

这些新的因子分别具有不同的结构和功能,有的是单体因子,有的是复合物因子,但它们都能够结合到DNA序列上,并在转录起始位点附近启动转录。

3. 转录因子如何与启动子段结合转录因子是通过特定的DNA结合区域与启动子段紧密结合的,这个DNA结合区域通常被称为DNA结合域(DNA-binding domain, DBD)。

不同的转录因子具有不同的DBD序列,因此也有了不同的结构和功能。

此外,转录因子通常有一些辅助因子,如组蛋白改变酶和转录后修饰酶等,这些辅助因子能够加强转录因子与DNA的结合,并促进转录的进行。

转录因子启动子互作

转录因子(Transcription Factors)是一类能够调控基因表达的蛋白质。

它们通过结合到DNA上的特定序列,称为启动子(Promoter)或增强子(Enhancer),来控制基因的转录过程。

启动子是基因上游的DNA区域,通常包含转录起始位点(Transcription Start Site, TSS),是RNA聚合酶二世结合并开始转录的地方。

转录因子启动子互作指的是不同转录因子之间在调控基因表达时的相互作用。

这些相互作用可能包括:
1. 协同作用:一些转录因子可能协同工作,共同增强或抑制某个基因的转录。

例如,一个转录因子可能首先结合到启动子的一部分,然后招募另一个转录因子来加强其效果。

2. 竞争性抑制:不同的转录因子可能竞争性地结合到同一个启动子区域,从而相互抑制对方对基因表达的调控作用。

3. 正反馈循环:某些转录因子可以正反馈地调节自己的表达。

一个转录因子激活了某些基因的表达,这些基因产生的产物可能进一步增强该转录因子的活性或表达。

4. 异源二聚体形成:一些转录因子可以与其他转录因子形成异源二聚体,这种复合体可能具有与单独存在时不同的结合特性和调控功能。

转录因子启动子互作是基因表达调控网络中的一个复杂方面,它允许细胞对环境变化做出精确的反应,并在不同的细胞类型和发育阶段中发挥特定的功能。

这些互作通常涉及一系列的信号传导路径和分子间的相互作用,是细胞生物学和分子生物学研究的重要领域。

转录因子在植物抗逆性中的调控机制

转录因子在植物抗逆性中的调控机制转录因子在植物抗逆性中的调控机制是一个复杂而精细的生物学过程。

以下是根据您提供的文档结构,撰写的关于该主题的文章。

一、转录因子概述转录因子是一类能够结合到DNA上的蛋白质,调控基因的转录过程。

在植物中,转录因子对抗逆性基因的表达起着至关重要的作用。

植物在面临逆境如干旱、盐碱、低温、高温、病原菌侵染等环境压力时,转录因子能够通过调节下游基因的表达,增强植物的适应性和生存能力。

1.1 转录因子的功能转录因子通过识别特定的DNA序列,与基因的启动子区域结合,从而激活或抑制基因的转录。

它们可以是激活因子,促进基因表达;也可以是抑制因子,抑制基因表达。

转录因子的活性受到多种信号通路的调控,包括植物激素信号、环境信号和内部代谢信号等。

1.2 转录因子的分类转录因子可以根据其结构域和功能进行分类。

常见的转录因子家族包括AP2/ERF家族、bZIP家族、WRKY家族、MYB 家族等。

每个家族的转录因子都有其特定的DNA结合模式和调控特性。

二、转录因子在植物抗逆性中的调控机制植物在逆境条件下,转录因子通过多种机制调控基因表达,以应对不同的环境压力。

2.1 逆境信号的识别与响应植物首先需要识别逆境信号,如干旱、盐分、低温等。

这些信号通过植物的感知系统被识别后,会激活一系列的信号传导途径,最终导致转录因子的激活或抑制。

2.2 转录因子的激活与功能逆境信号激活的转录因子会进入细胞核,结合到特定基因的启动子区域,调控这些基因的表达。

这些基因通常编码与抗逆性相关的蛋白质,如渗透调节蛋白、抗氧化酶、抗冻蛋白等。

2.3 转录因子的相互作用转录因子之间也存在相互作用,它们可以通过形成同源或异源二聚体,或者通过相互竞争DNA结合位点,来协同调控基因表达。

这种相互作用增加了调控网络的复杂性,使得植物能够精细调控其抗逆性反应。

2.4 转录因子的后转录调控除了直接调控基因的转录,转录因子还可以通过影响mRNA的加工、稳定性和翻译等后转录过程,进一步调节基因表达。

植物转录因子与DNA互作研究技术特邀专家方法,值得收藏!

