遗传学实验资料(一)

实验一植物的有丝分裂和减数分裂观察

一、实验目的

1、观察植物细胞有丝分裂过程，识别有丝分裂的不同时期。

2、观察植物细胞减数分裂过程，识别减数分裂的不同时期。

3、学习使用高倍显微镜和生物绘图的方法。

二、实验原理

有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地分配到两个子细胞中去，使子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而可以推断生物性状的遗传与染色体的准确复制和均等分配有关，支配生物性状的遗传物质主要存在于细胞核内的染色体上。高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点、幼叶等部位的分生组织。

减数分裂是形成性细胞前在性母细胞中进行的一种特殊方式的细胞分裂，通过减数分裂，体细胞内的染色体数目将比原来减少一半，如水稻n=12，玉米n=10，在减数分裂过程中，可以详细地观察到染色体的形态、数目、组成和染色体的鉴定和分析，在杂交育种中可以通过观察染色体配对的行为特征，鉴定是否远缘杂种、真假杂种和探求杂交不孕的原因；还可以通过染色体形态特征和染色体行为的变化，观察和分析生物的异常生长发育以至遗传性变异，如植物的雄性不育花粉败育及各种环境因素（物理、化学等）对于染色体的损伤引起的各种畸变等。

三、实验材料

植物细胞有丝分裂和减数分裂永久装片。

四、实验步骤

1、有丝分裂装片的观察。

2、减数分裂装片的观察。

五、实验报告

1、用2B铅笔绘出植物细胞有丝分裂各个时期的示意图。

2、用2B铅笔绘出植物细胞减数分裂各个时期的示意图。例如：

（1）中期Ⅰ；（2）后期Ⅰ；（3）中期Ⅱ；（4）后期Ⅱ；（5）四分孢子

实验二人染色体组型分析

一、实验目的

1、掌握染色体组型分析的各种数据指标。

2、学习染色体组型分析的基本方法。

二、实验原理

定义：染色体组型又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。

核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。

染色体形态特征：

1、长度：绝对、相对（相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度）

2、臂比=长臂/短臂

3、着丝点指数=短臂/（长+短臂）

4、随体的有无。

分组排队原则：

1、着丝粒类型相同，相对长度相近的分一组。

2、同一组的按染色体长短顺序配对排列。

3、各指数相同的染色体配为一对。

4、可根据随体的有无进行配对。

5、将染色体按长短排队，短臂向上。

三、实验材料

毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸、人染色体放大照片。

四、实验步骤

1、计数，沿边缘剪下染色体，编号。

2、初步目测配对，分组。

3、测量长度，计算相对长度、着丝粒指数、臂比，相同的染色体间配对。

4、将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，每一组下面画一横线，在两端注明起止号，并在

横线下的中部写明A-G组号，染色体从大到小编为1-22号，性染色体单独列为一组。

五、实验报告

对人染色体进行组型分析。

实验三、人类细胞中巴氏小体的观察

一、实验目的

1，掌握人类X小体（巴氏小体）玻片标本制作方法。

2，观察并识别巴氏小体形态特征及所在部位，鉴定个体的性别。

3、了解X染色体失活假设以及剂量补偿效应的机制。

二、实验原理

巴氏小体又称X小体，位于正常女性的分裂间期细胞核中，紧贴核膜内缘，大小约1-1.5 um，呈现三角或椭圆形小体，数量为X染色体数减一。巴氏小体是由于女性两个X染色体中的随机一条失活形成的。（例外：袋鼠总是来自父亲的X染色体失活。）

Lyon的剂量补偿学说认为：女性有两个X染色体，但所表达的绝大部分遗传物质与只有1个X染色体的男性是一样多的。这是因为女性的X染色体中只有1条保持活性，而另一条失去活性。该失活的染色体在形态学上呈异染色体，即DNA螺旋压的很紧，染色深而致密，称之为巴氏小体。

正常女性间期细胞的细胞核中X染色质阳性率为20%-45%，而男性则低于1%。因此，可以用于性别的快速鉴定和胎儿性别鉴定。

三、实验材料

口腔粘膜细胞，毛根鞘细胞，显微镜，载玻片，盖玻片，牙签，吸管，卡诺固定液（甲醇：冰醋酸＝3：1），生理盐水，5M的HCl，Giemsa染液

四、实验步骤

1、口腔黏膜上皮细胞处理（每组男女供材料者各一名）

（1）取材

受检者清水漱口数次，用洁净牙签的钝头，在口腔两侧刮取粘膜，原位刮2-3次，第一次舍去，换一根牙签，分别将第2-3次刮取的细胞涂于干净载玻片上，自然干燥。

（2）固定

滴加卡诺固定液，固定15分钟。注意随时补加，防止玻片干燥。

（3）解离

倒掉卡诺固定液，稍微干燥后，滴加5M的HCl，解离10分钟。

（4）染色

倒掉HCl，自来水冲洗，稍微干燥后，滴加Giemsa染色液，染色10分钟，注意勿干。（5）镜检

自来水将染色液冲洗干净，晾干后，镜检。

2、发根细胞（每组男女供材料者各一名）

（1）取材

拔取带有毛囊的头发，置于载玻片上。

（2）解离

在毛囊处滴加5M的HCl，解离5分钟。

（3）剥离细胞

用镊子将毛囊从发根剥离出来，倒掉HCl和头发。

（4）染色

在毛囊处，滴加Giemsa染色液，染色10分钟，注意勿干。

（5）压片

倒掉染色液后，加盖玻片，压片。

（6）镜检

五、实验报告

1、分别观察50个男、女性可数的细胞，计算各自的巴氏小体细胞所占的百分比。

2、在观察中画出2-3个典型细胞，标明巴氏小体的部位。

六、思考题

1、男性没有巴氏小体的理论基础是什么？

2、在男变女的变性手术后，该“女性”有无巴氏小体？

七、注意事项

1、刮口腔上皮细胞前要漱口，以减少杂质。

2、刮取时应用力适宜，以免划破口腔或取细胞较少。

3、刮取时在同一位置重复刮2-3下，确保牙签上有足够的口腔黏膜细胞。

4、涂片晾干后再加染色液，勿让染色液干掉。

5、染色时间不要太长，否则核质着色，X染色质体不易区分；也不可染色过短，以免染色不足。

6、压片时要用力适宜，过轻则细胞不能均匀散开，不易观察；过重可能会压破玻片，弄伤手指。

7、载玻璃片和盖玻片要干净，避免带入杂质影响观察。