固相微萃取技术修改
顶空固相微萃取_气质联用技术分析曲拉干酪素挥发性成分及来源_罗丽
顶空固相微萃取-气质联用技术分析曲拉干酪素挥发性成分及来源罗丽1，孙科1，鲁迎瑞1，刘恭1，何萧1，宋礼1，张兰威2，*(1.甘肃华羚生物技术研究中心，甘肃兰州730000;2.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，黑龙江哈尔滨150090)收稿日期：2015－12－22作者简介：罗丽(1987－)，女，硕士，研究方向:食品科学，E－mail :1072838931@ 。
*通讯作者：张兰威(1961－)，男，博士，教授，研究方向:乳制品及益生菌功能，E－mail :zhanglw@ 。
基金项目:国际科技合作重点项目计划(2011DFA32550)。
摘要：通过SPME－GC－MS 检测不同来源干酪素、曲拉及鲜奶中的挥发性成分，分析曲拉干酪素的特殊挥发性成分及来源。
结果表明，曲拉干酪素特殊挥发性成分主要为3－羟基－2－丁酮、甲苯和二氧化硫，2－丁酮、壬醛可能对曲拉干酪素特殊气味具有独特贡献。
其中，3－羟基－2－丁酮部分来源于曲拉，部分来源于生产环节;2－丁酮、壬醛和甲苯来源于生产环节，二氧化硫可能源于生产环节，也可能源于贮藏过程。
此外，曲拉原料地域差异对干酪素气味影响较大，色泽对其气味的影响较小。
关键词：曲拉，干酪素，GC－MS 分析，特殊挥发性成分，来源Analysis of volatile compounds and sources from Qula casein basedby SPME －GC －MS methodLUO Li 1，SUN Ke 1，LU Ying －rui 1，LIU Gong 1，HE Xiao 1，SONG Li 1，ZHANG Lan －wei 2，*(1.Gansu Hualing Biotechnology Ｒesearch Center ，Lanzhou 730000，China ;2.College of Food Science and Engineering ，Harbin Institute of Technology ，Harbin 150090，China )Abstract :In this stuy ，in order to explore the special volatile compounds of Qula casein as well as their source ，the SPME －GC －MS had been used to detect the volatile chemistries of caseins extracte from different raw materials as well as Qula and fresh milk .The results indicated that acetic acid ，3－oxhydryl －2－butanone ，nonanal ，toluene and sulfur dioxide were the distinctively substance of the Qula casein ，which had unique contribution to the Qula casein special odor and acetic acid was root in Qula .3－oxhydryl －2－butanone was partly root in Qula ，and partly from the production process .Nonanal ，toluene and sulfur dioxide were from the preparation procedure .In addition ，regional divergence of Qula had a biggish contribution to the smell of casein but not the color of the raw material .Key words :Qula ;casein ;GC －MS analysis ;special volatile components ;source 中图分类号：TS252.1文献标识码：A文章编号：1002－0306（2016）14－0083－07doi ：10．13386/j．issn1002－0306．2016．14．008曲拉是牧民将牦牛乳脱脂、煮沸、加酸发酵、风干而制成的奶干渣，含有蛋白、脂肪、乳糖和矿物质等多种营养物质，其主要成分是酪蛋白，含量达到80%左右［1］，是当地牧民的传统食物。