植物转录因子与DNA互作研究技术特邀专家方法,值得收藏!植物按照中心法则完成遗传信息的转录和翻译。

不同基因型的个体通过将DNA转录为RNA, RNA进一步翻译为蛋白质, 从而表现出不同的表型。

其中, 起始转录步骤的成功与否影响着后续步骤(如RNA的可变剪接以及翻译)的进行(Latchman, 2005)。

因此, 转录在植物生命过程中发挥至关重要的作用。

此外, 转录还能调控基因的组织特异性表达以及基因表达对特定信号的响应, 进而影响器官的分化以及植物对环境的适应性。

转录过程一直是生命科学研究中的热点问题。

近年来, 大量研究从转录调控的角度解析了植物对热、冷和干旱等胁迫信号以及对外源光信号的响应机制(Pu and Brady, 2010; Nakashima et al., 2014; Ohama et al., 2017; 杨立文等, 2019)。

在转录调控机制的解析过程中, 酵母单杂交(yeast one hybrid, Y1H)、凝胶阻滞迁移率检测(electrophoresis mobility shift assay, EMSA)和瞬时表达是行之有效的技术手段。

Y1H和EMSA是检测转录因子能否直接结合DNA的常用技术。

Y1H是酵母双杂交的衍生技术, 用于分析转录因子与DNA之间的相互作用, 以研究真核细胞中的基因表达调控(Li and Herskowitz, 1993)。

在Y1H分析系统中, 将特定顺式作用元件构建到pLacZ2μ酵母表达载体上, 将编码转录因子的cDNA构建到pB42AD酵母表达载体上。

将上述2种融合表达载体共转化至酵母细胞中, 此时转录因子若能结合在顺式作用元件上, 则会启动下游报告基因的表达。

目前, Y1H技术主要用于鉴定DNA结合位点, 筛选潜在的DNA结合蛋白(转录因子), 因操作简单且耗时短受到研究者的青睐。

然而, 在利用Y1H分析转录因子与DNA的结合时可能受到酵母内源表达激活物的影响, 即存在假阳性问题。

转录因子和miRNA的协同调控

转录因子和miRNA的协同调控在生物体内,基因的表达是一个复杂的过程,转录因子和microRNA(miRNA)都是基因表达的重要调控因素。

转录因子可以结合到DNA序列上,招募其他蛋白质进入基因转录组装体(转录因子复合物),使其转录相应的基因。

miRNA则可以结合到目标基因的mRNA上,介导靶标mRNA的降解或抑制其翻译。

这两种调控因子在许多重要的生物学过程中都扮演着重要的角色,它们相互作用并协同调控基因表达。

转录因子和miRNA的协同调控在细胞分化和发育中发挥重要作用。

细胞分化是一个复杂的生物学过程,通过这个过程细胞可以转化为具有特殊功能的细胞类型。

分化过程中的每个细胞都会传播具有不同的信号和表达不同的基因。

这种基因表达的分化程度由转录因子和miRNA的协同调控决定。

因此,了解这些调控因子对于理解组织发生和癌症等疾病的发生过程具有重要的意义。

转录因子和miRNA的协同调控可以通过多种方式实现。

传统上,miRNA被认为是一种抑制剂,可以通过靶基因mRNA上的互补配对来沉默基因表达。

然而,研究表明,大多数miRNA的靶基因不是单个mRNA,而是与转录因子p300和CBP等蛋白质交互并共同调控基因表达的多功能基因综合体。

这些蛋白质与转录因子在基因表达调控中的配合是miRNA和转录因子协同作用的关键。

另外,一些miRNA也可以与转录因子相互作用,直接影响转录因子的特异性和稳定性。

例如,在转录因子FOXP2中,miRNA-9能够通过与转录因子互作来调控其表达和功能。

另一个例子是miR-34a和TP53,在细胞凋亡通路中具有重要的功能,miR-34a通过抑制转录因子TP53来抑制肿瘤细胞的增殖和生存。

此外,转录因子和miRNA还可以通过远距离DNA相互作用的机制协同调控。

最近一项研究表明,miRNA在远距离内与其靶mRNA共同调控基因表达,并且维持了转录因子与DNA的稳定性。

这种远距离协同调控机制的发现大大拓展了我们对miRNA和转录因子协同作用的认识。

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转录因子互作研究方法
在生物体中,各种生命活动几乎都有蛋白质的参与,而且绝大多数的生命活动都需要多种蛋白质参与,它们或者形成一个复合体,或者在不同的时间、不同的位置参与到生命活动中。

这样就不可避免的发生各种类型的蛋白质相互作用,这些相互作用构成一个庞大的网络,支撑生命体的活动。

特别是各类转录因子之间的相互作用,在生物体内基因表达的调控及各类信号通路中起关键作用。

随着对转录因子以及转录因子相互作用研究的深入,研究蛋白质之间相互作用的技术越来越多。

其中有可以大量检测蛋白质相互作用的技术,如酵母双杂交技术(Yeast Two-Hybrid)、蛋白质芯片(Protein Chip);还有一些多用于已知蛋白相互作用验证的技术,包括:免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)、Pull-down技术(Pull-down assay)、荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)、分子荧光互补技术(Bimolecular fluorescence complementation,BiFC);还有一些新的技术层出不穷,如美国Signosis的转录因子互作微孔板芯片技术。

