疟疾诊断原则
疟疾临床症状
疟疾临床症状，治疗及其用药的问题，答案和评分标准（3问题2分）适用对象：县级医院内儿科门诊临床医生；一、二类县的乡级卫生院医生。
（用考核对象的平均分）。
1、疟疾病例诊断依据是什么？（0.9分）1) 流行病学史：曾有疟疾传播季节在疟疾流行区住宿、夜间停留史，或近二周内有输血史；或有既往病史。
（谈到流行病学史0.1分+具体描述0.1分=0.2分）。
2) 临床表现：①典型的临床表现：有周期性发冷、发热、出汗等症状，每天或隔天或隔两天发作一次，重症病例可出现昏迷等症状。
②不典型的临床表现：有发热、发冷、出汗等症状，但热型和发作周期不规律，有类似感冒症状或伴有腹泻等胃肠道症状，也可有头痛、妄语和昏迷等中枢神经系统症状。
（谈到临床症状方面0.1分+典型症状0.1分+非典型症状0.1分=0.3分）。
3) 实验室检查：①病原学检查（显微镜检查，简称镜检）：血涂片查见疟原虫；②免疫学检测（快速诊断试剂盒，简称RDT）：疟原虫抗原检测阳性；③基因检测（聚合酶链式反应，简称PCR）：疟原虫特异性基因片段检测阳性。
（谈到实验室检测0.1分+病原学检查0.1分+免疫学检测0.1分+基因检测0.1分=0.4分）。
2.我国治疗间日疟的首选（一线）治疗方法是什么？治疗无效时用什么方法（二线）治疗？可使用相同的方法治疗卵形疟和三日疟吗？（0.6分）首选磷酸氯喹片（以下简称氯喹）加磷酸伯氨喹片（以下简称伯氨喹）八日疗法进行治疗。
治疗无效时，可选用以青蒿素类药物为基础的复方或联合用药的口服剂型（以下简称ACT）进行治疗。
此疗法也适用于卵形疟和三日疟患者的治疗。
（谈到氯伯喹0.3分+二线药0.2分+肯定卵形和三疟用同样疗法0.1分=0.6分）。
3. 我国普通恶性疟的治疗方法是哪些？（0.5分）采用ACT进行治疗。
包括青蒿琥酯片加阿莫地喹片、双氢青蒿素哌喹片、复方磷酸萘酚喹片、复方青蒿素片等。
（谈到ACT 0.3分+二种以上ACT 0.2分=0.5分）。
中医诊治疟疾
中医诊治疟疾摘要】疟疾是由于虚弱之体感受疟邪或山岚瘴气、疫疠之邪引起的机体休作性寒战、壮热、汗出、头痛、烦渴等为主要表现的虫媒传染病。
目的讨论中医诊治疟疾。
方法根据患者临床表现与辅助检查结果进行诊断并治疗。
结论截疟祛邪为疟疾的基本治疗原则。
截疟是防止疟疾复发的根本措施。
实证以祛邪截疟为主，虚证以扶正补虚为主。
以此为基础，结合患者临床表现及兼夹症状，辨证施治，对症治疗【关键词】中医疟疾疟疾是由于虚弱之体感受疟邪或山岚瘴气、疫疠之邪引起的机体休作性寒战、壮热、汗出、头痛、烦渴等为主要表现的虫媒传染病：多见于夏秋季节蚊虫繁殖之时，雌性按蚊叮咬人体，将其体内寄生的疟原虫传人人体所致。
西医学中的各种疟疾，如间日疟、三日疟、卯形疟、恶性疟、先天性疟疾和婴幼儿疟疾、输血性疟疾、重型疟疾等均可参照本节辨证论治。
本病的发作主要是感受疟邪所致，疟邪伏于少阳半表半里，随感邪的轻重及正气的强弱而表现不同的疟型。
诊断时主要侧重点，“当辨六气中所伤何气，六经中所涉何经。
”根据患者临床表现、寒热轻重及发作时间，判断疟邪之深浅、疟发之部位及患者正气之强弱。
风温、时行感冒或淋病的初起或早期症状与疟疾相似，临床主要考虑与此类疾病进行鉴别。
现代医学主要考虑排除急性血吸虫病、伤寒与副伤寒、钩端螺旋体病、黑热病、阿米巴肝囊肿、败血病等疾病。
中医诊断与鉴别主要抓住疟疾发作的典型规律，即寒战高热，汗出热退，休作有时。
结合患者有无接触疟邪、疫区居留、不洁输血的病史，观察其临床表现，分析其所感之疟邪、感邪之轻重、病位之深浅、正气之盛衰、预后之好坏等。
