GBT_4789[1].40-2010_食品卫生微生物学检验_阪崎肠杆菌检验标准培训资料
阪崎肠杆菌检验技术
生态分类
一、阪崎肠杆菌概况
阪崎肠杆菌属肠杆菌科，是人和动物肠道中寄生的一种革 兰阴性无芽胞杆菌。是肠道正常菌群的一种，在一定条件 下可引起人和动物致病。1980年以前命名为黄色阴沟肠 杆菌，1980年更名为阪崎肠杆菌。
一、阪崎肠杆菌概况
生态分布 家庭、温泉、鼠、苍蝇、植物根围、沉积物，沼泽地、土壤、食品等均有检出阪 崎肠杆菌的报导。有报导推测，昆虫可能是阪崎肠杆菌的环境宿主。 婴儿配方粉的污染： 内在污染：--由加工环境中微生物的存在；加工装置内表面微生物的存在；热处理 后，与干燥基粉混合的加入成分中存在的微生物造成。 外源性污染：--受阪崎肠杆菌污染的配方粉或调制好的配方奶在较高温度下存放， 食用前不加热，或加热不彻底，喂食时间较长等都可导致阪崎肠杆菌有机会生长繁 殖，增加患病的危险性。
三、阪崎肠杆菌菌定量检测
1g(mL)×3
取样量 10g(mL)×3
100g(mL)×3
BPW 1：10 稀释
mLST-Vm
DFI、TSA
生化鉴定
报告 （MPN值）
操作规程
前增菌 选择性增菌 显色培养基 验证试验 结果报告
三、阪崎肠杆菌菌定量检测
各100ml（g)
各10ml（g)
各900ml（g) 各移1ml
900 ml BPW
样品
100mL（g） 溶解 预热
44℃
36±1℃ 18h±2h
选择性增菌 44±0.5℃
24h±2h
10mL mLST-Vm肉汤
挑取蓝绿色菌落
操作规程 API20E鉴定系统
二、阪崎肠杆菌菌定性检测
TSA平板上直接挑取黄色菌 落进行鉴定
结果鉴定
二、阪崎肠杆菌菌定性检测
微生物检验总则GB 4789.1
2.4 环境与设施 (1) 实验室环境不应影响检验结果的准确性。 (2)实验区域应与办公区域明显分开。 (3)实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要,实验 室布局宜采用单方向工作流程,避免交叉污染。 (4) 实验室内环境的温度、湿度、洁净度及照度、噪声等应符合工 作要求。
(5) 食品样品检验应在洁净区域进行,洁净区域应有明显标示。 (6) 病原微生物分离鉴定工作应在二级或以上生物安全实验室进行
主要作用于DNA,使DNA形成胸腺嘧啶二聚体，使微 生物DNA失去转化能力而死亡。
2.3.2湿热灭菌
湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流 通蒸汽进行灭菌的方法。压力蒸汽湿热灭菌法 是目前最常用的一种灭菌方法。它利用高压蒸 汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的 穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死 亡。适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、 胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
2.2微生物基本操作
30%
梯度稀释
平板倾注
45%
35%
平板划线
斜面穿刺 平板涂布
革兰氏染色
55%
50%
30%
60%
涂片及固定
数量对比
2.2.1梯度稀释
（1）用酒精棉消毒操作台面。 （2）点燃酒精灯，左手于酒精 灯火焰附近打开移液器吸头盒， 右手持移液器取枪头。 （3）用酒精灯火焰灼烧试管口 部，将枪头伸入试管，吸取足量 液体，再次灼烧试管口部，塞上 塞子。 （4）将待接种试管塞打开，用 酒精灯火焰灼烧试管口部，将液 体打入待接种试管，再次灼烧试 管口部，塞上塞子。
2.2.4斜面穿刺
操作时用笔直的接种针，从 长有目标菌的培养基上挑取少量 菌苔，将接种针平稳刺入培养基 ，勿触到管底，也不可碰到试管 内壁，然后沿原穿刺途径慢慢抽 出接种针，最后在斜面上进行“ 之”字划线。
10类食品污染阪崎肠杆菌状况的调查研究
10类食品污染阪崎肠杆菌状况的调查研究【摘要】目的了解10类食品中阪崎肠杆菌的污染状况及污染数量，评估其风险性，为预防和控制阪崎肠杆菌的感染、传播、流行提供科学依据。
方法按照GB4789.1-2010采抽样技术、GB4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》、实时荧光PCR 法操作规程，对10类850份食品进行阪崎肠杆菌检验，标准菌株作对照。
结果检出阪崎肠杆菌54株，总检出率为6.4%。
该10类食品阪崎肠杆菌的检出率差异有统计学意义，由高至低排序为：冰淇淋＞巧克力坚果＞熟肉＞糖饼类＞面包糕点＞方便面＞奶类＞饮用水、生肉、调味品。
染菌量＞30 MPN/100g(ml)以上的有15份，占27.7%(15/54)。
结论 10类食品检出阪崎肠杆菌的有7类，应予以重视。
