微生物基础实验技术回顾(ppt)
合集下载
微生物学实验ppt课件
器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。
微生物实验室基本能力和要求PPT演示课件
功能
微生物实验室在医学、生物科学、环境科学等领域发挥着重要作用，如病原微 生物的检测与鉴定、抗生素的筛选与研发、环境微生物的监测与治理等。
微生物实验室的重要性
保障公共卫生安全
通过对病原微生物的检测和鉴定， 及时发现和控制传染病的爆发和 传播，保障公众的健康和安全。
推动生物科学发展
微生物实验室是进行微生物学基础 和应用研究的重要场所，为新药物、 新疫苗的研发提供技术支持和保障。
仪器设备与配置
基本仪器
包括显微镜、培养箱、高 压蒸汽灭菌器等常用微生 物实验仪器。
专用仪器
根据实验需求配置如PCR 仪、全自动生化分析仪等 专用仪器。
仪器维护与校准
建立仪器维护和校准制度， 确保仪器的正常运行和准 确性。
实验技术与方法
基本实验技术
掌握微生物培养、分离、鉴定等基本实验技术。
分子生物学技术
阐述了微生物实验室质量控制的必要性，介绍了实验室内部质量控制和外部质量评估的方法和标准， 强调了持续改进的重要性。
学员心得体会分享
知识收获
通过本次课程，学员们对微生物 实验室的基本能力和要求有了更 深入的了解，掌握了微生物检测 与鉴定的基本技术和方法。
技能提升
通过实践操作和案例分析，学员 们的实验技能和解决问题的能力 得到了提升，对微生物实验室工 作有了更全面的认识。
微生物鉴定
通过观察微生物的形态特征、生理生化特性以及血清学反应等， 对微生物进行种类鉴定。
药物敏感性试验及结果解读
药物敏感性试验意义
药物敏感性试验方法
结果解读
了解微生物对抗菌药物的敏感性，指 导临床合理用药。
常用的方法包括纸片扩散法、稀释法等。 通过测定抑菌圈直径或最低抑菌浓度 （MIC）等指标，判断微生物对药物的 敏感性。
微生物实验室在医学、生物科学、环境科学等领域发挥着重要作用，如病原微 生物的检测与鉴定、抗生素的筛选与研发、环境微生物的监测与治理等。
微生物实验室的重要性
保障公共卫生安全
通过对病原微生物的检测和鉴定， 及时发现和控制传染病的爆发和 传播，保障公众的健康和安全。
推动生物科学发展
微生物实验室是进行微生物学基础 和应用研究的重要场所，为新药物、 新疫苗的研发提供技术支持和保障。
仪器设备与配置
基本仪器
包括显微镜、培养箱、高 压蒸汽灭菌器等常用微生 物实验仪器。
专用仪器
根据实验需求配置如PCR 仪、全自动生化分析仪等 专用仪器。
仪器维护与校准
建立仪器维护和校准制度， 确保仪器的正常运行和准 确性。
实验技术与方法
基本实验技术
掌握微生物培养、分离、鉴定等基本实验技术。
分子生物学技术
阐述了微生物实验室质量控制的必要性，介绍了实验室内部质量控制和外部质量评估的方法和标准， 强调了持续改进的重要性。
学员心得体会分享
知识收获
通过本次课程，学员们对微生物 实验室的基本能力和要求有了更 深入的了解，掌握了微生物检测 与鉴定的基本技术和方法。
技能提升
通过实践操作和案例分析，学员 们的实验技能和解决问题的能力 得到了提升，对微生物实验室工 作有了更全面的认识。
微生物鉴定
通过观察微生物的形态特征、生理生化特性以及血清学反应等， 对微生物进行种类鉴定。
药物敏感性试验及结果解读
药物敏感性试验意义
药物敏感性试验方法
结果解读
了解微生物对抗菌药物的敏感性，指 导临床合理用药。
常用的方法包括纸片扩散法、稀释法等。 通过测定抑菌圈直径或最低抑菌浓度 （MIC）等指标，判断微生物对药物的 敏感性。
《环境工程微生物学》PPT演示课件
《环境工程微生物学》 PPT演示课件
目录
• 微生物学基础 • 环境工程中的微生物应用 • 微生物检测与评价方法 • 环境工程微生物实验技术 • 环境工程微生物学前沿研究动态 • 总结与展望
01
微生物学基础
微生物概述
微生物的定义与特点 01
微生物的多样性 02
微生物在环境工程中的意义 03
微生物分类与形态
常见环境工程微生物实验操作
微生物的分离与纯化
介绍从环境样品中分离和纯化微生物的方法和步骤，如平板划线 法、稀释涂布法等。
微生物的培养与计数
详细讲解微生物的培养条件、培养基的配制以及微生物的计数方法， 如平板计数法、比浊法等。
微生物的生理生化实验