一旦明确病因，确立诊断，即以截疟祛邪为基本原则，针对典型证候，顾及兼夹症状。
(一)疟疾的诊断1.发作时寒战高热、汗出热退，每日、间日或三日发作一次，伴有肢体酸楚，恶心呕吐，发作后出现口唇疱疹等症，或者但寒不热，或但热不寒，寒热不清。
2.疫疟重症可出现持续高热、颈项强直、抽搐、昏迷等症。
3.多发于夏秋季节和疟邪流行地区。
疟疾的诊断与治疗
预防
1. 管理传染源：报疫卡、根治病人带虫者； 2. 切断传播途径：灭蚊、蚊帐 3. 保护易感人群：预防用药
超高热型：42°C，气促，烦躁，谵忘， 昏迷，抽搐，便失禁。
凶险发作临床表现
冷厥型：体温血压下降，呼吸浅促，脉 细，苍白发绀，胃肠症状。
胃肠型：高热，恶心呕吐腹泻，血便， 里急后重；后期血压降，少无尿，死于 循环衰竭、肾衰。
水肿型：突发呼吸困难，口鼻血性泡沫
临床表现（其他）
再燃
乙胺嘧啶每周25mg 哌奎每20天500mg
思考题
1. 疟原虫人体内阶段生活史 2. 脑型疟疾的发病机理 3. 间日疟典型临床表现； 4. 脑型疟疾的治疗方案。
最重要的鉴别诊断方法：病原学的确定
常用抗疟药物（1）
杀红细胞内裂殖体疟原虫
1. 氯喹：磷酸氯奎首剂1g，口服6-8h后再服0.5g， 第2、3日各再服0.5g，总量2.5g；
2. 青蒿素：首剂1g，第2、3日各0.5g，总量2.5g； 3. 蒿甲醚：首剂0.3g im,第2、3日各0.15g； 4. 青蒿琥酯：首日0.1g，Bid，第2-5日0.05g，
疟疾
疟疾（malaria) ：
疟性寒战、
高热、出汗、贫血、脾肿大。 人体内2个繁殖期-肝细胞内、红细
胞内
病原学
感染人体疟原虫有四种:
间日疟原虫
三日疟原虫
恶性疟原虫
卵形疟原虫
疟原虫生活史包括两个阶段：
疟疾诊断与防治(1)
防治原则
• 治疗病人和带虫者：杀红内期的药物（氯喹、 羟基喹哌、咯萘啶、青蒿素）；杀红外期和 配子体的药物：伯氨喹啉 • 保护健康人群：个人和集体预防，主要预防 药有乙胺嘧啶加磺胺多辛 • 防蚊、灭蚊 • 加强监测：早期发现，早期诊断与治疗
抗疟药使用原则
抗疟药使用原则
• 第一线药物：磷酸氯喹（下称氯喹）、磷酸哌
恶性疟原虫
• 环状体：环纤细，多环（一个红细胞内有2个 环状体）、多核（一个环状体上有 2 个细胞核） 和边缘型（环状体沿红细胞边缘分布）。 • 配子体：雄配子体呈腊肠型，细胞质略红， 核疏松，位于虫体中央，疟色素分布在核周； 雌配子体呈新月型，细胞质蓝色，核致密， 核位置及疟色素分布特点同雄配子体 。
————————————————
年
全国疟疾发病率和死亡率
发病人数 发病率 死亡人数 死亡率 （万） （/万） （/10万） ————————————————————
1949 1960 1980 1990 2000 2001 3000.00 1023.68 330.00 11.74 2.40 2.48 600.00 155.39 33.78 1.06 1.87 1.91 300000 399 64 35 39 28 60.0000 0.951 0.0066 0.0032 0.0033 0.0023
• ④发病数天后触及脾脏，有时在脾肿
前即有脾触痛，偶伴胆囊区触痛； • ⑤投以抗疟药后，症状很快消失。
临床诊断要点：
• ①多数病例发热前有时间长短不一的寒战或畏
寒； • ②体温在短时间内迅速上升，持续数小时，然 后很快下降，有不同程度出汗。隔 2 － 4 小时测 量体温1次，分析体温曲线，可发现夜间的体温 降至正常或在常温以下； • ③发作有定时性，发热期与无热期交迭出现， 有规律性； • ④病人在发作间歇期除疲劳、无力和略感不适 外，一般感觉良好；