粮食农药残留检测中的前处理方法探析
食品科技粮食农药残留检测中的前处理方法探析张海娜（朝阳市检验检测中心，辽宁朝阳 122000）摘 要：农药作为现代科技的产物，其在农业生产过程中对于提升农作物产量和品质有着十分重要的作用。
但近年来，农药滥用现象严重，导致粮食中农药残留量超标，引发了全社会对于粮食安全的极大关注，对粮食农药残留进行检测成为确保人们饮食健康的重要方式。
但从实际情况来看，当前阶段所采用的农药残留检测方法大都存在对检测样品前处理用时较长、技术细节较为烦琐的问题，为了进一步提升样品前处理质量和效率，本文针对粮食农药残留检测中常用的前处理方法进行了探析。
关键词：粮食农药残留；前处理方法；固相萃取Analysis of Pretreatment Methods in the Detection of PesticideResidues in GrainZHANG Haina(Chaoyang Inspection and Testing Center, Chaoyang 122000, China)Abstract: Pesticides as a product of modern science and technology, which in the process of agricultural production to improve crop yield and quality has a very important role. But in recent years, the pesticides abuse phenomenon is serious, leading to excessive pesticide residues in food, caused the attention of the whole society for food safety, and for food pesticide residue testing has been an important means of ensuring people a healthy diet. However, from the actual situation, most of the pesticide residue detection methods used in the current stage have the problems of long pre-treatment time and complicated technical details on the test samples. In order to further improve the quality and efficiency of sample pre-treatment, this article explores the commonly used pre-treatment methods in the detection of grain pesticide residues.Keywords: pesticide residues in grain; pretreatment method; solid phase extraction农药在农业生产中有着杀灭病虫害和杂草，保证农作物健康生长的作用。
固相微萃取与顶空进样技术在食品分析中的应用解析
固相微萃取在食品风味 质量控制分析中的应用
◆ 水果和果汁的分析 ●新鲜原料的香味组成，加工过程及储存 后的变化
◆ 酒类的微量香味组分分析 ●采用HS—SPME分析 ◆ 油脂氧化变质后产生的不良风味分析 ●变质玉米油采用HS—SPME分析
果汁香味组分的SPME分析谱图
采用SPME定量分析啤酒样品的典型色谱图
◆ 探寻更为简捷、有效的食品样品制备方法是分析
化学面临的任务
