铁皮石斛组培技术
铁皮石斛组培苗驯化移栽技术
铁皮石斛组培苗驯化移栽技术近年来，随着铁皮石斛市场的逐渐扩大，人们对其繁育与种植技术的研究也逐渐加强。
铁皮石斛是一种珍稀的地生兰科植物，在人工栽培过程中，由于生长习性和地理环境的差异，常常出现活率低、株型不佳、发根慢等问题，因此组培苗驯化移栽技术成为了关键。
1.组培苗的制备铁皮石斛组培苗的制备要注意选择来源健康的母株，通常以茎尖、中间部位、无病虫害的健壮无性系为材料。
采收后，将茎段嫁接在适宜培养基上，添加适量激素、营养物质等，促进组织的快速增殖，形成小组织块。
小组织块经过连续次分化，形成直径约为5 mm 大小的组培苗。
2.组培苗驯化铁皮石斛组培苗长势缓慢，新生叶片逐渐枯黄，活力下降。
这时需要进行组培苗的驯化。
具体步骤如下：（1）以1/2的原培养基为基础，添加适量食糖和椰子葡萄糖等碳源，增加组培苗的活力和养分供给。
（2）添加适量的生长调节剂，例如GA、KT等激素，调节植物的生长素和细胞分化，促进细胞分裂和增殖。
（3）调节培养容器内的光照、温度和湿度等环境条件，创造适宜的生长环境。
一般来说，组培苗需要在25~30℃温度下培养，湿度控制在70%左右，每天提供12小时光照。
（4）随着时间的推移，组培苗逐渐适应生长环境，长势逐渐恢复，可以开始进行移栽的准备工作。
组培苗移栽是一个需要精细操作的过程，需要注意以下几点：（1）移栽时间的选择。
一般情况下，组培苗在培养基内生长至10个月~1年以上时达到饱满状态，此时适合进行移栽。
（2）移栽环境的准备。
组培苗移栽时需要选择通风良好的环境，同时控制温度和湿度，保持适宜的生长环境。
（3）栽培土壤的选择。
铁皮石斛偏爱沙壤土和松软肥沃的土壤，质地细腻透气。
（4）移栽方法的选择。
可以采用水培、土培和促根剂浸泡等方式进行移栽。
根据以上操作规范，铁皮石斛组培苗的驯化移栽技术可以有效提高组培苗的活率和生长速度，为铁皮石斛的大规模生产提供了良好的技术支持。
铁皮石斛组织培养课件
根据培养的材料和目的，组织培养可以分为胚胎培养、 愈伤组织培养、器官培养和细胞培养等类型。
组织培养技术的发展历程
01 19世纪中期
植物组织培养的萌芽期，科学家开始尝试将植物 组织放在人工控制的条件下进行培养。
02 20世纪初
植物组织培养技术的初步形成，科学家发现植物 细胞具有全能性，能够发育成完整的植株。
开花时，铁皮石斛会形成黄绿色的花朵，并散发 03 出淡淡的香气。
铁皮石斛的生长环境
铁皮石斛主要生长在温暖湿润的环境中，如热带 01
雨林、季雨林等。
它需要附生于树木或岩石上，并需要较高的空气 02
湿度和适度的光照。
02 适宜的生长温度为15-25℃，且需要保持一定的 空气流通，以斛具有滋阴清热、生津止渴的功效，常用 于治疗热病伤津、口渴咽干等症状。
它还具有益胃生津、滋阴清热的功效，对于胃脘 痛、上腹胀痛等症状也有一定的疗效。
此外，铁皮石斛还具有一定的抗肿瘤、抗氧化、 增强免疫力等作用。
组织培养技术概述
组织培养的定义与分类
组织培养的定义
组织培养是一种在人工控制的条件下，将植物的细胞、 组织或器官进行离体培养，使其生长、发育的技术。
02
快速繁殖
通过组织培养技术可以实现铁皮石斛的快速繁殖， 提高种苗质量和产量，满足市场需求。
铁皮石斛组织培养的实践操 作
实验材料与设备
实验材料
铁皮石斛幼苗、培养基质（如珍珠岩、 蛭石等）、活性炭、植物生长调节剂 等。
实验设备
超净工作台、培养皿、玻璃瓶、烧杯、 量筒、天平、灭菌锅、PH试纸等。
实验操作流程
培养条件
将接种好的培养皿放入恒温培养箱 中，设定适宜的温度和光照时间， 保持一定的湿度。
铁皮石斛的组织培植
铁皮石斛的组织培植简介铁皮石斛（Dendrobium officinale）是一种珍贵的中药材，被公认为具有滋补养生的功效。
由于其野生资源减少，组织培植成为了其繁殖的重要途径。