疟疾有哪些表现及如何诊断
疟疾有哪些表现及如何诊断一、疟疾的概述疟疾是一种虫媒性传染病,即疟原虫引起的寄生虫病，一般具有两种感染途径：1、经按蚊叮咬而感染疟原虫；2、输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫，寄生于人体的疟原虫可以分为四种：恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫。
我国主要常见间日疟原虫和恶性疟原虫；其他二种的出现比较少，有也少见于国外的一些输入型病例。
疟疾在中医里还有“正疟”、“温疟”之称，它在夏秋两季的发病率较高，对于体质较弱的人群例如儿童等感染几率更大。
在热带及亚热带地区，一年四季该病都比较盛行，在这些人群受感染的几率会大幅度提升。
其主要表现有周期性规律发作，全身发冷、发热、多汗，长期多次发作后，可引起贫血和脾肿大，其中较为严重的是由恶性疟原虫致病的重症疟疾，其病死率高、风险大。
但经我国大规模地防治，近年疟疾发病率已大为降低.从流行病学的角度来讲，疟疾传染源分为疟疾病人及无症状感染者，即病人和无症状的血中有配子体的人是疟疾的传染源。
疟疾的传播媒介为按蚊，共200种左右，但传疟者并不多，只有吸人血、对疟原虫易感、群体的数量大、生活期较长、子孢子可在其体内发育成熟的蚊种才可成为媒介。
疟疾的传播方式有：被有传染性的按蚊叮咬（数量居多）、经胎盘的先天性感染、输血、麻醉药成瘾的人打麻醉针时针头或注射器消毒不良等传染（较少见）。
所有人群均易感，感染疟原虫后可产生一定程度的免疫，即：1.当地人由于早年多患过疟疾，均获得相当程度的免疫力。
2.外地人由于无免疫力，进入全疟区后，不被感染者极少。
3.疟区的婴儿，降生后一个月内，由于受来自母体的抗体保护，一个月后，疟疾的发病率与死亡率均很高。
二、疟疾的临床表现疟疾的临床表现分为五个时期，分别为：潜伏期、畏寒期、高热期、出汗期、间歇期。
潜伏期是指从被蚊叮咬、孢子体进入人体到第一次疟疾发作从而表现出现临床症状时的阶段。
这阶段包括了红外期和红内期的第一个繁殖周期，疟原虫在体内占据红细胞进行大量繁殖。
疟疾的诊断治疗
• ④ 发病数天后触及脾脏 ，有时在脾肿 发病数天后触及脾脏，
前即有脾触痛，偶伴胆囊区触痛； 前即有脾触痛，偶伴胆囊区触痛； • ⑤投以抗疟药后，症状很快消失。 投以抗疟药后，症状很快消失。
临床诊断要点：
• ① 多数病例发热前有时间长短不一的寒战或畏
寒； • ② 体温在短时间内迅速上升 ， 持续数小时 ， 然 体温在短时间内迅速上升， 持续数小时， 后很快下降， 有不同程度出汗。 后很快下降 ， 有不同程度出汗 。 隔 2－ 4小时测 － 小时测 量体温1次 分析体温曲线， 量体温 次，分析体温曲线 ，可发现夜间的体温 降至正常或在常温以下； 降至正常或在常温以下； • ③ 发作有定时性 ， 发热期与无热期交迭出现 ， 发作有定时性， 发热期与无热期交迭出现， 有规律性； 有规律性； • ④ 病人在发作间歇期除疲劳 、 无力和略感不适 病人在发作间歇期除疲劳、 一般感觉良好； 外，一般感觉良好；
疟疾的诊断与防治
疟疾流行态 势
• 疟疾流行于热带、亚热带及温带边缘地 疟疾流行于热带、 • • • • •
区 是重要蚊媒传染病 WHO最新估计，疟疾流行于 多个国家 最新估计， 最新估计 疟疾流行于90多个国家 和地区 约有21亿人受到威胁 约有 亿人受到威胁 每年有3-5亿人感染 每年有 亿人感染 死亡人数达270万，90%在非洲 死亡人数达 万 在非洲
