醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质

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影响血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验分离效果的因素.

影响血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验分离效果的因素.

影响血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验分离效果的因素:【 1】电泳介质 pH 的影响:对于蛋白质及氨基酸等两性物质,电泳介质的 pH 影响蛋白质的电泳情况即可决定蛋白质的带电量(Q 。

pI-pH<0,分子带正电荷,向负极泳动;pI-pH>0,分子到负电荷,向正极泳动;pI-pH=0,兼性离子,净电荷为零。

pH 偏离等电点越远,分子所带净电荷越多,其泳动速度越快。

所以,当┃ pI-pH ┃接近零时,分子处于等电状态,不移动,影响条带清晰度,从而影响实验分离效果。

【对应注意点】由于血清蛋白质的等电点多在 pH 4~6 之间,因此,分离血清蛋白常用 pH 8.6的巴比妥缓冲液或者三羟甲基氨基甲烷 (Tris 缓冲液。

【 2】缓冲溶液的离子强度:离子强度低,电泳速度快,分离区带不易清晰;离子强度高,电泳速度慢,但区带分离较清晰。

离子强度过低,缓冲溶液的缓冲量小,不易维持 pH 的恒定;离子强度过高,则降低蛋白质的带电量使电泳速度减慢。

所以,当离子强度过低时,电泳速度虽快,但易引起分离区带不清晰; 当离子强度过高时,虽分离区带清晰,但点用速度过慢,所以要选择合适的离子强度。

【对应注意点】离子强度的选择要合适, 一般常用的离子强速为 0.02~0.2之间。

【 3】电场强度的影响:电场强度和电泳速度成正比关系。

电场强度一每厘米的电势差计算,也称电势梯度。

电场强度越高,则带电离子的移动速度越快。

随着电场强度的增高,电流强度增加,产热也增多。

产热的不良后果:①引起水的蒸发,改变溶液 pH 及离子强度②引起介质温度高,可使蛋白质变性。

另外,当电场强度过高时,电泳速度也会很快,分离区带将不清晰。

【对应注意点】电泳实验要控制在一定范围之内, 进行高压电泳时, 必须装备有效的冷却装置。

【 4】电渗:在电场中,由于多孔支持物吸附水中的离子使支持物表面相对带电,在电场作用下,溶液就像一定方向移动,此种现象称作电渗。

醋酸纤维薄膜电泳分离人血清蛋白质

醋酸纤维薄膜电泳分离人血清蛋白质
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3.醋酸纤维素溶于有机溶剂(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙 酸乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。 该膜具有均一的泡沫状的结构,厚度约为120 μm,有很 强的通透性,对分子移动阻力很小。该薄膜电泳具有微量、 快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点 4. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条 区带,从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、 β球蛋白及γ球蛋白,经染色可计算出各蛋白质的百分含 量。
生物化学实验之三
醋酸纤维薄膜电泳 分离人血清蛋白质
郑州轻工业学院 王章存
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
一、实验目的
• 了解电泳技术的一般原理 • 学习醋酸纤维薄膜电泳的操作
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二、实验原理
1.电泳:是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相 反的电极移动的现象。 在一定pH条件下,不同的蛋白质由于具有不 同的等电点而带不同性质的电荷,因而在一定的 电场中它们的移动方向和移动速度也不同,即它 们的电泳迁移率不同,因此,可使它们分离 2. 影响电泳迁移率的因素: 内在因素:蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和 形状 外界因素:电场强度、溶液的pH值、溶液的离子 强度和电渗现象
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浸泡:将2×8 cm醋酸纤维薄膜迎着光辨别光泽面和无光泽面。在无光泽 面距短边一端1.5 cm处用铅笔轻轻画一条点样线,将之置于盛有缓冲液 的平皿中,浸泡30 min方可用于点样 点样:用镊子取出浸透的薄膜,夹在两层粗滤纸内吸干多余的缓冲液, 然后平铺在玻璃板上(无光泽面朝上)。在另一 载玻片上滴一滴血清, 点样器(用盖玻片的一边)在血清上蘸一下(可来回移动一次),再将 点样器轻印在加样线上,使血清渗透到薄膜内,形成均匀的直线
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3.点样: 点样时,先将毛细血管插入血清中,封住上端, 在载玻片的一端均匀涂过,使样品连续、均匀、适量,把 载玻片在薄膜毛面上轻而温和地印一下。点样区距阴极端 1.5cm处(见图)。此步是实验的关键。