本文将介绍铁皮石斛的组织培植方法，用于指导相关研究和实践。
材料与方法1. 无菌实验室条件：培养室温度为25℃，相对湿度为60%-70%，光照强度为3000-4000lx。
2. 培养基配方：- MS培养基：含有葡萄糖（30g/L）、琼脂（8g/L）、pH值调整到5.8。
- 添加生长调节剂：添加6-苄氨基酸（0.1mg/L）和吲哚-3-乙酸（0.5mg/L）。
过程1. 选取健康无病的铁皮石斛茎段作为外植体，将其进行消毒处理。
使用70%酒精浸泡2分钟，随后用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗3次。
2. 切取消毒后的茎段偏上部位的小芽组织，每个芽组织含有1-2个小芽。
3. 将切取的芽组织置于含有MS培养基和生长调节剂的培养瓶中。
4. 培养瓶密封并置于培养室中，进行组织培养。
每周移植一次，移至新的含有培养基的培养瓶中。
结果与讨论经过适当的组织培养时间，铁皮石斛的小芽可以快速生长并分化出根系。
在合适的培养条件下，每个芽组织可以发育成为整株植物，从而实现大规模繁殖。
值得注意的是，在铁皮石斛的组织培植过程中，应加强对培养基和环境条件的控制。
培养基中添加的生长调节剂和孕育液质量对结果有重要影响。
同时，无菌操作的严格执行也是保证培植过程成功的关键。
结论铁皮石斛的组织培植方法是一种有效的繁殖途径，能够满足市场需求，并促进可持续发展。
通过合理控制培养基配方和环境条件，可以实现铁皮石斛的大规模繁殖与种植，为相关产业的发展提供有力保障。
这一研究对于进一步深入了解铁皮石斛的生物学特性和开发利用具有重要意义。
铁皮石斛组织培养
铁皮石斛组织培养铁皮石斛组织培养研究进展组织培养摘要：近年来，对铁皮石斛的需求日趋增加，而野生资源难以满足市场需求，组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。
从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况，并展望了发展前景。
铁皮石斛为兰科石斛属植物，是传统名贵中药材。
《神农本草经》列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、止咳润肺的功效。
现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。
由于石斛自然繁殖力低，种子需与真菌共生才能萌发，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，成为濒危植物，被列为国家重点保护的野生药材品种。
为了满足市场的需求，国内许多科研人员进行了铁皮石斛组织培养技术的研究。
1 种子萌发1.1 胚龄:不同种龄的种子萌发率不一样。
叶秀嶙等取铁皮石斛2~ 6 个月种龄的种子进行组织培养发现，种龄愈长，萌发率愈高。
2 个月种龄的种子接入改良N6培养基中，萌发率仅为6 % ; 3 个月种龄的种子接入改良叹培养基中，培养2 周后开始萌发，萌发率为87 % ;4 一6 个月种龄的种子接入培养基中，只要培养一周即可萌发，萌发率为95 ％。
1.2 基本培养基:铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
1.3 激素:在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。
2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。
最新铁皮石斛组培苗移栽技术
最新铁皮石斛组培苗移栽技术近年来，随着消费者对于养生的需求不断增加，铁皮石斛也成为了热门的养生保健品。
铁皮石斛的天然恢复力和免疫力远超过其他植物，由于其在市场上的价格高昂，越来越多的人开始学习铁皮石斛的种植。
