抗草甘膦转基因大豆的操作步骤
抗草甘膦转基因大豆的操作步骤
转基因大豆可以抵抗杀草剂——草甘膦（毒滴混剂）。草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。
这种大豆被称为转基因大豆。而这种转基因技术终于走出实验室和试验田，进入像玉米、大豆和棉花作物的日常耕作。
抗草甘膦转基因大豆针对草甘膦的作用机理，导入能够使植物表达更多的4252合成酶的基因，使植株对草甘膦不敏感从而能够忍受正常剂量或更高剂量的草甘膦而不被杀死。从鼠伤寒沙门氏菌及大肠杆菌中可以直接分离出抗草甘膦的4252编码AroA，美国Monsonto公司利用该机制将该抗性基因导入大豆中成功地获得了抗草甘膦转基因大豆。这种转基因大豆对草甘膦的忍耐能力是普通大豆的69倍，从而使大豆田中的绝大部分一年生或多年生杂草得到控制而大豆本身不受伤害。除了抗草甘膦作物之外，还有抗草丁膦除草剂的作物，不过草丁膦与草甘膦杀灭植物的原理并不相同，而培养这两类作物所转的基因也不同。而当前转基因大豆主要用来提炼大豆油。
抗草甘膦转基因大豆的操作步骤;（1）分离克隆基因，搞清楚基因功能。（2）构建表达载体，也就是运输工具，即质粒或载体。（3）遗传转化，也就是所说的转基因，利用各种方法，把备转移的质粒DNA转移到植物细胞的细胞核中，让外源DNA在细胞中复制。本次使用的转基因方法是根癌农杆菌法。根癌农杆菌是一种土壤农杆菌，在它的细胞中有一个环形的质粒，叫Ti质粒，质粒上有一段可转移的DNA，叫T-DNA。这段T-DNA上带有编码肿瘤的基因，根癌农杆菌侵染大豆后，这段T-DNA可以切下来，转移到大豆的细胞中，是植物中产生肿瘤。把T-DNA编码肿瘤的基因切除，插入所需转移的目的基因上，使大豆具有新的特性。转入目的基因的同时，还需转入一个选择标记基因，以便后面筛选和鉴定出转化的细胞。即获得目的基因的细胞是少数，大多数仍是非转基因的细胞，要筛选出转化的细胞，需要在转化后把非转基因细胞杀死。本次使用的标记基因是除草剂抗性标记基因，在培养大豆细胞阶段，在培养基中加入抗草甘膦除草剂，没有转入的基因的细胞不具有抗除草剂。在转基因大豆幼苗期，使用飞机或大型机动喷雾器对转基因大豆直接喷洒草甘膦，大豆苗长高封行后，收割前五十天左右不用再喷洒，等待收割即可。草甘膦杀死了除抗除草剂转基因大豆以外的杂草，使产量提高。转基因大豆的草甘膦残留一般很低，或者根本检测不出，五十天时间草甘膦残留几乎为零。
抗草甘膦转基因大豆的优缺点：优点（1）增加粮食生产、减少生产的投入，有助于解决世界范围的粮食问题（2）转基因大豆具有抗病虫害、抗除草剂的特性，可减少杀虫剂、除草剂的使用，有利于环境保护。（3）通过利用某些基因，增加食物品种，改善食物品质，使食物更加可口。缺点 （1）转基因技术使不同物种的基因相互融合，而对其后果却无法控制，因而可能造成基因污染，引起生物安全上的问题。（2）转基因食品可能存在毒性问题，对人的负面影响可能有很长的潜伏期，而其对人体的长期影响尚难以确定。（3）某些人对转基因食品存在过敏反应。（4）转基因食品的营养作用、对抗生素的抵抗作用、对环境的威胁等问题尚未得到证实或解决。
对转基因大豆的看法
辩证法浅谈转基因大豆
每次去超市购买豆油的时候，都会仔细挑选，大家都喜欢买非转基因的豆油。那么转基因大豆到底是什么。
