荔枝霜疫霉病病原菌鉴定与生物学特性研究
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察霜疫霉是一种常见的真菌病害，主要侵害荔枝果实，在果实上形成灰白色的霜疫霉菌丝体和黑色的孢子囊，严重影响果实的品质和商品价值。
霜疫霉侵染后，荔枝果皮结构发生了明显的变化，为了了解霜疫霉侵染对荔枝果实的影响，我进行了扫描电镜观察。
我们要了解霜疫霉侵染后荔枝果实的一般症状。
霜疫霉侵染的果实会出现以果实表面为中心扩散的圆形或不规则形状的浅褐色病斑，病斑上布满灰白色的霜疫霉丝状结构。
果实表面还可能出现黑色或浅黑色的小颗粒，这是霜疫霉的孢子。
在掌握了一般症状之后，我们开始进行了扫描电镜观察。
我们采集了霜疫霉侵染后的荔枝果实样品，并进行了样品的处理和制备。
经过样品切片处理，我们首先对正常的荔枝果皮进行了扫描电镜观察。
在扫描电镜下观察到的正常荔枝果皮结构是由密集的细胞组织构成的，细胞之间紧密相连，呈现出平整的表面。
果皮表面呈现出网状的纹理，整体上比较光滑，没有明显的裂缝或伤痕。
接下来，我们观察了霜疫霉侵染后的荔枝果实样品。
扫描电镜下观察到，果皮上的霜疫霉菌丝体和孢子囊密集分布，覆盖了原本平整的果皮表面。
霜疫霉菌丝体呈现出网状结构，交织在一起，形成了一层灰白色的覆盖物。
黑色的孢子囊也随处可见，这些孢子囊是霜疫霉的繁殖器官，在果实表面上形成了大量的颗粒状结构。
在霜疫霉侵染的果实表面下方，果皮细胞组织发生了明显的变化。
果皮组织出现了空洞和破坏现象，细胞之间的连接变得松散，失去了原本的紧密结构。
这些空洞和破坏的细胞组织为霜疫霉的侵染提供了可乘之机，使得霜疫霉能够更容易地侵入果实内部，加快果实的腐烂过程。
通过以上的扫描电镜观察，我们可以清晰地看到霜疫霉侵染后荔枝果皮结构发生了显著的变化。
果皮表面被覆盖了大量的霜疫霉菌丝体和孢子囊，果皮下的细胞组织也出现了破坏和空洞。
这些变化不仅影响了果实的外观和口感，也为其他病原菌的侵染和果实的腐烂提供了条件。
针对霜疫霉病害的防治工作显得尤为重要。
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察
霜疫霉是一种引起荔枝果实腐烂的真菌病原体，它会在荔枝果皮中引起结构的变化。
本文使用扫描电镜技术对霜疫霉侵染后荔枝果皮的结构变化进行观察。
在扫描电镜下观察正常果皮可以看到，荔枝果皮表面光滑而整齐，覆盖着一层细微的
蜡质物质，这种蜡质物质起到保护果皮免受外界环境侵蚀的作用。
当荔枝果实被霜疫霉侵染后，果皮表面的结构发生了明显的变化。
在果皮表面可以观
察到大量的霜疫霉菌丝，这些菌丝呈现出交错纠缠的排列形态。
霜疫霉菌丝呈灰色或黑色，具有分枝状的结构。
在霜疫霉侵染的果皮表面，均匀覆盖着大量的霉菌孢子。
这些孢子呈球形或椭圆形，
具有光滑的表面。
孢子之间紧密排列，形成一层层的覆盖。
霉菌孢子的颜色通常为灰色或
黑色，与菌丝相似。
这些孢子是霜疫霉的主要繁殖体和传播途径，可以通过风吹、昆虫传
播等方式传播给其他健康的果实。
霜疫霉侵染会导致荔枝果皮的细胞损伤和坏死。
在果皮的表面和内部，可以观察到细
胞破裂、空洞和坏死的现象。
果皮组织的细胞间隙有明显的增加，细胞的结构也发生了崩
溃和塌陷。
霜疫霉的侵染导致荔枝果皮表面出现大量的霉菌丝和孢子，同时也引起果皮细胞的病
变和坏死。
这些观察结果有助于我们更深入地了解霜疫霉对荔枝果实的病害机制，为防治
霜疫霉病提供一定的依据。
荔枝霜霉病生物防治研究进展
荔枝霜霉病生物防治研究进展
徐迟默;谢龙莲;曾筱芬;温衍生
【期刊名称】《南方农业学报》