介绍常见的微生物生理生化实验，如糖发酵实验、蛋白质分解实验 等，用于鉴定不同种类的微生物。
免疫学方法
通过抗原-抗体反应，检测微生物特定抗原或抗体的存在，具有高 度的特异性和敏感性。
生物传感器法
利用生物活性物质（如酶、抗体等）作为识别元件，结合换能器将生 物信号转换为电信号进行检测，具有快速、准确、自动化等优点。
环境工程微生物评价指标体系
微生物多样性指数
通过测定环境中微生物的种类、数量 及其分布情况，评价环境的微生物多
废气处理中的微生物技术
01 生物滤池法
利用附着在滤料上的微生物降解废气中的有机物， 如挥发性有机化合物（VOCs）。
02 生物洗涤法
将废气通入含有微生物的营养液中，通过微生物 的代谢活动去除废气中的污染物。
03 生物滴滤法
在生物滤池的基础上，通过向滤料上喷洒营养液， 提高微生物的活性，增强废气处理效果。
环境工程领域的微生物技术应用需要稳定的微生物群落支持，如何维持
目录
• 微生物学基础 • 环境工程中的微生物应用 • 微生物检测与评价方法 • 环境工程微生物实验技术 • 环境工程微生物学前沿研究动态 • 总结与展望
01
微生物学基础
微生物概述
微生物的定义与特点 01
微生物的多样性 02
微生物在环境工程中的意义 03
微生物分类与形态
常见环境工程微生物实验操作
微生物的分离与纯化
介绍从环境样品中分离和纯化微生物的方法和步骤，如平板划线 法、稀释涂布法等。
微生物的培养与计数
详细讲解微生物的培养条件、培养基的配制以及微生物的计数方法， 如平板计数法、比浊法等。
微生物的生理生化实验
介绍常见的微生物生理生化实验，如糖发酵实验、蛋白质分解实验 等，用于鉴定不同种类的微生物。
免疫学方法
通过抗原-抗体反应，检测微生物特定抗原或抗体的存在，具有高 度的特异性和敏感性。
生物传感器法
利用生物活性物质（如酶、抗体等）作为识别元件，结合换能器将生 物信号转换为电信号进行检测，具有快速、准确、自动化等优点。
环境工程微生物评价指标体系
微生物多样性指数
通过测定环境中微生物的种类、数量 及其分布情况，评价环境的微生物多
废气处理中的微生物技术
01 生物滤池法
利用附着在滤料上的微生物降解废气中的有机物， 如挥发性有机化合物（VOCs）。
02 生物洗涤法
将废气通入含有微生物的营养液中，通过微生物 的代谢活动去除废气中的污染物。
03 生物滴滤法
在生物滤池的基础上，通过向滤料上喷洒营养液， 提高微生物的活性，增强废气处理效果。
环境工程领域的微生物技术应用需要稳定的微生物群落支持，如何维持
微生物总结_PPT幻灯片
五种有益微生物的应用形式微生物发酵原料灭菌接种微生物发酵发酵产品提取纯化代谢产物微生物代谢产物的修饰和改造菌体有益微生物在食品工业中的应用形式?微生物菌体的应用?微生物发酵食品的应用?微生物代谢产物的应用?微生物酶制剂的应用?微生物在食品工厂废弃物处理方面的应用第二部分微生物分类鉴定进展微生物的命名学名scientificname林奈的双名法binominalnomenclature生物界的分类及微生物在生物界中位置六界系统五界系统1969年whittaker三大领域woese16srrna序列分析比较提出将生物分成为三界kingdom后来改称三个域
2021/3/10
25
第九版伯杰氏细菌鉴定手册设立35个群，将古 细菌部改编为5个群，全书描写了约500个属。
划分为四大类： 第一类 具细胞壁的革兰氏阴性真细菌 第二类 具细胞壁的革兰氏阳性真细菌 第三类 无细胞壁的真细菌 第四类 古细菌
1984-1989年陆续出版的四卷册《伯杰氏系统 细菌学手册》第一版，在着重于表观特征描述 的基础上，结合化学分类、数值分类特别是 DNA相关性分析，及16S rRNA寡核苷酸编目 在生物种群间的亲缘关系研究中的应用作了详 细的阐述，体现了细菌分类的研究从表观向系 统发育体系的发展。除此，还附有每个菌群的 生态、分离、保藏及鉴定的方法。
B：核酸分子杂交——DNA-DNA和DNA-RNA 杂交
C：16SrRNA寡核苷酸编目分析
微生物分类方法
1.传统分类法（classical classification） 以细菌的形态和生理生化特征为依据。
2.数值分类法（numerical classification） 20世纪60年代兴起，细菌的各种生物学性状“等重要 原则”分类，性状数量超过50个。
2021/3/10
25
