实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定
一、目的要求
1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理
复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理
COOH
O C
O
CH 3
+
NaOH
COONa
O C
O
CH 3
+
H 2O
等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理
3、咖啡因的测定原理
N
N O
O H 3C 3
N
N
＋2I+KI+H 2SO 4N
N O
O H 3C 3
N
CH 3N
HI I 4+KHSO 4
CH 3
I 2(剩余)+2Na 2S 2O 3
2NaI+Na 2S 4O 6
三、实验方法
取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定
药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为
0.219g ～0.242g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ，10ml ，10ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。
按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数
平均片重称样量
片＝
W T /⨯⋅⋅W f
V g
其中：T －为滴定度；V －消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子
（二）对乙酰氨基酚的含量测定
药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120g ～0.132g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.25g ），置锥形瓶中，加稀硫酸25ml ，缓缓加热回流60分钟，冷却至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液(1→2)40ml ，分数次洗涤，每次5m1，合并滤液与洗液，加溴化钾3g 溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，在不低于20℃的温度下，用0.lmol/L 亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取
溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色的条痕，停止滴定，5分钟后再蘸取少许，划过一次，如仍显蓝色的条痕，即达终点。每lml 的0.lmol/L 亚硝酸钠液相当于15.12mg 的C 8H 9NO 2。
按下式计算每片含对乙酰氨基酚的克数：
平均片重称样量
称
平均片重片W W M V W f
V T g NaNO
⨯⨯
⨯=
⨯⋅⋅=1
.001512.0/'
2
式中：'
2
NaNO M 为亚硝酸钠液的实际浓度，0.1为亚硝酸钠液的理论浓度
(三)咖啡因的含量测定
药典规定每片检品中含咖啡因应为27.0～31.5mg 。
精密称取上述细粉适量(约相当于咖啡因50mg)，加稀硫酸5ml ，振摇数分钟使咖啡因溶解，滤过，滤液置50ml 容量瓶中，滤器与滤渣用水洗涤三次，每次5m1，合并滤液与洗液，精密加0.lmol/L 碘液25m1，用水稀释至刻度，摇匀，在约25℃避光放置15分钟，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25m1置碘量瓶中，用0.05mol/L 硫代硫酸钠液滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每lml 的0.1mol/L 碘液相当于5.305mg 的C 8H 10N 4O 2·H 2O 。
按下式计算每片含咖啡因的mg 数
平均片重称样量
片W W f V T mg I ⨯⋅⋅⨯
=22/
()平均片重称样量
样空W W M V V T O S Na ⨯⨯⋅-⋅⨯
=202'
3
22
四、预习提要
1.采用三种方法分别测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因含量的原理及有关问题讨论。
2.测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因时，各自的取样量如何计算?
3.画出乙酰水杨酸提取及洗涤的装置草图。
4.画出对乙酰氨基酚水解回流的装置草图及滴定装置图。
5.测定乙酰水杨酸时，加入中性乙醇的作用是什么？如何配制?
6.测定乙酰水杨酸时，为什么要提取？
7.测定对乙酰氨基酚时，加入KBr的作用是什么?如何控制到达近终点的一次滴定量?
8.外指示剂指示终点的原理、方法及缺点。如何尽可能克服这一缺点？
9.咖啡因能否采用一般含氮碱的方法测定之，为什么?
10.咖啡因含量测定时，为什么要在滴定近终点时才加入淀粉指示液?过早加入会出现什么现象?如何掌握近终点?
11.测定过程中如何防止碘(I2)的挥发?