三．疟疾防治
需要了解和掌握的要点
1．流行三环节 ． （1）传染源：有配子体的现症病人和带虫者 ）传染源： （2）传播途径 ） ① 主要传播途径是通过雌性按蚊叮咬 中华、嗜人、微小和大劣按蚊） （中华、嗜人、微小和大劣按蚊） ② 通过输血感染 （3）易感人群：流行区儿童和低疟区、非疟区 ）易感人群：流行区儿童和低疟区、 无免疫力的人群
疟原虫检测依据
疟原虫检测依据
疟原虫检测是一种用于诊断疟疾的关键性检测方法。
疟疾是由疟原虫寄生在人体内引起的传染病，因此检测疟原虫的存在是确诊疟疾的关键步骤之一。
以下是常见的疟原虫检测依据：
临床症状：疟疾患者通常会出现周期性发作的高热、寒战、头痛、肌肉酸痛、恶心、呕吐等症状。
虽然这些症状并不特异，但结合疫情流行地区和病史可以引起对疟疾的怀疑。
实验室检测：
血液涂片检查：这是最常用的疟原虫检测方法之一。
通过显微镜检查患者的血液涂片，观察疟原虫在红细胞内的形态特征，包括形态、大小、数量等。
免疫学检测：包括抗原检测和抗体检测。
抗原检测可以检测血液中的疟原虫特异性抗原，而抗体检测可以检测病人体液中的疟原虫特异性抗体，从而确定疟疾的感染情况。
分子生物学检测：包括聚合酶链反应（PCR）等技术，可以检测疟原虫的遗传物质，具有高度的敏感性和特异性。
流行病学史：确定病人是否曾经旅行到或居住在疟疾流行地区，或者是否接触过疟疾感染者，有助于确定诊断。
疟疾流行地区：考虑患者是否居住在或近期旅行到疟疾流行地区，这也是对疟疾进行诊断和筛查的重要依据之一。
综合以上依据，结合临床症状、实验室检测和流行病学史，可以更准确地诊断疟疾，确定疟疾的感染类型（原发性感染、复发性感染等），并指导相应的治疗措施。
及早诊断和治疗对于预防疟疾的严重并发症和传播具有重要意义。
感染病学疟疾
季节性
疟疾的传播与气温、湿度 等环境因素密切相关，通 常在雨季和夏季更容易传 播。
免疫反应
天然免疫
人体对疟疾具有一定的天然免疫力， 但这种免疫力随着感染次数的增加而 逐渐减弱。
适应性免疫
免疫逃避
疟原虫能通过变异等方式逃避人体的 免疫攻击，导致长期感染和反复发作 。
疟疾的临床表现包括周期性发热、寒战、头痛、 乏力等，严重时可引起昏迷和死亡。
诊断方法
疟疾的诊断主要依据临床表现和实验室检测，包 括血涂片显微镜检查和特异性抗原及抗体检测等 。
误诊与漏诊
由于疟疾的临床表现与其他疾病相似，容易出现 误诊和漏诊，特别是在非流行地区。
02
疟疾的发病机制
病原学
01
02
03
适应性免疫通常在感染后产生，对特 定类型的疟原虫具有更强的针对性。
03
疟疾的治疗
药物治疗
快速控制症状
针对疟疾引起的发热、寒战等 症状，可使用解热镇痛药进行
缓解。
抗疟药治疗
针对疟原虫，使用特定的抗疟 药物进行治疗，如氯喹、青蒿 素等。
联合用药
为了提高治疗效果，可采用不 同抗疟药物进行联合治疗。
耐药性监测
提高接种率
加强宣传教育，提高公众对疟疾疫苗的认识和接受程度，促进疫苗接 种率的提高。
05
疟疾研究进展
新药研发
青蒿素类衍生物
针对疟原虫的生物靶点进行设计和优化，以提高疗效和降低抗药 性风险。
新型抗疟药物
研究开发新的抗疟药物，通过作用于疟原虫的不同生物过程，以多 重方式抑制其生长和繁殖。
联合用药
探索多种药物的联合使用，以提高疗效，减少抗药性的产生，并降 低治疗成本。
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疟疾诊断原则根据疟区住宿史，发病时有定期发冷发热出汗等临床症状，脾肿大等体征，以及病原学检查，血清免疫学检查等结果，予以诊断。