第九版伯杰氏细菌鉴定手册设立35个群，将古 细菌部改编为5个群，全书描写了约500个属。
划分为四大类： 第一类 具细胞壁的革兰氏阴性真细菌 第二类 具细胞壁的革兰氏阳性真细菌 第三类 无细胞壁的真细菌 第四类 古细菌
1984-1989年陆续出版的四卷册《伯杰氏系统 细菌学手册》第一版，在着重于表观特征描述 的基础上，结合化学分类、数值分类特别是 DNA相关性分析，及16S rRNA寡核苷酸编目 在生物种群间的亲缘关系研究中的应用作了详 细的阐述，体现了细菌分类的研究从表观向系 统发育体系的发展。除此，还附有每个菌群的 生态、分离、保藏及鉴定的方法。
B：核酸分子杂交——DNA-DNA和DNA-RNA 杂交
C：16SrRNA寡核苷酸编目分析
微生物分类方法
1.传统分类法（classical classification） 以细菌的形态和生理生化特征为依据。
2.数值分类法（numerical classification） 20世纪60年代兴起，细菌的各种生物学性状“等重要 原则”分类，性状数量超过50个。
微生物基础ppt课件
细菌
真菌
病毒
原虫
4
微生物的相对大小
微生物大小的直观感觉
可见范围
微生物的相对大小
肉眼
真核细胞型
光学显微镜 电子显微镜
原核细胞型
病毒
5
微生物的分类
细菌
真菌
原核细胞型微生物
真核细胞型微生物
有没有真正的细胞核
病毒
细 胞 型微生物
非细胞型微生物
6
微生物和人类的关系
维持自然界生态平衡 食品酿造 医疗制药 作为正常菌群，维持人体正常功能 特定情况下，某些微生物可以导致疾病
UU) 生殖器支原体(M.genitalium, MG)
55
支原体---特点和致病
✓ 介于细菌和病毒之间，能独立生活的最小微生物。
✓ 无细胞壁
✓ 肺炎支原体可引起呼吸道感染
✓ 支原体可引起生殖道感染，不孕，流产早产，低出生体重儿 和胎儿畸形，新生儿结膜炎和肺炎。
支原体肺炎
无论是免疫功能正常还是有免疫功能不全的人均可发生呼吸道感染
2.细胞膜
磷脂双层生物膜
3.细胞质
核糖体是蛋白质合成场所 质粒是染色体外的遗传物质
4.核质
核质包含染色体，是细菌的遗传物质21
请说出下面细菌的结构
核糖体
细胞壁 细胞膜
细胞质 核质
22
连连看
细胞壁
核糖体
细胞膜
DNA
细胞质
肽聚糖
核质
脂质双层生物膜
23
目录
微生物简介 细菌的特点和结构 细菌的分类与命名 临床常见的致病菌介绍 非典型病原体的概念 细菌感染与人体防御
45
革兰阴性杆菌——军团菌属
微生物技术及应用PPT课件-2024鲜版
生长曲线的调控与优化 讲解如何通过改变培养条件或使用特定的生长因子等手段， 调控和优化微生物的生长曲线，以满足实验或生产需求。
10
03
微生物代谢与发酵技术
2024/3/28
11
微生物的代谢途径与调控
糖代谢途径
包括糖酵解、三羧酸循 环等，产生ATP和还原
力。
2024/3/28
氮代谢途径
包括氨基酸、核苷酸和 蛋白质的代谢，合成细
2024/3/28
33
微生物在医药工业中的应用
生产抗生素
利用微生物发酵技术生产抗生素，如青霉素、链霉素等，用于治疗 各种细菌感染。
生产疫苗
利用微生物培养技术生产疫苗，如麻疹疫苗、流感疫苗等，用于预 防传染病。
生产酶制剂
利用微生物发酵技术生产酶制剂，如淀粉酶、蛋白酶等，用于促进药 物合成和分解。
2024/3/28
研究微生物生长、底物消耗和 产物生成的动力学关系。
发酵设备与技术
包括发酵罐设计、传质与传热、 在线监测与控制等。
2024/3/28
13
发酵产品的分离与纯化
预处理
去除发酵液中的菌体、杂质等， 提高后续分离纯化效率。
2024/3/28
分离方法
包括萃取、吸附、膜分离等，根 据目标产物的性质选择合适的分 离方法。
医学领域
利用微生物技术生产疫苗和诊断试剂， 预防和治疗各种传染病和慢性病。此 外，基因工程和细胞工程等技术在医 学领域也有广泛应用。
2024/3/28
农业领域
利用微生物肥料和生物农药等技术， 提高农作物产量和品质，减少化学肥 料和农药的使用。
环境领域
利用微生物处理污水和废气等环境污 染物，以及进行环境监测和评价等工 作。
10
03
微生物代谢与发酵技术
2024/3/28
11
微生物的代谢途径与调控
糖代谢途径
包括糖酵解、三羧酸循 环等，产生ATP和还原
力。
2024/3/28
氮代谢途径
包括氨基酸、核苷酸和 蛋白质的代谢，合成细
2024/3/28