1、酵母双杂交技术
Fields等人首先在1989年介绍了酵母双杂交技术,这是一种基于酵母转录激活因子GAL4特点建立起来的技术。

在酵母双杂交实验过程中,将诱饵蛋白基因与DBD结构域基因融合,将需要筛选的全长cDNA构建成与AD结构域基因融合的文库。

当诱饵蛋白与cDNA表达的蛋白质发生相互作用时,会将DBD结构域与AD结构拉近,启动下游报告基因的表达。

酵母双杂交技术有自身的优势:a、蛋白质之间的相互作用在细胞体内进行,在一定程度上反应了蛋白质相互作用的真实环境;b、利用酵母体内激活因子的特性,相对来说比较敏感。

同时,酵母双杂交也存在一些缺陷:首先,诱饵蛋白与靶蛋白的相互作用发生在细胞核内,对于一些不能入核的蛋白质无法检测;第二,酵母中表达的蛋白质只能进行有限的翻译后修饰,对于一些需要多种翻译后修饰的蛋白质作用有限;第三,酵母双杂交实验中经常出现假阳性和假阴性的现象;第四,有一些诱饵蛋白对酵母具有毒性或者本身就能够激活报告基因的表达,不适合使用酵母双杂交技术。

2、免疫共沉淀
免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)是基于抗原-抗体专一性反应的一种研究蛋白质相互作用的经典方法。

这种方法在非变性条件下裂解完整细胞,细胞中的大多数蛋白质都以其原本的状态存在于裂解液中,很多蛋白质复合体保持聚合状态,使得很多蛋白质与蛋白质之间的相互作用都保留了下来。

使用一种已知蛋白质的抗体将其沉淀,那么与这种蛋白质相互作用的蛋白质也会一起沉淀下来,进一步分析沉淀下来的蛋白复合物,可以得到与已知蛋白相互作用的蛋白质的信息。

该方法最大的特点是在蛋白质本身所处的细胞环境中检测蛋白质相互作用,真实性较高,所以常被用于验证两种蛋白质的相互作用是否真实,也可用于确定某种蛋白质在细胞内的伴侣蛋白。

其缺点是常常产生非常显著的背景,而且也不适用于高通量的实验研究。

3、Pull-down技术
Pull-down技术(Pull-down assay)利用了标签与相应固相支持物之间的亲和作用。

将已知蛋白与适当的标签融合表达,由于标签的存在,融合蛋白会吸附在固相支持物上,与已知蛋白相互作用的蛋白质会随之保留下来,其余蛋白则被洗
掉。

Pull-down技术既可以作为第一种方案确定相互作用对,同样也可以对于使用其它方法筛选得到的相互作用对进行确定。

目前比较常用的标签包括GST、6×His、MBP等。

Pull-down技术的优点是操作简单、方便,花费少;但是这种体外鉴定蛋白质相互作用的方法更适合于鉴定相互作用比较稳定的蛋白对,无法检测微弱以及瞬间的蛋白质相互作用,而且较大的标签可能影响蛋白质的结构。

4、转录因子互作微孔板芯片技术
Signosis的转录调控因子互作微
孔板芯片技术可以同时分析一个转录
因子或调控因子与多个转录因子间的
相互作用。

首先针对96种已知转录因
子设计一系列独特的生物素标记探针,
每种探针分别可以与特定转录因子结
合,每个探针代表一种特定的转录因
子。

将探针混合物、核提取产物(样
本)以及目的转录因子抗体混合孵育,
探针与相应的转录因子相结合;同时
目的转录因子、相应的抗体及与目的
转录因子相互作用的转录因子相互结
合;探针-转录因子复合物通过离心柱
上的蛋白G或琼脂糖珠富集。

洗去未
结合的抗体探针和蛋白质,分离复合
物上结合的探针;生物素标记的探针
与预制备的微孔板杂交结合,通过
HRP酶标记的链霉亲和素和底物进行
检测。

相应探针的检测信号反映出96
种已知转录因子与目的转录因子的相
互作用关系。

这种技术实际上是一种小范围内筛选互作转录因子的技术。

操作简便;只需要目的转录因子的抗体,不需要其它的抗体;最终的结果数值化呈现,更加客观且方便进行样本之间的相对定量分析;筛选出来的已知蛋白也容易进行下一步的深入研究。

传统的蛋白质相互作用研究技术已经不能满足研究需求,蛋白质相互作用研究领域需要更加强大的研究工具,需要更多新技术的开发,需要加强对新技术的应用。

期待新的技术是蛋白质相互作用研究发生翻天覆地的变化!。

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