luminex 检测肿瘤标志物优势
流式荧光技术

流式荧光技术又称液态芯片技术(Luminex xMAP技术),其整和了荧光编码微球、激光分析、应用流体学及高速数字信号处理等多项最新科技,是美国Luminex公司于上世纪末开发出的新一代高通量发光检测技术。
目前该技术已被广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别等领域,并得到各权威机构和医学界的高度认可。
2005年,该技术荣获Frost&Sullivan颁发的“年度国际临床诊断技术革新大奖”。
目前,由Luminex技术平台获得实验数据发表的科研文献已超过12000篇。
每年有数千篇引用流式荧光技术的文献,其中数百篇为Pubmed收录的高质量研究文献。
我国也已有不少厂家将先进的流式荧光技术平台用于临床检验领域高端的体外诊断试剂开发和生产,如国内的透景生命(股票代码:300642)、益善生物及协和洛克等。
其中,透景生命是国内最早引入流式荧光技术的体外诊断试剂公司,也是Luminex公司在国内最大的开发型合作伙伴,在国内最早获得CFDA批准将流式荧光技术用于临床检验试剂的生产。
流式荧光技术特点及原理流式荧光平台的突出特点在于其可进行高速高效的多指标联检、既可对蛋白也可对核酸进行分析、既适用于临床检验也适用于科研、高灵敏度荧光发光可进行定性或定量分析,而且检测时对样本需求量极少,特别适合一些珍贵样本的多指标分析。
此外,平台具有极佳的开放性和拓展性,用户可根据自己的需求来设计和实现对不同目标分子的联合检测。
该技术是以直径5.6μm(约为头发丝直径的十五分之一)、大小均一的荧光微球作为免疫或核酸杂交反应的载体,微球表面包被有特异性抗体或核酸探针,可与样本中待检分子特异性结合。
微球经两种荧光染料染色编码,可获得100种不同特征荧光谱的微球,不同荧光编码微球连接不同抗体或核酸探针并可在同一反应体系内进行反应。
当微球逐颗经过仪器检测时,检测仪发射红色激光识别微球的荧光编码以确定检测项目类型,发射绿色激光读取待检物荧光信号强度进行定性或定量分析。
luminex微球参数

luminex微球参数
Luminex微球技术是一种多重分析技术,用于同时测定多种生
物分子,如蛋白质、核酸和细胞因子等。
Luminex微球参数通常包
括以下几个方面:
1. 微球种类,Luminex微球通常是由不同大小和颜色的微小聚
苯乙烯微球组成,每种微球都与特定的抗体或亲和配体标记。
这些
微球可以根据其尺寸和荧光特性进行区分。
2. 荧光标记,每种微球表面都带有特定的荧光标记,用于识别
和区分不同的微球。
常见的荧光标记包括荧光素、荧光蛋白和有机
染料等。
3. 结合分子,Luminex微球通常与特定的抗体或亲和配体结合,用于捕获待测分子。
这些结合分子可以是单克隆抗体、多克隆抗体
或亲和配体,用于特异性地捕获目标分子。
4. 流式细胞仪,Luminex微球技术通常需要与流式细胞仪结合
使用,流式细胞仪可以识别和计数不同荧光标记的微球,从而实现
多重分析。
5. 数据分析,对于Luminex微球实验得到的数据,通常需要进行复杂的数据分析和解释,包括标准曲线的绘制、样品浓度的计算以及统计学分析等。
总的来说,Luminex微球参数涉及到微球的种类、荧光标记、结合分子、仪器使用以及数据分析等多个方面,这些参数的选择和优化将直接影响到实验的准确性和可靠性。
希望这些信息能够帮助你更全面地了解Luminex微球技术。
luminex多因子检测原理