33
微生物在医药工业中的应用
生产抗生素
利用微生物发酵技术生产抗生素，如青霉素、链霉素等，用于治疗 各种细菌感染。
生产疫苗
利用微生物培养技术生产疫苗，如麻疹疫苗、流感疫苗等，用于预 防传染病。
生产酶制剂
利用微生物发酵技术生产酶制剂，如淀粉酶、蛋白酶等，用于促进药 物合成和分解。
2024/3/28
研究微生物生长、底物消耗和 产物生成的动力学关系。
发酵设备与技术
包括发酵罐设计、传质与传热、 在线监测与控制等。
2024/3/28
13
发酵产品的分离与纯化
预处理
去除发酵液中的菌体、杂质等， 提高后续分离纯化效率。
2024/3/28
分离方法
包括萃取、吸附、膜分离等，根 据目标产物的性质选择合适的分 离方法。
医学领域
利用微生物技术生产疫苗和诊断试剂， 预防和治疗各种传染病和慢性病。此 外，基因工程和细胞工程等技术在医 学领域也有广泛应用。
2024/3/28
农业领域
利用微生物肥料和生物农药等技术， 提高农作物产量和品质，减少化学肥 料和农药的使用。
环境领域
利用微生物处理污水和废气等环境污 染物，以及进行环境监测和评价等工 作。
高中生物选修1微生物的实验室培养ppt(共54张PPT)
稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结 合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想， 第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如， 酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触 任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后
分装前，要进行的是
。 调整pH
（6）右表中各成分重量确定的原则
是 依微生物的生长需要确定 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该
增加的成分
琼脂（或凝固。剂）
一、课题目标：
了解有关微生物及培养基的基础知识，进 行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
青霉
生殖 孢子生殖
直立菌丝 营养菌丝
腐生生活
（二）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制
而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌 大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源，如葡萄糖；
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
病原微生物实验规则和基本实验技术ppt
2、增菌（营养）培养基enrich medium：在基础培养基中加入血液、血 清、酵母浸膏或生长因子等物质，专供营养要求高的或特殊要求的细 菌生长。如：血琼脂平板。
3、选择培养基selective medium：利用不同细菌对某些化学物质敏感性 不同的性质，在培养基中加入一定量该化学物质，抑制某些细菌的生 长，利于另一些细菌的生长，从而从混杂众多细菌的样品中特异分离 出目的菌。如：分离肠道杆菌的SS培养基。
第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动 物疾病的微生物，如：小鼠白血病病毒。
（二）生物安全实验室分类
生物安全实验室（Biosafety Laboratory，BSL）， 在结构上由一级防护屏障（安全设备）和二级防护屏障 （设施）两部分硬件构成。根据安全设备和设施的不同 组合，构成了四级生物安全防护水平 ：
（第一类和第二类称为高致病性病原微生物。医学微生物学教学实验 中使用的微生物主要为第三类和第四类病原微生物）
第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一 般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险 有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治 疗和预防措施的微生物，如：HBV、登革病毒、破伤风梭 菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。