【年(卷),期】2015(046)001
【摘要】【目的】对荔枝霜霉病生物防治研究现状及存在问题进行总结和分析，以期为后续研究及生产应用提供参考。
【方法】以现有文献为依据，从植物活性筛选、微生物活性筛选、有效成分分析和产品开发4个方面总结荔枝霜霉病生物防治研究进展。
【结果】自然界拥有丰富的荔枝霜霉菌生防资源。
我国对荔枝霜霉病生物防治研究比较活跃，但现行研究以对拮抗植物、微生物的初筛为主要目的，停留在对拮抗生物代谢产物的活性测试水平，对活性物质的生化性质探讨不够深入，阻碍了荔枝霜霉病生防药物的开发与应用，资源价值没有真正得到实现。
【建议】以拮抗荔枝霜疫霉菌活性成分为核心，加强对其结构鉴定、化学构效分析及其诱抗和抑菌机理等研究，为研制新型生物农药奠定更坚实的理论基础和物质基础。
【总页数】7页(P72-78)
【作者】徐迟默;谢龙莲;曾筱芬;温衍生
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S436.67
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荔枝霜疫霉病发生规律及防治技术的试验研究
荔 枝 园采用对 角线 ５点 调查 法 ， 调查 ５株树 ， 共 花期 调 查所 有花穗 病 害 的发 生情 况 ， 期 每株 树 调查 ２ 果 ０ 个果 ， 每点 调 果 １０个 果 ， ０ 每个 荔 枝 园 调查 ５０个 ０ 果 。调查 时间是 每年 荔 枝 疏 花 短 花 后 １ ０—１ｄ 荔 ５、
维普资讯
试验推 广
荔枝霜疫霉病发生规律 及防治技术 的试验研 究
蔡 永春
（ 广东 省廉江市农作物病虫预测预报站 ， 廉江 ５ ４０ ） ２４ ０
中图分类号 ：４ １ ９ ￥ ８ ．
文献标识码 ： Ｂ
文章 编号 ：０ ５— １４ ２０ ） ２— ０ ２— ２ １０ ６ １ （０ ８ ０ ０４ ０
（２８ ； ７ 防效不同程度在下降， ４．％）药后 ｄ 仍以联苯菊 酯Ｅ Ｃ防效最好 为 ７ ．％ ， ７２ 其次 为苦 参碱 Ｅ ５ ．％ 。 Ｃ２３
经过药 后 ３ 、ｄ７ ｄ５ 、ｄ各 处理 间防效 进行 方 差分 析 ， 表 明药后 ３ 、ｄ７ ｄ５ 、ｄ的 防效 差异 显著 ， 各处 理 间 防效 差 异显著 ， 联苯菊酯 Ｅ 、 Ｃ 苦参 碱 Ｅ Ｃ防效 与对 照有 极显 著 差异 ， 说明药 后 ５ ｄ各药 剂 防效 最好 ， 苯菊 酯 Ｅ 联 Ｃ 与苦参 碱 Ｅ Ｃ防治烟粉虱效果较好 。
收稿 日期 ：０ ８— ２— ３ ２０ ０ ０
ｃ试验 地基 本情况 试 验地 点设在 广 东省廉 江 、
（０３ ） ５ ．％ 、吡 虫 啉 ＷＰ （ ９ ３ ） ４ ． ％ 、啶 虫 咪 ＷＰ
药， 有很 好 的推 广 前 景 。天然 除虫 菊 素 Ｅ Ｃ可 作 为 轮 换用 药 品种 的首 选 。据华 中农业 大学 进行分 子生 物学分 析 的初 步结 果 ， 北省 烟粉 虱有 ３种生 物型 ， 湖 Ｂ型 为其 中之 一 。据有 关 烟 粉 虱 抗 药 性 研 究结 果 ，
【荔枝病虫害防治】什么是荔枝霜疫霉病,如何防治？附图片
【荔枝病虫害防治】什么是荔枝霜疫霉病，如何防治？附图片荔枝霜疫霉病又叫荔枝霜霉病、荔枝疫病，属于真菌病害，荔枝霜疫霉病有哪些症状？荔枝霜疫霉病发病原因是什么？如何防治荔枝霜疫霉病的发生？以下耕种帮就作详细介绍，供网友们参考。
一、荔枝霜疫霉病症状及危害1、枝干发病症状：荔枝枝干发生霜疫霉病后果柄和结果小枝发病后产生褐色病斑。
2、叶处发病症状：荔枝叶片发生霜疫霉病初期在叶面出现褐色小斑，后扩展为不规则形病斑，淡黄色，病斑两面长出白色霜霉状物。