luminex多因子检测原理Luminex多因子检测是一种高通量、多参数、有色微球流式细胞技术。
它可以同时检测多个分子分析物,包括蛋白质、核酸、生物标志物等,具有快速、高灵敏度和高特异性等优点。
其工作原理分为四个步骤:微球标记、样品反应、洗涤和检测。
第一步,微球标记。
利用荧光染料将聚合物微球标记上不同的颜色,每种颜色微球上面可以结合一个特异性的抗体、核酸探针或配体。
不同颜色的微球可用于区分不同的检测物,每种被检测物对应一种颜色的微球。
第二步,样品反应。
将待测样品和微球混合,其中的待测分子与微球上的抗体、探针或配体结合。
比如,如果待测分子是蛋白质,那么它将与微球上的抗体结合。
第三步,洗涤。
将混合物置于洗涤缓冲液中,洗去未结合的待测分子。
这一步旨在去除非特异性吸附的物质,以提高检测的特异性。
第四步,检测。
将洗涤后的微球悬浮液注入一台Luminex仪器中,该仪器会通过激光激发荧光素,引起微球上的标记物发出特定波长的荧光信号。
这个信号将被检测器检测并转化为数字信号。
每种颜色微球对应的信号对应于与之结合的待测分子的浓度。
Luminex多因子检测的原理是基于荧光信号的区分,并通过检测信号强度来计算待测分子的浓度。
每种颜色微球上标注不同的抗体或配体,使其与目标分子特异性结合。
这种特异性结合可通过荧光标记物发出的特定波长和强度来检测。
荧光信号的强度与待测分子的浓度成正比,因此可以根据荧光信号的强度来计算待测分子的浓度。
Luminex多因子检测技术具有许多优势。
首先,它可以在一个反应体系中同时检测多个分子,减少了实验时间和样品消耗。
其次,该技术具有高灵敏度和高特异性,可以可靠地检测低浓度的分子。
此外,它也具备高通量性,可以同时分析大量样品。
Luminex多因子检测可以应用于多个领域,如病原体检测、免疫学研究和药物筛选等。
总的来说,Luminex多因子检测技术为多个分子分析物的高通量检测提供了一种快速、准确和可靠的方法。
luminex液相芯片技术原理

luminex液相芯片技术原理
Luminex液相芯片技术是一种用于做多色原理,蛋白质分析及重组药品检测等的分析化学技术。
又称离心多色芯片技术,是液相平台技术的一种。
Luminex技术是基于荧光原理、紫外-可见放射非特定性抗体双重标记法,广泛应用于免疫、蛋白分析、重组药品质量检测、细胞相互关系等研究。
Luminex技术主要分为离心多色芯片及液相平台信号集成等两个方面。
离心多色芯片是指用于检测单个表面染色体上标记细胞做多色研究的技术。
其中,放射性荧光来源可以检测标记细胞的分布,并可以使用多个不同的放射性源来查看多个表型。
液相平台则是用一定体积的液体接收单个孢子上的多种抗原或特异性抗体的刺激。
液相平台的信号集成则是把上述信号聚合在一起,追踪每个抗原或者特异性抗体的响应传导和激素变化中心进行分析,从而确定他们之间的相互作用。
Luminex技术主要优势是可以从极低的细胞表型水平上检测,从而更加深入地探索细胞内特定原材料和活性物质之间的介绍作用以及它们在分子细胞程序中所扮演的角色。
Luminex技术在许多研究领域中表现出较好,比如利用它可以高度灵敏、特异性的分离定性的抗原和抗体信息;可以用于分析新的免疫和其他生物反应物质,甚至可以用于快速、高效的疾病屣病毒特异性诊断,以及对付生物武器等。
通过Luminex技术,可以同时进行大量低成本的分析,而且可以使培养细胞从一次性制剂转化为可循环利用的重复使用细胞,极大的提高了分析的效率。
因此Luminex技术可以为细胞分析及更精确的活性物质结构解析提供一个有效的替代解决方案。
LUMINEX技能技术总结原理及应用