诊断标准1．曾于疟疾传播季节在疟疾流行区住宿，或有输血史。
2．间歇性定时发作，每天、隔天或隔两天发作一次，发作时有发冷、发热、出汗等临床症状。
发作多次可出现脾肿大和贫血。
重症病例出现昏迷等症状（详见重症疟疾）。
3．用抗疟药作假定性治疗，3天内症状得到控制者。
4．间接荧光抗体实验或酶联免疫吸附试验抗体阳性。
5．血涂片查见疟原虫。
其种类有间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫。
疑似病例：具备1与2。
临床诊断：疑似病例加3或4。
确诊病例：疑似病例加5。
按查见的疟原虫种类，分为间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。
按照以上标准，只有血检查见疟原虫，在诊断判定上才能写为确诊疟疾，不然，只能写为疑似疟疾或临床诊断疟疾。
诊断方法1．血涂片检查吉氏液染色--光学显微镜（油镜）检查：同时涂制薄血膜和圆形厚血膜，薄血膜须用甲醇固定，用吉氏染色液（Giemsa stain）进行染色。
吉氏染液用pH7.0-7.2的水配成3%的稀释液，可将血片插入染色缸内染色，或用滴管将稀释液滴在厚、薄血膜上，染色30min，若需快速染色，可在2ml水中加吉氏染液3滴，染色6min 。
对临床诊断为脑型疟者，宜用快速染色法，以便能尽快获得确诊依据。
现症患者至少检查100个厚血膜视野，带虫者应查完整个厚血膜，未发现疟原虫才判为阴性。
薄血膜可用于原虫形态鉴定。
以薄血膜中平均每100个红细胞中的原虫数，或厚血膜中平均每100个白细胞范围内的原虫数，推算每微升血中的原虫密度。
染色血片中的原虫核呈红色，胞浆呈兰色。
除环状体外，其他各期均可查见褐色的疟色素。
除恶性疟病例外，均可查见各期疟原虫。
一般恶性疟病例，仅查见环状体，或可见配子体。
但脑型疟病例，不仅原虫密度高，查见的环状体比一般的粗大，而且可查见大滋养体和裂殖体，疟色素呈黑褐色，这些特点对明确诊断很有帮助。
还有一点值得注意，在非洲感染的非重症恶性疟病例，其环状体往往比国内一般恶性疟病例所见的环状体粗大，胞浆较多，与间日疟原虫小滋养体相似，容易误判为间日疟原虫，但也不能同时查见大滋养体和裂殖体，这一点有别于间日疟原虫感染。
瑞氏液染色-光学显微镜（油镜）检查：亦须制作厚、薄血膜，用瑞氏染液（Wright stain）进行染色。
在厚血膜上加清水2-3滴溶去血红蛋白，染色效果较好。
染色时，先在薄血膜上直接加约1ml瑞氏液染色2min，然后在薄血膜上加与染液等量的水稀释，并引到厚血膜上共染5-6min。
其他参见吉氏液染色法。
荧光素吖啶橙染色-荧光显微镜检查：要求涂制成直径为1.2-1.5cm的亚厚血膜，不宜过薄。
须用甲醇固定薄血膜，用清水溶去厚血膜的血红蛋白。
吖啶橙1g加pH6.5-7.0磷酸缓冲液100ml配制成1%吖啶橙母液。
染色时，将吖啶橙母液0.1ml加生理盐水9.9ml配制成万分之一稀释液。
用滴管取稀释液2-3滴于血膜上，染色40-60S，加上盖玻片。
用荧光显微镜，或以普通显微镜加简便荧光光源装置代替，在暗室中检查，疟原虫和白细胞核呈黄绿色荧光，胞浆呈桔红色荧光。
临床意义：血涂片查找疟原虫是每个可疑疟疾病例或临床诊断疟疾病例确诊的必要手段，通过血检还可以确定是何种疟疾，为临床治疗提供明确的依据。
2．骨髓穿刺按医院常规进行。
本法一般不宜用于疟疾诊断，仅在特殊情况下用于鉴别诊断。
