1-4-生物实验操作技能指导-李启凡、吕帆、许小凤
初中生物实验指导手册
初中生物实验指导手册目录1.实验室安全须知2.基本实验器材及其用途3.实验方法与步骤示例4.常见的初中生物实验案例介绍5.实验结果记录与分析6.拓展实验项目推荐1. 实验室安全须知在进行任何实验之前，学生们应该了解下列重要的实验室安全须知：•穿戴好个人防护装备，包括实验服、手套和护目镜。
•注意使用化学品时的防护措施，如戴手套、避免直接接触皮肤。
•切勿将食物或饮料带入实验室。
•急救箱的位置及使用方法。
•在老师或助教的指导下进行实验。
2. 基本实验器材及其用途学习初中生物需要使用一些基本的实验器材。
以下是一些常见的器材及其用途：•显微镜：观察细胞结构、观察小型生物等。
•称量瓶/量筒：用于测量液体体积。
•高锰酸钾溶液：氧化剂，常用于观察光合作用。
•培养皿：培养细菌、观察生物生长等。
•实验室试管：用于混合、加热试剂等。
3. 实验方法与步骤示例下面是一个示例实验的方法与步骤，供初中生参考：实验名称：观察酵母的呼吸作用所需材料： - 酵母 - 糖 - 水 - 气球 - 试管步骤： 1. 在一个试管中加入 10ml 的水。
2. 向水中加入适量的糖，并搅拌均匀。
3. 将少量的酵母粉末撒入试管中，并轻轻摇晃使其溶解。
4. 快速地将一个气球套在试管口上，并等待一段时间。
实验结果：随着时间的推移，观察到气球开始膨胀。
这是因为酵母通过呼吸作用将糖分解成二氧化碳和乙醇，产生了气体。
4. 常见的初中生物实验案例介绍在初中生物教学中，有许多常见的实验案例可以供学生们进行。
以下是一些常见的实验案例：•观察植物细胞结构：通过显微镜观察植物细胞的核、质体、细胞壁等结构。
•测量呼吸速率：用酵母进行呼吸作用实验，并观察不同条件下气球膨胀的速率。
•研究光合作用：使用水苔或其他植物叶片，观察光照对光合作用产生的影响。
5. 实验结果记录与分析在进行实验时，学生们应该学会记录实验结果，并进行简单的分析。
例如，他们可以使用表格记录变化、测量结果等。
生物科学实验操作作业指导书
生物科学实验操作作业指导书实验一：制备酵母发酵剂材料：- 酵母粉- 白砂糖- 温水- 塑料瓶- 漏斗- 纸巾- 酒精灯或电炉操作步骤：1. 将塑料瓶清洗干净，并用热水消毒。
将塑料瓶沿纵向切割一条长约10厘米的缝隙，并对折将其打开，使其成为一个小漏斗。
2. 取适量的酵母粉，倒入一个干净的容器中。
3. 加入适量的白砂糖，在酵母粉上撒上一层糖。
4. 将温水倒入塑料瓶中，闭上盖子，摇晃均匀，将盖子重新打开，等待一段时间，观察是否有气泡产生。
5. 若有气泡产生，说明酵母发酵剂制备成功，将其过滤至另一个干净的容器中。
6. 将制备好的酵母发酵剂保存在冰箱中以延长其储存寿命。
实验二：观察酵母的呼吸作用材料：- 酵母发酵剂- 糖水溶液- 试管- 橡皮塞- 数字温度计操作步骤：1. 准备多个试管，并在每个试管中分别加入适量的糖水溶液。
2. 在其中一个试管中添加适量的酵母发酵剂，用橡皮塞封闭试管口。
3. 在剩余的试管中分别分别加入热水、冷水和常温水，作为对照组。
4. 使用数字温度计分别测量各试管中液体的温度，并记录下来。
5. 观察每个试管中是否产生气泡，并记录下观察结果。
6. 根据观察结果，分析酵母在不同温度下的呼吸作用是否受到影响。
实验三：观察叶绿素的光合作用材料：- 鲜绿色植物叶片- 高锰酸钾溶液- 试管- 温水- 酒精灯或电炉- 针筒操作步骤：1. 准备多个试管，并在每个试管中加入适量的高锰酸钾溶液。
2. 从不同植物中采集新鲜的绿色叶片，并将其放入试管中。
3. 使用针筒将试管中的气体抽出，以创建真空条件。
4. 将部分试管放在光照区域，部分试管放在遮光区域，作为对照组。
5. 观察每个试管中的颜色变化，并记录下观察结果。
6. 根据观察结果，分析叶绿素在光照条件下是否参与光合作用。
实验四：观察细菌的生长条件材料：- 琼脂培养基- 干净的培养皿- 细菌培养液- 干净的棉签- 酒精灯或电炉操作步骤：1. 将琼脂培养基倒入干净的培养皿中，使其均匀分布，并让其凝固。