12.计算三成份测定时的滴定度。
13.请比较乙酰水杨酸的中国药典法即直接酸量法(原料)和两步滴定法(片剂)与本法提取酸量法的优缺点。
附:复方对乙酰氨基酚片处方
乙酚水杨酸230g
对乙酰氨基酚126g
咖啡因30g
制成1000片
实验指导
复方对乙酰氨基酚片为一复方制剂。所谓复方制剂指含有二种或二种以上主成份的制剂。在分析复方制剂时，既应考虑赋形剂等附加成份的影响，又要考
虑主成份之间的相互影响。复方对乙酰氨基酚片中含有三种主成份，乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚和咖啡因。乙酰水杨酸为酸性，对乙酰氨基酚为中性，含潜在芳伯氨基，咖啡因为弱生物碱。由于性质差异大，可以采用酸量法、水解后重氮化法、碘量法分别测定三者的含量，相互之间互不干扰。通过本实验，应掌握复方制剂分析的特点及三种方法的原理和操作技能。 一、乙酰水杨酸的含量测定 (一)提取酸量法
乙酰水杨酸为酸性物质，采用酸量法测定时对乙酰氨基酚、咖啡因对它无干扰，但是处方中加入酒石酸或枸椽酸为稳定剂影响测定，故用氯仿提取以消除稳定剂的影响。
由于乙酰水杨酸易水解成水杨酸和醋酸，要多消耗氢氧化钠，所以应在中性乙醇中进行分析，并控制滴定温度在5~15℃，以防水解。 (二)操作要点与技能训练
本实验进一步加强提取分离的技能训练。 1.片剂的取样方法 (1) 取样量计算平均片重取样量W W 23
.04
.0 (2) 粉末制备及称量
取15片或20片置称量纸或干燥洁净的小烧怀(预先称重)里精密称重(求得平均片重)，置研钵中研细，不允许有大颗粒存在。按取样量的±10%为范围精密称定粉末量。 2.定量提取
①检查分液漏斗并检漏
在提取前，首先要检查分液漏斗，注意漏斗塞及活塞是否严密、配套，尤其要注意上口活塞边上有无放气的小孔。然后用少量提取溶剂振摇，检漏。活塞用甘油淀粉糊润滑，因为与活塞直接接触的是与水不溶的有机溶剂氯仿。 ②振摇方法
参见实验三有关内容。如有少量液体冲至漏斗玻管部分，应用少量氯仿冲洗使之回入漏斗中。如果上口活塞有放气孔，只需将两孔对齐即可放气，然后错开两孔，再轻轻旋摇或振摇。
③分层
将分液漏斗置分液漏斗架上，静置待分层后，打开玻塞(或对齐上口小孔)，用少量水冲洗玻塞瓶口。旋转活塞，缓缓放出下层液至接收器中(如下层液体需进一步用溶剂提取或洗涤时，可用另一分液漏斗接收之)。因尽量将两相恰好分离。分得的两相必要时可经过过滤或洗涤。
④提取次数及用量
提取4次，氯仿用量依次为20m1,10m1,10m1,10m1。
⑤提取及洗涤方法
a.提取－洗涤过程中，不能让水层长时间地接触活塞部分，以免甘油淀粉糊被溶解而发生渗漏。
b.每次提取液都置第2只分液漏斗经同一份水洗涤，洗涤液收集入锥形瓶，并合并洗涤液。即经过四次提取，四次洗涤，然后将4次提取--洗涤液合并入同一锥形瓶中。
3.蒸除溶剂
在水浴上蒸馏回收，蒸馏所得氯仿液应收集于磨口锥形瓶中，不能敞口蒸馏或敞口接收馏液。
4.所加中性乙醇，是用酚酞为指示剂调配的。
5.滴定温度控制在5~15℃，终点粉红色应保持30秒不褪。
二、对乙酰氨基酚的含量测定
（一）解释两个问题
l.复方对乙酰氨基酚片粉的水解
对乙酰氨基酚、阿斯匹林在酸性中水解，生成的产物有对氨基酚
（
OH
N
H
2
）和水杨酸（
COOH
OH
）,在酸性条件下，水杨酸不溶于水而沉淀
析出。
2.加入KBr的作用
在盐酸条件下，重氮化反应过程为:
NaNO2十HCl→HNO2+NaCl
HNO2十HCl→NOCl十H2O
Ar NH 2
NO +Cl -Ar N H
NO
Ar N N OH
慢Ar N +
N NCl -
反应速度取决于慢反应的一步即第一步。根据质量作用定律，反应速度=K[Ar 一NH 2]·[NO +]，亦即增大Ar 一NH 2和NO +的浓度，都能加速反应。由于反应
物OH
N
H 2是一个具斥电子基的化合物，所以使氮上电子云密度增大，碱性增
强，成盐性增强，游离原形浓度下降，会使反应速度下降。为了加快反应速度，那么势必要增加另一个反应物NO +的浓度，为此在溶液中加入KBr ，
KBr+HCl →HBr+KCl HBr+HNO 2→NOBr +H 2O
产生NOBr 的平衡常数比产生NOCl 的平衡常数要大300倍，亦即加入KBr 后，溶液中NO +的浓度大大增加了，从而有效地增加了反应速度。 (二)操作要点及技能训练 1.取样量计算平均片重取样W W ⨯=126
.025
.0 2.水解
水解完全是本实验的关键。如果水解不完全，轻者含量偏低，重者致使快速滴定失效。为确保水解完全，应在直火上(2000瓦电炉)加热回流40分钟，若用3000瓦以上的电炉，则应加石棉网，以免加热太猛烈使回流液冲出。 3.滤过及滤渣洗涤
(1)在此条件下对乙酰氨基酚水解产物对氨基酚溶于稀硫酸中，而乙酰水杨酸的水解产物水杨酸不溶于酸而析出。将回流液放冷至室温或用自来水冲洗外瓶壁使之冷却，冷却过程中轻轻旋摇，以生成有利于过滤的大针形结晶。
(2)过滤时可采用上倾法过滤，即将上层液体置入漏斗，滤渣及锥形瓶用盐酸液(1→2)40m1分数次洗涤，仍用上倾法过滤并将洗液并入滤液中，以免样品损失。 4.滴定
(1) 在200或250m1的烧杯中进行，烧怀置搅拌器上，在烧杯中加搅拌子一粒
或二粒。
(2) 在酸式滴定管前加一小段滴管，用乳胶管连接。 (3) 按下限预先计算近终点加入量。
(4) 将滴定管尖端插入液面下约2/3处，不低于20℃的温度下，用0.lmol/L 亚硝