转基因大豆的研制是为了配合草甘膦除草剂的使用。除草剂有选择性的和非选择性的，草甘膦是一种非选择性的除草剂，抗草甘膦转基因作物是目前全球播种面积最大的转基因作物。草甘膦杀死植物的原理在于破坏植物叶绿体或者质体中的EPSPS(5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶)。通过转基因的方法，让植物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗甘草膦，从而让作物不被草甘膦除草剂杀死。有了这样的转基因大豆，农民就不必像过去那样使用多种除草剂，而可以只需要草甘膦一种除草剂就能杀死各种杂草。当前除了大豆之外，还有很多其他抗甘草膦的转基因作物，包括油菜、棉花、玉米等。除了抗草甘膦作物之外，还有抗草丁膦除草剂的作物，不过草丁膦与草甘膦杀灭植物的原理并不相同，而培养这两类作物所转的基因也不同。而当前转基因大豆主要用来提炼大豆油。
对于这种新东西的面世，大家众说纷纭。它究竟是好还是坏，可以从社会主义基本原理来对它进行讨论。
关于转进因大豆的发明：事物是普遍联系的。事物具有普遍性，世间万物都是存在普遍的联系的。因此说，转基因大豆的发明一定是有他的原因的。转基因技术在农业上的应用大大提高了作物质量极其产量，解决了目前因人口激增带来的粮食短缺问题，这也是很多推广转基因的人重点考虑的因素。另外，转基因技术研究对于科学家更是有着魔幻般的吸引力。转基因技术研究分子水平上的生命过程，对于人类探求自身起源与进化有着重要意义，掌握转基因技术，对于研究人类遗传病、推动医学的发展有着巨大的帮助，当然对人类本身非常有利。
转基因技术的弊端：任何事物都是有两面性的。技术是一把双刃剑，转基因技术的当然也不例外。转基因技术的研究还不够成熟，其存在很多弊端，具体表现在对环境的影响和对生物的影响。具体危害如下:1、转基因大豆及产品会引起跨物种感染，使人类感染动物的疾病，
理化诱变筛选抗草甘膦大豆植株
一５６一 江苏农业科学２００７年第５期 理化诱变筛选抗草甘膦大豆植株 魏松红，纪明山，谷祖敏，王英姿，张杨，祁之秋，王新，何智勇 （沈阳农业大学植物保护学院，辽宁沈阳１１０１６１） 摘要：分别应用紫外线和叠氮化钠对大豆种子进行诱变处理，以不同浓度草甘膦进行抗草甘膦大豆植株筛 选。在４０ ｍ］／Ｌ草甘膦筛选条件下，紫外线照射处理（０．５、１、１．５ ｈ）诱变筛选出１５粒抗草甘膦大豆种子，叠氮化 钠（２．５、５．０、１０．０ ｍｍｏ￣Ｌ）浸泡处理（１、２、３ ｈ）筛选出９粒抗草甘膦种子；紫外线与叠氮化钠复合诱变筛选出１７４ 粒抗草甘膦种子。将所筛选出的发芽种子播种，苗期喷施不同浓度草甘膦，最终筛选出对４０ ｍｌ／Ｌ草甘膦具有抗 性的大豆植株。 关键词：抗草甘膦；大豆；理化诱变；筛选 中图分类号：￥５６５．１０３．５２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２００７）０５—００５６～０２ 草甘膦是有机磷类非选择性除草剂，具有杀草 谱广、不易产生抗药性、在土壤中易降解、对环境安 全等优点，因而培育抗草膦作物品种成为十分活跃 的研究领域。目前世界上已开发了３０多个抗除草 剂品种，以孟山都和艾格福为代表的公司已成功选 育出一系列抗多种类型除草剂的作物品种ｌＩ 』。