显微镜按要求维护好，登记并对号放入柜中。 （七）每次实验课后，按排值日。 （八）洗手后离开实验室。
三、实验室生物安全简介
（一）病原微生物分类： 为确保操作人员和环境的安全，2004年国务院发布
并实施《病原微生物实验室生物安全管理例》。根据 病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害 程度，将病原微生物分为四类。
五、无菌观念和操作
认识消毒、灭菌、无菌操作的重要意义，学习基本的无菌操作方法。
3、选择培养基selective medium：利用不同细菌对某些化学物质敏感性 不同的性质，在培养基中加入一定量该化学物质，抑制某些细菌的生 长，利于另一些细菌的生长，从而从混杂众多细菌的样品中特异分离 出目的菌。如：分离肠道杆菌的SS培养基。
第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动 物疾病的微生物，如：小鼠白血病病毒。
（二）生物安全实验室分类
生物安全实验室（Biosafety Laboratory，BSL）， 在结构上由一级防护屏障（安全设备）和二级防护屏障 （设施）两部分硬件构成。根据安全设备和设施的不同 组合，构成了四级生物安全防护水平 ：
（第一类和第二类称为高致病性病原微生物。医学微生物学教学实验 中使用的微生物主要为第三类和第四类病原微生物）
第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一 般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险 有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治 疗和预防措施的微生物，如：HBV、登革病毒、破伤风梭 菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。
显微镜按要求维护好，登记并对号放入柜中。 （七）每次实验课后，按排值日。 （八）洗手后离开实验室。
三、实验室生物安全简介
（一）病原微生物分类： 为确保操作人员和环境的安全，2004年国务院发布
并实施《病原微生物实验室生物安全管理例》。根据 病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害 程度，将病原微生物分为四类。
五、无菌观念和操作
认识消毒、灭菌、无菌操作的重要意义，学习基本的无菌操作方法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
物表、污水、污物、排泄物、分泌物 • 注意事项：密闭干燥保存；消毒后去除残留；
使用液不稳定，加盖，有效期； 对织物漂白，对金属腐蚀用； 操作时应做好个人防护。
化学消毒灭菌
二、过氧乙酸
酸性透明液体，易挥发易分解，爆炸危险。 • 杀菌能力：灭菌，高水平消毒 • 适用范围：餐饮具、果蔬、环境、物表、空气。 • 薰蒸消毒：18-20%过氧乙酸5-6 ml（1g）/m3，
无菌操作技术
无菌操作的要求：
（1）在操作中不应有大幅度或快速的动作； （2）使用玻璃器皿应轻取轻放。 （3）在火焰上方操作； （4）接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌； （5）在接种培养物时，协作应轻、准。 （6）不能用嘴直接吸吹吸管。 （7）带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的微生物，以免污染环境
微生物的接种方法
一、斜面接种
将已长好微生物移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微 生物的接种。左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。 用右手先将塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手 掌拨下塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌 后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或 直线。
