结直肠癌的基因检测
结直肠癌分子病理检测PPT课件
“我要么成为第一个幸运地（通过全基因组测序）战胜了癌症的 人，要么成为癌症的最后一批受害者。”
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结直肠癌分子病理检测
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结直肠癌分子病理检测
肿瘤个体化检测离我们有多远？
安吉丽娜朱莉被检查出带有家族遗传的 BRCA1基因缺陷，这也意味着她拥有87%和 50%的几率罹患乳癌和卵巢癌，她于是毅然 接受了预防性乳腺切除。
ERCC1、BRCA1表达水平与疗效和生存期负相关 ERCC1、ERCC2、XRCC1突变药物敏感性变差
GSTP1突变药物敏感性增强
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结直肠癌分子病理检测
CRC常见的靶向药物及其检测靶点
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结直肠癌分子病理检测
铂类作用原理
跟铂类药物相关的位点检测
药物名称 靶标 检测内容
ERCC1、BRCA1 基因表达，2项 化疗 药物 铂类 ERCC1、 基因多态性，4 ERCC2、 项 GSTP1、XRCC1
基因表达，1项
基因检测项目
×5
C-kit基因突变+PDGFRA基因突变
3000.00
/
C-kit及PDGFRA突变类型可以预测伊马替尼和舒尼替尼的疗效，其中：
1、C-kit外显子11突变者使用伊马替尼疗效最佳；
2、舒尼替尼治疗原发C-kit外显子9突变和野生型GIST患者的生成获益优于C-kit外显子11突变患者；
270700003
×2
N-ras基因突变检测（12、13、61位点）
1200.00
/
晚期转移性结直肠癌（mCRC）患者在治疗前均应进行K-ras状态的检测，只有野生型才建议抗EGFR抗治疗，突变型不能从该治疗中获益。进一步研究发现，K-ras野生型患者如果发生N-ras基因突变时，也不能从西妥昔单抗或帕尼单抗治疗中获益，因此结直肠癌患者如果要使用EGFR抗体药物除了要检测K-ras、B-raf基因状态外还应检测N-ras基因状况
科研
/
DHFR基因多态性(C829T)
EDTA抗凝血4mL，4℃运输
5个工作日
/
二氢叶酸还原酶（DHFR)是甲氨蝶昤（MTX)靶标酶，MTX抗肿瘤作用的基本原理是竞争性结合DHFR，使二氢叶酸不能被还原成四氢叶酸。研究发现DHFR基因多态性829位点发生C>T突变，使DHFR表达水平上升，导致肿瘤细胞对甲氨蝶呤敏感性降低
2、用药方面：Ⅱ期MMR缺陷的结肠癌患者对5-FU的治疗效果不明显，不适合5-FU治疗；
3、诊断方面：MMR蛋白检测可用于诊断Lynch综合征（HNPCC）。
/
MSI微卫星+MMR蛋白
2800.00
片段分析+IHC
1、预后方面：MMR缺陷或者MSI-H的结直肠癌者预后较好。
粪便SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用研究
匡！ 壶（ 电王 盟
生 筮 鲞筮
』 ｉ ｓＥｅｔｎ ｄｉ ）Ｍ ｙ ５２１．ｏ ６Ｎ ． 堕 ｃ ｎ（ ｌ ｒ ｉＥｉｏ 。ａ ． ２Ｖ１ ．ｏ１ ａ ｃｏ ｃ ｔｎ １ ０ ． ０
・
论 著 ・
粪 便 Ｓ Ｐ ９基 因 甲基 化 检 测 在 结 直 肠 癌 ＥＴ 早 期 诊 断 中 的应 用研 究 、
ｃ ｌｒ ｃａ ａ ｃ ｒｗ ｒ ４ １ ｏｏ ｅ ｔ ｃ ｎ ｅ ｅ ｅ ８ ． ％ ａ ｄ ９ ． ％ ｒ ｓ ｅ ｔ ｅｙ． ｄ ｔｅ ｓｏ ｌ Ｅ Ｔ ａ ｉ ｌｒｓ ｎ ｉ ｖ ｔ ｓ ｃ ｎ ｅ ｉ ｕ ｓ ｌ ｎ ２ １ ｅ ｐ ｃ ｉ ｌ ａ ｈ ｔｏ Ｐ ９ ｈ ｄ ｓｍｉ ｅ ｓ ｉ ａ ａ ｃ ｒｔ ｓ ｅ ｖ ｎ Ｓ ａ ｉ ｔ ｙ ｓ
赵慧霞 李秋 文 董伟 伟 段 昕好 朱 建华 王如 良 郝怡鑫 叶 明 肖文华
【 摘要 】 目的
探讨 粪便 Ｓ Ｖ９（ ｅｔ ９ 基 因 甲基化 检测在 结直 肠癌诊 断 中的价值 。方 法 从 １６ Ｅ Ｉ Ｓｐｉ ） ｎ ２
粪便SDC2基因检测联合粪便隐血试验对结直肠癌诊断的临床研究
粪便SDC2基因检测联合粪便隐血试验对结直肠癌诊断的临床研究摘要：目的本研究通过分析对照组、肠腺瘤组、大肠癌组患者行粪便SDC2基因甲基化检测及粪便隐血试验的结果，探讨二者联合检测对大肠癌诊断的临床价值。
方法收集2021年1月-2022年1月期间于北华大学附属医院就诊，经电子结肠镜及组织学病理检查后明确诊断，符合入组标准的150名患者为研究对象。
通过分析检测结果探讨二者联合检测对结直肠癌诊断的临床价值。
