血流感染的实验室诊断
血流感染的实验室诊断(可直接使用).ppt
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（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大 量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴 有多发性脓肿或败血性休克。
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（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。
• 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染 大于48h，多为污染
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（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果 相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时， 考虑血
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（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前 细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着 体温从最高峰逐渐 下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时 间是在寒战后和发 热高峰前，此时阳 性检出率最高。
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（一）标本采集
采血量 成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。 儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
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• 阴性曲线
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• 假阳性曲线
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五、如何判断是否污染？
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五、如何判断是否污染？
（一）阳性检出瓶数 （二）细菌种类 （三）阳性检出时间 （四）重复培养结果
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（一）阳性检出瓶数
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固
血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识
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通过辅助检查，如影像学检查、内镜检查等，排除其他可能的
感染源。
治疗方案选择
1 2
根据病原体种类选择治疗方案
根据病原体种类及其药敏试验结果，选择敏感的 抗生素进行治疗。
根据患者情况选择治疗方案
根据患者的年龄、性别、基础疾病等情况，选择 适合的治疗方案。
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根据医院条件选择治疗方案
根据医院的药物库存、设备条件等实际情况，选 择可行的治疗方案。
血液培养技术用于血 流感染诊断临床实践 专家共识
汇报人：文小库 2023-11-19
目 录
• 引言 • 血液培养技术概述 • 血流感染诊断流程 • 血液培养技术在血流感染诊断中的应用 • 血液培养技术用于血流感染诊断的临床效果评
估
目 录
• 血液培养技术用于血流感染诊断的局限性及改 进措施
• 结论与展望
临床有效率
总结词
血液培养技术用于血流感染诊断的临床有效率较高。
详细描述
血液培养技术能够准确地检测血流感染，提高诊断的准确性和可靠性，减少漏 诊和误诊的情况。在临床实践中，血液培养技术的有效率可达90%以上，为医 生提供可靠的诊断依据。
并发症发生率
总结词
血液培养技术用于血流感染诊断的并发症发生率较低。
培养时间
血液培养一般需要2-7天的时间，根据不同的培养方式有 所差异。
阳性结果判断
在培养过程中，如果发现培养瓶中的细菌数量增加，或者 通过分子生物学等方法检测到病原菌的存在，即可判断为 阳性结果。
阴性结果判断
如果在培养过程中未发现病原菌的存在，则可判断为阴性 结果。
CHAPTER 05
血液培养技术用于血流感染 诊断的临床效果评估
血培养的概念
血培养的概念
血培养（Blood Culture）是一种临床微生物学实验室的检测方法，用于从患者体内采集血液样本，并将其接种到含有营养培养基的培养瓶或培养管中，以培养和鉴定可能存在于患者血液中的微生物，如细菌、真菌等。
血培养是诊断血流感染（Bloodstream Infection, BSI）、菌血症（Bacteremia）或真菌菌血症（Fungemia）的金标准，即最可靠的诊断方法。
血培养的主要目的包括：
1. 证实感染性病原体的存在。
2. 鉴定病原体的种类，以便进行针对性的治疗。
3. 提供抗菌药物敏感性试验结果，指导临床医生选择合适的抗生素。
血培养的过程通常包括以下几个步骤：
- 采集血液样本：通常从患者的静脉抽取血液，采集时需注意无菌操作，以避免污染。
- 接种培养：将采集的血液分别注入到需氧瓶和厌氧瓶中，因为不同的微生物在不同的氧气环境下生长。
- 培养和监测：将血培养瓶放入恒温培养箱中，定期监测培养瓶中是否有微生物生长。