老叶发害通常在中脉处断续变黑，沿着中脉出现褐斑，潮湿时病部着生霜状霉。
3、果实发病症状：荔枝果实发生霜疫霉病后果蒂处先产生褐色不规则形病斑，迅速扩展，最后全果果皮呈暗褐色至黑色，果肉腐烂发出酒味或酸味，流出褐色汁液。
潮湿时病部表面长出白色霜霉状物。
果实受害时，病斑迅速扩大至全果，使整个果实变色、脱落，造成大量落果，对产量影响较重。
二、荔枝霜疫霉病传播途径和发病原因1、荔枝霜疫霉病病菌在病叶和病果上过冬，来年春末夏初产生孢子囊借风雨传播，遇水萌发芽管，或释放游动孢子再长出芽管，侵入叶片和果实，引起病害。
2、由于荔枝开花至果实成熟期，遇多雨天气，易发生霜疫霉病，一般新果园比老果园病害发生普遍，发病重3、由于果园地势低洼，土壤黏重，排水不良，荫蔽度大，枝叶繁茂，结果多，易发生霜疫霉病。
三、荔枝霜疫霉病防治方法1、加强荔枝园的管理，增施腐熟有机肥，以改善土质，并修通畦沟以确保排水良好，在给果树追肥时，要增施磷、钾肥，不宜偏施氮肥，以提高植株抗病力。
2、及时修剪果树病虫枝、重叠枝、过密枝、下垂枝、弱枝、阴枝，以增强树体通风透光性，并清除地面的病果、病叶深埋或烧毁，减少病源。
3、荔枝花蕾期，以保花为目的，施好保花药剂。
以防治荔枝蝽象和霜疫霉病为主，兼治其它病虫。
可用90％敌百虫600～800倍混合53％金雷多米尔600倍或杀毒矾600倍喷雾。
4、谢花结果期，以保护幼果为目的。
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察霜疫霉（Peronophythora litchii）是一种常见的荔枝病原真菌，能够引起荔枝果实的腐烂。
在荔枝果实受到霜疫霉侵染后，果皮的结构会发生一系列变化。
本文通过扫描电镜观察荔枝果皮的结构变化，以期对霜疫霉侵染的病害机制有更深入的了解。
观察样品是在不同侵染时间下的霜疫霉侵染的荔枝果实。
我们观察了未侵染的正常果皮的结构。
果皮由表皮细胞、次生皮层和主皮层构成。
表皮细胞形状多样，大部分为长方形或多边形，有的表面覆盖着细微的毛细结构。
次生皮层为均质的细胞层，主要由细胞壁和细胞质组成。
主皮层为次生皮层的下方，由密集的细胞集群构成，细胞间有一定的基质。
当果实受到霜疫霉侵染后，果皮的结构发生了明显的变化。
在侵染的初期，果皮表面开始出现小斑点，这些斑点是病原真菌的侵染点。
随着病害的发展，侵染点逐渐扩大，并且出现了明显的病斑。
病斑表面比正常果皮更为凹凸不平，且颜色较浅。
在病斑上我们还观察到了一些菌丝的存在，这些菌丝是霜疫霉的主要生长形式，它们能够分泌出各种腐烂酶，破坏果皮的结构。
在进一步的观察中，我们发现病斑处果皮的细胞结构也发生了变化。
在病斑处，果皮的细胞壁变得更加不规则，出现了明显的破损和缺口。
细胞质也发生了明显的变化。
病斑处的细胞质变得更为致密，且出现了丰富的颗粒状物质。
这些颗粒状物质可能是霜疫霉的代谢产物，它们有可能对果皮的结构和生理活性产生了影响。
在进一步的观察中，我们还发现了一些与免疫反应相关的结构。
在病斑附近的果皮上，我们观察到了一些细胞壁增厚现象。
这些增厚的细胞壁可能是果实对霜疫霉侵染的免疫反应，通过增厚细胞壁来抵抗病原真菌的侵染。
我们还观察到了一些球形的结构，这些结构可能是果皮中较大的细胞脱落后形成的残体。
霜疫霉侵染后荔枝果皮的结构发生了明显的变化，包括果皮表面的病斑形成、细胞壁和细胞质的破损和变化以及免疫反应的发生。
这些结构变化可能是霜疫霉侵染导致荔枝果实腐烂的重要原因。
怎样防治荔枝霜疫霉病