结果对照组、腺瘤组及CRC组均行粪便SDC2基因甲基化检测、粪便隐血试验及二者联合检测，结果三种检测方法三组间比较阳性率均呈上升趋势。
三组间比较差异均有统计学意义（<0.05）。
三组间两两比较差异均有统计学意义（<0.05）。
结论粪便SDC2基因甲基化检测对大肠腺瘤的检出率明显高于粪便隐血试验；对结直肠癌诊断的灵敏度明显优于粪便隐血试验。
粪便SDC2基因甲基化检测联合粪便隐血试验对大肠腺瘤的检出率及对结直肠癌诊断的灵敏度均高于二者单独检测。
二者联合检测对结直肠癌的诊断具有临床价值。
关键词：粪便SDC2基因；粪便隐血试验；结直肠癌；诊断近年来，我国结直肠癌的发病率和死亡率也逐年增加，结直肠癌在我国已经成为发病率处于第2位，病死率处于第5位的恶性肿瘤[1]，是一种严重危害我国人民生命的恶性肿瘤。
粪便隐血试验与粪便SDC2基因甲基化检测均属于无创检查，操作简单，依从性较高[2]。
因此，探讨粪便SDC2基因甲基化及粪便隐血试验对结直肠癌的早期诊断是有意义的。
本研究通过分析健康体检组、肠腺瘤组以及结直肠癌组粪便SDC2基因及粪便隐血试验的测定结果，探究二者联合检测对结直肠癌诊断的临床意义。
以下是研究成果。
1 资料与方法1.1 一般资料收集2021年1月-2022年1月期间于北华大学附属医院就诊，经电子结肠镜及组织学病理检查后明确诊断，符合入组标准的150名患者为研究对象。
分为对照组（健康体检者）50例，大肠腺瘤组50例，结直肠癌组50例。
粪便SDC2_基因甲基化联合CEA_检测在早期结直肠癌鉴别中的应用价值
- 75 -①河南科技大学临床医学院 河南 洛阳 471003②河南科技大学第一附属医院通信作者：刘德纯粪便SDC2基因甲基化联合CEA检测在早期结直肠癌鉴别中的应用价值牛天宝①② 梁家① 刘德纯①②【摘要】 目的：探究粪便硫酸类肝素蛋白多糖2（syndecan-2，SDC2）基因甲基化联合癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）检测在早期结直肠癌鉴别中的应用价值。
方法：选择2020年8月—2022年10月于河南科技大学第一附属医院胃肠外科接受诊疗的86例疑似早期结直肠癌患者为研究组，选择同期于本院接受治疗的32例良性结直肠病变患者为对照组，对其分别进行粪便SDC2基因甲基化检测及CEA 水平检测，以病理学结果为金标准，分别计算两种检测方式及联合检测对早期结直肠癌的诊断效能。
结果：研究组粪便SDC2基因甲基化阳性占比及CEA 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。
粪便SDC2基因甲基化联合血清CEA 检测早期结直肠癌敏感度、准确度高于血清CEA 检测，差异有统计学意义（P <0.05）；但粪便SDC2基因甲基化联合血清CEA 检测早期结直肠癌敏感度、特异度和准确度与粪便SDC2基因甲基化及粪便SDC2基因甲基化联合血清CEA 检测早期结直肠癌特异度与血清CEA 检测比较，差异无统计学意义（P >0.05）。
结论：粪便SDC2基因甲基化检测及CEA 水平对早期结直肠癌均具有一定的诊断效能，而联合检测有助于提高诊断敏感度。
【关键词】 粪便硫酸类肝素蛋白多糖2基因甲基化 癌胚抗原 早期结直肠癌 诊断效能 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.35.019 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2023）35-0075-04 Application Value of Fecal SDC2 Gene Methylation Combined with CEA Detection in the Differential Diagnosis of Early Colorectal Cancer/NIU Tianbao, LIANG Jia, LIU Dechun. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(35): 75-78 [Abstract] Objective: To explore the application value of fecal syndecan-2 (SDC2) gene methylation combined with carcinoembryonic antigen (CEA) detection in the differential diagnosis of early colorectal cancer. Method: A total of 86 patients with suspected early colorectal cancer who treated in the Department of Gastrointestinal Surgery, the First