基因治疗
基因治疗
与安全性相联系的就是生殖细胞基因治疗。虽然在人类尚未实施，但在动物实验已获成功，这就是转基因的 动物出现。这一事实既给人类生殖细胞基因治疗带来了希望，同时也使人们耽心这种遗传特征的变化世代相传， 将给人类带来的是福还是祸。
概念
狭义概念
广义概念
狭义概念
指用具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，因而达到治疗疾病的目的。
广义概念
基因治疗指把某些遗传物质转移到患者体内，使其在体内表达，最终达到治疗某种疾病的方法。
主要分类
按靶细胞
按基因操作
给药途径
按基因操作
基因治疗一类为基因修正（gene correction）和基因置换（gene replacement），即将缺陷基因的异常序 列进行矫正，对缺陷基因精确地原位修复，不涉及基因组的其他任何改变。通过同源重组（homologous recombination）即基因打靶（gene targetting）技术将外源正常的基因在特定的部位进行重组，从而使缺陷基 因在原位特异性修复。另一类为基因增强（gene augmentation）和基因失活（gene inactivation），是不去除 异常基因，而通过导入外源基因使其表达正常产物，从而补偿缺陷基因等的功能；或特异封闭某些基因的翻译或 转录，以达到抑制某些异常基因表达。
①ex vivo途径：这是指将含外源基因的载体在体外导入人体自身或异体细胞（或异种细胞），经体外细胞 扩增后，输回人体。ex vivo基因转移途径比较经典、安全，而且效果较易控制，但是步骤多、技术复杂、难度大， 不容易推广；
②in vivo途径：这是将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体，直接导入体内。这种载体可以是病毒型或 非病毒性，甚至是裸DNA。in vivo基因转移途径操作简便，容易推广，但尚未成熟，存在疗效持续时间短，免疫 排斥及安全性等一系列问题。
基因治疗的使用教程和步骤
基因治疗的使用教程和步骤基因治疗是一种新兴的医学手段，可以通过修改患者的遗传物质来治疗一些遗传性疾病或基因突变导致的疾病。
随着基因工程技术的发展，基因治疗在临床应用中越来越受到关注。
本文将为您介绍基因治疗的使用教程和步骤，让您了解这一领域的基本概念和流程。
首先，让我们了解一下基因治疗的基本原理。
基因治疗的目标是通过改变患者体内的基因表达来修复病理状态。
基因治疗可以分为三种主要类型：基因替代治疗、基因添加治疗和基因革命治疗。
基因替代治疗是指通过替换缺陷或异常基因来恢复正常基因功能。
这种方法涉及到将一个健康的基因导入到患者体内以代替异常基因。
这可以通过载体（如病毒、质粒等）将健康基因输送到患者体内，以便将其整合到患者的基因组中，从而恢复正常的基因功能。
基因添加治疗是一种将新的基因添加到患者体内以增加特定蛋白质的表达的方法。
这种方法适用于患者体内缺乏某种特定蛋白质的情况。
在这种方法中，研究人员会将新的基因导入到患者体内，以便在细胞中产生所需的蛋白质。
这可以通过添加类似病毒载体的载体来实现，该载体将新基因递送到患者细胞中。
基因革命治疗是通过编辑患者基因组中的特定部分来纠正基因突变。
这种方法利用CRISPR-Cas9系统或其他基因编辑工具来直接修改基因组。
通过这种方法，研究人员可以准确地修复病理性基因突变，从而恢复正常基因功能。
了解基因治疗的基本原理后，让我们来了解一下基因治疗的具体步骤。
第一步是目标基因的识别和筛选。
在进行基因治疗之前，我们需要确定具体的目标基因，以及该基因突变对患者健康产生的影响。
这通常需要进行基因测序或其他分子生物学实验来确认基因突变或缺失。
第二步是基因治疗载体的构建。
基因治疗载体是将治疗基因递送到患者体内的工具。
载体通常是一种可以将基因有效传递到患者细胞内的病毒。
研究人员需要将治疗基因插入到载体中，并确保其能够安全、有效地递送到患者细胞中。