铁皮石斛的的生长速度较慢，为加快其生长速度，一些农村家庭采用了移栽技术。
而最新的铁皮石斛组培苗移栽技术受到越来越多人的青睐，下面，我们来介绍一下这一新技术的特点。
1.技术特点：最新铁皮石斛组培苗移栽技术是一种新型的种植技术，是在组培技术的基础上进行移栽的方法，通过悬浮液培养铁皮石斛，将铁皮石斛种植周期从5 ~ 7年缩短到1年内。
通过对组培苗的移栽，可以使铁皮石斛的生长周期得到进一步缩短。
2.技术步骤：（1）种子筛选：筛选优质的铁皮石斛种子，并去除不良种子。
（2）组组织培养：将优质种子在营养液中培养2~3个月，形成组织培养苗。
（3）单叶培养：将组织培养苗移植到含植物生长调节剂的营养液中进行培养，直到出现新的生长点。
（4）白化处理：将单叶苗移植到一个不含营养的培养液中，在黑暗的条件下培养到白化。
（5）移栽：将白化处理后的植物移植至腐叶土中，每株20 ~ 30cm，种植后加盖温室，保持土壤湿度不宜过高。
3.优点：最新铁皮石斛组培苗移栽技术有许多优点：（1）生长速度快：经过组培技术的处理，将铁皮石斛的种植周期缩短了不少。
（2）生产效益高：组培苗的生产周期较短，并且生长效果好、幼苗数量多，生产效益比以往要提高不少。
（3）种植质量可控：组培苗的移栽可以使养分的吸收分布更加均匀，生长条件稳定，质量可控。
4.注意事项：最新铁皮石斛组培苗移栽技术需要注意以下事项：（1）环境条件：温度20~30℃，湿度70%～80%。
（2）土壤条件：腐叶土、泥炭。
（3）肥料添加：养分过渡添加会导致铁皮石斛的新根被烧伤，应该配合合适的肥料。
总之，最新铁皮石斛组培苗移栽技术是一项新型的、提高种植效率的技术变革，可让铁皮石斛在其繁衍的过程中更快速、更加稳定，未来定会被广泛应用在铁皮石斛的种植环节中。
铁皮石斛组培讲义_PPT课件
• 从茎尖或茎段培养得到的小苗，大多 数是无根小苗，需转入1／2MS加马铃 薯进行生根和壮苗培养，才能出管移 栽。
④试管苗移栽
组培出的试管苗，最后移到大田栽培称为放养。 当幼苗在试管中长到3～5cm高时，即可出管。为 使试管苗移栽后适应自然环境，移栽前要先揭开 瓶塞放在室内自然光下炼苗7～10天，以提高小苗 的抗性。出管取苗要小心操作，不能折断根部。 从试管取出的苗须洗净附着在其根部的琼脂，然 后3～5株一丛种植。石斛苗具有群体抗性作用， 丛栽比单株栽培效果好。春季气温逐渐回升，有 利于试管苗适应自然环境，最宜移栽试管苗。
石斛试管苗可直接栽在树干或岩石上， 也可以盆栽。在阴凉潮湿、长有苔藓的树干 和岩石上，栽种石斛成活率高。盆栽选用木 屑、吸水石、砂岩、片麻岩等作基质，然后 覆上苔藓或青杠树树皮粉进行栽种，效果较 好。试管苗栽后宜放在荫棚内，荫蔽度要求 60％～80％。石斛喜湿润，怕积水。积水会 使根茎腐烂，叶片脱落而死。当移栽苗根伸 长后，每月用MS大量元素1000倍稀释液喷施 追肥，促进生长发育。
•种子外植体培养： 种子胚萌发→愈伤组织诱导→原球茎诱导→原球茎分化→ 发芽等过程 种子诱导出无菌苗的时间在20~35天之间， 种子诱导率一般为75%~90% ， ·茎段外植体培养：
茎段→丛生芽→完整植株 茎段外植体自植入培养基中10天后，其茎节部芽体就出现 突起，并产生丛生芽族，不仅生长快，而且芽体粗壮。 30天后能生成健壮完整的芽体，不需要经历原球茎诱导阶 段 茎段诱导率为90%~98% ；
主要作用是洗去外表尘土和大颗粒菌落、 菌丝等。
②材料二次消毒灭菌
将上述完成后的材料带到无菌室超净工作 台上，进行二次消毒灭菌: 将茎段腋芽的苞叶 拨去。
栽培技术：铁皮石斛组培瓶苗的方法
栽培技术：铁皮石斛组培瓶苗的方法铁皮石斛是石斛中的极品，具有独特的养阴生津效果，受到历代医家和医学典籍的推崇。
近年来，随着市场铁皮石斛逐步升温，需求量变得越来越大，继而出现了供不应求的现象。