【关键词】阪崎肠杆菌；定性；定量Investigation of 10 kinds of food be poluted by Enterobacter sakazakii LU Xing-er，ZHENG Yue-kang，WU Can-quan.Zhongshan Center for Disease Control and Prevention in Guangdong Province，Zhongshan 528403，China【Abstract】 Objective To understand the contamination of Enterobacter sakazakii and the amount of pollution from 10 kinds of food，assess their risk，to provide the scientific basisfor control and prevent infection，communication and prevalence of Enterobacter sakazakii.Methods The samples were tested in accordance with the national standard and real-time fluorescence PCR method.The samples were tested from 850 samples of 10 kinds of food.Standard strain was used as control.Results The 54 strains of Enterobacter sakazakii were detected,the detection rate was 6.4%.There was statistically significant difference in terms of 10 kinds of food.The order from high to low was：ice cream>chocolate nut>cooked meat>candy cake>bread，pastry>instant noodles>milk>water，condiment，raw meat.15 samples were contaminated volume over>30 MPN/100g(ml) concentration range，accounting for 27.7%（15/54）.Conclusion Enterobacter sakazakii were detected from 7 of 10 kinds of food.We should be targeted to strengthen supervision and management.【Key words】Enterobacter sakazakii；Qualitative；Quantitative据WHO最新报告显示，乳粉中的阪崎肠杆菌是导致婴幼儿感染和死亡的主要原因之一。
肠杆菌科检验(食品微生物学检验)
4.1 缓冲蛋白胨水(BPW):见 B.1。
1
4.2 缓冲葡萄糖煌绿胆盐肉汤(EE 肉汤):见 B.2。 4.3 结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA):见 B.3。 4.4 营养琼脂(NA):见 B.4。 4.5 葡萄糖琼脂:见 B.5。 4.6 革兰氏染色液:见 B.6。 4.7 氧化酶试剂:见 B.7。 4.8 无菌1 mol/L NaOH:见 B.选的每一个菌落,划线于营养琼脂平板,36 ℃±1 ℃培养18h~24h,挑取平板上 的 菌 落 进 行 革 兰 氏 染 色 镜 检 、氧 化 酶 试 验 及 葡 萄 糖 发 酵 试 验 。
6.2 倾注平板和培养
6.2.1 根据对样品污染状况的估计及相关限量要求,选择2个~3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液 体样品可以选择原液),每个稀释度接种2个无菌平皿。同时,分别吸取1 mLBPW 加入两个无菌平皿 内作为空白对照。 6.2.2 将10mL~15mL 冷却至46 ℃的 VRBGA(可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温)倾注于每 个 平 皿 中 。 小 心 旋 转 平 皿 ,使 样 品 匀 液 与 培 养 基 充 分 混 匀 。 6.2.3 待琼 脂 凝 固 后,倾 注 一 薄 层 同 样 的 培 养 基 覆 盖 平 板 表 层。 防 止 蔓 延 生 长 并 使 菌 落 特 征 更 为 明显。 6.2.4 待 VRBGA 平板上层琼脂凝固后翻转平板,36 ℃±1 ℃培养18h~24h。
GB 4789.41—2016
食品安全国家标准
食品微生物学检验 肠杆菌科检验
1 范围
本 标 准 规 定 了 食 品 中 肠 杆 菌 科 (Enterobacteriaceae)的 检 验 方 法 。 本标准第一法适用于肠杆菌科含量较高的食品中肠杆菌科的计 数;第 二 法 适 用 于 肠 杆 菌 科 含 量 较 低食品中肠杆菌科的计数。