精心整理Luminex 的基本原理及应用传统的蛋白质分析主要采用双抗体夹心ELISA 法。
此法长期以来被视为蛋白质定量分析的“标准方法”。
ELISA 可以用来准确测定大批量生物样品,但每次实验只能分析一个目标分子,而不具备同时分析多种目标分子的能力。
在ELISA 基础上发展出的luminex 技术,不仅同样通过双抗体选择而具有高特异性,同时也具有ELISA 的高通量、操作简便、测量准确等优点,而且可以在一次实验中完成对多种目标分子的分析,从而改变了过去的分析模式,建立了更加高效快速的分析平台。
Luminex 技术原理,在近年发表的文章中已有过详细的介绍和说明。
Luminex 技术应用微球和流式细胞仪的原理。
微球内部含有三种荧光免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不高达检测荧光”试剂盒,LUMINEX LUMINEX 完高达检测的特异性取决于抗体高特异性。
试剂几乎全部来源于美国大公司,产品经过了严格的质量控制。
同时,我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。
客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX 检测?Luminex 和ELISA 检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。
我们公司具有开发Luminex 试剂盒的经验。
但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。
除了蛋白,LUMINEX 技术是否还可以用于其它指标的检测? 可以用于基因表达,基因多态性和HLA 配型分析。
检测周期多久?视待测蛋白的种类、数量和标本数量定。
一般来说,检测一组蛋白(1-50个,视蛋白种类定)和一组标本(多达360个标)需要3-4小时的操作时间及基本数据分析。
但是,检测周期也取决于公司当时的工作量。
一般来说,从标本收到起,检测应在1-2周完成;但是部分蛋白试剂盒需要收到订单后从美国进口,检测周期可能会延长到4-5周。
如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。
肿瘤标志物液态芯片

PSA双检液芯 PSA双检液芯(前列腺癌 2 项),用于前列腺癌的辅助诊断
free-PSA , total-PSA
可自由组合的单检液态芯片
AFP,CEA,CA125,CA242*,NSE,CYFRA21-1,free-PSA ,total-PSA , free-β –hCG ,CA15-3** ,CA199* ,Ferritin ,SCCA 等 注:* CA199与CA242有交叉,不可联检。 ** CA15-3样本需稀释后检测,不可与其它样本不需稀释的项目联检。 上海透景生命科技有限公司
上海透景生命科技有限公司
Susspension Array
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透景科技, 透景科技,液芯专家
关于试剂盒的保存
⁔⁔2~8℃,干燥,避光,防冻。 ⁔⁔ ⁔ 特别是微球混悬液(B液)和HOOK指 示微珠(H液)出现沉淀,故在使用 前要震荡混匀。
⁔ 试剂盒各组份在使用后要及时避光 保存,要避免有直射的强光。
Suspension Array
多肿瘤标志物 流式点阵定量检测试剂
透景科技,液芯专家
上海透景生命科技有限公司
上海透景生命科技有限公司
内容一览
知识要点 Luminex简介 液态芯片原理介绍 标志物分类及组合 试剂盒组成 试剂操作步骤 产品性能及注意事项
上海透景生命科技有限公司
Susspension Array
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透景科技, 透景科技,液芯专家
内容一览
Luminex简介 液态芯片原理介绍 标志物分类及组合 试剂盒组成 试剂操作步骤 产品性能及注意事项
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Merck Millipore-液相芯片技术在肿瘤检测和研究中的应用

Milliplex/Luminex液相芯片技术在肿瘤检测和研究的应用前言目前,肿瘤标志物的研究与应用已成为肿瘤防治的重点和热点。
但当前肿瘤标志物检测能否达到早期诊断的效果?有无在人群中进行普查或筛查的价值?其临床意义如何解释?怎样规范与合理应用?尚存在诸多争议。
为此,中华医学会检验医学分会肿瘤标志物专家委员会,在2002年至2004年分别召开3次专家研讨会,起草制订了“肿瘤标志物临床检测的基本原则(建议稿) ”对以上问题进行了解释。
本文主要从以下几个方面进行介绍:●肿瘤标志物临床检测的基本原则●肿瘤标志物的检测指标●肿瘤标志物的高危人群检测项目●肿瘤血管的形成●慢性炎症与肿瘤微环境●趋化因子与肿瘤微环境●液相芯片技术原理●Milliplex肿瘤微环境相关试剂盒介绍●肿瘤微环境与肿瘤标记应用的相关文献一、肿瘤标志物临床检测的基本原则肿瘤标志物( TM) 是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/ 或升高的,反映肿瘤存在和生长的一类物质,包括蛋白质、激素、酶(同工酶) 、多胺及癌基因产物等。
TM 存在于病人的血液、体液、细胞或组织中,可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法测定,且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测复发以及预后评价具有一定的价值。
TM在肿瘤监测中的价值:TM的主要临床应用价值是判断治疗肿瘤治疗疗效和复发监测。
临床可通过对肿瘤患者治疗前后及随访中TM浓度变化的监测,了解肿瘤治疗是否有效,并判断其预后,为进一步治疗提供参考依据。
为确定何种TM适用于对肿瘤患者进行治疗监测,在患者治疗前应做相关TM检测。
TM浓度变化对肿瘤的疗效判断价值:恶性肿瘤治疗后TM浓度的变化与疗效之间有一定的相关性。
治疗前TM浓度变化,常有三种类型:①TM浓度下降到参考范围,提示肿瘤治疗有效。
②TM浓度下降但仍持续在参考范围以上,提示有肿瘤残留和/ 或肿瘤转移。
Luminex液态芯片在临床及科研中的应用