现 有抗除草剂作物大多数是转基因品种，而转基因植 物存在生态与食品等方面的潜在安全性问题 。 因此，用常规育种方法选育非转基因抗除草剂作物 品种更具有发展前景。本研究用紫外线和叠氮化钠 对大豆种子进行诱变处理，筛选抗草甘膦大豆植株。 别用含２０、４０、８０ ｍｌ／Ｌ草甘膦的药液催芽，以清水 为对照，３ ｄ后观察发芽情况。 １．２．３ 紫外线和叠氮化钠复合诱变将大豆种子 平铺于培养皿中，用紫外线照射０．５、１、１．５ ｈ，用 ２．５、５．０ ｍｍｏｌ／Ｌ叠氮化钠浸泡１、２、３ ｈ，将处理循 的大豆种子用清水冲洗净，用含４０ ｍｌ／Ｌ草甘膦的 药液催芽，以清水为对照，３ ｄ后观察发芽情况。 １．２．４大豆苗期草甘膦处理将通过诱变筛选出 来的大豆种子播种，２片复叶期应用２０、４０、６０ ｍｌ／Ｌ 不同浓度草甘膦进行叶面喷药处理，以没有诱变的 大豆植株为对照，３ ｄ后观察大豆苗生长情况。 １材料与方法 ２结果与分析 １．１供试材料 供试大豆品种为铁丰２９；供试药剂为４１％草甘 膦水剂（美国孟山都公司北京代理处产品）。 １．２ 方法 １．２．１ 紫外线诱变将大豆种子平铺于培养皿中， 用紫外线照射０．５、１、１．５、２ ｈ，分别用含２０、４０、１６０ ｍｌ／Ｌ草甘膦的药液浸种催芽，以清水浸种为对照，３ ｄ后观察发芽情况。 １．２．２叠氮化钠诱变将大豆种子平铺于培养皿 中，用２．５、５．０、１０．０ ｍｍｏｌ／Ｌ叠氮化钠浸泡１、２、３ ｈ，将叠氮化钠浸泡过的大豆种子用清水冲洗净，分 收稿日期：２００７—０３—０６ 作者简介：魏松红（１９７４一），女，吉林延吉人，博士，副教授，主要从 事农药学研究。Ｔｅｌ：（０２４）８８４９２６７３；Ｅ—ｍａｉｌ：ＳＯｎｇｈｏｎｇｗ１２５＠ＳＯ— ｈｕ．ｅｏｍｏ ２．１ 紫外线诱变筛选抗草甘膦大豆种子 经紫外线诱变处理，２０ ｍｌ／Ｌ草甘膦浸种的大 豆发芽率为１５．８３％～３０．０％，对照１为３７．５％，对 照２为９６．６７％；４０ ｍｌ／Ｌ草甘膦浸种的大豆发芽率为 ０～７．５０％，对照１和１６０ ｍｌ／Ｌ草甘膦浸种的大豆发 芽率均为０（表１）。故４０ ｍｌ／Ｌ草甘膦浓度适于筛 选，应用紫外线诱变共筛选出１５粒抗性大豆种子。 ２．２ 叠氮化钠诱变筛选抗草甘膦大豆种子 ２．５、５．０ ｍｍｏｌ／Ｌ叠氮化钠浸泡玉米种子１ ｈ， 分别筛选出４粒和３粒抗草甘膦大豆种子；２．５ ｍｍｏｌ／Ｌ叠氮化钠浸泡２、３ ｈ，分别筛选出１粒抗草 甘膦大豆种子。经叠氮化钠诱变处理，４０ ｍｌ／Ｌ草 甘膦筛选条件下共筛选出９粒抗草甘膦大豆种子。 ２．３ 紫外线与叠氮化钠复合诱变筛选抗草甘膦大 豆种子 ． 经过紫外线与叠氮化钠复合诱变处理，４０ ｍｌ
大豆除草剂的施用技术研究
大豆除草剂的施用技术研究
大豆是我国重要的经济作物之一，但同样也面临着很多的害草问题。草甘膦是一种常用的大豆除草剂，其效果良好，但过度使用也会对环境造成一定的危害。研究大豆除草剂的施用技术就显得尤为重要，可以有效地控制草甘膦的使用量，并提高除草效果。
一、大豆除草剂的选择：
大豆的除草剂可分为草甘膦类和除草剂混剂两大类。草甘膦类除草剂具有速效性、广谱性和安全性等优点，但过量使用会导致土壤残留和抗性杂草的产生。选择适当的除草剂非常重要。除草剂混剂是将不同的除草剂与其他药剂进行混合使用，具有多重作用机制，可延长药效并减少除草剂的用量。