3．血清免疫学检查间接荧光抗体试验（indirect fluorescence antibody test IFAT）：常用食蟹猴疟原虫(P.cynomolgi)为代用抗原。
用食蟹猴疟原虫感染恒河猴，待红细胞感染率超过2%，而且多数原虫为裂殖体时取血，制作抗原片，即在载玻片上，推制成6.0cm×1.5cm长条形亚厚血膜。
如采用体外培养的恶性疟原虫，应在红细胞感染率为4%以上而且以裂殖体为主时，取血制成抗原片。
取患者血清或先做成滤纸干血滴，然后制成血清稀释液。
其原理是先让患者血清接触抗原片，经处理，然后加上用PBS稀释的抗人IgG荧光抗体，再经处理，用荧光显微镜检查反应结果。
按裂殖体及大滋养体胞浆的荧光强度及形态结构清晰程度判断阳性级别，一般以1：20血清稀释度时查见一个十以上为阳性。
酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immuosorbent assag,ELISA）：按IFAT方法收集食蟹猴疟原虫，或用体外培养的恶性疟原虫，在红细胞感染率为4%-8%且以裂殖体为主时收集疟原虫，制备可溶性抗原。
用pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液将抗原所需浓度稀释包被聚苯乙烯板。
用pH7.4PBS/吐温20（PBS/T）灌洗或稀释。
分几个步骤，将可溶性抗原、稀释的待测血清、稀释的过氧化物酶标记的抗人IgG结合物，过氧化氢（H2O2）底物系统溶液加入井中，每个步骤后均须放置37℃中进行适当的反应，最后每井加入2mol/L硫酸50μl终止反应。
用酶标专用比色计读取492nmOD值，通常以OD值>=0.4为阳性阈值。
为了便于比较和减少误差，按OD值校正公式，对各个血样的OD值进行校正。
Dipstick试纸法：此方法检测血液中的富组氨酸蛋白Ⅱ（histidine-rich protein Ⅱ,HRP-Ⅱ）,该蛋白由恶性疟原虫寄生的红细胞产生，存在于整个红细胞内期，故提取HRP-Ⅱ抗原，然后免疫小鼠，制备单抗隆抗体（McAb），再利用McAb检测HRP-Ⅱ具有较高的敏感度和特异性。
目前进口的有两种Dipstick诊断试剂盒;其一，澳大利亚Austcard公司的快速免疫色谱试剂盒(immunochromatographic test,ICT)；其二，美国Becton Dickinson公司的ParaSight—F试剂盒。
均可按说明书操作。
ICT检测与ParaSight-F检测主要在显色系统上有所差异，操作方法亦不尽相同。
国内已开展此种诊断试剂盒的研究。
其他单克隆抗体方法还有单抗-胶体金探针法、单抗-（碱性磷酸）酶联免疫反应法、单抗-滴金膜过滤法等。
它们主要在抗体标记及检测系统上有所不同，其中有放射形同位素标记、生物素标记、酶（辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶）标记、胶体金标记等。
IFA和ELISA均可作为临床辅助诊断方法，对于疟疾现症患者，IFAT阳性和OD值在阳性阈值以上可表现出来，但不能判断是何种疟原虫。
由于免疫反应并不伴随原虫转阴而立即消失，原虫血症消失后隔一段时间，有的甚至隔3个月仍可能阳性，对有些不规则地使用抗疟药而血检原虫阴性者，有助于判断近期是否患过疟疾。
Dipstick试纸法可以作为疟疾诊断手段之一，初时用于恶性疟诊断，现时已用于间日疟诊断。
但须注意，血中仅含恶性疟原虫成熟配子体时，此方法难以检测出来，而且血中原虫消失后，仍可检出HRP-Ⅱ抗原，48小时后，阳性者仍可达75%。