但铁皮石斛这种植物却并不那么容易育苗，为了解决这一难题，小编经过多方查找资料，为大家推荐一款使用组培瓶苗的方式繁殖铁皮石斛幼苗的方法。
简单来说，就是巧用玻璃瓶通过组培的方式来培育铁皮石斛的种苗。
不过，虽然这种方法比较有效，若想要提高组培秒的成活率，那还需要我们掌握一定技术的。
农产信息网一、组培组培瓶苗是通过提炼铁皮石斛的细胞，再科学利用无性繁殖的原理，经过进行培育及后续转到瓶中育苗的一种方法。
期间，我们要调节好环境温度、空气湿度、光照强弱、通风效果及所需养分等因素，尽可能为铁皮石斛创造出适宜其生长的野外生长环境。
而这些因素恰恰制约着组培瓶苗的生长状况、种苗质量及成活率。
所以，我们应当掌握一定的科学技术来完成这项工作。
二、炼苗在铁皮石斛成功组培苗后，在移栽上盆之前，我们还需要对其进行炼苗，为上盆恢复正常的生长状态打好基础。
所以，移栽上盆之前，有必要让瓶苗经过炼苗，让其逐步适应生长环境的变化。
炼苗，首先需要将瓶苗置于一个合适的位置，让其从封闭的状态下适应开放的环境。
移栽上盆前，要让种苗适应从小环境到大环境的自然过渡；等到幼苗叶色加深且根茎更健壮时，同时具备3-4片新叶且在无病虫害的情况下方可进行移栽上盆。
农产信息网三、洗苗洗苗也是成功种植铁皮石斛的一个重要环节，洗苗方法正确与否，将直接应当到上盆定植后的成活比例，所以清洗幼苗是非常关键的。
首先需要将瓶苗连同培养基一并取出，然后甄别优劣并挑选出优质苗，接下来用干净的清水对其清洗2-3次，直到洗净为止。
之后，用消毒液对幼苗根系小心进行消毒处理，再将幼苗置于阴凉通风的地方晾干多余的水分。
四、驯化经过驯化的铁皮石斛幼苗具有成活率高、易栽植，且成分与功效不受影响的特点。
所以，我们需要对幼苗进行驯化，从而提高大苗的成活率。
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖(1)
移栽前， 先将试管苗练苗 １ 周， 出瓶时注意 不要伤及根茎部， 用流水洗去根部附着的培养基 后， 在阴凉通风处晾根半天， 栽入盛锯木屑和塘 基兰石的穴盘中， 或者混合基质（ ２ 份陶粒 ＋１ 份 腐叶土 ＋１ 份树皮 ＋１ 份锯木屑） ，（ 下转第 １３ 页）
时， 立即喷药防治， 使用的药物与防治红蜘蛛的药
物一样。
４．５ 蚧类
主要有吹绵蚧、盾蚧类等， 为害枝条和果实，
削弱树势， 诱发煤烟病， 降低果实的产量和品质。
防治方法： 冬季用 １６￣２０ 倍液的松脂合剂清园，
并剪去虫枝。防治重点掌握在 ５～６ 月间第 １ 代若
虫盛发期连续喷药 ２ 次， 使用的药剂有： ４０％ 氧化
柑桔类的病虫害种类较多， 介绍几种主要病 虫害的为害症状及防治方法。 ４．１ 疮痂病
主要为害嫩枝叶、幼果。叶片染病开始出现水 渍状小斑点， 后成蜡黄色。果实受害后常长出许多 瘤状突起。防治方法： 第 １ 次在春芽萌动 １ 粒米长 时， 第 ２ 次在谢 花结束时， 各 喷 １ 次 ５０％ 退 菌 特 ５００ 倍液或 ７０％ 甲基托布津 ８００ 倍液。 ４．２ 炭疽病
将增殖后的胚状体转到（ ８） 中壮苗， 可提高 植株的健壮度， 培养 ３０ 天后再转到培养基（ ９） 、 （ １０） 、（ １１） 中 ，（ ９） 、（ １０） 号 培 养 基 迅 速 分 化 长出具根的小苗， ６０ 天后形成的丛生苗已具 ３ 片 真叶和 ４ 条 ３￣５ｃｍ 长的根。（９） 号培养基苗高可 达 ５￣６ｃｍ， 但苗基部易产生丛芽， 不利于试管苗的 移栽， 所以（ ９） 号培养基更有利于生根移栽。 ３ 试管苗的移栽