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《生物化学》实验指导书适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。
1.实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2.严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3.进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物开玩笑。
4.实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5.实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。
否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。
6.使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。
7.做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。
8.实验后，要及时完成实验报告。
2006年1月目录生物化学实验细则 (1)目录 (2)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应 (3)实验2 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 (6)实验3 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (11)实验4 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (16)实验5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 (20)实验6 唾液淀粉酶的性质和活力测定 (24)实验7生物氧化与电子传递 (25)实验8 植物体内的转氨基作用 (27)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应（3学时）目的要求1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
3. 了解蛋白质变性与沉淀的关系。
原理在水溶液中，蛋白质分子表面形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒，所以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相类似。
但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的，相对的。
初中生物实验步骤解读
初中生物实验步骤解读第一篇范文：初中学生学习方法技巧学好初中生物的重要性不言而喻，它不仅为高中阶段的深入学习奠定基础，还能培养学生的实验操作能力和科学思维。
本文将从主要学习内容、学习注意事项、主要学习方法和技巧、中考备考技巧以及提升学习效果的策略等方面，详细解读初中生物实验步骤，帮助学生提高学习效果。
一、主要学习内容初中生物实验主要包括以下几个方面的内容：1.生物学基本概念：如细胞、组织、器官、系统等。
2.生物学现象：如生长、发育、遗传、变异等。
3.生物学实验技能：如观察、调查、实验操作等。
4.生物学实验原理：如实验设计、数据处理、实验结果分析等。
二、学习注意事项1.认真听讲：课堂上专心听讲，不懂就问，确保掌握实验原理和操作步骤。
2.积极参与：实验课上，主动参与操作，观察实验现象，提高实践能力。
3.注重安全：遵守实验室规定，使用实验仪器时小心谨慎，确保自身和他人的安全。
4.勤于思考：实验过程中，积极思考问题，分析实验结果，培养科学思维。