第三步是载体的载体转染和基因递送。
一旦构建好治疗载体，研究人员将其转染到目标细胞中。
基因治疗
• 反义核酸药物 • 反义技术（antisense technology）是采用反 义核酸分子抑制、封闭或破坏靶基因的技术。 根据碱基互补原理结合并调节靶基因活性的核 酸分子称为反义核酸，其种类有反义脱氧核糖 寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)、反义 RNA、核酶和三链形成寡核苷酸(triplexforming oligonucleotides,TFO)等。反义核 酸在抑制一些有害基因的表达和失控基因的过 度表达上发挥着重要作用，可用于肿瘤、病毒 感染性疾病、高血压等的治疗。
• （二） 基因调控治疗 • 1．药物调控 用药物使被抑制的基因重新表 达或抑制某些过度表达基因的表达。 • 2．反义核酸技术 利用反义核酸 （antisense nucleic acid） 在复制、转录、 转录后加工及翻译水平上抑制目的基因的表 达。 • 3．核酶技术 利用核酶（ribozyme）的催化 活性将mRNA特异地剪切，从而不能承担翻译 模板作用。
• 生长激素 • 生长激素( growth factor,GH)是垂体前叶合 成与分泌的一种蛋白质激素，其分泌受下丘脑 的生长激素释放激素及生长抑素的调节。。 • 重组人生长激素（recombinant human growth factor，rhGH）主要用于内源性生长激素缺乏 的儿童以及治疗烧伤、创伤、肌肉萎缩症等疾 病。
• 一、 基因治疗的类型 • （一） 基因矫正治疗 • 1．基因修正（gene correction） :此种方 法较困难，尚无体内成功的报道。 • 2．基因置换（gene replacement）： 这是 最理想的基因治疗方法。但目前同源重组频 率太低而无法用于临床。 • 3．基因增补（gene augmentation） : 基 因增补较易实现，是目前基因治疗最常用的 方法。
基因治疗的例子
基因治疗的例子基因治疗是一种利用基因工程技术来治疗疾病的方法。
它通过将正常的基因导入患者的体内，修复或替代缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。
以下是基因治疗的十个例子：1. 囊性纤维化治疗：囊性纤维化是一种常见的遗传性疾病，基因治疗可以通过将正常的CFTR基因导入患者体内来修复缺陷基因，从而恢复肺部和胰腺的正常功能。
2. 血友病治疗：血友病是一种由于凝血因子缺乏导致的出血性疾病，基因治疗可以通过导入正常的凝血因子基因来恢复凝血功能，从而治疗血友病。
3. 巨细胞病毒感染治疗：巨细胞病毒感染是一种常见的病毒感染，基因治疗可以通过导入抗病毒基因来增强机体对巨细胞病毒的抵抗能力，从而治疗感染。
4. 癌症治疗：基因治疗在癌症治疗中有广泛的应用。
例如，通过导入抑制癌细胞生长的基因，可以抑制癌细胞的增殖，达到治疗癌症的效果。
5. 心血管疾病治疗：基因治疗可以通过导入修复心脏血管的基因来治疗心血管疾病。
例如，通过导入血管生成因子基因，可以促进新血管的生成，改善心脏供血情况。
6. 免疫缺陷病治疗：免疫缺陷病是一类免疫系统功能异常的疾病，基因治疗可以通过导入正常的免疫相关基因来增强免疫功能，从而治疗免疫缺陷病。
7. 遗传性视网膜病治疗：遗传性视网膜病是一类导致视网膜退化的疾病，基因治疗可以通过导入修复视网膜功能的基因来治疗视网膜病，恢复视力。
8. 先天性免疫缺陷病治疗：先天性免疫缺陷病是一类由于先天基因缺陷导致的免疫系统功能异常的疾病，基因治疗可以通过导入正常的免疫相关基因来修复免疫功能，从而治疗先天性免疫缺陷病。
9. 神经退行性疾病治疗：神经退行性疾病是一类由于神经细胞退化导致的疾病，基因治疗可以通过导入促进神经细胞生长和修复的基因来治疗神经退行性疾病，延缓疾病进展。
10. 遗传性代谢病治疗：遗传性代谢病是一类由于代谢酶缺乏或功能异常导致的疾病，基因治疗可以通过导入正常的代谢酶基因来修复代谢功能，从而治疗遗传性代谢病。