2023-11-04contents •荔枝霜疫霉病简介•霜疫霉病的发病条件•防治方法•防治效果评估•结论与展望目录01荔枝霜疫霉病简介定义荔枝霜疫霉病是一种真菌性病害，主要由真菌Plasmopara obducera引起。
症状病害主要发生在果实成熟期，病斑初期呈褐色，后期扩大并变黑，湿度较大时出现白色霉层，最终导致果实腐烂。
定义与症状病原病原菌以卵孢子在土壤中越冬，也可在病残体和腐殖质中存活。
传播途径病原菌通过风雨传播，主要侵染荔枝的果实和叶片。
病原与传播途径病害严重时会导致大量果实腐烂，直接影响荔枝的产量和质量。
影响产量影响品质影响种植效益病害导致果实品质下降，影响销售和价格。
病害增加了农民的防治成本，严重时甚至可能导致种植失败，影响农民的收益。
03对荔枝的影响020102霜疫霉病的发病条件高湿度环境有利于霜疫霉病的发病，因为这种霉菌喜欢在湿润的土壤中生长。
气候因素湿度适宜的温度范围也是霜疫霉病发病的重要因素。
通常，20-25℃的温度环境最适宜霜疫霉病的生长和繁殖。
温度连续的阴雨天气和大量的降雨会使土壤变得过于湿润，为霜疫霉病的滋生提供了良好的环境。
降雨黏土和壤土等排水不良的土壤类型有利于霜疫霉病的发病。
土壤类型土壤湿度过高，如长期积水或地下水位较高的地方，都会为霜疫霉病的滋生提供有利条件。
土壤湿度土壤因素荔枝品种间的抗病性存在差异。
有些品种对霜疫霉病的抵抗力较强，而有些品种则容易感染。
选择适合当地气候和土壤条件的抗病性强的荔枝品种是防治霜疫霉病的重要措施之一。
品种抗性VS03防治方法加强栽培管理合理施肥、浇水、修剪和通风，保持果园的清洁和湿润度，提高果树的抗病能力。
选用抗病品种不同品种的荔枝对抗病性有差异，选择适合当地气候和土壤条件的抗病性强的品种能有效减少病害发生。
实施套袋技术对果实进行套袋，防止病菌直接侵染果实，降低病害发生。
农业防治在花期和果实发育期及时喷药预防，使用保护性杀菌剂如三唑酮、代森锰锌等，以防止病害的发生。
荔枝、龙眼霜疫霉病的发生与防治
雨量/mm
355.2 139.5 176.3 120.1
连续降雨情况
4—23 日除 8 日、16 日、21 日 3 d 外都下雨
4—12 日、16—24 日连续雨天 6—11 日、19—23 日连续雨天
没有连续下雨 3 d 以上
荔枝花穗发
龙眼花穗发病率（%）
病率（%） 水南一号 松风本 立冬本
28.8
病率都在 25%以上，2017 年雨水少发病相对较轻，龙 眼 3 个品种之间发病程度没有明显差异。
本地荔枝果转色至成熟期在 7 月份，如遇连续 降雨或台风暴雨，也有利霜疫霉病发生流行危害。 调查结果（表 2）显示，2014 年、2015 年两年雨水多、 连续降雨日达 8 d、湿度大果发病重，果发病率分别 为 15.8%、14.3% ，2016 年、2017 年雨水少、发病相对 较轻，果发病率在 5%以下。当地龙眼转色至成熟期 在 9 月份，此时雨水少、温度高，不利于病菌的生长、 繁殖，故病害发生较轻 ，根据 4 年调查果发病率均在 5%以下。
科普惠农 植物保护与栽培 ZHI WU BAO HU YU ZAI PEI
【
荔枝、龙眼霜疫霉病的发生与防治
余小玲
福建省宁德市蕉城区植保植检站，福建 宁德 352100
摘 要：霜疫霉病是福建省宁德市蕉城区荔枝、龙眼严重病害。本文主要根据生产实践总结蕉 城区荔枝、龙眼霜疫霉病发生特点和防治措施。
关键词：荔枝；龙眼；霜疫霉病；发生特点；防治