二、草甘膦类除草剂的施用量：
草甘膦类除草剂对于大豆的除草作用明显，但过量使用会导致抗性杂草的产生，同时还会对环境造成一定的危害。在施用草甘膦类除草剂时应合理控制用量，并结合实际情况进行调整。通常情况下，草甘膦类除草剂的推荐用量为每公顷1000-1500g，但在实际应用时，可根据实际情况进行适当的降低，如根据草甘膦类除草剂的封闭剂和调节剂的配方进行调整，可将用量控制在每公顷800-1000g左右，既能够达到除草效果，又能够降低对环境的污染。
三、施药时间的选择：
选择适当的施药时间是大豆除草剂施用技术的关键。大豆的最佳施药期为大豆苗期至6叶期。在这个时期，大豆的生长势较弱，对除草剂的耐受性较强，同时也可以有效地控制杂草的生长。而在大豆进入7叶期后，大豆的生长势逐渐增强，甚至会压制杂草的生长，因此施药效果较差。施药时应避开高温、干旱和雨天，以免影响除草剂的吸收和作用效果。
大豆除草剂的施用技术研究是提高大豆产量和品质的重要手段之一。通过合理选择除草剂、控制用量、选择适当的施药时间和使用除草剂混剂等方法，可以提高除草效果、减少草甘膦的使用量、降低对环境的污染，从而保护大豆生长的环境和提高大豆产量。需要加强对抗性杂草的研究，探索新的除草剂施用技术，以应对目前面临的抗性杂草问题。
抗除草剂大豆属于转基因植物吗,大豆品种有哪些
1 抗除草剂大豆属于转基因植物吗，大豆品种有哪些
回答抗除草剂大豆是转基因植物。使用现代生物技术将抗除草剂基因导入普通大豆中，提高大豆对除草剂的耐受性，这样可节省防除杂草的人工成本。草甘膦可通过破坏植物体内的EPSPS合成酶使其枯死，而将微生物体内的EPSPS基因转入大豆中后能让它产生更多的EPSPS合成酶，这样可避免大豆被草甘膦所灭杀。采用窄行间距种植抗除草剂大豆时还能提高产量，美国从1996年开始采用该方法，至今让大豆的产量提高了35%。
一、抗除草剂大豆属于转基因植物吗
1、抗除草剂大豆属于转基因作物，它是通过现代生物技术将抗除草剂基因导入普通大豆的DNA中，使其对除草剂的耐受性得到增强，继而节省防治杂草的劳力与成本。
2、以耐受草甘膦的转基因大豆为例，草甘膦可以破坏植物体内的EPSPS合成酶，使其枯萎死亡，采用转基因技术可将微生物体内的EPSPS基因转入大豆中，使其产生更多的EPSPS合成酶，当大豆接触到草甘膦后便可避免被灭杀。
3、种植抗除草剂大豆可采用窄行间距（行间距从76厘米缩减至33厘米，甚至更小），这有利于提高产量。美国从首次推出抗除草剂转基因大豆（时间为1996年，采用窄行间距进行种植）至今，大豆的产量已提高了35%。
4、在抗除草剂转基因大豆的种植地中，喷洒除草剂后无需处理田间的残留作物，这有利于减少人工。除此之外，大豆的产量提高后还能增加种植者的收入。
二、大豆品种有哪些 2 1、吉育653
（1）植株
①该品种属于早熟大豆，株高为86.6厘米左右，叶片为圆形，从出苗至成熟需要120天，熟期比对照品种合交02-69晚1天。
②亚有限结荚习性，主茎型结荚，主茎节数为13.7个，三粒荚多，荚熟时为黄褐色。
③花朵呈紫色，柔毛呈棕色，种皮、种脐呈黄色，平均百粒重为20.5克。
（2）抗性、品质
①经人工接种鉴定，中抗大豆花叶病毒1号株系，高抗大豆灰斑病，感大豆花叶病毒3号株系。
抗除草剂转基因大豆的生态安全评价进展