三、主要学习方法和技巧1.预习和复习：课前预习实验内容，了解实验原理和步骤；课后复习，巩固实验知识。
2.实践操作：课上认真操作实验，课后可以进行重复实验，加深对实验步骤的理解。
3.总结归纳：对实验过程中的问题和现象进行总结归纳，形成自己的知识体系。
四、中考备考技巧1.熟悉实验教材：对照教材，梳理实验知识点，掌握实验原理和操作步骤。
2.做题巩固：多做中考真题和模拟题，提高实验题解题能力。
3.分析错误：对做题过程中的错误进行分析，找出问题所在，及时改正。
五、提升学习效果的策略1.制定学习计划：合理安排学习时间，确保实验学习的效果。
2.小组讨论：与同学组成学习小组，共同讨论实验问题，取长补短。
3.寻求帮助：遇到实验难题时，及时向老师请教，确保问题得到解决。
通过以上学习方法和技巧，相信初中生在进行生物实验学习时，能够更加得心应手，提高学习效果。
同时，也要注重平时积累，为中考和未来的学习打下坚实基础。
初1年级生物实验室技巧大揭秘
初1年级生物实验室技巧大揭秘
初一年级的生物实验室，对于新手来说，充满了兴奋与好奇。
作为这些实验室中的一员，我要向你们揭示一些技巧和窍门，帮助你们更好地探索和学习。
首先，了解实验室的每一个角落是至关重要的。
墨水瓶子里的液体可能会比你想象中更危险，所以请小心处理。
试管架上的位置并不总是最好的，但是它们总是一个安全的选择。
试验中的化学试剂是非常重要的，不过，还有一些其他可能不太明显的研究材料可以探索，如显微镜的使用。
其次，认真地处理动物。
在这里，我们的角色是保护和照顾每一只昆虫或蛙类。
他们也许不会说话，但它们也需要关心和关注。
避免粗鲁对待他们，这样他们会对你的好奇心更感兴趣。
最后，学会与同学合作。
这是一个重要的技能，对于实验室和生活都有用处。
共享设备，分享想法，并且互相支持，这样我们每个人都可以更好地成长。
总之，初一年级的生物实验室可以是一个令人兴奋的地方，充满了发现和探索的机会。
通过遵循这些技巧和建议，我相信你们每一个人都能在这个环境中找到乐趣和成功。
创意启迪中学生物实验教案分享
创意启迪中学生物实验教案分享实验名称：观察酵母发酵产生二氧化碳的实验实验目的：通过观察酵母在发酵过程中产生的二氧化碳气泡，引发学生对生物发酵过程的兴趣，加深对生物化学反应的理解。
实验器材：- 酵母- 糖水溶液- 试管- 橡皮塞- 毛细管- 倒管- 盖玻片实验步骤：Step 1：在一个试管中加入适量的糖水溶液。
Step 2：向试管中添加一小块酵母，并轻轻摇动试管使其均匀混合。
Step 3：用橡皮塞封住试管，并在橡皮塞上插入一根毛细管。
Step 4：用倒管将试管倒置，将试管的底部完全浸没在一盛满水的容器中。
Step 5：观察试管中是否产生了气泡，并记录下气泡的数量和大小。
实验结果：在实验过程中，酵母会发酵并产生二氧化碳气泡，这些气泡通过毛细管被水吸附和收集起来。
观察结果可以发现，随着时间的推移，试管中的气泡数量会逐渐增多，并且气泡的大小也会不断增大。
实验原理：酵母是一种单细胞真菌，在有机物质的存在下，通过发酵作用将有机物质转化为能量、二氧化碳和酒精。
糖水溶液中的糖分子提供了酵母发酵所需的有机物质，酵母在此基础上进行发酵反应，并释放出二氧化碳气体。
通过气泡的产生和观察，我们可以证明酵母的生物可发酵性以及酵母发酵过程中产生的二氧化碳气体释放。
实验探究：通过这个实验，我们可以引导学生进行以下问题的探究：1. 酵母对不同浓度和类型的糖水溶液的发酵作用是否有差异？2. 酵母在何种条件下发酵最为活跃？3. 二氧化碳气体的释放量是否与糖水溶液的温度有关？4. 酵母在发酵过程中是否只产生二氧化碳气体？实验拓展：为了加深学生对酵母发酵的理解，可以进行以下拓展实验：1. 观察酵母对面粉的发酵反应，了解酵母在不同底物上的发酵能力。
2. 研究酵母发酵过程中可能产生的副产物，如酒精。
3. 探究酵母发酵与其他环境因素的关系，如光照、氧气浓度等。
实验安全提示：1. 实验过程中要小心操作，避免试管破裂或溢出。
2. 所有废弃物应按照正确的处理方式进行处理。
2024年人教版七年级生物上册 训练四 实验新突破(课件)