基因治疗的实验流程与操作步骤
基因治疗的实验流程与操作步骤基因治疗是一种通过在人体内引入、修复或替代缺陷基因来治疗遗传性疾病的方法。
这一领域的研究和开发已经取得了许多重要的突破，为许多患者提供了新的治疗方案。
在进行基因治疗时，研究人员需要按照一系列特定的实验流程和操作步骤进行操作。
本文将详细介绍基因治疗的实验流程和相关操作步骤。
1. 遗传疾病的诊断与基因定位在进行基因治疗之前，首先需要进行遗传疾病的诊断。
通过对患者的病史、家族病史和临床表现进行分析，确定患者是否患有遗传性疾病。
如果确认患者患有遗传性疾病，接下来需要进行基因定位，即确定导致疾病的具体基因突变位置。
2. 基因治疗的载体选择与构建基因治疗通常需要使用载体来将治疗基因输送到患者的细胞中。
常用的载体包括病毒载体和非病毒载体。
病毒载体通常具有高度传染性和较高的基因转导效率，而非病毒载体相对较安全。
研究人员需要选择合适的载体并进行构建，将治疗基因插入载体中。
3. 基因治疗载体的扩增与提纯构建好的基因治疗载体需要进行扩增以获取足够的量。
通常使用细菌或哺乳动物细胞进行大规模扩增。
扩增后，载体需要经过提纯过程去除杂质，得到纯净的载体。
4. 细胞培养与基因治疗载体转染在进行基因治疗之前，需要进行细胞培养以获取足够的目标细胞。
根据不同的研究需求，可以选择不同类型的细胞进行培养。
常用的细胞包括体外培养的细胞系和患者体内采集到的细胞。
细胞培养完成后，需要将基因治疗载体转染到目标细胞中。
5. 基因治疗载体在细胞中的表达与功能验证转染完成后，需要验证基因治疗载体在细胞中的表达情况以及是否具有治疗效果。
可以通过检测携带治疗基因的载体在细胞内的表达水平，以及观察是否能够修复目标基因的功能缺陷。
这些验证实验可以在细胞层面和动物模型上进行。
6. 动物模型的建立与基因治疗效果评估基因治疗的效果通常需要在动物模型上进行评估。
研究人员可以选择合适的动物模型，如小鼠、大鼠或猪等。
构建好的载体可以通过注射或其他途径直接引入动物体内。
基因治疗
基因矫正、基因置换、基因失活、基因修饰
从临床治疗角度，目前肿瘤基因基因治疗的策略
直接杀伤肿瘤细胞或抑制其生长； 增强机体免疫系统，间接杀伤或抑制肿瘤胞； 改善肿瘤常规治疗方法，提高疗效；
肿瘤基因治疗常用方法
基因干预技术 反义RNA技术：①封闭异常表达的癌基因； ② 作用癌基因的易位和重排部位；⑶抑制肿瘤细胞 的耐药性，提高化疗效果。 RNA干扰技术：用于阻断、抑制癌基因异常表 达的恶性肿瘤治疗。 反义基因技术：设计原癌基因启动子的竞争剂， 从而抑制原癌基因转录。
遗传病的基因治疗研究
人类遗传病4000多种，发病率为40-50%， 必须符合以下要求的遗传病才可考虑开展 基因治疗研究：（30余种） 在DNA水平上明确其发病原因及机制； 单基因遗传病，而且属隐形遗传； 该基因的表达不需要精确调控； 该基因能在一种便于临床操作的组织细胞 中表达并发挥其生理作用； 该遗传病不经治疗将有严重后果。
基因转移的生物学与非生物学方法
生物学方法：以病毒载体作为转移系统
逆转录病毒基因组经过改造后作为载体 ( retrovirus vector) 腺病毒(adenovirus,AV)基因组可作为载体携带治疗基因
腺病毒相关病毒（adenovirus associated virus, AAV)载体适合治疗基因的稳定长效表达。
几种已经或可望在临床进行基因治疗的 人类单基因遗传病
腺苷脱氨酶(ADA)和嘌呤核苷磷酸化酶（PNP) 缺乏症； 血友病：针对凝血因子Ⅸ基因； 中国科学家1991年12月成功进行了血友病B的基因 治疗。 将携带凝血因子Ⅸ基因的巨细胞病毒载体导入患者 自身皮肤的成纤维细胞—— 经体外培养---再植入患者皮下----患者血浆中凝血因子Ⅸ浓度 上升，凝血活性改善。
基因治疗的步骤和流程
基因治疗的步骤和流程基因治疗是一种先进的医学技术，旨在通过更改个体的DNA序列来治疗遗传性疾病和一些其他疾病。