E.g.：手提式高压蒸汽灭菌器。用于微生物实验 和少量培养基灭菌，一般0 .105MPa在25 到30分钟即可。
干热消毒灭菌，一般用于破璃仪器 如试管、三角 瓶、培养皿等, 灭菌温度在160 ℃, 维持60 分钟。
物理消毒灭菌
二、紫外线辐射灭菌
可达高水平消毒，使用方便；但由于对人皮肤黏膜有刺 激作用，并产生臭氧，在有人情况下使用受到限制。 • 适用范围：室内空气消毒、水的消毒、能直接照射到的 光滑物体表面的消毒。
放瓷或玻璃容器中，加热密闭薰蒸1-2h。 • 喷雾消毒：0.1-0.5%，20ml/m3，作用1h。 • 注意事项：性质不稳，用前配，有盖塑料容器；
对金属腐蚀，对织物漂白作用； 操作时应做好个人防护； 消毒完成后用清水去除残留。
化学消毒灭菌
三、乙醇
别名酒精，无色透明液体，易挥发，易燃烧 。 • 杀菌能力：中水平消毒 • 适用范围：手、皮肤、小面积物表、医疗器械 • 使用方法：手与皮肤用75%溶液擦拭1min
紫外线在水中穿透力随着深度的增加而降低
物理消毒灭菌
三、高效过滤除菌
高效过滤除菌技术，对空气中≤0.3μm颗粒与微生物的 阻留率能达到99.97 %以上。 • 适用范围：主要用于生物安全柜与生物安全实验室的空 气净化除菌。 • 注意事项： * 必须定期更换高效过滤器（HEPA）， * 更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒， * 更换时严格做好工作人员防护； * 换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的单位焚烧处 理。
微生物培养（micro culture) 是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、 放线菌、真菌等。
微生物的接种方法
接种的基本程序
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的微生物，以免污染标本
沾取标本 接种
•操作需在无菌室或超净工作台内进行 •无菌室、超净工作台使用前后需进行 消毒。 •实验使用的物品使用前后需严格灭菌
微生物基础实验技 术回顾(ppt)
（优选）微生物基础实验技术 回顾
消毒与灭菌
消毒（disinfectant）
是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化 的处理。（不一定包括芽孢）
灭菌(sterilant)
是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使 之达到无菌程度。
常见的消毒灭菌方法
物表用75%溶液浸泡或擦拭10min以上 • 注意事项：乙醇易燃，忌明火；可使蛋白质变性凝固形成
保护层，消毒前应将物品表面的有机物清除， 不宜用于被血、脓、粪便等污染表面消毒；破 坏仪器胶粘物与镜头，橡胶塑料变硬膨胀。
物理消毒灭菌
一、热力消毒和灭菌
是最可靠、首选的消毒灭菌方法。分为湿热消毒和灭菌以及 干热消毒和灭菌。 • 适用范围：耐热物品的消毒和灭菌。 • 常见类型：湿热消毒灭菌主要采用高压蒸汽灭菌。
• 化学消毒灭菌 通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。 消毒对象：物体表面、空气、污染物品等。 消毒方式：擦洗、熏蒸、浸泡等。
• 物理消毒灭菌 包括高压蒸汽、紫外线、焚烧、HEPA过滤除菌等。
化学消毒灭菌
一、含氯消毒剂
• 常用含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯、三氯等 • 常用剂型：粉剂、片剂、液体 • 杀菌能力：高水平消毒；1000-5000mg/L浓度。 • 适用范围：饮用水、餐饮具、果蔬、环境、
微生物的接种方法 一、斜面接种
1.两支试管呈“V”字形 3.火焰上微烧一周 5.接种、划线
2.拔下试管塞 4.接种环灼烧、冷却 6.塞上塞子，灼烧接种环
微生物的接种方法
消毒与灭菌的区别