食品样品处理的新技术
无溶剂（或少溶剂）的处理技术已成为食品样 品制备的主要发展方向，目前比较成熟的技术 包括： 以吸附剂萃取为基础的 固相萃取(SPE)、 固相微萃取(SPME)； 以气体萃取为基础的 顶空分析(HS)， 包括静 态顶空(Static Headspace)与动态顶空 (Dynamic Headspace)； 超临界流体萃取等
固相微萃取与顶空进样技术 在食品分析中的应用
胡国栋
中国食品发酵工业研究院
食品分析的目标
◆ 理化与感官质量的检验 ◆ 与品质相关的特征组分分析
◆ 与安全相关的卫生质量的监测
食品样品传统制备方法的复杂性
◆ 传统的制备方法：液-液萃取、索氏萃取、蒸馏等
◆ 步骤多、耗时长、可靠性差，大量耗费有机溶剂， 环境污染严重
SPME定量对测定条件的要求
萃取头的极性和涂层厚度，取样方式 （顶空或浸入），样品pH值和加盐量， 样品恒温温度和萃取时间，搅拌状况， 样品瓶中溶液与顶空的体积比例，乃 至取样时萃取头与液面的距离等参数 均需通过实验确定，并在以后的测定 中严格保持一致，方可获得重复的测 定结果。
各类商品萃取头的性能比较
SPME的装置
主要由萃取头（Fiber）和手柄 （Holder）两部分组成，其状 形同一支色谱注射器，萃取头 是一根长度仅为1cm的熔融石 英丝，其表面涂有厚膜的色谱 固定相或吸附剂。
顶空固相微萃取气相色谱质谱联用技术
７
８．１４
Ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ、ｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ乙酸乙醑
Ｃ·Ｈ＿ｍ
明
８
１．６５
９
１．９５
１０
２．２５
ｌｌ
３．８９
１２
１４．７２
１３
１４．８４
１４
１５．２１
１５
１６．４５
１６
１６．０８
１７
１６．６１
１８
１６．８１
１９
１７．０６
２０
１７。２６
２ｌ
１７．４９
Ｐｒｏｐａｎｉｃ ａｉｃｄ、ｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ丙酸乙酯
Ｕ。
１．４结果与讨论
５个苹果品种通过气相色谱一质谱联用分析后得到的总离子流图，见图１，２，３，４，５。
图ｌ目光苹果香气成分质谱总离子流圈（ＴＩＣ）
图２红富士苹果香气成分质谱总离子流图（ＴＩＣ）
圈３红蛇皋苹果香气成分质谱总离子流图（ＴＩＣ） ３３
圈４花牛苹果番气成分质谱总离子流圈（ＴＩＣ）
董届中国中西部地区色谱掌术交流会 一
风味物质大多为非营养物质，它们虽不参与体内代谢，但能促进食欲，影响人的精神状态［１１。 良好的风味是构成食品质量的重要因素之一ｎ１。风味和风味成分的研究在最近的４０多年来有了迅速 的发展，已成为风味化学研究中令人瞩目的研究领域‘３１。
对于苹果香气成分的分析，不同的研究者所得的结果并不完全一致“一·盯。由于每一品种都有独 特的风味以区别于其它，因此可以通过分析其香味成分组成和量比关系，为确定苹果品种、品质、产 地及苹果加工贮藏提供科学依据。固相微萃取（Ｓｏｌ ｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｊ４ｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔ ｉｏｎ，ＳＰＭＥ）技术是一种新 型的无溶剂样品预处理技术，该技术集采样、萃取、浓缩、进样于一体，操作简单、成本低、所需样 品量少，它通过吸附／脱吸附技术，富集样品中的挥发性和半挥发性成分，克服了～些传统样品处理技 术的缺点，已经广泛应用于水、食品、环境以及生物样品分析‘７—１。
固相微萃取原理及使用
二、SPME的原理
固相微萃取法（SPME）的原理与固相萃取不同，固相微萃取不 是将待测物全部萃取出来，其原理是建立在待测物在固定相和水相之间
达成的平衡分配基础上。
设固定相所吸附的待测物的量为WS，因待测物总量在43;C2 •V2
（1）
式中， C0是待测物在水样中的原始浓度； C1 、 C2分别为待测
二、SPME的原理