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(1)将菌悬液均匀涂抹在培养基上相当于培养细菌中的 接 种 步骤。
(2)步骤二的空白处应填入 10 mL无菌水 。
(3)实验中增加丙组的目的是 形成对照 。
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(4)【逆向思维】此探究过程中体现控制单一变量的做法是 在马桶按钮相同大小的面积上擦拭(合理即可) (请举一例)。
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(4)1个细菌由 1 个细胞构成。细菌没有成形的 ③ (填编 号)，属于原核生物，可形成 芽孢 ，度过不良环境。
(5)如果该模型表示真菌细胞，需要移除 ④ (填编号)；如 果该模型表示动物细胞，需要移除 ①④⑤ (填编号)。
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(5)如图所示，可知实验结果是 手机屏幕比马桶按钮单位面 积上的细菌多 。
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(6)【方案改进】为了增强实验的说服力，你认为可以如何改 进？ 设置重复实验 。
(7)【开放性】实验结果给我们日常生活的启示是 经常清洁 手机，勤洗手等 。越来越多的人患上“手机依赖症”， 你对此有什么建议： 合理控制手机使用时间，多参加室 外活动等(合理即可) 。
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(1)图1表示球孢白僵菌孢子的是 ② (写序号)，将其按 一定比例与其他成分加工可制成生产上常用的白僵菌 制剂。
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(2)球孢白僵菌可以通过昆虫(如玉米螟幼虫)体表侵入到虫体 内部，在适宜条件下萌发出 菌丝 (填结构名称)，吸收 昆虫体内营养，同时产生有毒物质，使虫体僵硬萎缩，只 留下体表坚韧的 外骨骼 ，称为“白僵虫”(如图2)。
初中生物进阶实验指南
初中生物进阶实验指南生物实验在初中生物学习中占据着重要的地位，通过实验可以帮助学生更好地理解理论知识，培养科学探究精神和实践能力。
本文将为初中生物学习者提供一份进阶实验指南，帮助他们进行更高难度的生物实验。
一、植物的维管束结构观察实验植物的维管束结构与其功能密切相关。
本实验可以通过显微镜观察不同植物茎的横切面，了解植物的维管束结构。
实验步骤：1. 准备不同种类的植物茎，如黄瓜、大葱等。
2. 用刀片将植物茎切成很薄的横切片。
3. 将切好的植物茎横切片放置在显微镜玻片上。
4. 用滴管滴上一滴水，将盖玻片放在溶液中，以避免植物茎干燥。
5. 将显微镜调至40倍或100倍倍率，用显微镜观察植物茎的维管束结构。
观察结果：不同植物茎的维管束结构可能有所不同，可以观察到维管束的形态、排列方式和组织结构等。
二、果蝇遗传实验果蝇是进行遗传实验的常用实验材料，其繁殖周期短，易于培养和观察。
通过果蝇遗传实验，可以深入了解遗传规律。
实验步骤：1. 准备一对自交纯合的果蝇，即纯合子的基因全部为同一对等位基因。
2. 将一只具有特定突变表型的果蝇与另一只具有正常表型的果蝇进行交配。
3. 观察并记录后代果蝇的表型。
4. 根据观察结果，进行基因型推断和遗传规律分析。
实验结果分析：通过与正常表型的果蝇交配后，观察到后代果蝇表现出正常和变异两种表型。
根据观察结果和遗传规律，可以推断出变异表型与基因的传递有关，进而探究遗传规律。
三、光合作用速率与光照强度关系实验光合作用是植物的重要生命活动之一，光照强度是影响光合作用速率的重要因素。
本实验旨在探究光照强度对光合作用速率的影响。
实验步骤：1. 准备一棵绿叶植物，如水稻或豌豆植株。
2. 将植株暗置一段时间，以消除光合作用产生的影响，使其光合作用速率降至最低。
