gfp激发波长和发射波长

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sfgfp波长

sfgfp波长

sfgfp波长
SFGFP波长是指绿色荧光蛋白(SFGFP)的发射波长。

SFGFP是一种常用的荧光标记物,广泛应用于生物学研究中。

它的发射波长为509纳米,属于绿色光谱范围。

SFGFP是由日本学者Shimomura等人在1962年从发光海螺中分离出来的一种荧光蛋白。

它的发现为生物学研究提供了一种新的工具,可以通过将SFGFP标记到感兴趣的蛋白质上,来研究这些蛋白质在细胞中的分布和功能。

SFGFP的发射波长为509纳米,这意味着它可以被绿色光激发并发出绿色荧光。

这种波长的选择是因为它在生物体内的穿透深度较好,可以穿透较厚的组织,同时也不会对细胞造成太大的伤害。

SFGFP的应用非常广泛,例如可以用来研究细胞的分裂、细胞器的运动、蛋白质的转运等等。

在研究中,科学家可以通过将SFGFP标记到感兴趣的蛋白质上,来跟踪这些蛋白质在细胞中的行为。

这种方法可以帮助科学家更好地理解细胞的生理过程,从而为疾病的治疗和预防提供更好的基础。

除了SFGFP之外,还有许多其他的荧光蛋白可以用于生物学研究。


如,绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)等。

这些荧光蛋白的发现和应用,为生物学研究提供了强有力的工具,也为人类的健康事业做出了巨大的贡献。

总之,SFGFP波长是指绿色荧光蛋白的发射波长,它的选择是为了更好地适应生物体内的环境。

SFGFP的应用非常广泛,可以帮助科学家更好地理解细胞的生理过程,为疾病的治疗和预防提供更好的基础。

荧光蛋白的发现和应用,为生物学研究和人类的健康事业做出了巨大的贡献。

cy3激发波长和发射波长

cy3激发波长和发射波长

cy3激发波长和发射波长
Cy3 (Sulfo-Cyanine3) 是一个传统的蛋白质和核酸的橙色荧光标记物 (λex=554, λem=568)。

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■AlexaFluor532激发波长为532nm,发射波长为554nm
■ Cy3激发波长为550nm,发射波长为570nm
■ DsRed-Express2 激发波长为557nm,发射波长为579nm ■ Ethidium Bromide 激发波长为300/518nm,发射波长为6 05nm
■ FITC激发波长为490nm,发射波长为525nm
■ Gel Green激发波长为500nm,发射波长为530nm
■ Gel Red激发波长为510nm,发射波长为600nm
■ GFP / EGFP 激发波长为488nm,发射波长为507nm
■ mCherry激发波长为580nm,发射波长为610nm
■ TagRFP激发波长为555nm,发射波长为583nm
■ SYBR Gold激发波长为490nm,发射波长为540nm
■ SYBR Green激发波长为498nm,发射波长为522nm
■ SYPRO Orange激发波长为470nm,发射波长为570nm
■ SYPRO Red® 激发波长为550nm,发射波长为630nm ■ SYPRO Ruby激发波长为450nm,发射波长为620nm。

GFP的发展史及启示

GFP的发展史及启示

GFP功能的升华
博士后期间,钱永健就发明了 一种可检测细胞内钙离子浓度 的染料,无需注射即可穿透细 胞壁。
Hale Waihona Puke 钱永健看到普拉舍等人在 《基因》杂志上发表文章后, 他仿佛看到了用多管水母 GFP取代化学荧光染料开展 荧光标记研究的曙光。
GFP功能的升华
方法:
用Muta基因噬菌体抗体体外试剂盒对GFP进行寡 核苷酸定点突变
布氏漏斗过滤,滤饼 发光,大部分发光活
性保留在滤饼中
同时,他们还意外地发现了另一种蛋白,能紫外光下发射强烈绿色。但是,下村修 只是在注脚中记录了这种蛋白,并不知道它就是未来获得诺贝尔奖的绿色荧光蛋白。
1963年,下村修和约翰森在《科学》杂志报道钙和水母素发光的关系。
水母发光蛋白 Ca2+ 脱辅水母发光蛋白+氧化荧光素+蓝光 绿色荧光蛋白 蓝光 绿光
背景: 野生型 GFP 光稳定性差、 有多个吸收峰;
翻译后的融合蛋白在镍螯柱上纯化
海笔(Renilla reniformis)蛋白具有与GFP相同的发 色团,但只存在一个吸收峰; GFP发光核心由Ser-Tyr-Gly结构域组成的一个杂环咪
用考马斯蓝染色变性凝胶的光密度测定,获得突 变后GFP的光谱
Martin Chalfie -首次用GFP在线虫里监测基因 表达和蛋白定位
GFP在mec-7基因的启动子控制下在少数神经元中表达mec-7基因编码AP微管蛋白,其在秀丽隐杆线虫的六个触觉神经元中含量丰富,而在其他 几个神经元中含量较低.GFP的表达模式与mec-7-lacZ融合体中的MEC-7抗 体检测到的模式相似。
GFP的发展史及启示
指导老师:牛雪梅 研究员 组员:庄学梅、周文慧、李海霞、张姝、杨少娟、代泽宝