Affiliated Hospital of Henan University of Science and Technology from August 2020 to October 2022 were selected as the study group, and 32 patients with benign colorectal lesions who treated in our hospital during the same period were selected as the control group. Fecal SDC2 gene methylation detection and CEA level detection were performed respectively, the pathological results were used as the gold standard to calculate the diagnostic efficacy of two detection methods and combined detection for early colorectal cancer. Result: The proportion of positive fecal SDC2 gene methylation and CEA levels in the study group were significantly higher than those in the control group, the differences were statistically significant (P <0.05). The sensitivity and accuracy of fecal SDC2 gene methylation combined with serum CEA in the detection of early colorectal cancer were higher than those of serum CEA detection, and the differences were statistically significant (P <0.05); however, there were no statistically significant differences in the sensitivity, specificity and accuracy of fecal SDC2 gene methylation combined with serum CEA in the detection of early colorectal cancer compared with those of fecal SDC2 gene testing, the specificity of fecal SDC2 gene methylation combined with serum CEA compared with that of serum CEA in the detection of early colorectal cancer (P >0.05). Conclusion: Fecal SDC2 gene methylation detection and CEA levels have certain diagnostic efficacy for early colorectal cancer, and combined detection is helpful to improve the diagnostic sensitivity. [Key words] Fecal syndecan-2 gene methylation Carcinoembryonic antigen Early colorectal cancer Diagnostic effectiveness First-author's address: The College of Clinical Medicine of Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China 结直肠癌又被称为大肠癌，是一种起源于直肠或结肠黏膜上皮的恶性肿瘤，有研究显示，结直肠癌是我国较为常见的恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率分别居恶性肿瘤的第3位和第5位，2015年国家癌症中心数据报道，当年全国结直肠癌新发病例数为38万，死亡病例数为18万[1-2]。
结直肠癌的早期诊断与筛查方法研究
结直肠癌的早期诊断与筛查方法研究结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，早期诊断与筛查对于该疾病的治疗和预后至关重要。