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铁皮石斛的组织培养研究专业班级：姓名：学号：课程：植物组织培养目录摘要 (3)Abstract (4)前言 (5)1. 培养基 (6)配方 (6)配制（以1000ml 幼株的生根壮苗培养基为例） (6)灭菌 (8)2. ............................................................ 转接9转接前准备 (9)转接 (9)培养 (9)3. .......................................................... 炼苗10炼苗目的 (10)炼苗方法 (10)4. .......................................................... 移栽11基质选择 (11)移栽技术要求 (11)5. 结论与分析 (12)参考文献 (13)摘要铁皮石斛(De ndrobium offic in ale )是兰科(Orchidaceae)石斛属(De ndrobiumSw)多年生草本植物。
铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。
铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。
铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。
为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。
关键词：铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖AbstractDendrobium orchid Dendrobium is a perennial herb. It is the ultimate in DendrobiumSw,namedfor its ferric green a rare traditional Chinese herbal medicine,it contributes to dry dampness and strengthen the spleen,clear away lung-heat ,nourish yin ，clear away heat ,and so main medicinal components of Dendrobium polysaccharide is a kind of immune mature,its capsule cracks,in which seeds are in small particle size and have a low rate of natural order to protect and utilize the Dendrobium orchid Dendrobium ,it is particularly important to establish a rapid propagation by the tissue culture technique .key words: Dendrobium orchid Dendrobium tissue cultureculture medium adapter rapid propagation前言多年生草本，具有气生根。
茎直立丛生、高30-50cm,肉质稍扁，有节、有槽沟，黄绿色。
单叶互生，叶片革质，无柄，狭长椭圆形或近披针形，叶鞘抱茎。
总状花序腋生，每个花序有花2-3 朵，白色，先端淡紫红色。
铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物。
作为我国传统的名贵中药, 具有重要的药用价值。
由于长期过度采挖, 加之本身繁殖率低,导致其野生资源急剧减少日趋濒危, 现已被列为国家重点保护植物, 成为国家重点保护的药材品种。