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告引言:血清蛋白是人体内一种重要的生物大分子,它在维持人体正常生理功能中起着至关重要的作用。

因此,对血清蛋白的研究一直备受科学家的关注。

本实验旨在利用醋酸纤维薄膜电泳技术,对血清蛋白进行分离,以期进一步了解血清蛋白的组成和功能。

实验方法:1. 准备样品:从健康人体中提取血清样品,将其离心,得到血清上清液。

2. 制备醋酸纤维薄膜:将醋酸溶液倒入玻璃容器中,将玻璃容器放置在恒温槽中,使醋酸溶液温度保持在60℃左右。

然后,将玻璃容器从恒温槽中取出,迅速浸入冷水中,使醋酸溶液迅速凝固形成醋酸纤维薄膜。

3. 实验操作:将醋酸纤维薄膜放置在电泳槽中,加入足够的电泳缓冲液,使醋酸纤维薄膜完全浸泡其中。

然后,将血清样品均匀涂抹在醋酸纤维薄膜上,并连接电源进行电泳分离。

4. 电泳条件:设置电泳电压和时间,一般情况下,电泳电压为100V,电泳时间为30分钟。

5. 实验结果:观察电泳结束后的醋酸纤维薄膜,记录血清蛋白的分离情况。

实验结果与讨论:经过电泳分离后,观察到醋酸纤维薄膜上出现了多个带状条纹,这些条纹代表了不同的血清蛋白组分。

根据条纹的迁移距离和形状,我们可以初步判断血清蛋白的分子量和电荷特性。

通过对实验结果的分析,我们可以发现,血清蛋白主要可以分为白蛋白、球蛋白、半胱氨酸蛋白和β-球蛋白等几个主要组分。

白蛋白是血清蛋白中含量最高的成分,迁移速度最快;球蛋白次之,迁移速度较慢;半胱氨酸蛋白和β-球蛋白迁移速度最慢。

这些血清蛋白的分离结果与其分子量和电荷特性有关。

白蛋白分子量较小,电荷较弱,因此迁移速度最快;球蛋白分子量较大,电荷较强,迁移速度较慢;半胱氨酸蛋白和β-球蛋白分子量更大,电荷更强,迁移速度最慢。

结论:本实验利用醋酸纤维薄膜电泳技术成功地对血清蛋白进行了分离,并初步了解了血清蛋白的组成和特性。

通过观察醋酸纤维薄膜上的带状条纹,我们可以对血清蛋白的分子量和电荷特性进行初步判断。

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告实验室报告
题目:醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验报告
一、实验目的
本实验旨在使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离血清蛋白,并分析其分离效果。

二、实验原理
醋酸纤维薄膜电泳技术是一种利用薄膜作为电泳载体,在交流电场中将带电微粒体分离的方法。

其分离原理在于不同电动力学直径的带电微粒体在局部电场中受到的电离流和离子机动力学的影响不同,导致粒径较小的微粒体在电场中移动的速度较快,粒径较大的微粒体则移动较慢,从而实现了分离。