随着医学技术的不断发展，针对结直肠癌的早期诊断与筛查方法也在不断改进和创新。
本文将从实验室检查、影像学检查和生物标志物三个方面探讨结直肠癌早期诊断与筛查方法的研究进展。
实验室检查：实验室检查是结直肠癌早期诊断的基础，通过分析血液中特定指标的变化可以初步判断是否患有结直肠癌。
目前常用的实验室检查项目包括血红蛋白测定、白细胞计数、血小板计数等。
此外，还有一些特异性指标如癌胚抗原（CEA）、碱性磷酸酶（ALP）等可以作为结直肠癌筛查的参考指标。
然而，单一指标的检测结果具有一定程度上误差，在临床应用中需要综合多个指标进行分析评估。
影像学检查：影像学检查是目前临床上常用的结直肠癌诊断方法之一，包括结肠镜检查、计算机断层扫描（CT）、磁共振成像（MRI）等。
其中，结肠镜检查是目前最敏感和特异的结直肠癌筛查方法，可以直接观察到结肠黏膜的变化，并进行组织活检。
然而，结肠镜检查费用较高且对患者有一定的不适感，限制了其在大规模筛查中的应用。
因此，对于无明显症状或风险较低的人群，计算机断层扫描、磁共振成像等非侵入性影像学检查也是一种可行的筛查方法。
生物标志物：近年来，生物标志物作为早期诊断与筛查方法备受关注。
生物标志物是指在血液、尿液、组织中具有特异性并能反映特定疾病存在及程度的分子。
针对结直肠癌早期诊断与筛查，许多候选生物标志物已经被发现并得到广泛研究。
例如，在血液中检测microRNA(miRNA)、DNA甲基化、肿瘤相关突变等生物标志物的变化，可以帮助早期诊断结直肠癌。
此外，粪便DNA检测技术也是一种用于筛查结直肠癌的新方法，通过检测粪便中的DNA异常改变来判断是否存在结直肠癌。
综合应用：在实际临床中，通常需要综合应用多种方法进行结直肠癌的早期诊断和筛查。
例如，结合实验室检查与影像学检查可以提高早期诊断的准确性和敏感性；同时辅以生物标志物分析可以进一步提高筛查效果。
252例结直肠癌组织中KRAS、NRAS、 BRAF、PIK3CA的基因突变分析
252例结直肠癌组织中KRAS、NRAS、 BRAF、PIK3CA的基因突变分析刘影;郑细闰;朱亚珍;何青莲;郑广娟【摘要】目的分析结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的常见突变类型及其与临床病理指标的关系.方法对252例CRC石蜡包埋组织进行DNA提取,采用Sanger测序法对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因进行检测,分析各个基因的突变率与临床病理特征的关系,并统计各个基因的突变类型.结果 252例CRC中,KRAS、BRAF、NRAS和PIK3CA突变发生率在性别、年龄、肿瘤部位、病理分期和有无淋巴结转移上差异均无统计学意义(P＞0.05);检测阳性突变共140例(55.5％),其中KRAS 113例(44.8％),NRAS 1例(0.4％),BRAF 19例(7.5％),PIK3CA 28例(11.1％),包括PIK3 CA与KRAS、NRAS、BRAF基因发生双突变21例(8.3％);KRAS的主要突变类型包括G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13D、T20M、A59T、Q61H、Q61L、Q61P;NRAS仅有1例突变为G12D;BRAF的主要突变类型为V600E、D594G、K601E;PIK3CA的主要突变类型包括E542K、E545K、Q546K、Q546P、Q546R、M1043I、H1047R.PIK3CA与KRAS、NRAS、BRAF之间会发生交叉突变,但KRAS、NRAS、BRAF三者之间基本不存在交叉突变.结论 CRC中KRAS阳性突变率居高,PIK3CA次之,BRAF、NRAS突变率最低,且PIK3CA常与KRAS、NRAS、BRAF发生交叉突变.对CRC患者行KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA等多基因检测,可正确指导并选择抗EGFR单抗药,从而实现真正意义上的个体化靶向治疗.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)008【总页数】6页(P851-855,859)【关键词】结直肠肿瘤;Sanger测序;KRAS;PIK3CA;靶向治疗【作者】刘影;郑细闰;朱亚珍;何青莲;郑广娟【作者单位】广东省中医院病理科,广州510120;广东省中医院病理科,广州510120;广东省中医院病理科,广州510120;广东省中医院病理科,广州510120;广东省中医院病理科,广州510120【正文语种】中文【中图分类】R735.3美国最新癌症统计结果显示，结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病率居全球常见恶性肿瘤的第3位，病死率居第4位[1]。