绿色荧光蛋白

绿色荧光蛋白
由于GFP荧光是生物细胞的自主功能,荧光的产生不需要任何外 源反应底物,因此GFP作为一种广泛应用的活体报告蛋白,其作用 是任何其它酶类报告蛋白无法比拟的。
GFP作为标记蛋白的优点
①荧光稳定 ②检测方便 ③无种属特异性,也无有细胞种类和位置的限制 ④GFP对受体细胞基本无毒害 ⑤易于构建载体,不受假阳性干扰 ⑥不需任何反应底物和辅助因子 ⑦可制成永久标本
绿色荧光蛋白
绿色荧光蛋白的分子生物学 及其应用
绿色荧光蛋白的研究史
1962年Shimomure等首先从维多利亚水母(Aequorea Victoria) 中分离出了GFP (Green-Fluorescent Protein) 。
维多利亚水母 (Aequorea Victoria)
A test tube containing a sample of a cyan (greenish-blue) fluorescent protein from a sea anemone illuminated by ultra-violet light from below.
பைடு நூலகம்
GFP发色团的骨架在左边。蛋白质链形成一个圆柱形罐头(蓝色),子链的一部分 直接从中间穿过(绿色),发色团刚好在罐头盒的中间,它被保护起来以免受周围环境 的影响。这种保护对于发射荧光是必需的。一但发色团吸收一个光子,激活的水分子通 常就会夺取它的能量。但是在蛋白质内部改为发射能量稍低的光子来释放能量,使它得 到了保护。发色团(右图)由蛋白质链上的三个氨基酸:甘氨酸,酪氨酸和苏氨酸(或 丝氨酸)自发形成。
绿色荧光蛋白的研究史
1994年Chalfie等首次在大肠杆菌细胞和线虫中表达了 GFP,开创了GFP应用研究的先河。

绿色荧光蛋白(GFP)技术在细胞生物学研究中的应用教材

绿色荧光蛋白(GFP)技术在细胞生物学研究中的应用教材

4 用于细胞内蛋白质的动力学研究


研究细胞内蛋白质相互作用的技术主要有两种:光漂白荧光恢复法 (FRAP)、光漂白荧光损失法(FLIP)。FRAP主要是通过对细胞内特定 的点或区域进行强烈的光照,使荧光发生光漂白作用,再通过相同时 间间隔的光影像采样记录下荧光恢复的动力学过程。FRAP不仅可以 确定细胞器上的蛋白,还可以确定流动蛋白的滞留时间。转录、mRNA前体的剪切、DNA的修复中蛋白质复合体操作机制都可以用这种 方法来研究。FLIP是对细胞的一个区域进行持续性的光漂白,再对光 漂白区外的荧光的损失进行监控就可以获得一些标记蛋白之间的相关 性信息。目前正在体外通过改变光照点的大小和固定细胞来研究光漂 白作用的可逆性,不过还是与活细胞的环境有一定的差距。 另外一种可以用来研究细胞内反应动力学的方法就是荧光相关性分光 光镜检查(FCS)。这种方法是首先通过聚焦照射在细胞内形成一个一 定大小的光洞,光洞中荧光探针的移动会引起荧光的波动,通过校正 计算出荧光颗粒的平均滞留时间和平均数量,再根据已知光洞的大小 和平均光滞留时间就可以计算出扩散蛋白的动力学参数[19]。
二、GFP 的应用特点


1 易于检测 GFP荧光反应不需外加任何反应底物,酶或其它共反应因 子, 也就不存在这些物质可能难于进入细胞的问题,只需 紫外光或蓝光激发, 即可发出绿色荧光,GFP发射的荧光 用肉眼或荧光显微镜就可以检测到。灵敏度高, 对于单细 胞水平的表达也可识别, 同时还可利用其进行定量检测。 由于GFP 对活细胞基本无毒害, 因此无须特殊处理就可以 很方便地进行活体观察。而且,具有不同光谱特性的GFP 突变体的获得,使在同一细胞中同时分析两种不同蛋白或 启动子成为可能,可以用于发育细胞学、药物筛选、分析 诊断等研究。这就使GFP有可能成为一种快速、简便、经 济的标记蛋白,GFP基因作为报道基因可能有广泛的用途。

egfp激发波长和发射波长

egfp激发波长和发射波长

egfp激发波长和发射波长摘要:I.引言A.研究egfp 的激发波长和发射波长的意义B.本文的目的和结构II.egfp 的基本特性A.egfp 的定义和作用B.egfp 的发光原理III.egfp 的激发波长A.激发波长的定义和影响因素B.egfp 的激发波长范围C.常用的激发光源和波长IV.egfp 的发射波长A.发射波长的定义和影响因素B.egfp 的发射波长范围C.常用的发射光源和波长V.egfp 的激发和发射波长关系A.激发和发射波长的一般规律B.egfp 的激发和发射波长比例VI.应用egfp 的注意事项A.实验操作中的注意事项B.结果解读时的注意事项VII.结论A.对egfp 激发波长和发射波长的总结B.对未来研究的展望正文:I.引言A.研究egfp 的激发波长和发射波长对于深入了解egfp 的发光特性以及其在生物实验中的应用具有重要意义。