在流行病学上，用血清免疫学方法可判断整个地区疟疾流行状况和采取抗疟措施后的效果。
血清免疫学检查还有间接血凝试验等方法，但未能推广应用。
4．分子生物学技术诊断法聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测：针对恶性疟原虫小亚单位核糖体核酸基因(SSUr DNA)，设计特异性引物，采用套式PCR技术，从样本DNA 中扩增恶性疟原虫SSUrDNA片段，进行恶性疟原虫检测，建立可诊断恶性疟原的方法，检测的灵敏性和特异性均较高。
PCR检测方法已在原来的基础上发展成多种方法，如巢式PCR、反转录酶PCR、PCR-ELISA等。
除可以直接检测血样中的疟原虫外，还可以检测滤纸干血滴上的疟原虫。
已从检测恶性疟原虫发展到检测间日疟原虫。
DNA探针检测：用一种示踪物对特定基因序列的核酸片段进行标记，通过与待检测样本中互补片段的特异结合来进行诊断。
探针来源有直接从疟原虫分离和化学合成的不同。
标记物以同位素最敏感，但由于对人体健康可能有影响，后来又推荐生物素标记。
DNA探针检测具有良好的特异性和稳定性。
PCR技术应用于疟疾诊断，经过不断改进，其检测恶性疟原虫的敏感性已有很大提高，而且特异性较高，可在临床上作为恶性疟诊断和鉴别诊断的手段之一，在诊断间日疟方面须继续研究和改进。
DNA探针检测有良好的特异性稳定性，在疑似疟疾病例的鉴别诊断上颇有意义，但敏感性不够理想，而且操作繁琐、费时、有逐渐被PCR检测代替的趋势。
分子生物学技术诊断方法为准确，有效地检测疟原虫提供了新手段，但由于它对实验技术和条件要求较高，在疟疾流行现场应用受到限制。
今后，在操作简化、省时和建立标准化、自动化方法上还须继续研究。
鉴别诊断对于症状不明显的疟疾，或疑似疟疾的其他疾病，应进行鉴别。
疟疾有发热和肝、脾肿大症状，应与有此特征性症状的其他疾病相鉴别。
1．与常见疾病鉴别血吸虫病：既往史中曾有在血吸虫病流行区接触过疫水和有尾蚴皮炎史。
发热和肝、脾肿大、消化道症状有腹泻、粘血便等，常见嗜酸性粒细胞增多。
血吸虫病试剂盒测试，抗体、抗原均阳性。
阿米巴肝脓肿：不规则发热，肝明显肿大和有明显压痛，白细胞增多，以中性粒细胞占多数，超声波检查可见肿块。
败血症：畏寒或寒战、高热，肝、脾肿大。
可出现迁徙性脓肿，白细胞和中性粒细胞明显增多。
一般可追问出感染原因及过程。
血细菌培养阳性。
伤寒：初为弛张热，后为稽留热或弛张热，出现玫瑰疹，可见胃肠道症状和全身中毒症状。
血、骨髓、粪尿细菌培养阳性，肥达氏反应阳性。
钩端螺旋体病：弛张热或持续性发热，有腓肠肌痛的特征性症状。
可能出现皮肤粘膜出血，肝、脾肿大。
血清免疫学试验阳性。
急性肾盂肾炎：不规则发热，腰酸，尿频或尿痛。
尿中出现红、白细胞和蛋白，尿液细菌培养阳性。
布氏杆菌病：弛张热、睾丸炎是特征性症状之一，脾肿大而有压痛。
血清凝集试验或ELISA试验阳性。
病毒感染：如病毒性感冒，发热、畏寒，常伴有明显的上呼吸道感染症状。
又如登革热，高热伴畏寒，肝、脾肿大、四肢及躯干疹。
有些病毒感染，不规则发热，多方面检查均未查出病因，用分子生物学技术检测，却测出一种病毒的阳性结果。
2．与脑性疟以外的昏迷的鉴别脑膜炎、脑炎、癫痫、脑脓肿、脑瘤、脑血管意外、热带地区的锥虫病，镰状细胞病等均可引起昏迷，如将其临床表现与实验室诊断结果综合起来分析，不难判断是否脑型疟引起的昏迷。
不过，至少在现阶段，凡近期在非洲和东南亚等疟疾流行地区居留过而出现昏迷症状者，脑性疟是首先要考虑的疾病。