血流感染的实验室诊断
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血流感染的实验室诊断(可直接使用).ppt
最新.
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（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大 量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴 有多发性脓肿或败血性休克。
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（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。
• 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染 大于48h，多为污染
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（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果 相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时， 考虑血
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（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前 细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着 体温从最高峰逐渐 下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时 间是在寒战后和发 热高峰前，此时阳 性检出率最高。
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（一）标本采集
采血量 成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。 儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
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• 阴性曲线
最新.
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• 假阳性曲线
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五、如何判断是否污染？
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五、如何判断是否污染？
（一）阳性检出瓶数 （二）细菌种类 （三）阳性检出时间 （四）重复培养结果
最新.
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（一）阳性检出瓶数
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固
血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识
03
通过辅助检查，如影像学检查、内镜检查等，排除其他可能的
感染源。
治疗方案选择
1 2
根据病原体种类选择治疗方案
根据病原体种类及其药敏试验结果，选择敏感的 抗生素进行治疗。
根据患者情况选择治疗方案
根据患者的年龄、性别、基础疾病等情况，选择 适合的治疗方案。
3
根据医院条件选择治疗方案
根据医院的药物库存、设备条件等实际情况，选 择可行的治疗方案。
血液培养技术用于血 流感染诊断临床实践 专家共识
汇报人：文小库 2023-11-19
目 录
• 引言 • 血液培养技术概述 • 血流感染诊断流程 • 血液培养技术在血流感染诊断中的应用 • 血液培养技术用于血流感染诊断的临床效果评
估
目 录
• 血液培养技术用于血流感染诊断的局限性及改 进措施
• 结论与展望
临床有效率
总结词
血液培养技术用于血流感染诊断的临床有效率较高。
详细描述
血液培养技术能够准确地检测血流感染，提高诊断的准确性和可靠性，减少漏 诊和误诊的情况。在临床实践中，血液培养技术的有效率可达90%以上，为医 生提供可靠的诊断依据。
并发症发生率
总结词
血液培养技术用于血流感染诊断的并发症发生率较低。
培养时间
血液培养一般需要2-7天的时间，根据不同的培养方式有 所差异。
阳性结果判断
在培养过程中，如果发现培养瓶中的细菌数量增加，或者 通过分子生物学等方法检测到病原菌的存在，即可判断为 阳性结果。
阴性结果判断
如果在培养过程中未发现病原菌的存在，则可判断为阴性 结果。
CHAPTER 05
血液培养技术用于血流感染 诊断的临床效果评估
血培养的概念
血培养的概念
血培养（Blood Culture）是一种临床微生物学实验室的检测方法，用于从患者体内采集血液样本，并将其接种到含有营养培养基的培养瓶或培养管中，以培养和鉴定可能存在于患者血液中的微生物，如细菌、真菌等。
血培养是诊断血流感染（Bloodstream Infection, BSI）、菌血症（Bacteremia）或真菌菌血症（Fungemia）的金标准，即最可靠的诊断方法。
血培养的主要目的包括：
1. 证实感染性病原体的存在。
2. 鉴定病原体的种类，以便进行针对性的治疗。
3. 提供抗菌药物敏感性试验结果，指导临床医生选择合适的抗生素。
血培养的过程通常包括以下几个步骤：
- 采集血液样本：通常从患者的静脉抽取血液，采集时需注意无菌操作，以避免污染。
- 接种培养：将采集的血液分别注入到需氧瓶和厌氧瓶中，因为不同的微生物在不同的氧气环境下生长。
- 培养和监测：将血培养瓶放入恒温培养箱中，定期监测培养瓶中是否有微生物生长。
- 结果分析：如果培养出微生物，需要进一步鉴定其种类，并进行药敏试验，以确定最有效的抗生素。
血培养对于诊断和治疗严重感染至关重要，尤其是在重症监护病房（ICU）和感染性疾病的治疗中。
正确执行血培养对于提高诊断准确性和患者治疗效果具有重要意义。
血流感染实验室诊断课件