山地农业生物学报３１（１）：０７０～０７６，２０１２
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ
抗除草剂转基因大豆的生态安全评价进展木
赵波，张鹏飞
（中国科学院中国科学院植物研究所植被与环境变化重点实验室，北京 １０００９３）
摘要：中国是大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍ６￣ｘ，）的起源中心，大豆是中国的重要作物。转基因大豆向环境释放后可能带来的生
态风险问题越来越受到人们的重视。中国自然状态下分布着丰富的野大豆（Ｇ．ｓ咖）遗传资源，转基因抗除草剂 大豆能够在自然冬件下与野大豆发生基因交流。转基因抗除草剂大豆释放后，由于大量单一使用草甘膦，田间杂
草已经进化出了抗药性。大量使用的除草剂以及转基因大豆根际分泌物会对土壤微生物、非靶标生物产生影响， 并影响到植物的固氮能力。本文在综述研究进展的基础上，提出了转基因大豆生物安全研究与管理的建议，为我 国将来转基因大豆的产业化提供参考。
关键词：转基因大豆；基因流；草甘磷；固氮；杂草化 中图分类号：Ｑ９４８；Ｓ一１；Ｘ９５４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８—０４５７（２０１２）０１—００７０—０７
１９８８年世界第一例转基因大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅ ）植 株诞生ｕ Ｊ，１９９６年美国孟山都公司推出抗草甘膦转
基因大豆，２０１０年世界范围内抗除草剂转基因大豆
占全球大豆栽培面积的８１％［２ｊ。目前转基因大豆
商业化释放的品种单一，主要是Ｍｏｎｓａｎｔｏ（孟山都）
公司开发的抗草甘膦大豆，广泛种植于美国、巴西、
阿根廷等国家。在大豆国际贸易中，抗除草剂大豆
已占主导地位。我国既是大豆生产大国，也是消费
大国，２０１０年进口５４８０万ｔ，抗除草剂转基因大豆比
例超过８０％。同时，我国独立研发的抗草甘膦转基
因大豆处于环境试验阶段，抗除草剂大豆已被列入
转基因专项进行研发培育，其目标是抗除草剂大豆
的产业化。抗除草剂大豆的安全性问题一直是目前
如何检测转基因大豆
PCR检测转基因大豆： [目的]定性检测转基因大豆。[方法]以非转基因大豆和CP4-EPSPS转基因大豆为材料,以大豆内源基因Lectin和外源基因5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(CP4-EPSPS)为检测的目的片段,建立PCR反应体系。采用改进CTAB法提取大豆基因组DNA, 并对所提DNA进行PCR扩增和电泳检测,确定转基因大豆的PCR检测限。
实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立：采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10
0倍