它涉及采取一系列步骤和流程，以确保安全有效地修改患者的基因。
以下是基因治疗的一般步骤和流程。
1. 诊断和选择目标疾病：在进行基因治疗之前，医生需要准确地诊断患者的疾病，并决定是否适合进行基因治疗。
一些遗传性疾病和某些癌症可能是基因治疗的理想候选病例。
医生还需要确定哪个基因或基因组区域是该疾病的致病因素。
2. 样本采集和细胞处理：为了进行基因治疗，医生需要获得患者的细胞样本。
这可以通过抽取患者的血液或从患者的组织中获取。
一旦获得样本，细胞必须被提取并处理，以便能够在体外修改其基因。
3. 基因修饰：基因治疗的关键步骤之一是修改患者的基因。
这可以通过多种方法实现，包括基因替代、插入和修复。
一种常见的方法是使用质粒或病毒载体将修饰的基因序列导入到患者的细胞中。
这些载体被设计成能够进入细胞并将修饰的基因序列导入患者的基因组。
4. 细胞培养和扩增：一旦成功将修饰的基因导入细胞中，细胞需要进一步培养和扩增，以便获得足够数量的细胞进行治疗。
这通常需要在实验室中进行多个培养周期。
5. 治疗准备：在进行基因治疗之前，患者需要进行一系列准备工作。
这可能涉及与医生进行详细的沟通，以确保患者了解并同意治疗的风险和潜在效果。
医生还可能进行一系列测试和评估以评估患者的整体健康状况。
6. 治疗过程：在开始基因治疗之前，医生会麻醉患者并决定如何将细胞或载体导入患者体内，这通常取决于患者的病情和基因治疗的类型。
在某些情况下，细胞可能被注入到患者体内的特定器官或部位。
在其他情况下，患者可能需要接受体内的细胞转染。
7. 治疗后的监测和护理：一旦完成基因治疗，患者需要接受监测和护理，以确保治疗效果和安全性。
这可能涉及定期的检查、血液测试和影像学检查。
医生还会密切关注患者是否出现任何不良反应或副作用。
8. 长期随访：基因治疗通常需要长期的随访来评估治疗的持久效果和长期安全性。
基因治疗的使用方法简介与操作流程详解
基因治疗的使用方法简介与操作流程详解基因治疗是一种新型的治疗方法，它利用基因工程技术将正常基因导入患者体内，修复或替换病变基因，从而达到治疗疾病的目的。
本文将介绍基因治疗的使用方法以及详细的操作流程。
1. 基因治疗的使用方法基因治疗可以分为体外基因治疗和体内基因治疗两种方法。
体外基因治疗是将患者的细胞取出后，通过体外培养将目标基因导入细胞中，再将处理后的细胞重新注入患者体内。
这种方法常用于癌症治疗，如CAR-T细胞治疗等。
体内基因治疗是将基因药物直接注射或输注到患者体内，使其通过血液循环进入到靶细胞中。
这种方法常用于遗传性疾病的治疗，如囊性纤维化、血友病等。
2. 基因治疗的操作流程（1）目标基因的筛选：根据患者的病情和基因突变的类型，从基因库中筛选出能够修复或替代病变基因的目标基因。
（2）载体构建：选择合适的载体，将目标基因插入载体中，生成重组载体。
常用的载体包括病毒载体（如腺病毒、腺相关病毒）和非病毒载体（如脂质体、高分子聚合物）。
（3）载体纯化和扩增：将重组载体转染到宿主细胞中，利用细胞培养技术进行载体的纯化和扩增，得到足够量的载体。
（4）基因药物的制备：将得到的载体与适当的辅助剂（如输送剂、保护剂）混合，经过纯化和过滤处理，制备成基因药物。
（5）患者的治疗计划和预处理：根据目标疾病的特点和患者的病情，制定个体化的治疗计划。
在实施基因治疗之前，患者可能需要接受一系列的预处理，如化疗、放疗或免疫抑制剂的使用。
（6）基因药物的输送：将制备好的基因药物通过静脉注射或局部注射的方式输送到患者体内。
在进行输送时，需要严格控制输送剂的剂量和输送速度，确保基因药物能够有效到达到靶细胞中。
（7）基因治疗效果的监测和评估：在基因治疗后，需要对患者的疗效进行监测和评估，以确保治疗的有效性和安全性。
常用的监测方法包括基因表达水平的检测、临床症状的观察和影像学检查等。
（8）随访和复查：基因治疗后，患者需要进行定期的随访和复查，以了解治疗效果的持续性和潜在的不良反应。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