福建省宁德市蕉城区地处福建省东北部沿海， 属中亚热带海洋性季风湿润气候，种植荔枝、龙眼面 积 1 867 hm2，形成沿海内海湾晚熟荔枝龙眼带。霜 疫霉病是蕉城区荔枝、龙眼严重病害，该病主要危害 花穗和果实，也危害嫩梢、叶片，大多数年份发病率 一般在 15%以上，严重的高达 50%，造成大量落花、 落果、裂果和烂果，严重影响产量和品质，经济损失 严重，产业发展受阻。为了做好本地区荔枝、龙眼霜 疫霉病防治工作，笔者通过 2014—2017 年对荔枝、 龙眼霜疫霉病观察调查，对该病发生规律及防治措 施进行探讨。
中国荔枝病原真菌分离和鉴定
中国荔枝病原真菌分离和鉴定张新春;高兆银;肖茜;彭元科;王家保【摘要】为了解全国荔枝存在的病原真菌种类,对来自全国6省18个市地的108个荔枝品种的162份病害样本进行分离鉴定,得到255个病原真菌菌株,涉及21个种,其中13种已有记录在荔枝上发生,8种未有在荔枝上报道出现.炭疽菌和镰刀菌所占比例最多、分布范围最广、涉及荔枝品种最多,在荔枝叶片、果实和茎干上几乎都能分离到,霜疫霉菌(Peronphythora litchi)只在果实上分离到.叶部是病原真菌存在的最主要部位.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2014(041)016【总页数】6页(P81-84,95,封3)【关键词】荔枝;病原真菌;种类;鉴定【作者】张新春;高兆银;肖茜;彭元科;王家保【作者单位】中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101;鄂州市鄂州经济开发区建设管理局,湖北鄂州436000;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101【正文语种】中文【中图分类】S432.4+4荔枝（Litchi Chinensis Sonn.）属无患子科（Sapindaceae）荔枝属（Litchi Sonn.）常绿果树。
荔枝原产于我国，至今已有超过2 000多年的栽培历史，现有栽培面积55.3万hm2，年产量100多万t，是我国热区主要热带果树之一。
荔枝病害已经成为影响荔枝产量和质量的重要制约因素。
荔枝病害种类繁多，特别是侵染性病害的发生，危害更严重，不仅造成大量落果、烂果，而且由于防治病害，喷施农药特别是采收季节的滥用农药不仅危害果园生态平衡，更因为超量的药物残留对人体产生极大损害。
由于目前能对荔枝生产和经济效益产生较大影响主要是真菌病害，而且造成病害的病原物归属不同，使得相应的防治措施也不同，因此摸清荔枝园存在的主要真菌病害种类对于提高防治效率具有重要意义。
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察
霜疫霉侵染后荔枝果皮结构变化的扫描电镜观察霜疫霉是一种常见的真菌病，也是荔枝果实的主要病害之一。
荔枝果实在成熟期后易受到霜疫霉的侵害，导致果实腐烂，影响果品质量和市场价值。
而荔枝果实的外观变化往往是由于果皮内部结构的变化所引起的。
本研究旨在利用扫描电镜对霜疫霉侵染后荔枝果皮的结构变化进行观察，探究霜疫霉对荔枝果皮的影响，为防治霜疫霉提供科学依据。
一、材料与方法1. 材料：选取新鲜健康的荔枝果实和已被霜疫霉侵染的荔枝果实各一批。
2. 方法：分别对健康果实和侵染果实进行扫描电镜观察。
具体操作步骤为：（1）样品制备：将荔枝果实的果皮切割成适当大小的薄片，进行表面处理和固定。
（2）扫描电镜观察：将制备好的样品放入扫描电镜观察室，进行高倍率的观察和拍摄，以获得果皮结构的详细图像。
二、结果与分析1. 健康果实的果皮结构在扫描电镜下观察健康荔枝果实的果皮结构，可以看到果皮表面光滑，无明显裂纹和病斑。
果皮内部细胞紧密排列，胶质层规整，气孔清晰可见，整体结构完整。