Luminex液态芯片在临床及科研中的应用张保强;张晓【摘要】Luminex 液态芯片是一个多功能、多指标并行分析系统,集编码微球、激光技术、流式细胞、数字信号处理等技术于一体,具有高通量、既能检测蛋白,又能检测核算等特点,可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究.本文就液态芯片技术的原理、特点及在临床和科研中的应用进行阐述.【期刊名称】《当代医学》【年(卷),期】2012(018)004【总页数】3页(P18-20)【关键词】液态芯片;悬浮阵列;肿瘤标志物;HPV基因分型;移植配型【作者】张保强;张晓【作者单位】261061,潍坊市疾病预防控制中心检验科;261061,潍坊市疾病预防控制中心检验科【正文语种】中文液态芯片是美国纳斯达克上市公司Luminex于本世纪初研制出的后基因组时代的技术平台,又称悬浮阵列、流式荧光技术,是基于多功能流式点阵仪(Luminex 100)开发的多功能生物芯片平台,是一个多功能、多指标并行分析系统(见图1)。
它有机地整和了编码微球(color-codedbeads)、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则,造就了高度的检测特异性和灵敏度,可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究,也是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。
2003年美国食品与药品管理局(FDA)批准该项技术用于临床检验诊断。
图1 Luminex 100 多功能流式点阵仪1 Luminex液态芯片技术的概况1.1 工作原理该技术的核心是采用聚苯乙烯(polystyrene)制作微球,把微小的聚苯乙烯小球(5.6 μm)包覆以不同比例的红光及红外光染色剂,制成100种不同颜色的微球[1](见图2)。
将每种颜色的微球(或称为荧光编码微球)共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。
不同的微球结合了针对不同待检测物的蛋白(抗体或抗原,用于免疫检测)或核酸(DNA或RNA用于基因检测),检测抗体中以生物素标记,并用高灵敏的荧光染料染色。
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Luminex 检测肿瘤标志物的优势
透景科技在Luminex的技术平台上开发试剂盒。
其中肿瘤标志物定量测定试剂盒(流式荧光技术)与化学发光/电化学发光比较具有的优势如下:
1. 检测项目多:
透景科技检测项目:AFP、CEA、CA125、CA15-3、CA19-9、t-PSA、f-PSA、CA242、free-β
-hCG、SCCA 、Cyfra21-1、NSE、CA724
透景科技比罗氏增加指标: SCCA、CA242
透景科技比雅培增加指标: CYFRA21-1、NSE、free-β-hCG、CA242、CA72-4
透景科技比西门子增加指标: CA125、CA15-3、CA242、free-β-hCG、SCCA 、Cyfra21-1、NSE、CA724
2. 1次检测指标数多:
流式荧光技术可多指标并行检测,1次最多可测100个指标。
化学发光是单指标检测,1次仅检测1个指标。
3. 联检速度快:
300份9联检标本,需2700个tests,流式荧光技术仅需4个小时,而化学发光需12小时以上。
流式荧光技术最快可达10000测试/小时。
化学发光是80~150测试/小时。
4. 试剂成本低:
流式荧光技术联合检测试剂用量很少,降低检测成本,比发光法低20%以上。
化学发光试剂用量大,且多为进口试剂,成本高昂。
5. 通用性好:
流式荧光技术既能检测蛋白,又能检测核酸如HPV,既能用于临床又能用于科研。
化学发光仅用于临床蛋白类或药物浓度的检测。
6. 开放程度高:
流式荧光技术平台高度开放,可使用不同厂家的试剂。
化学发光不开放,只能使用仪器厂家提供的配套试剂。
7. 所需样本量少:
流式荧光技术需10-20ul血清,可做多项指标,在科研当中,标本量少时有相当大优势。
化学发光100ul血清,仅做1项指标。