遗传性结直肠癌基因检测及其在临床上的应用规范化问题
遗传性结直肠癌基因检测及其在临床上的应用规范化问题姜烈君;陆晓旭;黄华艺【摘要】遗传性结直肠癌是一类多因素遗传特征家族性疾病,包括Lynch综合征、家族结直肠腺瘤性息肉和MYH相关性息肉,约占所有结直肠癌的5％.Lynch综合征(又称遗传性非息肉性结直肠癌)是因无效的错误配对修复(mismatch repair,MMR)而导致微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)的一系列相关癌症,常由MMR基因(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)突变引起.家族性结直肠腺瘤性息肉(familial adenomatous polyposis,FAP)是APC基因突变引起的广泛性结肠息肉病.而MUTYH基因突变可引起MYH相关性息肉(MYH-associated polyposis,MAP).为了规范对遗传性结直肠癌的分子诊断技术流程,美国医学遗传学和基因组学会制定检测大纲以供各相关实验室参考.本文对该大纲进行归纳并结合我国的大纲进行讨论.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2016(008)002【总页数】7页(P135-141)【关键词】遗传性结直肠癌;家族性腺瘤样息肉;Lynch综合征;MYH相关性息肉;基因检测【作者】姜烈君;陆晓旭;黄华艺【作者单位】广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;美国罗斯威尔帕克癌症研究所肿瘤外科,纽约,布法罗14263【正文语种】中文结直肠癌（colorectal cancer，CRC）可分为散发性、家族性或遗传性几种特征。
约20%～30% CRC为多因素遗传特征家族性疾病，因遗传获得的高度外显率单基因突变约占所有CRC的5%。
Lynch综合征、家族结直肠腺瘤性息肉（familial adenoma⁃tous polyposis，FAP）和MYH相关性息肉（MYH⁃associated polyposis，MAP）为3种常见遗传性CRC，约占所有CRC的5%。
临床研究结直肠癌术后化疗方案的优化
临床研究结直肠癌术后化疗方案的优化结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，在肿瘤中的发病率排名前列。
随着医疗技术的不断发展和进步，结直肠癌的治疗手段也在不断完善和优化。
术后化疗方案是结直肠癌治疗中的重要一环，对于其优化研究具有重要的临床意义。
本文将从多个方面对临床研究结直肠癌术后化疗方案的优化进行探讨。
一、化疗药物的选择术后化疗方案的核心在于药物的选择。
目前常用的结直肠癌化疗药物有氟尿嘧啶、奥沙利铂、亚叶酸钙等。
根据患者的具体情况，如年龄、肿瘤分期、身体状态等，合理选择适当的化疗药物是优化方案的关键。
1. 氟尿嘧啶：氟尿嘧啶是结直肠癌化疗的一线药物，具有广谱杀灭肿瘤细胞的作用。
但是，长期使用氟尿嘧啶易导致耐药性的产生，因此在合理用药的前提下，可以结合其他化疗药物进行联合应用，以提高疗效。
2. 奥沙利铂：奥沙利铂是一种克服氟尿嘧啶耐药性的药物，在结直肠癌的化疗中具有重要地位。
研究表明，与氟尿嘧啶联合应用奥沙利铂可以明显提高肿瘤的缓解率和生存率。
3. 亚叶酸钙：亚叶酸钙能够有效抑制该药物对骨髓造血功能的抑制作用，从而减轻患者术后不良反应。
二、剂量和周期的调整在优化术后化疗方案中，剂量和周期的调整是一项很重要的工作。
化疗药物的剂量决定了其抗肿瘤作用的强弱，而周期的长短则影响了药物对肿瘤细胞的持续攻击时间。
1.剂量：剂量的大小应根据患者的身体状况和药物的毒副作用来进行调整。
剂量过大容易导致药物毒副作用加重，而剂量过小则可能降低药物的疗效。
因此，医生需要综合考虑多种因素来合理调整药物的剂量。
2.周期：周期的选择应考虑到肿瘤的生长特点和药物的半衰期等因素。
较短的周期能够更好地保持药物在体内的有效浓度，但可能导致药物的积累，增加毒副作用。
因此，医生需要在充分评估患者状况的基础上，制定合理的化疗周期。
三、个体化治疗策略的应用个体化治疗是近年来重要的研究热点，也是结直肠癌术后化疗方案优化的一部分。
通过分析患者的基因型、表型等遗传信息，可以为其制定更为个体化的治疗方案，提高治疗的精准度和疗效。
Lynch综合征相关结直肠癌的遗传基因及分子病理筛查策略