3. 将植株放置在不同光照强度的环境中，可以利用电灯调节光照强度。
4. 测量不同光照强度下的光合作用速率，可以使用测氧法或测光法等方法测量氧气释放量或二氧化碳吸收量。
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生物实验技术操作指导目录生物实验须知实验室一些常用知识介绍实验一：马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验实验二:植物组织中DNA和RNA的提取和鉴定实验三：糖酵解中间产物的鉴定实验四：综合设计实验—蛋白质的制备及其含量测定实验五：细菌血栓溶解酶活性测定实验六：可溶性糖的硅胶G薄层层析实验室主要仪器使用操作规程与注意事项生物实验须知1．实验室规则(1) 实验课必须提前5分钟到实验室,不迟到,不早退，应自觉遵守课堂纪律。
(2) 使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约, 应特别注意保持药品和试剂的纯净, 严防混杂污染。
(3) 实验台、试剂药品架必须保持整洁, 仪器药品摆放井然有序。
实验完毕,需将药品、试剂排列整齐, 仪器洗净倒置放好, 实验台面抹拭干净, 经教师验收仪器后, 方可离开实验室。
(4) 使用和洗涤仪器时, 应小心谨慎, 防止损坏仪器。
使用精密仪器时, 应严格遵守操作规程, 发现故障应立即报告教师, 不要自己动手检修。
(5) 在实验过程中要听从教师的指导, 严肃认真地按操作规程进行实验, 并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上。
课后写出实验报告, 由课代表收齐交给教师。
(6)仪器损坏时, 应如实向教师报告, 真填写损坏仪器登记表, 然后补偿一定金额。
(7)每次实验课安排同学轮流值日, 值日生要负责当天实验的卫生和安全检查。
2．实验记录实验课前应认真预习实验内容，将实验名称、实验原理、实验内容和步骤等简单扼要写在记录本上。
实验记录本要标明页码，不能随意撕掉任何一页。
实验中使用的试剂纯度和终浓度以及使用的仪器类型等都要记录清楚。
实验中观察到的现象、结果和得出的数据，应及时直接记在记录本上，绝对不可以随意记在单片纸上。
原始记录必须准确、简练、清楚。
3．实验报告的书写实验结束后,应及时整理和总结实验结果, 写出实验报告。
（1）标题标题应包括实验名称、实验时间、实验室名称、实验组号、实验者及同组者姓名、实验室条件。
（2）实验目的（3）实验原理应简述基本原理，不要完全照抄实验指导书。
（4）操作步骤操作步骤(或方法)可以采用流程图的方式或自行设计的表格来表达。
（5）实验结果将实验中的现象、数据进行整理、分析，得出相应的结论。
建议尽量使用图表法来表示实验结果，这样可以使实验结果清楚明了。
（6）讨论包括对实验结果及观察现象的小结、对实验中遇到的问题和思考题的探讨以及对实验的改进意见等。
4．生物实验课评分标准⏹实验预习情况（10%）⏹实验操作情况（20%）⏹实验报告情况（30%）⏹实验考试成绩（40%）实验室一些常用知识介绍一．玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂1. 玻璃仪器的洗涤（1）新购买的玻璃仪器, 首先用自来水洗去表面灰垢, 然后用洗衣粉刷洗, 自来水冲净后, 浸泡在1%~2% 盐酸溶液中过夜以除去玻璃表面的碱性物质。
最后, 用自来水冲洗干净, 并用蒸馏水冲洗2 次。
（2）对于使用过的玻璃仪器, 应先用自来水冲洗, 再用毛刷蘸取洗衣粉刷洗。
用自来水充分冲洗后再用蒸馏水冲洗 2 次。
凡洗净的玻璃仪器壁上都不应带有水珠, 否则表示尚未洗净, 需重新洗涤。
（3）比较脏的仪器或不便刷洗的仪器, 使用前应用流水冲洗, 以除去粘附物, 如果仪器上有凡士林或其他油污, 应先用软纸擦除, 再用有机溶剂擦净，最后用自来水冲洗。
待仪器晾干后, 放入铬酸洗液中浸泡过夜。
取出后用自来水充分冲洗, 再用蒸馏水冲洗2 次。