三、实验步骤
1.将5μL血清样品加入凝胶载体中。

2.在醋酸纤维薄膜电泳仪中进行样品电泳分离,设置电场参数:电压300 V,电泳时间30分钟。

3.将分离后的血清蛋白样品涂在聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳定
量和分析。

四、实验结果
通过电泳定量和分析,我们可以得到血清蛋白的分离效果。


们发现,血清蛋白样品在30分钟内可以被醋酸纤维薄膜电泳技术
有效地分离,分离效果良好,明显区分了不同种类的蛋白。

五、结论
醋酸纤维薄膜电泳技术是一种非常有效的血清蛋白分离方法。

通过本次实验,我们得到了良好的分离效果和明确的蛋白种类区分。

这种技术具有高分离效率、高通量、简单易行等特点,可以
在临床医学、药物研发、生命科学等领域得到广泛应用。

此外,在使用醋酸纤维薄膜电泳技术分离血清蛋白时,需要注意控制一定的电场参数,以确保实验效果。

生物化学实验2.醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质

生物化学实验2.醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质

5. 染色 电泳完毕后断电,用镊子取出薄膜条投入染
液氨基黑中1分钟,染色过程中不时轻轻晃动 染色皿,使染色充分。 6. 漂洗
用漂洗液漂洗,不停摆动薄膜条,至背景 颜色脱去。将薄膜夹在干净滤纸中,吸去多余 溶液。
注意: 控制染色和漂洗的时间,防止背景过深或 某些区带太浅。
五、结果与分析:
一般的染色后的薄膜上 可显现清楚的五条区带。 从正极端起,依次为白蛋 白、α1球蛋白、α2球蛋 白、β球蛋白和γ球蛋白
实验二 醋酸纤维素薄膜电泳分离蛋白质
蛋白质是生命的物质承担者,要揭示生命 的本质,探讨各种生命活动的物质基础,就必 须对蛋白质的结构、性质和功能进行深入的研 究,这首先就需要将蛋白质分离出来,进行纯 化,再进一步进行测定。
蛋白质是是构成人体及动物细胞组织的重要成分,参 与机体内的各种生命活动
人体内蛋白质含量直接关系着人体的健康状况,测定 蛋白质含量在临床上尤为重要。
注意: 分清电泳槽上的正负极 如有很多膜条同时电泳时,膜条间应相距 1~3mm ,使之不互相接触,以免相互干扰。
4. 电泳 将电泳槽和电泳仪连接,注意电泳槽上的
正负极(红正黑负)。调节电流1.5mA/1膜; 通电时间45-60分钟。
点样端
1.滤纸桥 2.电泳槽 3.醋酸纤维素薄膜 4.电泳槽膜支架 5.电极室中央隔板
区带观察:1.排列顺序 2.区带宽窄 3.颜色深浅
临床意义
肝硬化:白蛋白降低,γ-球蛋白极度升高; 肝癌患者:白蛋白与球蛋白间多出一条甲胎蛋白
(AFP)带; 急慢性肾炎、肾病综合症:白蛋白降低,a1、a2
和β球蛋白升高;
注意事项
分清光面和毛面 取样要适量、均匀(点样器下端均匀沾有一层血 清即可) 点样时动作要轻稳,用力要均匀,点样时用力不 能太大,以免损坏膜片或印出凹陷影响电泳区带 分离效果。 只能点一次。 分清电泳槽上的正负极 如有很多膜条同时电泳时,膜条间应相距1~ 3mm ,使之不互相接触,以免相互干扰。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验一.实验原理1、电泳是指带电质点在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。

在一定pH条件下,不同的质点由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,即它们的电泳迁移率不同,因此,可使它们分离。

2、影响电泳迁移率的外界因素:电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象。

3、影响电泳迁移率的内在因素:质点所带净电荷的量、质点的大小和形状。

4、采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素薄膜电泳。

醋酸纤维素薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点。

5、醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯,将它溶于有机溶剂(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。

该膜具有均一的泡沫状的结构,厚度约为120 μm,有很强的通透性,对分子移动阻力很小。

6、本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血清蛋白。

血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。

各种蛋白质由于氨基酸组成、分子量、等电点及形状不同,在电场中的迁移速度不同。

以醋酸纤维素薄膜为支持物,正常人血清在pH8.6的缓冲体系中电泳,染色后可显示5条区带。

其中清蛋白的泳动速度最快,其余依次为α1-、α2-、β-及γ-球蛋白。

二.实验仪器和试剂✧器材醋酸纤维素薄膜(3×8cm),培养皿,载玻片,电泳仪,电泳槽,粗滤纸,镊子✧材料新鲜血清(未溶血)✧试剂1、巴比妥缓冲液(pH 8.6,离子强度0.06):巴比妥1.66g, 巴比妥钠12.76g,加水至1000ml。

置4℃冰箱保存,备用。

(已配置)2、染色液:氨基黑10B 0.5g, 甲醇50ml, 冰醋酸10ml,蒸馏水40ml,混匀。

3、漂洗液:含95%乙醇45ml,冰醋酸5ml,蒸馏水50ml,混匀。

4、NaOH溶液:称取NaOH 16g,定容至1000ml。

实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳(共享)