·综述·Lynch 综合征相关结直肠癌的遗传基因及分子病理筛查 策略王雯邈 董林 李文斌 邹霜梅 吕宁DOI ：10.3877/cma.j.issn.2095-3224.2018.02.015基金项目：国家重点研发计划（No.2016YFC0905300）；中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费（No.2016ZX310176）作者单位：国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科通信作者：邹霜梅，Email ：cicams_blk@ ；吕宁，Email ：nlu@【摘要】 Lynch 综合征（Lynch syndrom ）是结直肠癌中最常见的遗传性肿瘤综合征，约占全部大肠癌的2~3%。
该病患者同时增加了罹患肠外及第二肿瘤的风险。
现已证明，Lynch 综合征是由于编码错配修复基因（mismatch repair ，MMR ）——MLH1，MSH2，MSH6和PMS2的种系突变、失活导致的一类显性遗传性疾病，近年发现EPCAM 的突变与MSH2表达缺失相关。
尽管有Amsterdan 及Bethesda 等临床诊断标准，利用分子遗传学检测在MMR 基因中发现致病性胚系突变仍为目前诊断Lynch 综合征的金标准。
对于发病年龄小于70岁的结直肠癌患者，均应进行Lynch 综合征的筛查。
首先需进行微卫星不稳定性（microsatellites instability ，MSI ）检测，检测手段包括PCR 扩增微卫星位点及免疫组化（IHC ）检测，而后对相应的MMR 基因进行胚系突变的检测以明确是否为Lynch 综合征 以及相应的致病位点。
对于MLH1表达缺失患者需进行BRAF 基因突变检测和（或）MLH1启动子区域甲基化检测以除外散发性结直肠癌。
对于确诊的患者建议进行家系筛查并进行规律的监测和随访。
【关键词】 Lynch 综合征； 结直肠肿瘤； 遗传学； 分子检测Screening strategy for Lynch syndrome associated colorectal cancer through genetic and molecular pathology technique Wang Wenmiao, Dong Lin, Li Wenbin, Zou Shuangmei, Lyu Ning. National Cancer Center/Cancer Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100021, ChinaCorresponding author: Zou Shuangmei, Email: cicams_blk@; Lyu Ning, Email: nlu@【Abstract 】 Lynch syndrome is the most common form of hereditary CRC, accounting for approximately 2~3% of population-based CRC. Individuals with Lynch syndrome have an increased risk for extracolonic cancer and second primary colorectal cancer. It has been dedicated that Lynch syndrome is an autosomal dominant cancer predisposition syndrome caused by germline mutations in the DNA mismatch repair genes (MMR)—MLH1, MSH2, MSH6 and PMS2, and EPCAM mutation is also found associated with MSH2 deficiency recently. Even though clinical diagnostic criteria (Amsterdan I/II, revised Bethesda) have been released decades ago, molecular testing of MMR genes is still the golden standard of Lynch syndrome diagnosis. Colorectal cancer patients less than 70y, are recommended to get into the procedure of Lynch syndrome screening, starting with microsatellite instability and/or immunohistochemical analysis on the tumor specimen followed by germline genetic testing and possibly further studies, such as MLPA. Notably, Testing on BRAF mutation is necessary, when the expression of MLH1 is lost, in order to exclude the sporadic colorectal cancer. Individuals with identified germline mutations need further screening for their immediate relatives.