（4）普通玻璃仪器可在烘箱内烘干, 但定量的玻璃仪器如吸管、滴定管、量筒、容量瓶等不能加热, 应晾干备用。
另外, 分光光度计中的比色杯的四壁是用特殊胶水粘合而成, 受热后会散架, 所以也不能烘干。
2. 一些常用的洗涤剂肥皂水或洗衣粉溶液这是最常用的洗涤剂, 主要是利用其乳化作用以除去污垢, 一般玻璃仪器均可用其刷洗。
实验一：马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验一、实验目的1．学习从组织细胞中制备酶的方法。
2．掌握多酚氧化酶的作用及各种因素对其作用的影响。
二、实验原理多酚氧化酶是一种含铜的酶，其最适pH值为6～7。
由多酚氧化酶催化的反应，如以邻苯二酚为底物，可以被氧化形成邻苯二醌。
由多酚氧化酶催化的氧化还原反应可通过溶液的颜色的变化鉴定，这个反应在自然界中是常见的，如去皮的马铃薯和水果变成褐色就是由于该酶作用的结果。
多酚氧化酶的最适底物是邻苯二酚（儿茶酚）。
间苯二酚和对苯二酚与邻苯二酚的结构相似，它们也可以被氧化为各种有色物质。
酶是生物催化剂，其催化活性易受各种因素的影响，如温度、pH、底物种类、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和蛋白质变性剂等都会改变其生物催化活性。
三、实验器材1．匀浆机2．小刀，纱布，漏斗，其它玻璃器皿3．离心机4．冰箱5．恒温水浴四、材料与试剂1．马铃薯2．0.1mol/L的NaF溶液: 将4.2g氟化钠溶于1000mL水中。
3．0.01mol/L的邻苯二酚溶液:将1.1g邻苯二酚溶解于1000mL水中,用稀NaOH调节溶液的pH值为6.0,防止其自身的氧化作用。
当溶液变成褐色时，应重新配制。
新配制的溶液应贮存于棕色瓶中。
4．pH6.8的磷酸盐缓冲液5. 5%三氯乙酸溶液6. 硫脲7. 0.01mol/L的间苯二酚溶液:将0.11g间苯二酚溶解于100mL水中。
8．0.01mol/L的对苯二酚溶液:将0.11g对苯二酚溶解于100mL水中。
9．固体硫酸铵10．0．8％HCl：19.2mL浓HCl加水稀释到1000mL。
11．0.2%和0.3%（V/V）的乳酸溶液。
12. 0.5%的碳酸钠溶液13．0.01％的碳酸钠溶液五、操作方法1．多酚氧化酶的制备每三个小组一起，称取150g马铃薯（新马铃薯可以不去皮），切块后放入匀浆机，加入150mLNaF溶液，匀浆后用四层纱布过滤。
各组分别量取50mL滤液置离心管中，于3500转/min离心5～10min，取上清夜，加入固体硫酸铵16g，溶解，于4℃放置30min，于3500转/min离心15min，倒掉上清液，沉淀用15mL pH6.8的磷酸盐缓冲液溶解，即为粗酶液，含有马铃薯多酚氧化酶。
2．多酚氧化酶的催化作用按表1加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
表1 多酚氧化酶的催化作用按表2加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
表2 多酚氧化酶的化学性质按表3加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
表3 多酚氧化酶的底物专一性按表4加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
表4 底物浓度的影响按表5加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
表5 酶浓度的影响按表6加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。
六、思考题1．在酶制备过程中加入硫酸铵的目的是什么？2．在多酚氧化酶性质实验中三氯乙酸和硫脲有什么作用？3．该多酚氧化酶的最适pH值是多少？为什么？4．通过实验可知哪些因素会影响酶的催化活力？实验二：植物组织中DNA和RNA的提取和鉴定一、实验目的①学习和掌握从植物组织中分离核酸的原理和操作方法。