• 消毒只要求场所与物品达到无害化水平，而灭菌 则要求达到没有一个活菌存在。
• 两者选用的处理方法不同。灭菌与消毒相比，要 求更高，处理更难。
• 应用的场所与处理的物品也不同。
无菌操作技术
无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类 微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
无菌操作目的： 保证待检物品不被环境中微生物污染； 防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员。
无菌操作技术
无菌操作材料： 接种工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
无菌操作技术
无菌操作材料： 材料 器械和用品：酒精灯、记号笔、标签、火柴、灭菌培 养皿、无菌水、试管架 菌种 培养基：
消毒桶内消毒。
无菌操作技术
无菌操作技术
微生物接种、分离纯化与培养
接种（inoculate/vaccinate） 是指按无菌操作技术要求将目的微生物移接到培养基质中的过 程。
微生物的分离纯化（ isolation aቤተ መጻሕፍቲ ባይዱd purification of microorganisms）
将特定的微生物个体从群体中或从混杂的微生物群体中分离出 来的技术叫作分离；在特定环境中只让一种来自同一祖先的微生 物群体生存的技术叫作纯化。
使用液不稳定，加盖，有效期； 对织物漂白，对金属腐蚀用； 操作时应做好个人防护。
化学消毒灭菌
二、过氧乙酸
酸性透明液体，易挥发易分解，爆炸危险。 • 杀菌能力：灭菌，高水平消毒 • 适用范围：餐饮具、果蔬、环境、物表、空气。 • 薰蒸消毒：18-20%过氧乙酸5-6 ml（1g）/m3，
无菌操作技术
无菌操作的要求：
（1）在操作中不应有大幅度或快速的动作； （2）使用玻璃器皿应轻取轻放。 （3）在火焰上方操作； （4）接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌； （5）在接种培养物时，协作应轻、准。 （6）不能用嘴直接吸吹吸管。 （7）带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的微生物，以免污染环境
微生物的接种方法
一、斜面接种
将已长好微生物移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微 生物的接种。左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。 用右手先将塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手 掌拨下塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌 后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或 直线。
E.g.：手提式高压蒸汽灭菌器。用于微生物实验 和少量培养基灭菌，一般0 .105MPa在25 到30分钟即可。
干热消毒灭菌，一般用于破璃仪器 如试管、三角 瓶、培养皿等, 灭菌温度在160 ℃, 维持60 分钟。
物理消毒灭菌
二、紫外线辐射灭菌
可达高水平消毒，使用方便；但由于对人皮肤黏膜有刺 激作用，并产生臭氧，在有人情况下使用受到限制。 • 适用范围：室内空气消毒、水的消毒、能直接照射到的 光滑物体表面的消毒。
放瓷或玻璃容器中，加热密闭薰蒸1-2h。 • 喷雾消毒：0.1-0.5%，20ml/m3，作用1h。 • 注意事项：性质不稳，用前配，有盖塑料容器；
对金属腐蚀，对织物漂白作用； 操作时应做好个人防护； 消毒完成后用清水去除残留。
化学消毒灭菌
三、乙醇
别名酒精，无色透明液体，易挥发，易燃烧 。 • 杀菌能力：中水平消毒 • 适用范围：手、皮肤、小面积物表、医疗器械 • 使用方法：手与皮肤用75%溶液擦拭1min
紫外线在水中穿透力随着深度的增加而降低
物理消毒灭菌
三、高效过滤除菌