【Key words 】 Lynch syndrome; Colorectal neoplasms; Genetics; Molecular testing一、前言Lynch 综合征，旧称遗传性非息肉病性结直肠癌（hereditary nonpolyposis colorectal cancer ，HNPCC ）， 是一种常染色体显性遗传综合征。
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史；则可行MLH1基因结构性表观突变
检测，和/或LS相关胚系突变检测
+
+
--
N/A (-)
(+) 1.散发肿瘤；2.罕见MLH1基因胚系突变或
MLH2基因结构性表观突变
+
+
-- N/A (-)
(-) 1.MLH1基因或罕见PMS2基因胚系突变；2.1.LS相关胚系突变检测；2.若胚系突变
散发肿瘤
检测阴性，考虑体细胞MMR基因检测
纯/杂合子 临床意义 杂合 良性多态性 纯合 良性多态性 杂合 良性多态性 杂合 良性多态性 纯合 良性多态性 杂合 良性多态性 杂合 良性多态性 纯合 良性多态性 杂合 良性多态性 杂合 良性多态性 杂合 良性多态性 杂合 良性多态性
说明：
已知致病突变，表示该突变在现有的研究报道中与疾病有关，致病机理明确，遗 传统计学意义显著，有相关功能验证。疑似致病突变，是指功能预测可能是致病 的，但还未有确凿的临床证据。临床意义未明表示该变异有研究报道，但与关系 不明的变异。疑似良性多态性是指该变异有研究报道是良性的，但还未有确凿的 临床证明。良性多态性是指该变异在临床研究表明不能导致疾病，与疾病没有关 系
BRAF V600E
N/A
N/A
合理的病因
MLH1 启动子甲
基化
N/A 1.散发肿瘤；2.其他遗传性结直肠癌综合 1.无
征（非LS）
进一步检查
N/A 1.任一LS相关基因的胚系突变；2.散发肿 1.LS相关胚系突变检测；2.若胚系突变
瘤
检测阴性，考虑体细胞MMR基因检测
N/A N/A N/A MSI-H N/A N/A 1.散发肿瘤；2.任一LS相关基因的胚系突 1.可通过IHC检查指导基因检测；2.如果
• 大部分大肠癌呈散发，但家族性肿瘤综合征在肠癌中也很常见。
• 估计约有10-30%的患者具有家族聚集现象，其中5-6%与研究较为明确的多种遗传综合 征明确相关
---详细的家族史 ---详细的医学和手术治疗史 ---相关的表现进行直接检查 ---风险咨询 ---教育支持 ---遗传检测讨论 ---知情同意
MSI MSI-H MSI-L MSS
不稳定标记的比 例
≥ 40% < 40%
0%
阳性标记数 （Bethesda工作组）
≥ 2/5 1/5 0/5
MSI检测
肿瘤中的MSI-H（又称dMMR）是指在预先确定的微卫星重复标记组中具 有一定比例改变的肿瘤，丧失MMR活性。其检测意义、运用和提示作用 均与IHC 相似，尽管两者略有互补性。MSI的检查主要采用美国国立癌症 研究所推荐的的5个微卫星标记(D2S123、 D5S346、 D17S250 、BAT25和 BAT26)。PCR主要是检测DNA分子链上的MSI状态，国内通常对以下位点 （NR-27、NR-24、NR-21、BAT-25、BAT-26、MONO-27 、PentaC、PentaD、 PentaE等）进行检测。 MSI 检测的假阴性率约5%-10%。
位点 GenBank Number
重复序列
产物范围
NR-27 NR-21
BAT-26 BAT-25 NR-24 MONO-27 Penta C
Penta D
AF070674 XM_033393
U41210 L04143 X60152 AC007684 AL138752
AC000014
（A)27 （A)21
（A)26 （A)25 （A)24 （A)27 （AAAAG）3-15
（AAAAG）2-17
70-91 92-113
160-185 105-125 119-139 155-177 190-250
151-224
MSI检测
标志物类别
标志物名称
检测结果
结论
单核苷酸重复标志物 NR-21
未检测到不稳定 MSS
--
N/A
N/A
N/A 1.任一LS相关基因的胚系突变；2.散发肿 基因检测
瘤
N/A:未行检测或检测结果不影响检测策略 + 正常蛋白染色 --蛋白染色缺失