本文旨在详细探讨egfp 的激发波长和发射波长的相关知识,为实验操作和结果解读提供参考。

II.egfp 的基本特性A.egfp 是一种绿色荧光蛋白,具有在紫外线下产生绿色荧光的特性。

在生物实验中,egfp 常用于蛋白质、细胞和组织的标记和检测。

III.egfp 的激发波长A.激发波长是指用于激发egfp 产生荧光的波长。

其影响因素包括荧光蛋白的种类、浓度、环境条件等。

通常,egfp 的激发波长范围在300-450nm 之间。

B.常用的激发光源包括紫外灯、激光等。

在实验中,需要根据具体需求选择合适的激发光源和波长。

IV.egfp 的发射波长A.发射波长是指egfp 在激发后产生的荧光的波长。

其影响因素包括荧光蛋白的种类、浓度、环境条件等。

通常,egfp 的发射波长范围在500-570nm 之间。

B.常用的发射光源包括荧光显微镜、荧光检测仪等。

在实验中,需要根据具体需求选择合适的发射光源。

V.egfp 的激发和发射波长关系A.在荧光蛋白中,激发波长和发射波长之间存在一定的规律。

显微镜荧光波长详解

显微镜荧光波长详解

⏹人肉眼对光源波长的颜色感觉红色 770-622 nm橙色 622~597 nm黄色 597~577 nm绿色 577~492 nm蓝靛色 492~455nm紫色 455~350nm⏹常见显微镜滤光片的波长在激发波长在Ex范围内才能被激发,只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到,背景光的波长只有大于DM才能被观察到。

红色滤光片G-2AEx 510-560DM 575BA 590绿色滤光片B-2AEx 450-490DM 505BA 520蓝色滤光片UV-2AEx 330-380DM 400BA 420其它荧光染料介绍【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2,Cy3,Cy5)】Cy2耦联基团激发波长为492nm,发光为波长510nm的绿色可见光。

Cy2和FITC使用相同的滤波片。

由于Cy2比FITC在光下更稳定。

要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂,因为这种抗淬灭剂和Cy2反应,在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。

Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮,更稳定,背景更弱。

Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm,最强发射光为570nm。

因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中,可使用和TRITC一样的滤波片。

Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50%的光强,在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75%。

Cy3可以和荧光素一起作双标。

Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。

Cy5耦联基团的激发波长最大650nm,发光波长最大670nm。

在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98%的荧光,在氦氖灯下(633nm)为63%。

Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。

由于它的最大发射波长在670nm,Cy5很难用裸眼观察,而且不能用汞灯作理想的激发。

通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。

在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。

gfp是什么意思

gfp是什么意思

gfp是什么意思
gfp意思是:绿荧光蛋白
绿色萤光蛋白(Green fluorescent protein;简称GFP),由下村脩等人于1962年在维多利亚多管发光水母中发现,其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光,整个发光的过程中还需要冷光蛋白质水母素的帮助,冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用。

2008年10月8日,日本科学家下村脩、美国科学家马丁·查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色荧光蛋白获得了诺贝尔化学奖。

绿色萤光蛋白现常被用来研究骨架和细胞分裂、动力学和泡囊运输、发育生物学等,并可应用于转染细胞的确定、体内基因表达的测定、蛋白质分子的定位、细胞间分子交流的动态监测等。

由水母中发现的野生型绿色荧光蛋白,395nm和475nm分别是最大和次大的激发波长,它的发射波长的峰点是在509nm,在可见光绿光的范围下是较弱的位置。

由海肾(sea pansy)所得的绿色荧光蛋白,仅有在498nm有一个较高的激发峰点。

在细胞生物学与分子生物学领域中,绿色荧光蛋白基因常被用作为一个报导基因(reporter gene)。

一些经修饰过的型式可作为生物探针,绿色荧光蛋白基因也可以克隆到脊椎动物(例如:兔子上进行表现,并拿来映证某种假设的实验方法。

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gfp激发波长和发射波长
gfp激发波长是488nm,发射波长是507nm。

gfp是绿色荧光蛋白的简称,是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。

虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。

扩展资料:
1、由于荧光蛋白能稳定在后代遗传,并且能根据启动子特异
性地表达,在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。

更多地,荧光蛋白被改造成了不同的新工具,既提供了解决问题的新思路,也可能带来更多有价值的新问题。

2、荧光显微镜:GFP和它的衍生物的可用性已经彻底重新定
义荧光显微镜,以及它被用来在细胞生物学和其他生物学科的方式。

其中,最令人兴奋的就是用于超分辨显微镜成像。

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