- 结果分析：如果培养出微生物，需要进一步鉴定其种类，并进行药敏试验，以确定最有效的抗生素。
血培养对于诊断和治疗严重感染至关重要，尤其是在重症监护病房（ICU）和感染性疾病的治疗中。
正确执行血培养对于提高诊断准确性和患者治疗效果具有重要意义。
血流感染实验室诊断课件
加拿大CANWORD监测20022009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
美国49医院BSI病原谱
CID. 2004, 39: 309-317
• 标准三：年龄<1岁的病人具备下列症状或体征中的至少一项，发热 （>38 ⁰C ），低温（<37 ⁰C ），呼吸暂停、脉搏徐缓，并具有下列之 一（同上3点略）
临床血流感染（Clinical Sepsis）
具有下列二条件之一者： • 具有非其它已知原因所引起的发烧、血压过低（收缩压≤90mmHg或收 缩压低于平常超过40mmHg），少尿（每小时尿量低于30ml）等临床 症状任何一项，且符合下列所有条件者：
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需结 合临床分析
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为什么需氧+厌氧？
血流感染
• 医院获得性血流感染
– 原发血流感染
• 实验室证实血流感染（Laboratory-confirmed Bloodstream Infection, LCBI） • 临床血流感染（Clinical Sepsis）
– 继发血流感染：血培养分离出有意义微生物， 而且此微生物与另一部位之院内感染有关。唯 不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感 染。
PUMCH2012年46株BSI草绿色溶 血链球菌药敏结果
2011CHIF-NET489株BSI酵母菌
2011CHIF-NET念珠菌对氟康唑的敏感性
2011CHIF-NET念珠菌对伏立康唑的 敏感性
2011CHIF-NET其他酵母菌对氟康唑的敏感性
导管相关血流感染的实验室诊断课件
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡 萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI） 的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002
【精编】血流感染的早期诊断与病原菌识别
机会性致病菌，在特定条件下引起血流感染，如 长期使用抗生素或免疫抑制治疗。
流感嗜血杆菌
引起呼吸道和血流感染，常见于儿童和老年人。
病原菌的分离与培养
01
血培养
采集患者血液样本，在培养基中培 养，以分离病原菌。
尿液培养
采集尿液样本进行培养，用于诊断 尿路感染。
变组织进行培养，以分离病原 菌。
02
血流感染的早期诊断 方法
实验室检测方法
01
血液培养
血液培养是诊断血流感染的金标 准，通过培养血液中的细菌来判 断是否存在血流感染。
02
血常规检查
血常规检查可发现白细胞计数升 高、中性粒细胞比例增高等感染 征象。
03
C反应蛋白和降钙素 原检测
C反应蛋白和降钙素原是感染时 升高的标志物，有助于早期诊断 血流感染。
03
病原菌识别与鉴定
常见病原菌种类与特点
金黄色葡萄球菌
常见于皮肤和软组织感染，也可引起血流感 染。具有高致病性和耐药性。
大肠杆菌
肠道正常菌群，但在特定条件下可引起血流感 染，如新生儿败血症。
肺炎克雷伯菌
常引起肺炎和血流感染，多见于免疫功能低下患 者。
铜绿假单胞菌
环境中的常见菌，可引起皮肤和血流感染，具有多 重耐药性。
血流感染的症状与体征
症状
发热、寒战、乏力、食欲不振等全身性感染症状。
体征
可能出现血压下降、心率加快、呼吸急促等循环系统和呼吸系统异常表现。
血流感染的危害与流行病学
危害
血流感染是一种严重的全身性感染，如不及时治疗，可导致多器官功能衰竭、休克甚至 死亡。
流行病学
血流感染的发病率和死亡率较高，主要与免疫功能低下、留置导管、外科手术等因素相 关。
血流感染实验室诊断.pptx
血培养污染菌
• 在多次血培养中单次培养下列细菌阳性 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 棒状杆菌 • 微球菌 • 丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需 结合临床分析
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为什么需氧+厌氧？
两种组合均能检测
非条件致病菌 Mayo Clinic
Pathogen No.
or <4 G/L or >10% 未成熟中性粒细胞 • 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p <0.001) • 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p <0.001)
Clin Microbiol Infect. 2012 online
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单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区 别
OR=1.23
OR=0.93
Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online
第39页/共70页
抗菌药物治疗与血流感染死亡率
死亡率
Chest 115 (2): 1999 第40页/共70页
血培养三级报告制度
血培养 阳性
终报告
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血培养结果回报对治疗的影响
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阳性血培养－基于PCR的检测
• PCR特异性检测