遗传性大肠癌基因检测病例
基因名称 EPCAM PMS2 PMS2 MUTYH APC BMPR1A AXIN2 MLH3 EPCAM PMS2 MLH1 MLH3
变
未行IHC，可考虑LS相关胚系突变检测
+
+
--
N/A N/A N/A 1.散发肿瘤；2.MLH1基因或罕见PMS2基 1.可行BRAF甲基化检测；2.LS相关胚系
因胚系突变
突变检测
+
+
--
N/A
(+)
N/A 1.散发肿瘤；2.罕见MLH1基因胚系突变或 1.无，除非发病年龄早或有明确的家族
MLH1基因结构性表观突变
IHC结果
MLH1或MSH2蛋白缺失
MMR dMMR
正常的蛋白表达
pMMR
MSI MSI-H MSI-L/MSS
dMMR：MMR基因缺失； pMMR：MMR基因正常；
MSI-H：高度微卫星不稳定； MSI-L：低度微卫星不稳定； MSS： 微卫星稳定。
Lynch 综合征
MSI检测
微卫星不稳定性（MSI）是指DNA甲基化或者基因突变 致错配修复基因缺失，从而导致微卫星重复序列插入 或缺失，继而长度改变，与肿瘤的发生密切相关。约 15%的结直肠癌中存在MSI，主要是微卫星序列碱基对 的替换和移码突变。散发性肠癌中最常见的就是 hMLH1基因启动子区高甲基化，导致MSI的发生。
结直肠癌的基因检测
2000年4月16日，梅艳芳姐姐梅爱芳因子宫颈癌病逝，终年41岁。 2003年12月30日，梅艳芳因子宫颈癌病逝，终年40岁。 2015年3月11日，梅艳芳二哥梅德明因喉癌病逝，终年62岁。
基因检测
朱莉（2013）曾检查出BRCA1基因缺陷，意味着她拥有87%和50% 的几率罹患乳癌和卵巢癌，再加上拥有癌症家族史，她的母亲就 曾被查出患有乳癌，并最终死于卵巢癌。朱莉当年实施双侧乳腺 切除手术，引发全球关注。2015年朱莉又以公开信的形式正式宣 告，为了避免患癌，继两年前切除乳腺之后，她又接受了卵巢和 输卵管手术
NR-24
未检测到不稳定
BAT-25
未检测到不稳定
BAT-26
未检测到不稳定
MONO-27
未检测到不稳定
五核苷酸标志物
PentaD
正常
PentaE
正常
MSI 稳定型（microsatelite stable,MSS）：单核苷酸重复标志物中没有发生不稳定；
MSI 低频型（low-frequency MSI,MSI-L）：单核苷酸重复标志物中仅有1 个发生不稳定；
--
--
+
N/A N/A N/A 1.MSH2/EPCAM基因胚系突变，罕见MSH6
基因胚系突变；2.散发肿瘤
+
+
--
N/A N/A N/A 1.PMS2基因胚系突变；2.MLH1基因胚系
突变
--
+
+
N/A N/A N/A 1.MSH2/EPCAM基因胚系突变；2.散发肿
瘤
+
--
+
N/A N/A N/A 1.MSH6基因胚系突变；2.MSH2基因胚系 1.LS相关胚系突变检测；2.若可行，考
转录本号
碱基变化
NM_002354.2 c.515C>T
NM_000535.6 c.1621A>G
NM_000535.6 c.1454C>A
NM_001128425.1 c.1014G>C
NM_000038.5 c.5465T>A
NM_004329.2 c.4C>A
NM_004655.3 c.148C>T
患者MMR基因缺失，主要是由基因突变或启动子甲基化引起，其中MLH1和 MSH2基因突变占所有基因改变的90以上。MMR基因突变或启动子甲基化可导 致MMR基因功能缺失，从而引起含有错配碱基、核苷酸插入或缺失的DNA分子 不能正常修复，最终引起广泛的MSI。
Lynch 综合征
MMR蛋白IHC结果判读标准
APC
MUTYH
PTEN
√√
√
√
√
√
√√
黑斑息肉综合征 STK11 √ √ √ √
李法美尼综合征 TP53
√ √√ √
幼年息肉综合征
SMAD4 BMPR1A
√
胃 胰腺 √√ √
√√ √√ √√
其他
√
√ √ √ √ √
为什么要关注遗传性大肠癌
• 一、重视度低、知名度低 • 二、遗传性结直肠癌并不罕见 • - 10%-25%结直肠癌患者有家族史 • - 近10%患者有明确致病基因 • 三、临床表现复杂：表现为综合征 • - 相同表型不同基因型 • - 相同基因型不同表型
突变；3.散发肿瘤/治疗效应
虑MSI检测或对未治疗的肿瘤再行IHC检
测；3.若胚系突变检测阴性，考虑体细
胞MMR基因检测
+
+
+
N/A N/A N/A 1.MLH1基因胚系突变，也可能为激发肿 1.LS相关胚系突变检测；2.若MLH1基因
瘤或PMS2基因胚系突变
胚系突变检测阴性，考虑体细胞MMR
--
--
遗传学特点
• 连续（或间断）几代中发生大肠癌（垂直遗传） • 男女遗传度相等，即一级亲属携带几率为50% • 患者及亲属相关器官的肿瘤易感性提高 • 发病年龄早 • 多处原发癌
遗传综合征 相关基因