食品安全国家标准——食品微生物学检验大肠菌群计数.pdf
食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数1 范围本标准规定了食品中大肠菌群（Coliforms）计数的方法。
本标准适用于食品中大肠菌群的计数。
2 术语和定义2.1 大肠菌群coliforms在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
2.2 最可能数most probable number，MPN基于泊松分布的一种间接计数方法。
3 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。
3.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。
℃℃。
3.3 恒温水浴箱：46 ±13.4 天平：感量0.1 g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量500 mL。
3.9 无菌培养皿：直径90 mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
3.11 菌落计数器。
4 培养基和试剂4.1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：见附录A中A.1。
4.2 煌绿乳糖胆盐（Brilliant Green Lactose Bile，BGLB）肉汤：见附录A中A.2。
4.3 结晶紫中性红胆盐琼脂（Violet Red Bile Agar，VRBA）：见附录A中A.3。
4.4 磷酸盐缓冲液：见附录A中A.4。
4.5 无菌生理盐水：见附录A中A.5。
4.6 无菌1 mol/L NaOH：见附录A中A.6。
4.7 无菌1 mol/L HCl：见附录A中A.7。
第一法 大肠菌群MPN计数法5 检验程序大肠菌群MPN计数的检验程序见图1。
图1 大肠菌群MPN计数法检验程序6 操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25 g样品,放入盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内, 8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min,或放入盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10的样品匀液。
《食品卫生-微生物学检验》--阳性对照标准菌株
《食品卫生微生物学检验》-----阳性对照标准菌株
中国工业微生物菌种保藏管理中心
《食品卫生微生物学检验》新版标准GB/T 4789-2010于2010年6月1日开始实施。
新版《食品卫生微生物学检验》国标在检测流程、检验方法及培养基使用等方面进行了较大改动。
标准中要求实验室应当有阳性对照标准菌株，以下是中国工业微生物菌种保藏管理中心整理的《食品卫生微生物学检验》标准中涉及的阳性对照标准菌株，以方便食品监督管理部门、检验检疫机构、卫生防疫部门、大专院校、科研院所和食品企业微生物实验室使用。
附件：食品微生物学检验(GB/T 4789)阳性对照用菌。
培训课件：菌落总数的测定GB4789.2-2010-.
状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数； 若片状菌落不到平板的一半，而另一半平板菌落分 布又很均匀，则可以计算分布均匀的半个平板上的 菌落数，再乘以2，以代表一个平板的菌落数。
计数规则3： 当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，
菌落计数 报告
四、 试验步骤
1 样品的稀释： 1.1固体和半固体样品：称取25g （mL）样品至盛有 225 mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌均质杯内， 8000r/min～10000 r/min均质1min～2min，或放入盛有 225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1min～2min，制成1:10的样品匀液。
计数规则 1
选取菌落数在30cfu～300cfu之间、无蔓延菌落 生长的平板计数菌落总数。
低于30cfu的平板记录具体菌落数； 大于300cfu的可记录为多不可计； 每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
计数规则2： 有较大片状菌落生长的平板，不宜采用，应以无片
a 在GB4789.2-2010的培养条件下所得结果，只 包括一群在平板计数琼脂上生长的嗜中温需氧 或兼性厌氧菌的菌落总数。