由式（4）： WS =K • C0 • V1 ，可知WS与C0呈线性关系，并与K 和呈正比。决定K值的主要因素是萃取头固定相的类型，因此，对某 一种或某一类化合物来说选择一个特异的萃取固定相十分重要。 萃取头固定液膜越厚， WS越大。由于萃取物全部进入色谱柱，一个 微小的固定液体积即可满足分析要求。通常液膜厚度为5-100um，这 一已比一般毛细管柱的液膜厚度（0.2-1um）厚得多。
um) 萃取柱; 40μl 样品, 100ul/min,20 次反复萃取, 搬阀进样。线性范围： 10 - 200 pg/ml (r≥0.9996), 检测限 2.7 to 11.7 pg/ml. 86% 回收率， RSD 0.9–8.8%.
ESI(-) ,MRM，five 50 pg/mL 雌激素标样 雌激素酮, 17-雌二醇,雌激素三醇, 乙炔基雌二醇 和二乙基已烯雌酚
第二页，共55页。
一、概述
固相微萃取(solid phase microextraction）
• 1989年；Pawliszyn • Supelco1993年推出了商品化的SPME装置
• 1995年Pawliszyn等；空气中苯系物分析；SPME在气相色谱
中快速进样装置； 萃取丝内用CO2冷却装置
SPE、SPME的简单比较
中药农药残留分析中的固相萃取技术及其研究进展
蕴陨杂匀陨在匀耘晕 酝耘阅陨悦陨晕耘 粤晕阅 酝粤栽耘砸陨粤 酝耘阅陨悦粤 砸耘杂耘粤砸悦匀 圆园员园 灾韵蕴援 圆员 晕韵援 愿
中药农药残留分析中的固相萃取技术及其研究进展
关键词：固相萃取； 摇 固相微萃取； 摇 农药残留； 摇 中药 阅韵陨 标识： 凿燥蚤： 员园援 猿怨远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园愿鄄园愿园缘援 圆园员园援 园愿援 员圆怨 中图分类号： 砸圆愿源摇 摇 文献标识码： 悦摇 摇 文章编号： 员园园愿鄄园愿园缘 （ 圆园员园 ） 园愿鄄圆员员源鄄园圆
择性洗脱液洗脱或者加热进行解吸附， 以达到分离和富集目标化 合物的目的。根据其分离机制的不同， 可分为吸附分离和离子交 换分离， 其作用力主要为氢键、 偶极作用、 疏水性相互作用和静电 吸引力等。根据固相吸附剂的性质不同， 其分离模式可分为正相 固相萃取和反相固相萃取。正相固相萃取的吸附剂为极性， 且极 性大于洗脱剂的极性， 用来萃取极性物质， 一般用含有氰基 （ 原 悦晕） 、 三氧化铝、 键合硅胶、 氨基 （ 原 晕匀圆 ） 、 硅酸镁等的吸附剂。 反相固相萃取的吸附剂为非极性的， 且极性小于洗脱剂的极怀， 悦愿 等吸附剂， 离子交换分离的 用来萃取非极性物质， 一般用 悦员愿 、 固相为带电荷的离子交换树脂， 用来吸附带有相反电荷的离子化 合物。在进行分离处理时， 需要根据被分析物的极性、 溶解度、 孕噪葬 等理化性质， 选择合适的固定相。 固相萃取技术是一种基于液相色谱分离机理的样品前处理 技术， 具有溶剂使用量少、 操作简便快速， 选择性高、 重现性好、 易 于实现自动化操作等优势， 已广泛应用于食品农药残留分析工作 ［源］ 。对于中药农药残留分析的前处理， 固相萃取技术的应用 中 研究也取得了一些进展。 ［缘］ 采用弗罗里硅土和中性氧化铝作吸附剂的固相 万益群等 萃取分离技术测定了白术中 圆员 种有机磷和氨基甲酸酯类农药残 留量， 得到两个水平的加样回收率分别为 愿员援 圆豫 耀 员园愿援 远豫 和 愿怨援 愿豫 耀 员圆源援 圆豫 。还通过不同配比实验最后确定分别用 员园皂造 体积比为 怨颐 员 ， 员颐 员 ， 员颐 怨 的二氯甲烷 原 丙酮的混合溶剂洗脱， 速灭威等弱极性的农药首先淋洗下来， 然后大部分中等极性农药 淋洗下来， 最 后 乐 果 等 极 性 较 强 的 农 药 完 全 淋 洗 下 来。阎 正 ［远］ 采用 云造燥则蚤泽蚤造 固相萃取小柱快速净化提取物的固相萃取毛细 等 管气相色谱法测定丹参等 怨 种中草药中 员猿 种有机氯农药的残留 （ 砸杂阅 为 员援 猿 豫 耀 远援 愿 豫 ） 。 量， 加样回收率为 愿苑援 猿豫 耀 员园圆援 猿豫 并对影响固相萃取有因素、 固定相的种类和用量、 洗脱剂的组成 ［苑］ 和用量以及流速等方面进行了研究。杨雪梅等 采用氟罗里硅 土、 中性氧化铝和活性碳制备混合吸附剂固相萃取法处理测定药 加样回收率在 远源援 缘豫 耀 怨苑援 远豫 之 材中 怨 种有机磷农药残留量， ［愿］ 用 悦员愿 吸 间， 能够满足农药残留量测定方法的要求。