实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳(共享)

实验一血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳(共享)一、实验目的本实验旨在掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作的技能,通过血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳分析,了解蛋白质电泳分析中常用的方法和技术,并且能够初步理解血清蛋白质电泳图谱的含义和影响因素。

二、实验原理1. 蛋白质分离原理蛋白质分离是利用蛋白质之间在电场中的运动迁移率的不同分离的。

蛋白质在电场中的运动迁移率取决于蛋白质分子的大小、形状、电荷性质等的不同。

2. 醋酸纤维素薄膜电泳原理醋酸纤维素薄膜电泳是一种以醋酸纤维素膜为电泳区间的蛋白质电泳方法。

其原理为,蛋白质在正常向电场中发生运动,随着蛋白质运动迁移,逐渐进入膜孔中,受到膜孔的限制,蛋白质停止迁移。

大分子的蛋白质分子无法进入膜孔,小分子的蛋白质可以进入膜孔,分子大小的差异导致了蛋白质的分离。

醋酸纤维素膜孔的大小通常小于3纳米,蛋白质要进入膜孔需要满足一定的条件,如形状、电荷、大小等,因此通过醋酸纤维素膜孔的筛选效果,可以将蛋白质分离出不同性质和大小的蛋白质组分。

三、实验步骤1. 操作前准备:① 气泡清除:取适量蒸馏水,通入空气,将水搅动形成气泡,并将其排出,重复多次,以去除气泡。

② 涂膜:取新的醋酸纤维素膜,利用毛刷刷上适量真空脱泡机中的真空润湿液,边刷边使薄膜平铺,直至全部涂膜结束。

2. 样品制备① 取0.5 mL 的实验样品,放入1.5 mL 的离心管中,室温下放置5 min,使蛋白质沉淀和分散。

② 在超净工作台或洁净室内操作,将样品香磨匀,取样板,向上转移液体吸头轻轻吸取一下,将液体加入样品槽中。

3. 电泳操作① 将准备好的醋酸纤维素膜,贴在电泳仪的隔板上,并将隔板安装在电泳槽内。

② 将电泳槽中的电泳缓冲液(TGE)加热并耗尽气泡之后,轻轻将样品槽放入电泳槽中,注意不能与电泳膜接触,最后慢慢加入样品针头的样品。

③ 大致运行5-10min 后,可观察到样品在膜上积累。

④ 电泳完成后,将电泳槽内的醋酸纤维素膜取出,将其在甲醇以及蒸馏水中洗涤3次,最后在蒸馏水中洗涤一次。

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告

血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告一、实验目的1、掌握血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的基本原理。