b 按国家标准方法规定，即在需氧情况下， 36
±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长发育 的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营 养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能 满足其生理需求，故难以繁殖生长。
1.3、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL，沿
管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓 冲液的试管内（注意吸管或吸头尖端不要触及稀 释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹 打使之混合均匀，制成1:100的稀释液。
致病菌检验
操作步骤
3.TSA培养： 挑取1~5个可疑菌落，划线接种于TSA平板上，置于 25℃±1℃培养箱中，培养48±4h.（ 注：接种时必须挑 取单个菌落，来保证菌种的纯度，鉴定的准确性。） 4.生化鉴定： 将TSA平板上的菌落制成0.5个麦氏比浊度的菌悬液； 使用无菌加样管将菌悬液加入到API20E小管中，把加好的 菌悬液的20E试剂条放入已经加入无菌蒸馏水的小盒中， 盖好盖子。置于36℃培养18-24h后，根据说明再对应小孔 中加入辅助试剂，通过颜色变化判定出阴性或阳性；最后 读出鉴定编码后在软件上查询编码，读出菌种类型。 （注：添加矿物油时，要保证覆盖小孔上方， 保证是无氧环境。）
36℃±1℃，20-48h
挑取可疑菌落， 接种TSI，半固体，营养琼脂斜面
血清学分型
生化鉴定
志贺氏菌属分群及分型结果
2014-12-11
报告
操作步骤
1.增菌： 以无菌操作取检样25g（ml），加入装有灭菌225ml志 贺氏菌增菌肉汤中，摇匀，于41.5℃±1℃，厌氧培养1620h。 2.分离： 取增菌后的志贺氏菌增菌液分别划线接种于XLD琼脂 平板和MAC琼脂平板上，于36℃±1℃培养20-24h。观察各 个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直 径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落不典型或菌落较小不 易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同 选择性琼脂平板上的菌落特征见表。
• Baird-Parker平板制备： • 每95ml Baird-Parker平板基础添加一 支亚碲酸盐卵黄增菌液，制成平板，备用。
2014-12-11
操作步骤
2014-12-11
操作步骤
1.以无菌操作准确称取样品25g（ml）于225ml灭菌 生理盐水中，摇匀制成混悬液。 2.分别吸取0.3ml、0.3ml、0.4ml混悬液于平板上， 用L棒涂布于整个表面。置于36℃培养箱中，培养 45-48h.
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USFDA 方法 （一） （一）USFDA
30
• •
优点：所使用的各种培养基常见、价格便宜，更易普及。 缺点：选择性差
：竞争性抑制作用 1. EE broth broth：竞争性抑制作用 2. VRBGA ：（ 1）其它细菌也能生长，产生粉紫色菌落，胆 VRBGA：（ ：（1 2）ES 无特征性菌落，不易 汁酸沉淀形成紫色晕圈；（ 汁酸沉淀形成紫色晕圈；（2 ES无特征性菌落，不易 ES 和其他微生物 区别 区别ES ES和其他微生物 3. TSA:多种产生黄色素沉着的肠杆菌科菌株均能生长，如： pantoea spp .，E. hermanii，E. vulneris。 spp.
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五、增殖能力
℃，37 ℃分别是 13.7h ，1.7h ，19 －21min 。 • 6℃，21 21℃ 37℃ 分别是13.7h 13.7h， 1.7h， 19－ 21min。 发现，与本底相比， 25 ℃放置 6h 该菌的相对危险 • MRA MRA发现，与本底相比， 发现，与本底相比，25 25℃ 放置6h 6h该菌的相对危险 30 倍； 25 ℃放置 10h 可增加 30 000 倍。 性可增加 性可增加30 30倍； 倍；25 25℃ 放置10h 10h可增加 可增加30 000倍。 年2月FAO/WHO 在日内瓦召开的婴儿配方粉中 ES • 2004 2004年 FAO/WHO在日内瓦召开的婴儿配方粉中 在日内瓦召开的婴儿配方粉中ES ES （＜ 3 专家研讨会上提出婴儿配方粉中微量的 专家研讨会上提出婴儿配方粉中微量的ES ES（＜ （＜3 CFU/100g ）污染也能导致感染的发生。 CFU/100g）污染也能导致感染的发生。