加拿大CANWORD监测20022009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
美国49医院BSI病原谱
CID. 2004, 39: 309-317
• 标准三：年龄<1岁的病人具备下列症状或体征中的至少一项，发热 （>38 ⁰C ），低温（<37 ⁰C ），呼吸暂停、脉搏徐缓，并具有下列之 一（同上3点略）
临床血流感染（Clinical Sepsis）
具有下列二条件之一者： • 具有非其它已知原因所引起的发烧、血压过低（收缩压≤90mmHg或收 缩压低于平常超过40mmHg），少尿（每小时尿量低于30ml）等临床 症状任何一项，且符合下列所有条件者：
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需结 合临床分析
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为什么需氧+厌氧？
血流感染
• 医院获得性血流感染
– 原发血流感染
• 实验室证实血流感染（Laboratory-confirmed Bloodstream Infection, LCBI） • 临床血流感染（Clinical Sepsis）
– 继发血流感染：血培养分离出有意义微生物， 而且此微生物与另一部位之院内感染有关。唯 不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感 染。
PUMCH2012年46株BSI草绿色溶 血链球菌药敏结果
2011CHIF-NET489株BSI酵母菌
2011CHIF-NET念珠菌对氟康唑的敏感性
2011CHIF-NET念珠菌对伏立康唑的 敏感性
2011CHIF-NET其他酵母菌对氟康唑的敏感性
导管相关血流感染的实验室诊断课件
❖ 真菌引起的导管相关血行感染的死亡率更高。
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡 萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI） 的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡 萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI） 的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002
【精编】血流感染的早期诊断与病原菌识别
白色念珠菌
机会性致病菌，在特定条件下引起血流感染，如 长期使用抗生素或免疫抑制治疗。
流感嗜血杆菌
引起呼吸道和血流感染，常见于儿童和老年人。
病原菌的分离与培养
01
血培养
采集患者血液样本，在培养基中培 养，以分离病原菌。
尿液培养
采集尿液样本进行培养，用于诊断 尿路感染。
变组织进行培养，以分离病原 菌。
02
血流感染的早期诊断 方法
实验室检测方法
01
血液培养
血液培养是诊断血流感染的金标 准，通过培养血液中的细菌来判 断是否存在血流感染。
02
血常规检查
血常规检查可发现白细胞计数升 高、中性粒细胞比例增高等感染 征象。
03
C反应蛋白和降钙素 原检测
C反应蛋白和降钙素原是感染时 升高的标志物，有助于早期诊断 血流感染。
03
病原菌识别与鉴定
常见病原菌种类与特点
金黄色葡萄球菌
常见于皮肤和软组织感染，也可引起血流感 染。具有高致病性和耐药性。
大肠杆菌
肠道正常菌群，但在特定条件下可引起血流感 染，如新生儿败血症。
肺炎克雷伯菌
常引起肺炎和血流感染，多见于免疫功能低下患 者。
铜绿假单胞菌
环境中的常见菌，可引起皮肤和血流感染，具有多 重耐药性。
血流感染的症状与体征
症状
发热、寒战、乏力、食欲不振等全身性感染症状。
体征
可能出现血压下降、心率加快、呼吸急促等循环系统和呼吸系统异常表现。
血流感染的危害与流行病学
危害
血流感染是一种严重的全身性感染，如不及时治疗，可导致多器官功能衰竭、休克甚至 死亡。
流行病学
血流感染的发病率和死亡率较高，主要与免疫功能低下、留置导管、外科手术等因素相 关。
机会性致病菌，在特定条件下引起血流感染，如 长期使用抗生素或免疫抑制治疗。
流感嗜血杆菌
引起呼吸道和血流感染，常见于儿童和老年人。
病原菌的分离与培养
01
血培养
采集患者血液样本，在培养基中培 养，以分离病原菌。
尿液培养
采集尿液样本进行培养，用于诊断 尿路感染。
变组织进行培养，以分离病原 菌。
02
血流感染的早期诊断 方法
实验室检测方法
01
血液培养
血液培养是诊断血流感染的金标 准，通过培养血液中的细菌来判 断是否存在血流感染。
02
血常规检查
血常规检查可发现白细胞计数升 高、中性粒细胞比例增高等感染 征象。
03
C反应蛋白和降钙素 原检测
C反应蛋白和降钙素原是感染时 升高的标志物，有助于早期诊断 血流感染。
03
病原菌识别与鉴定
常见病原菌种类与特点
金黄色葡萄球菌
常见于皮肤和软组织感染，也可引起血流感 染。具有高致病性和耐药性。
大肠杆菌
肠道正常菌群，但在特定条件下可引起血流感 染，如新生儿败血症。
肺炎克雷伯菌
常引起肺炎和血流感染，多见于免疫功能低下患 者。
铜绿假单胞菌
环境中的常见菌，可引起皮肤和血流感染，具有多 重耐药性。
血流感染的症状与体征
症状
发热、寒战、乏力、食欲不振等全身性感染症状。
体征
可能出现血压下降、心率加快、呼吸急促等循环系统和呼吸系统异常表现。
血流感染的危害与流行病学
危害
血流感染是一种严重的全身性感染，如不及时治疗，可导致多器官功能衰竭、休克甚至 死亡。
流行病学
血流感染的发病率和死亡率较高，主要与免疫功能低下、留置导管、外科手术等因素相 关。
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血培养污染菌
• 在多次血培养中单次培养下列细菌阳性 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 棒状杆菌 • 微球菌 • 丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需 结合临床分析
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第27页/共70页
为什么需氧+厌氧？
两种组合均能检测
非条件致病菌 Mayo Clinic
Pathogen No.