用巢式和半巢式PCR检测转基因大豆Roundup Ready及其深加工食品：用从转基因大豆(Glycinemax )颗粒中提取的DNA作为模板,经过稀释,形成不同浓度梯度的DNA溶液,然后用巢式和半巢式PCR进行扩增反应。结果表明,巢式和半巢式PCR均可以扩增DNA浓度为10-14g/μL的溶液。用巢式和半巢式PCR对市场的食品原料和深加工食品进行检测,可以从大豆油、酱油、面酱、大豆磷脂、豆腐、豆浆等食品原料和深加工食品的17个品牌的食品中检测出大豆内标基因(housekeepinggene)。
ELISA方法定量检测转基因大豆及其产品的研究：以美国、阿根廷、巴西转基因大豆等为材料,建立了ELISA法定量检测抗草甘膦转基因大豆CP4 EP- SPS蛋白的方法,成功检测出美国转基因大豆含量为3.768%、阿根廷转基因大豆含量为2.820%、巴西转基因大含量为1.920%,转基因豆粉、转基因豆粕和中国大豆未检测到CP4 EPSPS蛋白。此方法具有简便、快速、稳定等优点,其检测灵敏度可达到0.0075%,并且稳定性良好,为抗草甘膦转基因大豆中CP4 EPSPS蛋白的定量检测提供了有效的手段。
外源抗草甘膦EPSPs基因在大豆基因组中的整合与定位
作物学报ＡＣＴＡ ＡＧＲＯＮＯＭＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ ２０１０，３６（３）：３６５—３７５ ＩＳＳＮ ０４９６—３４９０；ＣＯＤＥＮ ＴＳＨＰＡ９ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｈｉｎａｃｒｏｐｓ．ｏｒｇ／ｚｗｘｂ／ Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｂｚｗ＠ｃｈｉｎａｊｏｕｍａ１．ｎｅｔ．ｃｎ
ＤＯＩ：１０．３７２４／Ｓ Ｐ．Ｊ．１００６．２０１０．００３６５
外源抗草甘膦ＥＰＳＰｓ基因在大豆基因组
王晓波
陶 波２ 蒋凌雪 ，
常汝镇 魏 利
邱丽娟 ， 刘 林 中的整合与定位
陆 伟 李文欣 王 俊
中国农业科学院作物科学研究所／农作物基因资源与基因改良国家重大科学Ｔ程／农业部作物种质资源引用与生物技术重点开放 实验室，北京】０００８１；。东北农业大学，黑龙江哈尔滨，１５００３０； 中周农业科学院生物技术研究所，北京１０００８１
摘 要：通过基因特异引物扩增和免疫层析试纸法分别对转基因大豆中外源ＥＰＳＰｓ基因和其编码的蛋白进行检测， 结果表明，ＥＰＳＰｓ基因不仅已整合到大豆基因组中，而且ＥＰＳＰｓ蛋白可以正常表达。利用染色体步移法获得了转基因
大豆插入位点的侧翼序列，序列比对表明３５Ｓ上游的大豆ＤＮＡ序列起始于Ｇｍ０２：７９１２７４０，ＮＯＳ下游的大豆ＤＮＡ序
列起始于Ｇｍ０２：７７７７７０５。在本研究检测序列范围内发现插入位点两侧不同位置有３个不同的未知片段、２个大豆基 因组序列倒位，同时发现２个大豆基因组片段丢失。外源基因不是以点插入方式整合，而是导致大豆基因组约１３５ ｋｂ
片段的移位；ＮＯＳ下游大豆基因组序列发生重排，导致一个编码ＨＥＣｌ和ＨＥＡＴ ｒｅｐｅａｔ两个功能域的基因 （Ｇｌｙｍａ０２ｇ０９７９０）结构受到影响，首次发现该基因在ＡＢＡ和ＰＥＧ处理时下调表达，推测该基因通过ＡＢＡ信号通路
参与胁迫应答。本研究通过对抗除草剂ＥＰＳＰｓ基因在大豆基因组中的插入位点分析，明确了外源ＥＰＳＰｓ基因在大豆 基因组中的整合、定位及其侧翼序列，为转基因大豆安全评价提供了依据。
农杆菌介导大豆转磷基因实验步骤