试验结果表明，MS N6和B5等3种基本培养基对铁皮石斛芽诱导和增殖的效果,B5要优于其他基本培养基；在激素浓度配中,铁皮石斛原球茎在L+L中,增殖系数最大; 天然附加物对铁皮石斛增殖的影响差异很大, 实际应用中宜选用香蕉汁为添加剂；在B5+蔗糖30g/L+香蕉汁100mg/L+琼脂L基本培养基中,加入的NAA寸铁皮石斛芽的生根以L处理的效果最好，但考虑到NAA介格较贵,且在浓度范围为之间对生根的影响差异不明显，在实际应用中以选用L的NAA为好；生成的小苗经过炼苗后, 在铺有一层苔藓的含有75％锯末+20％泥炭土+5％碎磁片的基质上能够良好的生长。
1. 培养基配方根据不同阶段，培养基配方有所差异。
如表1-1表1-1各种培养基配方不同阶段培养基备注愈伤组织（原球”、“MS+L6-BA+3蔗糖+%琼脂pH= 茎）的诱导原球茎的增殖MS+20马铃薯+3%蔗糖+%琼脂pH =k丄卄”八八MS+20马铃薯+LNAA+3蔗糖+%琼原球茎的分化- pH=脂MS+10香蕉+LNAA+3蔗糖+%琼脂pH= 幼株的生根壮苗配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例）配方：10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+%琼脂（w/w）+L NAA 1）量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中，加热至沸腾；2）准确称量100g香蕉果肉，切成碎片状，并倒入上述烧杯中，加热煮沸5mi n，其间搅拌使之充分溶解；3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机I、有机U顺序，量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水的烧杯，混合均匀；4）将2）和3）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA （ml），混合均匀；5）加热至沸腾，加入8g琼脂并煮沸5min，其间不断搅拌使之充分溶解；6）冷却至50± 5C时，调pH至一。
分装于培养瓶内，瓶。
培养基附加物：（1）天然添加物在基本培养基中加人香蕉汁、马铃薯汁、绿豆芽汁、苹果汁仁、椰子乳等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育，香蕉汁的促进作用最为显著（2）炭源铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长，能使根系长得更加粗壮闭。
唐桂香等认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率，但对苗的根数和根长影响小。
注意事项①溶解香蕉的蒸馏水尽可能多，以确保香蕉各种成分完全溶解；②各种母液混合时，要按照大量、微量、Fe2+盐、有机I、有机U的顺序;③煮沸时，小心溶液溢出；④分装时不要污染培养瓶瓶口。
灭菌培养基灭菌1）检查灭菌锅的水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表，确保灭菌锅各指标和功能的正常，以防事故发生；2）把带灭菌的培养基装入锅内，盖上锅盖，对称而均匀地扭紧螺丝；3）打开电源和排气阀，调节电压至220V;4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后，关闭排气阀；5）当温度上升到121C后，调节电压至135V,保持20min；6）关闭电源，使之自动降温至0C。
10min后，打开排气阀和锅盖；7）5—10min后，取出培养基放于试验台上冷却，待用。