• 病原特异性PCR
• 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van • 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
• 广谱检测：PCR扩增特定靶位
• 多态性分析 • 测序 • 后续基因检测 • 种特异性real-time PCR
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症和菌血症 目前统称为血流感染。
血流感染实验室诊断新技术
法检 测 ， 其 应 用有 一 定 的 限 制 。
也不 同。在细菌的快速鉴 定 中利用 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ技 术， 对 不 同细 菌 Ｐ Ｃ Ｒ扩增后 的产物进行切割 ， 可产 生不 同数 目的条 带，由此
鉴 别 不 同菌 种 。 该 方 法检 测 时 间 不超 过 ２ ４ ｈ ， 且 单 份 标 本 可
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广东医学 ２ ０ １ ３ 年 ３月 第 ３ ４卷第 ５ 期 Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ Ｍ ａ ｒ ． ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． ５
血 流 感 染 实 验 室诊 断 新 技 术
果 建 立成 图谱 以 筛选 各 种 病 原 茵 ， 是 现 时 临床 实验 室 常 用 的
一
同的抗 生素进 行 治疗 ， 是 败血 症 能否治愈 的关键 。如何 实 现 血流感染致病 菌的快速 有效检测及 其 药敏 结 果的准确 回 报， 是 长期 困扰 临床 的问题 。随着分子生物 学技 术 的广泛应 用， 对各种致病 菌的检测也从常规的单纯分 离培养鉴 定及 药
鉴定仪 已被广泛应用 于Ｉ 临床微 生物室 ， 该方 法建 立于传统的
手 工培养及 细菌鉴定 方法 的基 础上。采 集 患者 血液 置于血 培养瓶后立 即装载至全 自动血培养仪 ， 实时观察 细菌生长曲
血流感染的临床诊断
血流感染的临床诊断血流感染是一种严重的全身感染性疾病，多继发于肺部严重感染、腹腔感染、尿路感染，手术切口感染，以及导管留置感染等。
主要临床症状有：高热（个别病例有低温表现），畏寒，低血压，少尿或高乳酸水平等，易诱发脓毒症及多器官功能障碍综合征，病死率高等特点。
01血流感染的流行病学数据美国一项回顾性队列研究显示，住院患者人群中血流感染的发生率为5.9%，死亡率为15.6%。
英国每年约有10万人因血流感染住院，并导致约3.7万人死亡。
我国的流行病调查研究显示，血流感染的总病死率为28.7%，是主要的公共卫生负担。
02血流感染的常见类型社区获得性血流感染：主要病因为社区获得性肺炎、腹腔感染、尿路感染、脑膜炎、感染性心内膜炎及皮肤软组织感染等。
医院获得性血流感染：患者入院48小时后检测出的血流感染，或既往2周有住院史，再次入院48小时内检出的血流感染。
主要病因包括医院获得性肺炎、腹腔感染、尿路感染、导管/植入物相关性感染、外科术后感染及原发性血流感染等。
导管相关性血流感染：患者在植入血管内导管48小时后或拔除导管48小时内出现的血流感染，除血管内导管外没有其他明确的感染源，常伴有发热、寒战或低血压等感染表现。
非复杂性血流感染和复杂性血流感染：非复杂性血流感染是指患者血培养阳性，可于治疗后2-4天内转阴，经有效治疗后72小时内退热，无感染性心内膜炎，无人工植入装置，且无迁徙性感染灶的血流感染。
不符合上述定义者即为复杂性血流感染。
持续性血流感染：患者有持续的发热等临床感染症状，血培养阳性状态持续3天以上。
培养阴性血流感染：血流感染患者从未能通过微生物培养鉴定出明确的病原体，可能的原因包括之前曾使用抗微生物药物，导致感染的病原体不易培养且缺乏快速诊断手段的病原菌导致的血流感染等。
03血流感染的检验方法明确引起血流感染的致病菌和感染源对于血流感染的诊断治疗非常重要。
目前公认的诊断血流感染的“金标准”是血培养法。
血流系统感染诊断标准
血流系统感染诊断标准第一条血管相关性感染1.临床诊断符合下列情况之一者：（1）静脉穿刺部位有脓液排出，或有弥散性红斑（蜂窝组织炎的表现）。
（2）沿导管的皮下走行部位出现疼痛性弥散性红斑（理化性因素所致除外）。
（3）经血管介人性操作，发热>38℃，局部有压痛，无其他原因解释。
2.病原学诊断（1）导管尖端培养或血液培养分离出有意义的病原微生物。
（2）说明①导管管尖培养其接补方法应取导管尖端5cm，在血平板表面往返滚动一次，细菌菌数≥15cfu/平板即为阳性。
②从穿刺部位抽血定量培养，细菌菌数≥100cfu/ml，或细菌菌数相当于对侧取血培养4～8倍。
第二条败血症1.血液培养分离出病原微生物，并伴有下列症状体征中的一项：（1）发热>38℃或低体温<36℃，可伴有寒颤。
（2）有入侵门户或迁徙病灶。
（3）有全身性感染中毒症状而无明显感染灶。
（4）收缩压低于12kPa（90mmHg），或较原收缩压下降超过5.3kPa(40mmHg)。
2.说明继发于某部位医院感染的败血症需同时报告原发医院感染。
第三条输血相关感染常见有病毒性肝炎（乙、丙、丁、庚型）、艾滋病、巨细胞病毒感染、疟疾、弓形体病等。
1.临床诊断必须符合下列三种情况：（1）输血至发病或输血至血中出现病原血清免疫学标志的时间超过该感染的常见（或最短）潜伏期。
（2）受血者受血前从未有过该种感染，血清免疫学标志阴性。
（3）证实供血员血存在感染性物质，如血中查到病原体、血清免疫学标志阳性、病原DNA 或RNA的阳性等。
2.病原学诊断（1）在临床诊断基础上，符合下列情况之一者：①血中找到病原体。
②血特异性病原体抗原检测阳性，或其血清lgM抗体效价达到诊断水平，或双份血清lgG呈4倍升高。
③组织或体液涂片找到包涵体。
④病理活检证实。
（2）说明①病人可有症状体征，也可仅有血清学改变。
②艾滋病潜伏期长，但受血者受血后6个月内可出现抗—HIV 阳性，后者可作为初步诊断依据，需进一步进行确诊试验。