②学习和掌握测定核酸含量的定糖法（苔黑酚法和二苯胺法）的原理及操作方法。
二、实验原理核酸是生物体内的主要化学成分，核酸在生物体内主要以核蛋白的形式存在。
核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA主要存在与在细胞核中，RNA主要存在于细胞质中。
用冰冷的稀三氯乙酸或高氯酸溶液在低温下抽提菜花匀浆，以除去酸溶性小分子物质。
再由有机溶剂如乙醇、乙醚等抽提，去除脂溶性的磷脂等物质。
最后用浓盐溶液（10%氯化钠溶液）和0.5mol/L高氯酸（70℃）分别提取DNA 和RNA。
由于核酸和脱氧核糖核酸有特殊的颜色反应，经显色后所呈现的颜色深浅在一定范围内和样品中所含的核糖和脱氧核糖的量成正比。
因此可用定糖法来定性定量测定核酸。
① 核糖的测定：测定核糖的常用方法是苔黑酚法（3，5—二羟基甲苯，即Orcinol 反应）。
当含有核糖的RNA 与浓盐酸及3，5—二羟基甲苯在沸水水浴中加热10～20min 后，有绿色物产生，这是因为RNA 脱嘌呤后的核糖与酸作用生成糠醛，后者再与3，5—二羟基甲苯作用生成绿色物质。
RNA+浓硫酸+ OH CH 3OH3100FeCl Co 绿色化合物注意：DNA 、蛋白质和黏多糖等物质对测定有干扰作用。
② 脱氧核糖的测定：测定脱氧核糖的常用方法是二苯胺法。
含有脱氧核糖的DNA 在酸性条件下和二苯胺在沸水浴中共热后，产生蓝色。
这是因为DNA 嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-6-酮基戊醛，再与二苯胺作用产生蓝色物质。
DNA+少量浓硫酸或冰乙酸+NH−−→−Co100蓝色物质注意：DNA 、蛋白质和黏多糖等物质对测定有干扰作用。
此法易受多种糖类及其衍生物和蛋白质的干扰。
上述两种定糖的方法准确性较差，但快速简便，能鉴别DNA 和RNA ，是鉴定核酸、核苷酸的常用方法。
三、实验器材 ① 恒温水浴 ② 电炉 ③ 布氏漏斗装置 ④ 移液管 ⑤ 烧杯 ⑥ 量筒 ⑦ 剪刀 ⑧ 研体四、材料和试剂 ① 新鲜菜花 ② 95%乙醇 ③ 丙酮④ 5%高氯酸溶液 ⑤ 0.5mol/L 三氯酸溶液 ⑥ 10%氯化钠溶液⑦ 标准RNA 溶液（5mg/100mL ） ⑧ 标准DNA （15mg/100ml ） ⑨ 粗氯化钠 ⑩ 海沙⑪ 二苯胺试剂：将1g 二苯胺溶于100ml 冰醋酸中，再加入2.75mL 浓硫酸（置冰箱中可保存6个月。
使用后，在室温下摇匀）。
⑫三氯化铁浓盐酸溶液：将2ml10%三氯化铁溶液（用FeCl3·6H20配制加入到）400mL 浓盐酸中。
五、操作方法1. 核酸的分离①取菜花的花冠20g，剪碎后置于研钵中。
加入20mL 95％乙醇和少量诲砂，研磨成匀浆。
然后用布氏漏斗抽滤，弃去滤液。
②向滤渣中加入20mL丙酮，搅拌均匀,抽滤，弃去滤液。
③再向滤渣中加人20mL丙酮，搅拌5min后抽滤(用力压滤渣，尽量除去丙酮)。
④在冰盐浴中，将滤渣悬浮在预冷的20mL 5％高氯酸溶液中搅拌抽滤弃去滤液。
⑤特滤渣悬浮于20mL 95％乙醇中，抽滤，弃去滤液。
⑧滤渣中加入20mL丙酮，搅拌5min。
抽滤至干．用力压滤渣尽量除去丙酮。
⑦将干燥的滤渣重新悬浮在40ml10％氯化钠溶液中，在沸水浴中加热15mln，放置、冷却，抽滤至干，留滤液，并将此操作重复进行一次。
将两次滤液合并，为提取物一。
⑧将滤渣重新悬浮在20mL 0.5mol儿高氯酸溶液中。
加热到70℃。
保温20 min(恒温水浴)后抽滤。
留滤液为提取物二。
2．DNA和RNA的定性鉴定①二苯胺反应：按表1加入各种试剂，反应后观察现象井记录结果。
表1 二苯胺反应加入试剂表2 苔黑酚反应加入试剂根据现象分析提取物一和提取物二中主要含有什么物质?六、思考题1．核酸分离时为什么要除去小分子物质和脂类物质？本实验是怎样除掉的？2．运用本实验方法是否可以提取到能够进行其他生物实验用的核酸材料?3．快速鉴别RNA和DNA的方法是什么?实验三：糖酵解中间产物的鉴定一、实验目的了解糖酵解过程的某一中间步骤及利用抑制剂来研究中间代谢的方法。