表1-2灭菌时间统计阶段单锅火困（耗时-64mi n）多锅连续火菌第一锅（耗时63mi n）第二锅（耗时46mi n）起始22:218:049:30排气22:418:239:43T=121C22:508:329:50关闭电源23:108:5210:10气压降至023:259:0710:16外植体灭菌①原材料清洗选择生长旺盛、无病害的铁皮石斛健康植株，每2节为一段放入500ml的烧杯中，加入少量洗衣粉，用纱布单层棚扎杯口，然后用工程线扎紧，放在自来水龙头下冲洗30min,冲水量调整到能使铁皮石斛茎段在水中漂动为好。
主要作用是洗去外表尘土和大颗粒菌落、菌丝等。
②材料二次消毒灭菌将上述完成后的材料带到无菌室超净工作台上，进行二次消毒灭菌：将茎段腋芽的苞叶拨去。
70%的酒精速浸25s，用％勺升汞溶液浸泡10min用无菌水冲洗5次，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，以去掉表面药物残留。
2. 转接转接前准备1）培养皿、镊子、剪刀等转接用具的灭菌（可以在培养基灭菌时附带）；2）检查超净台内各种用具，及时补充酒精灯的酒精，确保用具齐全；3）放置待转接材料和待接入培养基，以“方便操作为宜”而陈列；转接1）揭去防尘膜，打开电源、通风和紫外灯，灭菌15—20min；2）关掉紫外，打开白炽灯，用75%酒精仔细擦拭手指、指甲、材料瓶瓶盖及盖边缘、工作区等处，确保“消毒”彻底；3）点燃酒精灯，用无菌镊子把材料夹取于无菌培养皿内，挑选生命力旺盛的植株用于转接；4）用无菌剪刀修去多余的根系，“双镊子”法将材料转接于新的培养基中；5）标注相关日期和品系，转至培养室培养。
注意事项①操作时，所有用具均不能从“核心工作区”和开启的培养瓶上面晃过，防止细菌落入而导致污染；②在打开材料瓶和培养瓶后，其盖均在酒精灯外焰灼烧3-5s，瓶口灼烧5-10s ；盖瓶盖时，亦如此操作；③转接时，确保手一直在超净台内，以免带入外界细菌。
培养石斛组培常用的温度为（26 ± 1）C光强1 600 〜2 000 lx日照光8~12h/d（1）组培苗在光照度为2000IX，温度以22 C为宜。
（2）在20 一22 C时丛生芽增殖较好，温度超过25 C丛生芽就开始分化成苗。
待增殖芽数量较多时，将高1〜2cm带有2〜3片叶的小芽切下转入生根培养基上进行生根培养。
培养30天左右，基部开始出现2〜3条约1cm长的白色根, 随后逐渐伸长，生根率达到90％以上。
3. 炼苗炼苗目的炼苗的主要目的是使组培苗适应外界的环境——温差，湿度差以及微生物环境。
炼苗方法1）将待炼苗的材料放置于欲移栽的环境，不开盖保持4-5 天；2）半开盖保持1-2 天后，全开盖再炼苗2-3 天；方法（整个过程：适应期，半开瓶期，开瓶期，出瓶，并移栽）。
洗根，浸泡，移栽或框炼4. 移栽基质选择栽培的基质为火山岩1+椰衣2+木炭1 的基质配比石斛兰长势最好，椰衣1+ 水苔1 和块状椰衣的基质配比稍微次之。
多数树皮中含有较多的酚类物质，这对于植物是有害的，而且树皮的C/N 比值都较高，直接使用会引起微生物对速效氮的竞争作用，造成N素缺乏，树皮保水性能差。
移栽技术要求将已经灭菌地石斛茎段，在无菌条件下切成至少带有一个茎节地茎段，接种于事先准备好的诱导芽培养基中诱导出芽。
从茎尖或茎段培养得到的小苗，大多数是无根小苗，需转入1/2MS加马铃薯进行生根和壮苗培养，才能出管移栽。
铁皮石斛不宜深植，种植时根系向四周均匀展开，将基质填充根部、基部必须露出，否则易造成烂根。
移栽后隔5 天再浇水效果较好。
30天内每隔1 天喷雾1 次，水量不宜过多，期间勿施肥，待小苗恢复正常生长后才开始常规的水肥管理。
移栽后期管理营养生长期施用氮肥较高的花多多复合肥( N:P:K=30:10:10 )，花芽分化期开始施偏重磷钾肥( N:P:K=10:30:20 )，其余时期施( N:P:K=15:20:25 )以促进假鳞茎的生长，采用“薄肥多施”的原则，施肥频率为1 次/1 周，浓度为%叶面喷施，雨天不施肥。