基因治疗（gene therapy）
•经典的基因治疗：指正常的基因整合入细胞基因组以校正或置换致病基因的一种治疗方法。
•广义的基因治疗：将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。
基因治疗与常规治疗方法的不同：一般意义上疾病的治疗针对的是因基因异常而导致的各种症状，而基因治疗针对的是疾病的根源--异常的基因本身。
基因治疗目前主要是治疗那些对人类健康威胁严重的疾病，包括：遗传病（如血友病、囊性纤维病、家庭性高胆固醇血症等）、恶性肿瘤、心血管疾病、感染性疾病（如艾滋病、类风湿等）。
基因治疗发展简史
1990年9月14日：第一例正式批准的基因治疗实验开始进行1991年美国批准了人类第一个对遗传病进行体细胞基因治疗的方案，即将腺苷脱氨酶（ADA）导入一个4岁患有严重复合免疫缺陷综合征（SCID）的女孩。
1991年7月中国开始进行基因治疗试验
第一个基因临床治疗的实例
其他实例
1993年法国将Ad-RSVmDys（腺病毒－罗斯病毒小肌营养不良蛋白基因重组体）注入小鼠肌内成功。
即用腺病毒为载体，与小肌营养不良蛋白（minidystrophin）基因的cDNA重组，在RSV启动子启动下，作肌肉注射，证明可在mdy小鼠肌肉表达。
在中国
1991年,我国科学家进行了世界上首例血友病B的基因治疗临床试验,目前已有4名血友病患者接受了基因治疗,治疗后体内IX因子浓度上升,出血症状减轻,取得了安全有效的治疗效果。
随后,我国科学家利用胸腺激酶基因治疗恶性脑胶质瘤基因治疗方案获准进入1期临床试验,初步的观察表明,生存期超过1年以上者占55%,其中1例已超过三年半,至今仍未见肿瘤复发。
此外,采用血管内皮生长因子基因治疗外周梗塞性下肢血管病基因治疗方案也已获准进入临床试验。
目前,我国已有6个基因治疗方案进入或即将进入临床试验。
总的来看,我国基因治疗产业比美国落后了约4年,正处于成长阶段,
绝大部分还处于实验室研究阶段,仅有大约5个项目通过审批进入特批临床试验或I、Ⅱ期临床试验。
基因治疗的基本程序
(一)治疗性基因的获得
(二)基因载体的选择
(三)靶细胞的选择
(四)基因转移方法
(五)转导细胞的选择鉴定
(六)回输体内
基因治疗有二种形式：一是体细胞基因治疗，正在广泛使用；二是生殖细胞基因治疗，因能引起遗传改变而受到限制。
1)体细胞基因治疗：体细胞基因治疗(somatic cell gene therapy)是
指将正常基因转移到体细胞，使之表达基因产物，以达到治疗目的。
这种方法的理想措施是将外源正常基因导入靶体细胞内染色体特定基因座位，用健康的基因确切地替换异常的基因，使其发挥治疗作用，同时还须减少随机插入引起新的基因突变的可能性。
对特定座位基因转移，还有很大困难。
2)生殖细胞基因治疗：生殖细胞基因治疗(germ cell gene therapy)
是将正常基因转移到患者的生殖细胞（精细胞、卵细胞中早期胚胎）使其发育成正常个体，显然，这是理想的方法。
实际上，这种靶细胞的遗传修饰至今尚无实质性进展。
基因的这种转移一般只能用显微注射，然而效率不高，并且只适用排卵周期短而次数多的动物，这难适用于人类。
而在人类实行基因转移到生殖细胞，并世代遗传，又涉及伦理学问题。
因此，就人类而言，多不考虑生殖细胞的基因治疗途径。
体细胞基因治疗采用将基因转移到基因组上非特定座位，即随机整合。
只要该基因能有效地表达出其产物，便可达到治疗的目的。
这不是修复基因结构异常而是补偿异常基因的功能缺陷，这种策略易于获得成功。
体细胞基因治疗不必矫正所有的体细胞，因为每个体细胞都具有相同的染色体。
有些基因只在一种类型的体细胞中表达，因此，治疗只需集中到这类细胞上。
其次，某些疾病只需少量基因产物即可改善症状，不需全部有关体细胞都充分表达。
基因治疗的策略
（一）基因置换（gene replacement）