农杆菌介导的大豆胚尖的遗传转化实验
一、实验步骤：
（1）大豆种子的灭菌：本实验中采用的是氯气熏蒸灭菌方法，它具有灭菌效果好、对材料伤害小的优点。具体操作：选取无病斑、没有破损的、光滑、颗粒大且饱满的大豆种子放于培养皿中， 并放于充满氯气的密闭容器中熏蒸14～16h。（氯气发生：50ml安替富民（NaClO）+2ml浓HCl）
（2）大豆种子浸泡：为了方便剥除大豆种皮获取大豆胚尖，大豆种子经消毒灭菌处理后，放入无菌水中28℃浸泡18～24 h。
（3）预培养：取出浸泡好的种子，在超净台上剥掉种皮，把两片子叶从胚轴上剥离下来，并去掉刚刚萌动的胚尖上的原叶，将胚尖的胚根朝下垂直接种至预培养培养基P1中，但是在培养基中胚尖的间隔要适度，不宜过密，于25～28℃，16 h光照培养1d。
（4）农杆菌菌液准备：从划线的含有目的基因的农杆菌的平板中挑取1～2个单菌落，接种到YEB液体培养基（含50 mg/L Kan）中，于恒温水浴摇床中，28℃、避光、120r/min条件下振荡培养至对数生长期(OD600=0.5)。本步骤应在侵染共培养之前完成。
（5）侵染共培养：将活化好的农杆菌菌液50 ml，于4000 r/min，4℃离心10 min并弃上清液，用等体积的侵染培养基P2（液体）将离心沉淀的菌体重悬。将预培养后的胚尖外植体浸泡在重悬备用菌液中28℃，120 r/min暗培养20 h，侵染结束后用无菌滤纸擦干菌液。
注：1、农杆菌菌液活化
原农杆菌菌液从-80℃的冰箱中取出，取100ul接种到10ml的YEB液体培养基（含50 mg/L Kan）中培养1d，暗培养，150 r/min ,28℃。
2、农杆菌扩大培养（划板）
将活化的农杆菌划线，画在YEB固体培养基上（含50 mg/L Kan），暗培养，28℃，150 r/min ,1~2d。
3、活化好的农杆菌培养
挑一个单菌落接种到50ml的YEB液体培养基上（含50 mg/L Kan），扩大培养，暗培养，28℃，150 r/min ,1d。
正确使用草甘膦的方法和经验
正确使用草甘瞬的方法和经验
（发布日期：2008-12-12 11:41:29）浏览人数：403
农民提出的有关草甘麟除草剂使用时出现的问题，其中具有代表性的问题集中在：一是反映 草甘騰除草剂虽然除草效果好但是有时在使时其药效差异很大；二是如何才能充份发挥草甘 勝除草剂效果；三是在使用草甘腓除草剂时对农作物的安全问题。草甘瞬作为除草剂目前使 用量大、除草效果好，深受农民朋友的欢迎，但它在使用时仍要讲究一定的技术性，稍不留 心，容易给生产带来不利的影响，值得引起大家的注意。
一、 施用草甘腓除草剂时药效为何有差异。
草甘肠是一种有机麟吸传导型灭生性除草剂，又名为农达、镇草宁。杀草广谱、灭生性 强，在土壤中无残留，广泛应用于免耕田化学除草和林、果园的定向除草，能杀死地面生长 的各种杂草，但对地下萌芽未出土的杂草无效。草甘騰除草剂对40多科杂草都有防效，包 括单子叶、双子叶、一年生和多年生的草本杂草及灌木、藻类、蕨类等。农民朋友反映的草 甘瞬除草剂除草效果不一致问题经过我们的调查和观察不外乎这几个原因：一是耕作方式不 同药效会有差异。使用草甘麟除草剂最好用于免耕播种。于作物播前1-3天喷药，为抢季节 播种也可在喷后播种。