2. 霜疫霉侵染果实的果皮结构而对于霜疫霉侵染的荔枝果实，扫描电镜下观察到果皮表面出现大片病斑，表面粗糙，且有明显的霉菌丝状物附着。
果皮内部细胞排列紊乱，胶质层破损，局部组织溃烂，气孔明显受阻。
经过对健康果实和侵染果实的扫描电镜观察，可以清晰地看到霜疫霉侵染后荔枝果皮结构发生了明显变化。
霜疫霉侵染导致果皮表面病斑严重，果皮内部细胞结构紊乱，胶质层破损，气孔受阻，这些变化不仅影响了果实的外观和口感，更可能影响荔枝果实的新陈代谢和营养代谢，进而影响果实的品质和保质期。
三、结论与展望霜疫霉侵染后荔枝果皮的结构变化明显，这些变化与果实的腐烂和品质下降密切相关。
在荔枝的种植、采摘、储藏和销售过程中，应加强对霜疫霉病害的防治措施，减少果实的霜疫霉侵染，保护果实的外观和内部结构，确保果实的品质和市场竞争力。
未来的研究方向可以进一步探究霜疫霉侵染对荔枝果实其他组织结构的影响，深入研究霜疫霉侵染的机制以及开发更有效的防治方法，为荔枝产业的可持续发展提供技术支持和科学指导。
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1 荔枝霜疫霉病病原菌鉴定及生物学特性研究 荔枝霜疫霉病(Peronophythora Litchi Chen et al.)是目前荔枝生产上的重要病害之一[1~2]，严重影响荔枝品质、产量以及鲜果的贮运和外销。发病初期果皮表面出现褐色或黑色的不规则病斑，后来迅速扩展蔓延至全果变黑，果肉腐烂，有酸味和酒味，并流出褐色汁液，病害发生至中后期，病部表面长出白色霜霉状物。叶片受害后出现褪绿斑块，以后病斑扩大成为不规则的黄绿色斑块；空气湿度大时，病部会长出白色霜霉状物[3]。该病在广东、广西、福建、海南、台湾均有发生，不仅严重危害接近成熟的果实，也危害嫩梢、叶片、花穗、结果小枝、果柄及幼果，引起大量落花、落果、裂果和烂果，产量损失可达30%～80%[4~5]。本文对荔枝霜疫霉病原菌的生物学特性的研究为有效地防治病害、降低产量损失等提供理论依据。
1 材料和方法 1.1 病原来源 从海南省澄迈县永发镇采集荔枝霜疫霉病病果，组织分离获得菌株，进行单孢分离纯化菌种并将纯化后的菌种保存在PDA斜面上待用。 1.2 病原菌致病性测定 无菌条件下，将菌饼接种到健康无病的荔枝叶片，保湿24 h，设接种清水为对照，重复3次。 1.3 病原菌的分离鉴定及培养性状 27 ℃下在PDA平板上对病菌纯化培养，对菌落形态特征和病原菌形态特征进行观测及记录。 1.4 病原菌生物学特性测定 1.4.1 温度对菌丝生长的影响 将菌饼移至PDA平板中央，分别置于5 ℃、10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、27 ℃、30 ℃和35 ℃共8个梯度的恒温培养箱中培养4 d和7 d后，测量菌落的直径。每处理3个平板，重复3次（下同）。 1.4.2 pH对菌丝生长的影响 用1 mol/L的HCl和NaOH调节PDA培养基的pH值，使之分别为3、4、5、6、7、8、9、10、11和12共10个梯度。将菌饼移至pH梯度培养基平板中央，27 ℃的恒温箱中培养4 d和7 d后，测量菌落的直径。 1.4.3 碳源对菌丝生长的影响 2