陈慧琴等 附剂的固相萃取法测定土茯苓中 源 种有机磷农药残留量， 加样回 （ 砸杂阅远援 苑豫 耀 愿援 怨豫 ） ， 适合于土茯苓中多种 收率 苑怨援 园豫 耀 员园怨豫 ［怨］ 有机磷农药残留的同时测定。 云葬灶早 悦匀耘晕 等 采用双柱固相萃 取进行处理以 郧悦 原 耘悦阅 同时测定了蜂胶中 员苑 种有机氯农药残 留量， 加样回收率 远圆援 远豫 耀 员园怨援 远豫 （ 砸杂阅园援 愿豫 耀 怨援 源豫 ） 。 圆摇 固相微萃取技术 （ 泽燥造蚤凿 原 责澡葬泽藻 皂蚤糟则燥藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶， 杂孕酝耘） 随着检测技术不断更新和发展， 样品前处理越来越成为分析 过程中的瓶颈， 特别是以痕迹分析为目的的分析过程。一方面， 对于低含量成分检测的要求， 既要消除复杂基质的干扰， 又要富 集到足够的浓度以便于检测器的检测。另一方面， 要满足环境保 护的要求， 在处理过程中要尽可能用到少量的有机溶剂。有鉴于 此， 一系列新的样品前处理技术应运而生。使得样品前处理过程 向着省时、 省力、 价廉， 减少溶剂用量和对环境污染、 以及微型化
SPME技术
GC
萃 取 头 57300U 57302
HPL C
产品描述
分析对象
价格
萃取 头 5730 3211.00 100μm PDMS 萃 取 头 挥发性物质 1 （PK/3） 5730 3211.00 7μm PDMS 萃取头（PK/3） 中极性和非极性半挥发 3 物质 57304 5730 3211.00 85μm PA 萃取头（PK/3） 极性半挥发物质 5 57306 5730 / 3211.00 85μm，7μm，100MM各一 7 支套装 57308 5730 3211.00 30μm PDMS 萃取头（PK/3） 非极性半挥发物质 9 57310 5731 3211.00 65μm PDMS/DVB 萃取头 极性挥发物质 1 （PK/3） 57312 5731 3211.00 65μm PDMS 萃取头（PK/3） 极性物质 3 57318 5731 3211.00 75μm Carboxen/PDMS 萃 气体硫化合物和VOC 9 取头（PK/3） / 5731 3211.00 50μm PEG/ 树 脂 萃 取 头 表面活性剂 5 （PK/3） 注：PDMS-聚二甲基硅氧烷；PEG-聚乙二醇2万；PA-聚丙烯 DVB-二乙烯苯；Carboxen-碳分子筛
SPME装置
SPME装置简单，操作方 便。它类似于一个气相色 谱微量进样器的萃取装置, 由手柄（Holder）和萃取 头（Fiber）两部分构成， 萃取头是一根熔融石英纤 维，纤维上涂不同色谱固 定相吸附剂，接在不锈钢 丝上，外套细的不锈钢针 管（保护石英纤维不被折 断及进样），纤维头可在 针管内伸缩，手柄用于安 装萃取头，可永久使用。
可以降低有机化合物在溶液中的溶解度， 使极性有机物进入纤维涂层的分配常数增 大，从而提高萃取分离效率。
固相微萃取仪使用步骤
固相微萃取仪使用步骤固相微萃取技术是一种集采样、萃取、浓缩、进样于一体的新型样品前处理技术，应用领域广泛。
固相微萃取技术克服了传统萃取方式的缺点，集合了样品用量少、操作简单方便、省时省力、溶剂用量少或者不使用溶剂等优点，适合野外现场分析。
睿科集团旗下新拓仪器推出全新升级的固相微萃取仪，满足处理效果高度一致性的同时，操作灵活，专业方便。
固相微萃取仪使用：
样品萃取
1.将SPME针管穿透样品瓶隔垫，插入瓶中。
2.推手柄杆使纤维头伸出针管，纤维头可以浸入水溶液中(浸入方式)或置于样品上部空间(顶空方式)，萃取时间大约2-30分钟。
3.缩回纤维头，然后将针管退出样品瓶
GC分析
1.将SPME针管插入GC仪进样口。
2.推手柄杆，伸出纤维头，热脱附样品进色谱柱。
3.缩回纤维头，移去针管。
HPLC分析
1.将SPME针管插入SPME/HPLC接口解吸池，进样阀置于“Load”位置。
2.推手柄杆伸出纤维头，关闭阀密封夹。
3.将阀置于“Inject”位置，流动相通过解吸池洗脱样品进样。
4.阀重新置于“Load”位置，缩回纤维头，移走SPME针管。