高效过滤除菌技术，对空气中≤0.3μm颗粒与微生物的 阻留率能达到99.97 %以上。 • 适用范围：主要用于生物安全柜与生物安全实验室的空 气净化除菌。 • 注意事项： * 必须定期更换高效过滤器（HEPA）， * 更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒， * 更换时严格做好工作人员防护； * 换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的单位焚烧处 理。
微生物培养（micro culture) 是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、 放线菌、真菌等。
微生物的接种方法
接种的基本程序
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的微生物，以免污染标本
沾取标本 接种
•操作需在无菌室或超净工作台内进行 •无菌室、超净工作台使用前后需进行 消毒。 •实验使用的物品使用前后需严格灭菌
微生物基础实验技 术回顾(ppt)
（优选）微生物基础实验技术 回顾
消毒与灭菌
消毒（disinfectant）
是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化 的处理。（不一定包括芽孢）
灭菌(sterilant)
是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使 之达到无菌程度。
常见的消毒灭菌方法
物表用75%溶液浸泡或擦拭10min以上 • 注意事项：乙醇易燃，忌明火；可使蛋白质变性凝固形成
保护层，消毒前应将物品表面的有机物清除， 不宜用于被血、脓、粪便等污染表面消毒；破 坏仪器胶粘物与镜头，橡胶塑料变硬膨胀。
物理消毒灭菌
一、热力消毒和灭菌
是最可靠、首选的消毒灭菌方法。分为湿热消毒和灭菌以及 干热消毒和灭菌。 • 适用范围：耐热物品的消毒和灭菌。 • 常见类型：湿热消毒灭菌主要采用高压蒸汽灭菌。
• 化学消毒灭菌 通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。 消毒对象：物体表面、空气、污染物品等。 消毒方式：擦洗、熏蒸、浸泡等。
• 物理消毒灭菌 包括高压蒸汽、紫外线、焚烧、HEPA过滤除菌等。
化学消毒灭菌
一、含氯消毒剂
• 常用含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯、三氯等 • 常用剂型：粉剂、片剂、液体 • 杀菌能力：高水平消毒；1000-5000mg/L浓度。 • 适用范围：饮用水、餐饮具、果蔬、环境、
微生物的接种方法 一、斜面接种
1.两支试管呈“V”字形 3.火焰上微烧一周 5.接种、划线
2.拔下试管塞 4.接种环灼烧、冷却 6.塞上塞子，灼烧接种环
微生物的接种方法
消毒与灭菌的区别
• 消毒只要求场所与物品达到无害化水平，而灭菌 则要求达到没有一个活菌存在。
• 两者选用的处理方法不同。灭菌与消毒相比，要 求更高，处理更难。
• 应用的场所与处理的物品也不同。
无菌操作技术
无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类 微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
无菌操作目的： 保证待检物品不被环境中微生物污染； 防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员。
无菌操作技术
无菌操作材料： 接种工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
无菌操作技术
无菌操作材料： 材料 器械和用品：酒精灯、记号笔、标签、火柴、灭菌培 养皿、无菌水、试管架 菌种 培养基：
消毒桶内消毒。
无菌操作技术
无菌操作技术
微生物接种、分离纯化与培养
接种（inoculate/vaccinate） 是指按无菌操作技术要求将目的微生物移接到培养基质中的过 程。
微生物的分离纯化（ isolation aቤተ መጻሕፍቲ ባይዱd purification of microorganisms）
将特定的微生物个体从群体中或从混杂的微生物群体中分离出 来的技术叫作分离；在特定环境中只让一种来自同一祖先的微生 物群体生存的技术叫作纯化。