用等量的蔗糖、麦芽糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、D-果糖、D-半乳糖、可溶性淀粉、甘油和L-阿拉伯糖共10种碳源分别与PDA培养基中的葡萄糖等量置换，配制成不同碳源的培养基，将菌饼接种在培养基平板中央，置27 ℃的恒温箱中，培养4 d和7 d后，测量菌落的直径。 1.4.4 氮源对菌丝生长的影响 用等量的甘氨酸、酵母浸膏、L-组氨酸、草氨酸、硝酸铵、硫酸铵、氯化铵、牛肉浸膏、蛋白胨和尿素共10种氮源分别与Czapek培养基中硝酸钠等量置换，配成不同氮源的培养基。将菌饼移至培养基平板中央，置于27 ℃的恒温箱中，培养4 d和7 d后，测量菌落的直径。 1.4.5 光照对菌丝生长的影响 将菌饼移至PDA平板中央，置于完全黑暗、12 h光暗交替和完全光照3个处理条件下，于27 ℃恒温培养箱中培养4 d和7 d后，测量菌落的直径。 1.4.6 致死温度和时间的测定 于45 ℃、50 ℃、55 ℃、60 ℃、恒温水浴锅中的试管内加入1 ml孢子悬浮液，处理5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min后迅速冷却，将孢子悬浮液滴于载玻片上保湿培养12 h后观察，镜检孢子萌发情况。
2 结果和分析 2.1 致病性测定结果 通过对致病性测定观察可见，在健康的荔枝果上产生了明显的病原菌菌丝，取其病原菌在显微镜下观察，发现病原菌与原分离培养的荔枝霜疫霉菌菌落、孢囊梗、孢子囊相同，根据柯氏法则，确定了该病菌对荔枝的致病性。如图1
图1 荔枝霜疫霉菌病原菌接种健康果和叶产生的病症 2.2 病原菌的分离鉴定及培养性状 菌落形态：PDA平板上菌落突起，高1～2mm，菌丝絮状，白色质密，边缘整齐（如图2）。 病原菌形态：孢囊梗直立，双分叉锐角分枝，前端逐渐变细；孢子囊柠檬形、椭圆形， 3
无色至淡褐色，顶端有明显的乳突，可直接萌发或间接萌发，直接萌发产生芽管，间接萌发产生游动孢子，一个孢子囊可产生5～14个游动孢子，多为6～8个；游动孢子肾脏形，侧生双鞭毛。根据观测得到的病原菌形态特征，查阅有关文献后，可初步确定此菌为荔枝霜疫霉菌[6~7]。
菌落形态 孢囊梗及孢子囊 图2 荔枝霜疫霉病菌 2.3温度对菌丝生长的影响 菌丝在10～30℃范围内均可生长，适宜温度为20～30 ℃，最适温度为27 ℃，10～15 ℃菌丝生长缓慢，5 ℃和35 ℃菌丝停止生长（见图3）。
0102030405060
510152025273035温度/℃
菌落直径/㎜
4d菌落直径7d菌落直径
图3 温度对荔枝霜疫霉菌丝生长的影响 Fig.3 Effect of temperature on mycelial growth of peronophythoraceae litchi
2.4 PH对菌丝生长的影响 菌丝在pH 3~12均能生长，适宜pH为4~8，最适pH为6，pH大于8时，对菌丝生长有抑制作用，说明酸性条件适合菌丝生长（见图4） 4
01020304050603456789101112PH值
菌落直径/㎜
4d菌落直径7d菌落直径
图4 pH对荔枝霜疫霉菌丝生长的影响 Fig.4 Effect of temperature on mycelial growth of peronophythoraceae litchi
2.5碳源对菌丝生长的影响 供试的11种碳源中都可促进菌丝生长。其中荔枝霜疫霉菌菌丝在可溶性淀粉、山梨酸和甘露醇为碳源的培养基上菌丝生长最快，与其它碳源达极显著差异；而在以D-果糖为碳源的培养基上生长最慢。（见表1） 表1 碳源对荔枝霜疫霉菌丝生长的影响 Table1 Effect of carbon sources on mycelial growth of peronophythoraceae litchi