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五五��世世界界范范围围内内 感感染染情情况况
中国CDC营养食品所
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第三部分 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
主要内容
一、制订的主要依据 《食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验 》 二、 二、《 阪崎肠杆菌检验》
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一、制订的主要依据
1. ISO 2006年“乳和乳制品中阪崎肠杆菌的检测”（Milk and milk products—Detection of Enterobacter sakazakii ）方法； 2. 美国FDA 2002年颁布的“婴儿配方粉中阪崎肠杆菌的分离和 计数”（Isolation and Enumeration of Enterobacter sakazakii from Dehydrated Powdered Infant Formula ）方法； 3. 2004年荷兰乳及乳制品控制中心对各种阪崎肠杆菌检测方法 的比较研究； 4. 雀巢研究中心2005年环境样品中阪崎肠杆菌快速检测方法； 5. 阪崎肠杆菌快速检测培养基DFI研究资料。
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显色培养基的特点
α-葡萄糖苷酶活性
指示剂：
1. -α，D吡喃葡糖甙（ XαGlc ） 5-溴-4-氯-3-吲哚 吲哚D-吡喃葡糖甙（ 吡喃葡糖甙（X Glc）
甲基伞形酮 -α-D葡糖苷（α-MUG ） 2. 44-甲基伞形酮 甲基伞形酮-D-葡糖苷（ -MUG） 3. 4邻硝基苯 -α-D吡喃葡糖甙 4-邻硝基苯 邻硝基苯-D-吡喃葡糖甙
4
第一部分：一般特征
命名 一、 一、命名 二、 培养特征 二、培养特征 生化反应 三、 三、生化反应 抵抗力 四、 四、抵抗力 增殖能力 五、 五、增殖能力 致病性 六、 六、致病性
5
一、命名
1980 年之前一直被称为 黄色 阴沟肠杆菌 。 1980年之前一直被称为 年之前一直被称为黄色 黄色阴沟肠杆菌 阴沟肠杆菌。 杂交 DNA-DNA DNA-DNA杂交 生化反应 黄色素 抗生素敏感性
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36 中国CDC营养食品所
阪崎肠杆菌检测方法的比较
• 2005年从10个省（市）的零售或批发市场采集的 194份配方粉。FDA定性检 测检出4个阳性样本， ISO定性检测检出 5个，其中4个在第一法的检测中均 为阳性，另一阳性检出样品在第一法中的检测结果为阴性。 选择性分离平板上分离株的菌落特征和样品数量
GB/T 4789.40-2010 食品卫生微生物学检验 008
食品卫生微生物学检验
阪崎肠杆菌检验
Enterobacter sakazakii (ES) sakazakii(ES)
2
Enterobacter sakazakii (ES) sakazakii(ES)
内 容
第一部分：一般特征 第二部分：流行病学特征 ES 的检验 第三部分： 第三部分：ES ES的检验
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婴儿配方粉中 ES 的安全性问题，已成为全球关注的焦 婴儿配方粉中ES ES的安全性问题，已成为全球关注的焦 点。 年ICMSF 把ES 列为 “严重危害特殊人群，威胁生命、 • 2002 2002年 ICMSF把 ES列为 列为“ ”的一种病原菌。 导致慢性实质性后遗症或长期影响 导致慢性实质性后遗症或长期影响” 年2月FAO/WHO 在日内瓦召开的婴儿配方粉中 ES 专家研 • 2004 2004年 FAO/WHO在日内瓦召开的婴儿配方粉中 在日内瓦召开的婴儿配方粉中ES ES专家研 ES 列为婴儿配方粉中仅有的两种 A类致病菌（沙门 讨会： 讨会：ES ES列为婴儿配方粉中仅有的两种 列为婴儿配方粉中仅有的两种A 和阪崎）之一。
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六、致病性
婴儿： 1. 脑膜炎 2. 坏死性小肠结肠炎 3. 菌血症 • 严重的神经系统后遗症
成人：局部感染、菌血症、 术后骨髓炎 成人：局部感染、菌血症、术后骨髓炎
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第二部分：流行病学特征
内 容