2、熟悉电泳操作的基本技术和方法。

3、了解血清蛋白质的组成和相对含量。

二、实验原理血清中含有多种蛋白质,它们在 pH 值为 86 的缓冲液中均带负电荷,在电场中会向正极移动。

由于各种蛋白质分子大小、形状及所带电荷量不同,在电场中的迁移速度也就不同,从而可将血清蛋白质分离成不同的区带。

醋酸纤维薄膜具有均一的泡沫样结构,渗透性强,对蛋白质吸附极少,因此适合用于电泳。

三、实验材料1、器材电泳仪、电泳槽、醋酸纤维薄膜(2×8cm)、点样器、镊子、培养皿、滤纸、铅笔、直尺。

2、试剂巴比妥缓冲液(pH 86,离子强度 006)、染色液(氨基黑 10B)、漂洗液。

3、样本新鲜血清四、实验步骤1、准备醋酸纤维薄膜将醋酸纤维薄膜浸泡于巴比妥缓冲液中,浸泡时间约为 30 分钟,直至薄膜完全浸透。

2、点样取出浸透的薄膜,用滤纸吸去多余的缓冲液,在无光泽面距一端15cm 处,用铅笔轻轻划一条横线作为点样线。

然后,用点样器蘸取血清,均匀地点在点样线上,使血清形成一条细窄的直线。

点样量要适中,过多会导致蛋白质区带扩散,过少则不易观察到清晰的区带。

3、电泳将点样后的薄膜小心地放入电泳槽中,点样端靠近负极,使薄膜平整地贴在电泳槽的支架上。

盖上电泳槽盖,接通电源,调节电压为120V,电泳时间约为 50 60 分钟。

4、染色电泳结束后,取出薄膜,直接放入染色液中浸泡 5 10 分钟,使蛋白质区带染上颜色。

5、漂洗将染色后的薄膜取出,放入漂洗液中漂洗数次,直至背景无色,蛋白质区带清晰可见。

五、实验结果经过染色和漂洗后,在醋酸纤维薄膜上可以观察到清晰的血清蛋白质区带。

从正极到负极依次为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白。

通过与标准图谱对比,可以大致估算出各蛋白质组分的相对含量。

六、结果分析1、影响电泳结果的因素(1)点样不均匀或点样量过多过少都会导致区带不清晰或不完整。

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生物化学实验
醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质
一、实验目的
掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法

二、实验原理
蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,
在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电
场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同
一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。
血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由
于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速
度不同。由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH值7.0,所以在
pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。
蛋白质名称 等电点 相对分子质量
白蛋白 4.88 69000
α1-球蛋白 5.06 200000
α2-球蛋白 5.06 300000
β-球蛋白 5.12 90000~150000
γ-球蛋白 6.85~7.50 156000~300000
在一定范围内,蛋白质的含量与结合的燃染料量成正比,故可将蛋白质区带
剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。也可
以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。
肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、慢性炎症、妊
娠等都可以使白蛋白下降。肾病时α1、α2、β球蛋白升高,γ-球蛋白降低。
肝硬化时α2、β-球蛋白降低,而α1、γ-球蛋白升高。

三、实验器材
1、醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm)
2、人血清;
3、烧杯及培养皿 数只;
4、点样器;
5、竹镊子;
6、玻璃棒;
7、电吹风;
8、试管 六只;
9、恒温水浴锅;
10、电泳槽;
11、直流稳压电泳仪;
12、7220型分光光度计;
13、剪刀

四、实验试剂
1、巴比妥-巴比妥钠缓冲液:取两个大烧杯,分别称取巴比妥钠和巴比妥溶
解于500ml蒸馏水中;
2、染色液,可反复使用;
3、漂洗液:取乙醇45ml,冰醋酸10ml,混匀;
4、浸出液:0.4mol/L NaOH溶液;
5、透明液:取冰醋酸25ml、无水乙醇75ml,混匀。

五、实验操作
1、准备和点样
取一条醋酸纤维薄膜,浸入缓冲液中,完全浸透后,用镊子轻轻取出,将薄
膜无光泽的一面向上,平放在干净滤纸上,再放一张干净滤纸吸取多余的缓冲液;
用玻棒蘸取少量血清,涂在点样器上,然后轻轻于距纤维薄膜一端1.5cm处
接触,样品即呈一条状突于纤维膜上。待血清透入膜内,将薄膜平贴于已放在电
泳槽上、并已浸透缓冲液的纱布上,点样端为阴极;
2、电泳
接通电源,设定电泳电压为100V,通电50分钟;
3、染色
电泳完毕,将薄膜浸于染色液中10分钟,取出,用漂洗液漂至背景无色,
再浸于蒸馏水中;
4、定量
将漂净的薄膜用滤纸吸干,剪下薄膜上各条蛋白质色带,另取一条与各区带
近似宽度的无蛋白附着的空白薄膜,分别浸于4.0ml 0.4mol/L NaOH溶液中,37℃
水浴10分钟,色泽浸出后,用7220型分光光度计在590nm处比色,以空白膜条
洗出液为空白调零,测定各管的吸光度。
5、透明
另外取电泳好的薄膜,待其完全干燥后,浸入透明液中20分钟,取出,平
贴于干净玻片上,干燥,即得背景透明的电泳图谱。

六、实验数据记录
蛋白质名称 吸光度 各组分比率%
白蛋白 0.504 65.1
α1-球蛋白 0.038 4.9
α2-球蛋白 0.052 6.7
β-球蛋白 0.097 12.5
γ-球蛋白 0.083 10.8

设各部分吸光率为:AAAAA、、、、白21。则吸光度总合为:


A= 白A+ 1A
+2A+A+A=0.774

白蛋白比率=白A/总A=0.651
α1-球蛋白比率=1A/总A=0.049
α2-球蛋白比率=2A/总A=0.067
β-球蛋白比率=A/总A=0.125
γ-球蛋白比率=A/总A=0.108

七、实验讨论与总结
1、什么是血清
将抽取的血液置入不加抗凝剂的试管中,使血凝固,析出的上清液就是血清。
血清中所含的蛋白成分与血浆相比,少了纤维蛋白原,而主要是白蛋白、球蛋白。
2、由于蛋白的绝大部分均由肝脏合成,所以,各种蛋白质的质与量的变化,
除与免疫性疾病等有关外,主要反映肝脏的生理、病理情况。
3、醋酸纤维素薄膜
醋酸纤维素(二乙酸纤维素)薄膜具有匀一的泡沫状结构,是由醋酸纤维素
加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体有以下优点:①电泳后区带界限
清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它对各种蛋白质(包括血清白
蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无拖尾现象;④对染料也
没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全无色。它的电渗作
用虽高但很均一,不影响样品的分离效果,由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低,因
此必需在密闭的容器中进行电泳,并使用较低有电流避免蒸发。
醋酸纤维素薄膜经1,4-二氧六环、透明液或液体石蜡处理即透明,因而可
得背景为无色的电泳图谱。
4、血清提取蛋白
从血清中提取的蛋白质,适用于食品工业的食品添加剂和医药制剂。
通常提取蛋白质的方法是离心分离,除去血浆,使二价铁血红素酸化,并将
其排除。
制作方法 :取经过稳定的血液,作离心分离15~30分钟,每分钟转速为2
500~3 000转。从而取得固形物,去除血浆,用水使固形物沉渣溶解。置血红
素于培养基中。为了使培养基酸化而使血红素分子中的二价铁血红素和血球蛋白
的结合体分离 预先制备好醋酸和氯化钠的混合物 并将它加热到90~110℃。混
合时将固形物的溶血产物缓慢地添加到加热的混合物中。重新把温度逐渐地升高
到沸点,煮沸5~15分钟,以便使结合体完全分离,接着将混合物逐步冷却到室
温。为了使二价铁血红素溶解并消除,在混合物中按溶物产物比值2∶1~5∶1
添加乙醚。这时提取出来的蛋白质呈白棉絮状。将溶液过滤,再用乙醚清洗。100
毫升血中提取的蛋白质产品相当于14.4克。应用这种方法,每100毫升的血液
可提高蛋白质得率45%。
5、实验总结
本次实验结果中,γ-球蛋白测得的含量偏低,原因可能是在裁剪电泳条带的时
候遗漏了一条薄膜没有剪下浸洗,分析即γ-球蛋白;另外实验室温度比较低,
电泳距离太短不利于观察分析,应增大电压增长电泳时间。
富不贵只能是土豪,你可以一夜暴富,但是贵气却需要三代以上的培养。孔子说“富而不骄,莫若富而好礼。” 如今我们不缺
土豪,但是我们缺少贵族。
高贵是大庇天下寒士俱欢颜的豪气与悲悯之怀,高贵是位卑未敢忘忧国的壮志与担当之志 高贵是先天下之忧而忧的责任之心。
精神的财富和高贵的内心最能养成性格的高贵,以贵为美,在不知不觉中营造出和气的氛围;以贵为高,在潜移默化中提升我们的素质。以贵为尊,在创造了大量物质财富的同时,精神
也提升一个境界。

一个心灵高贵的人举手投足间都会透露出优雅的品质,一个道德高贵的社会大街小巷都会留露出和谐的温馨,一个气节高贵的民族一定是让人尊崇膜拜的民族。别让富而不贵成为永久的
痛。

分享一段网上流传着改变内心的风水的方法,让我们的内心高贵起来:
喜欢付出,福报就越来越多;喜欢感恩,顺利就越来越多;喜欢助人,贵人就越来越多;喜欢知足,快乐就越来越多;喜欢逃避,失败就越来越多;喜欢分享,朋友就越来越多。
喜欢生气,疾病就越来越多;喜欢施财,富贵就越来越多;喜欢享福,痛苦就越来越多;喜欢学习,智慧就越来越多。

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