播前用药因药物不与作物种子直接接触，不会影响作物种子发芽和幼 苗生长，因而除草和抑草效果均优于翻耕。免耕没有将土壤里层的杂草种子翻到表土层，因 而杂草种子难以发芽，一旦作物成长封行后，杂草种子和幼苗因见不到而不能萌发生长。因 此草甘勝除草剂用于免耕地的除草效果就会好于翻耕地。二是杂草不同生育期用药，药效会 有差异。草甘麟是吸传导型除草剂，所以要在杂草生长最旺盛时用药。在时间上一般在3-10 月，在植物学特性上，应以开花前用药最佳时期。一般来说一年生杂草有15厘米左右高度、 多年生杂草有30厘米高度、6-8片叶时喷？是最迁宜的。不考,虑杂草的生育时期，待杂草老 化后再盲目喷药除草，当然就收不到理想的防治效果了。在作物行间除草，当作物植株较高 与杂草存在一定的落差时，用药效果较好且安全。此时用草甘麟除草剂时作物因下部叶片已 经老化，对药物的敏感度低，传导力差，因而药物对作物的影响很小。如玉米行间的除草， 上架后的豆类、瓜类行间除草等都可以用这种方法。三是喷施浓度不同药效会有差异。据调 查，农户在用草甘瞬时用药浓度不像其它农药一样有较严格的要求，随意性较大，加大用量 或减少用量的现象时有发生。在确定用药浓度时一定要考虑杂草的类型。一般禾本科杂草对 草甘麟较敏感，能被低剂量的药液杀死，而防除阔叶杂草时则要提高浓度；对一些多年生的 根茎繁殖的恶性杂草则需要较高的浓度，杂草叶龄大、耐药力提高，相应的用药量也要提高。 如防除果园杂草时，一年生禾本科杂草时可用10%草甘騰500-700克兑水30-40公斤；防除 一年生阔叶杂草时药液用量应增加到750-1000克；防除多年生恶性杂草时，用药量应达到 1250-1500克。但用药过量时会迅速杀死植物的传导组织，反而不利于药液吸收而降低药效， 因此为了经济用药，应先用较低浓度把燉草杀死，然后约10天后再用相应的浓度定向喷？ 恶性杂草。
转基因大豆油(植物油)介绍
转基因大豆油（植物油）介绍
转基因大豆油（植物油）当然就是从转基因大豆当中提炼出来的，而转基因大豆就是一种可以抵抗杀草剂的一种大豆，也就是说利用这种大豆--草甘膦，可以将一些普通的大豆的植株与一些杂草全部给杀掉。那利用转基因大豆提炼出的转基因大豆油（植物油）有什么好处。
转基因大豆的研制是为了配合草甘膦除草剂的使用。除草剂有选择性的和非选择性的，草甘膦是一种非选择性的除草剂，可以杀灭多种植物，包括作物，这样，虽然这种除草剂的效果很好，但是却难以投入使用。草甘膦杀死植物的原理在于破坏植物叶绿体或者质体中的EPSPS合成酶。通过转基因的方法，让植物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗甘草膦，从而让作物不被草甘膦除草剂杀死。有了这样的转基因大豆，农民就不必像过去那样使用多种除草剂，而可以只需要草甘膦一种除草剂就能杀死各种杂草。当前除了大豆之外，还有很多其他抗甘草膦的转基因作物，包括油菜、棉花、玉米等。除了抗草甘膦作物之外，还有抗草丁膦除草剂的作物，不过草丁膦与草甘膦杀灭植物的原理并不相同，而培养这两类作物所转的基因也不同。而当前转基因大豆主要用来提炼大豆油（植物油）。
了解到了转基因大豆油（植物油）的好处，不过它也存在着一定的隐患，首先一点就是可以产生过敏的反应，而且该品种可能对人体的营养遭受到一定的破坏，并且减少了人体的抵抗力，这样就容易导致人体有抗药性的产生。