or <4 G/L or >10% 未成熟中性粒细胞 • 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p <0.001) • 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p <0.001)
Clin Microbiol Infect. 2012 online
第32页/共70页
单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区 别
OR=1.23
OR=0.93
Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online
第39页/共70页
抗菌药物治疗与血流感染死亡率
死亡率
Chest 115 (2): 1999 第40页/共70页
血培养三级报告制度
血培养 阳性
终报告
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第41页/共70页
血培养结果回报对治疗的影响
第44页/共70页
阳性血培养－基于PCR的检测
• PCR特异性检测
• 病原特异性PCR
• 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van • 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
• 广谱检测：PCR扩增特定靶位
• 多态性分析 • 测序 • 后续基因检测 • 种特异性real-time PCR
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症和菌血症 目前统称为血流感染。
血流感染实验室诊断新技术
素， 减少污染结果。但是 此方法受采血 前患者皮肤 消毒等检 验前 处理质 量控制 、 临床应 用过抗 生素、 采血量 及细 菌数量 等诸 多因素的影 响， 易出现假 阴性 或假 阳性的 结果 ， 使 实验 室误报 而导致 临床误诊 ， 耽误 患者的治疗。另外生长缓慢或 不能在培 养基上 生长的细 菌及 一些苛 养茵则 不可采 用此 方
法检 测 ， 其 应 用有 一 定 的 限 制 。
也不 同。在细菌的快速鉴 定 中利用 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ技 术， 对 不 同细 菌 Ｐ Ｃ Ｒ扩增后 的产物进行切割 ， 可产 生不 同数 目的条 带，由此
鉴 别 不 同菌 种 。 该 方 法检 测 时 间 不超 过 ２ ４ ｈ ， 且 单 份 标 本 可
・
７ ９ ０・
广东医学 ２ ０ １ ３ 年 ３月 第 ３ ４卷第 ５ 期 Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ Ｍ ａ ｒ ． ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． ５
血 流 感 染 实 验 室诊 断 新 技 术
果 建 立成 图谱 以 筛选 各 种 病 原 茵 ， 是 现 时 临床 实验 室 常 用 的
一
同的抗 生素进 行 治疗 ， 是 败血 症 能否治愈 的关键 。如何 实 现 血流感染致病 菌的快速 有效检测及 其 药敏 结 果的准确 回 报， 是 长期 困扰 临床 的问题 。随着分子生物 学技 术 的广泛应 用， 对各种致病 菌的检测也从常规的单纯分 离培养鉴 定及 药
鉴定仪 已被广泛应用 于Ｉ 临床微 生物室 ， 该方 法建 立于传统的
手 工培养及 细菌鉴定 方法 的基 础上。采 集 患者 血液 置于血 培养瓶后立 即装载至全 自动血培养仪 ， 实时观察 细菌生长曲
法检 测 ， 其 应 用有 一 定 的 限 制 。
也不 同。在细菌的快速鉴 定 中利用 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ技 术， 对 不 同细 菌 Ｐ Ｃ Ｒ扩增后 的产物进行切割 ， 可产 生不 同数 目的条 带，由此
鉴 别 不 同菌 种 。 该 方 法检 测 时 间 不超 过 ２ ４ ｈ ， 且 单 份 标 本 可
・
７ ９ ０・
广东医学 ２ ０ １ ３ 年 ３月 第 ３ ４卷第 ５ 期 Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ Ｍ ａ ｒ ． ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． ５
血 流 感 染 实 验 室诊 断 新 技 术
果 建 立成 图谱 以 筛选 各 种 病 原 茵 ， 是 现 时 临床 实验 室 常 用 的
一
同的抗 生素进 行 治疗 ， 是 败血 症 能否治愈 的关键 。如何 实 现 血流感染致病 菌的快速 有效检测及 其 药敏 结 果的准确 回 报， 是 长期 困扰 临床 的问题 。随着分子生物 学技 术 的广泛应 用， 对各种致病 菌的检测也从常规的单纯分 离培养鉴 定及 药
鉴定仪 已被广泛应用 于Ｉ 临床微 生物室 ， 该方 法建 立于传统的
手 工培养及 细菌鉴定 方法 的基 础上。采 集 患者 血液 置于血 培养瓶后立 即装载至全 自动血培养仪 ， 实时观察 细菌生长曲