指将特定的目的基因导入特定细胞，通过定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因。
通过同源重组（homologous recombination）即基因打靶技术（gene targeting）将外源正常的基因在特定的部位进行重组，从而使缺陷基因在原位特异性修复。
对缺陷基因的缺陷部位进行精确的原位修复，不涉及基因组的任何改变。
（二）基因增强（gene augmentation）和基因失活（gene inactivation），
指不去除异常基因，而通过导入外源基因使其表达正常产物，从而补偿缺陷基因等的功能；或特异封闭某些基因的翻译或转录，以达到抑制某些异常基因表达。
（三）自杀基因治疗
将“自杀”基因导入宿主细胞中，这种基因编码的酶能使无毒性的药物前体转化为细胞毒性代谢物，诱导靶细胞产生“自杀”效应，从而达到清除肿瘤细胞的目的。
（四）基因免疫治疗
通过将抗癌免疫增强细胞因子或MHC基因导入肿瘤组织，以增强肿瘤微环境中的抗癌免疫反应。
基因治疗的途径
1、间接体内治疗途径（ex vivo)
先从患者体内取出某一器官组织的细胞，体外扩增后，将目的基因转入靶细胞形成表达外源基因的遗传修饰细胞，选择高表达的细胞扩增培养，以一定数量移植患者体内。
（安全、易控制但操作复杂）2、直接体内治疗途径（in vivo）
将目的基因体内直接转移到靶细胞，所用载体必须具有特异的导向性和转移效率。
（操作简单但疗效短、免疫排斥等）
基因转移技术(gene transfer)
1.病毒介导的基因转移系统
病毒载体介导的基因转移效率较高，因此它也是使用最多的基因治疗载体。
据统计，有72%的临床实验计划和71%的病例使用了病毒载体，其中用得最多的是逆转录病毒载体和腺病毒(adenovirus，AV)载体。
2.非病毒载体介导的基因转移系统
1）化学法：将正常基因DNA（及其拷贝）与带电荷物质和磷酸钙、DEAE－葡萄糖或与若干脂类混合，形成沉淀的DNA微细颗粒，直接倾入培养基中与细胞接触，由于钙离子有促进DNA透过细胞有作用，某些化合物可扰乱细胞膜，故可将DNA输入细胞内，并整合于受体细胞的基因组中，在适当的条件下，整合基因得以表达，细胞亦可传代。
这种方法简单，但效率极低，一般1000－100000个细胞中只有一个细胞可结合导入的外源基因。
要达到治疗目的，就需要从病人获得大量所需的受体细胞。
当然，可以通过选择培养的方法来提高转化率。
2）物理法：包括电穿孔法和直接显微注射法。
①电穿孔法：电穿孔法（electroporation）是将细胞置于高压脉冲电场中，通过电击使细胞产生可逆性的穿孔，周围基质中的DNA可渗进细胞，但有时也会使细胞受到严重损伤。
②显微注射法：显微注射（microinjection）是在显微镜直视下，向细胞核内直接注射外源基因，这种方法应是有效的。
但一次只能注射一个细胞，工作耗力费时。
此法用于生殖细胞时，有效率可达10%。
直接用于体细胞却很困难。
在动物实验中，应用这种方法将目的基因注入生殖细胞，使之表达而传代，这样的动物就称为转基因动物，目前成功使用得较多的是转基因小鼠（transgenic mice），它可作为繁殖大量后代的疾病动物模型。
③脂质体法：脂质体（liposome）法是应用人工脂质体包装外源基因，再与靶细胞融合，或直接注入病灶组织，使之表达。
3）同源重组法：同源重组（homologous recombination）是将外源基因定位导入受体细胞的染色体上，在该座位因有同源序列，通过单一或双交换，新基因片段替换有缺陷的片段，达到修正缺陷基因的目的。
如在新基因片段旁组装一Neo基因，则在同源重组后，因有Neo基因，可在含有新霉素（neomycin）的培养基中生长，从而使未插入新基因片段的细胞死亡。
对于体细胞基因治疗，体外培养细胞的时间不能过长，筛选量大，故在临床上应用也受限制难以进行。
今后如能改进技术，提高重组率，这种定点修正基因的方法仍是有前景的。