ＥＳ的分布 一、 一、ＥＳ的分布 易感人群和引起中毒的食物 二、 二、易感人群和引起中毒的食物 三、 婴儿配方粉中 ES 的污染状况 三、婴儿配方粉中 婴儿配方粉中ES ES的污染状况 食物中 ES 的来源及中毒发生的原因 四、 四、食物中 食物中ES ES的来源及中毒发生的原因 世界范围内感染情况 五、 五、世界范围内感染情况
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一、ＥＳ的分布
环境 1. 1.环境 原油、切削液、苍蝇、食品加工厂（奶制品、谷类、 巧克力、马铃薯粉、意大利面制品）、医院（空气、 听诊器、临床用品）、家庭、温泉、鼠、植物根围、 沉积物，沼泽地、土壤 食品及其相关用品 2. 2.食品及其相关用品 啤酒杯、干酪、婴儿配方奶粉和豆粉、婴儿配方粉冲 调用品（搅拌器、勺子、瓶刷）、普通奶粉、碎牛肉、 肉类、香肠、盐腌肉、发酵面包、豆腐、蔬菜、水 （管道，生物膜）、谷类、蔬菜、豆类制品、调味品
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ISO 方法 （二） （二）ISO
检 样 1：10 BPW 稀释 36±1℃，18±2h 0.1ml + mLST-Vm 10ml 44±0.5℃，24±2h ESIA 44±1℃，24±2h 挑取蓝绿色菌落 TSA 25±1℃，48～72h 挑取黄色菌落 氧化酶试验 报 告 生化鉴定 生 化 鉴 定
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四、食物中 ES 的来源及中毒发生的原因 四、食物中ES ES的来源及中毒发生的原因
目前公共卫生关注的婴儿配方中 ES 的来源包括以下 2种情况： 目前公共卫生关注的婴儿配方中ES ES的来源包括以下 的来源包括以下2 � 二次污染。 内在污染 —— ——二次污染。 如：加工环境中微生物的存在；加工装置内表面微生物 的存在；热处理后，与干燥基粉混合的加入成分中存在的微 生物。 � 外源性污染 —— 配方粉调制环境和调制器皿。 外源性污染—— ——配方粉调制环境和调制器皿。 污染的配方粉或调制配方在较高温度下存放，食用 受ES ES污染的配方粉或调制配方在较高温度下存放，食用 前不加热，或加热不彻底，喂食时间较长等都可导致 ES 有机 前不加热，或加热不彻底，喂食时间较长等都可导致ES ES有机 会生长繁殖，增加患病的危险性。
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主要感染渠道 ！！！
虽然现在还不能确 的宿主和传播模 定ES ES的宿主和传播模 型，但在多起新生儿 感染事件的调查中 ES ES感染事件的调查中 发现婴儿配方粉是主 要的感染渠道。
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产品召回
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ES 的污染状况 三、婴儿配方粉中 三、婴儿配方粉中ES ES的污染状况
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三、生化反应
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注：＋ ：90-100％；(＋) ：75-89%； V ：25-74％；(－)：10 -24％；－ ：0-9％
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四、抵抗力
• 耐热性 • 渗透压 • 干燥
巴氏消毒 过 不同菌株的耐热性存在明显的差别，但标准的 不同菌株的耐热性存在明显的差别，但标准的巴氏消毒 巴氏消毒过 ES 。 程能有效的灭活 程能有效的灭活ES ES。 对渗透压的耐受性使该菌能够成为环境中的优势株，增 ES ES对渗透压的耐受性使该菌能够成为环境中的优势株，增 加婴儿配方粉加工后污染的危险性，使其在婴儿配方粉中长期 存活。
• • • •
6
二、培养特征
℃范 • G－无芽孢杆菌，兼性厌氧，在6℃-47 -47℃ ℃ 围内均可生长，适温35-37 35-37℃ • 营养要求不高： VRBGA、TSA、NA、MAC、EMB、其他
与其他常见肠杆菌相似
7
培养温度
�
已调制配方奶中ES（n＝27）在不同温度下的生长 率（Iversen et al. (2004b); Zwietering personal communication, 2004）。
8
生长特征
ES 在VRBGA 平板上首次划线分离时， 37 ℃培养 24h ES在 VRBGA平板上首次划线分离时， 平板上首次划线分离时，37 37℃ 培养24h 2种不同的形态学特征： 可生成 可生成2 1. 干燥或粘液状、圆锯齿状（凹口或锯齿），用金属环 接触时可发现坚韧或有弹力，即粘贴金属环的菌量很 少，并且菌落可很快恢复。传代培养后可能会转变为 典型的光滑菌落。 2. 光滑、易于用金属环从菌落移取细胞。