碳源 菌落直径/mm 4 d 7 d 乳糖 22.58CDd 45.25CDd 可溶性淀粉 30.13Aa 55.95Aa 山梨酸 27.08ABb 53.58Ab 甘露醇 27.80ABb 54.03Aab 麦芽糖 22.33CDd 44.13De 蔗糖 26.58Bbc 49.76Bc 葡萄糖 24.58BCc 46.58Cd D-果糖 8.38Ff 30.03Fg D-半乳糖 21.30Dd 44.78CDde L-阿拉伯糖 15.60Ee 36.40Ef 甘油 24.53BCc 48.83BC 注：不同的大写字母代表在1%的显著性水平，不同小写字母代表在5%的显著性水平。 Note: Different uppercases indicate significance at 1% level and different low ercases indicate significance at 5% level
2.6氮源对菌丝生长的影响 供试的11种氮源中，在草酸铵和尿素上不利于荔枝霜疫霉菌菌丝生长，其他氮源都可促进菌丝生长。其中，以酵母菌膏为氮源的培养基上菌丝生长最快，与其它氮源达极显著差异。（见表2） 5
表2氮源对荔枝霜疫霉菌丝生长的影响 Table2 Effect of nitrogen source on mycelial growth of f peronophythoraceae litchi
氮源 菌落直径/mm 4 d 7 d 氯化铵 14.80Cc 24.86Dd L-组氨酸 11.45Dd 22.40Ee 甘氨酸 20.62Bb 40.63Bb 硫酸铵 9.65Ee 16.45Ff 硝酸铵 15.33Cc 25.38Dd 牛肉浸膏 12.70Dd 22.90Ee 硝酸钠 11.93Dd 25.38Dd 酵母菌膏 25.58Aa 46.43Aa 蛋白胨 19.35Bb 35.68Bb 草酸铵 0.00Ff 0.00Ff 尿素 0.00Ff 0.00Ff 注：不同的大写字母代表在1%的显著性水平，不同小写字母代表在5%的显著性水平。 Note: Different uppercases indicate significance at 1% level and different low ercases indicate significance at 5% level
2.7光照对菌丝生长的影响 试验结果表明病原菌菌丝在完全光照、光暗交替各12 h及完全黑暗这3种处理下，三者之间的差异极显著，其中光暗交替有利于菌丝生长。（见表3） 表3 不同光照对荔枝霜疫霉菌丝生长的影响 Table3 Effect of light on mycelial growth of peronophythoraceae litchi
不同光照 菌落直径/mm 4 d 7 d 全光照 24.5Cc 51.75Cc 光暗交替 31Aa 59Aa 全黑 28.75Bb 56.25Bb 注：不同的大写字母代表在1%的显著性水平，不同小写字母代表在5%的显著性水平。 Note: Different uppercases indicate significance at 1% level and different low ercases indicate significance at 5% level
2.8 致死温度和时间测定 试验结果表明荔枝霜疫霉菌游动孢子的致死温度和时间为45 ℃ 30min，50 ℃ 30min和55 ℃ 5min。 3 结论与讨论 结果表明，菌丝生长的适宜温度是20~30 ℃，最适温度为27 ℃；适宜pH值为4~8，
最适pH值均为6；以可溶性淀粉、山梨酸和甘露醇为碳源有利于病原菌的生长；以酵母菌膏为氮源最有利于该菌生长，不同光照处理下，光暗交替有利于菌丝生长，游动孢子的致死温度和时间为45 ℃ 30min，50 ℃ 30min和55 ℃ 5min。