酸钠液迅速滴定，边滴边搅拌。当滴至按下限计理论量前1~2m1，即至近终点时，将滴定管尖端提出液面;并用少量水将尖端上的样液洗净并入。 (5) 此时，应缓缓滴定，逐滴滴入并不断搅拌，因为这个反应为分子反应，尤其
是近终点时反应物浓度小，速度更慢。
(6) 在白瓷板上滴一滴碘化钾淀粉指示液，用细玻棒头蘸取反应液少许，划过指
示液，如立即显蓝色，则应停止滴定，搅拌反应3分钟后，再试之，若仍显蓝色，即达终点，否则视为假终点，是由于局部浓度过浓引起的。这里还应强调显色要立即。过后显色不能算达终点。因为指示剂置于空气中一段时间后，空气将指示剂中KI 氧化为I 2而使淀粉变蓝色。
(7) 外指示剂指示终点最大的缺点是样品易损失。为了减少这一损失，可预先做
一份求得大概含量，然后再准确测定，另外蘸取试验时取量一定要少。 三、咖啡因含量测定的操作要点及注意事项 1.取样量计算平均片重取样W W ⨯=
30
50
2.加稀硫酸溶解咖啡因，但乙酰水杨酸、非那西丁、滑石粉等不溶。搅拌5~6分钟以控制咖啡因的溶解程度。
3.定量过滤并转移是本法的关键。
4.标准碘液和咖啡因的反应可置于暗处进行，时间为15分钟左右。
5.剩余碘溶液的量取
遵循斩头去尾的原则，将初滤液置于一洗净并干燥的烧杯内，荡洗烧怀，全部弃去;再将续滤液接收入该荡洗过的烧怀内，移液管用该液荡洗三次，才能取该续滤液进行分析，以确保浓度的一致性。 6.滴定
指示剂不能过早加入，否则由于碘量太多，遇淀粉形成蓝黑色，碘被包裹，终点不明锐，导致终点迟到。当溶液滴至淡黄色(可置于白瓷板上观察)时即可加淀粉指示液。
7.样品和空白试验应遵循平行原则，即同时加试剂，同时反应，同时过滤等等。 四、实验后思考
1.在制剂分析和原料药分析中，取样量的描述不同。以乙酰水杨酸为例，原料药
分析中：取本品约0.4克，精密称定，……；片剂分析中：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于乙酰水杨酸0.4克），……。请回答下列问题：
（1）0.4克是怎样求得的？这里的“约”和“精密称定”是否矛盾？为什么？（2）片剂分析中取样量为何如此规定？能否直接精密称定约0.4克的粉末进行分析，为什么？
2.通过本实验试讨论复方制剂分析的特点。
对乙酰氨基酚片的含量测定
验证性试验 实验十七 对乙酰氨基酚片的含量测定 一、目的要求 1.掌握对乙酰氨基酚片的含量测定的原理。 2.掌握紫外可见分光光度法测定药物含量的方法及计算。 二、仪器与试药 1.仪器 Mettler AL204电子天平 752型紫外可见分光光度仪 刻度移液管 规格：5mL 、10mL 定量滤纸（直径10cm ） 容量瓶 规格：100mL 500mL 研钵 HHS 型电热恒温水浴锅 2.试药 对乙酰氨基酚片 规格0.3g 氢氧化钠 三氯化铁试液 蒸馏水 三、实验原理 利用对乙酰氨基酚结构中有共轭结构，在紫外区有吸收，最大吸收波长为257nm ，测定其最大吸收波长处的吸收度即可计算其含量。 四、实验内容 本品含对乙酰氨基酚（C 8H 9NO 2）应为标示量的95.0%～105.0%。 【鉴别】本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。 【含量测定】取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg ），置250mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50mL 与水50mL ，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL,置100mL 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在257nm 的波长处测定吸光度，按C 8H 9NO 2的吸收系数（%11cm E ）为715计算，即得。 计算： 对乙酰氨基酚片标示量%＝ A ：供试品在257nm 的波长处测得的吸收度； D ：供试品的稀释倍数； %11cm E :吸收系数; W ：对乙酰氨基酚片片的平均片重； W ：称取对乙酰氨基酚片粉的量。 五、注意事项 1.移液管、容量瓶的使用方法。 2.振摇充分，使样品溶解完全。 %100100D 1%1??????标示量W E W A cm
实验三-复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定 一、目的要求 1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。 2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。 各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理 COOH O C O CH 3 +NaOH COONa O C O CH 3+H 2O 等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。 2、对乙酰氨基酚的测定原理
3、咖啡因的测定原理 N N O O H3C CH3 N N ＋2I+KI+H2SO4N N O O H3C CH3 N CH3 N HI I4+KHSO4 CH 3 I2(剩余)+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6 三、实验方法 取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定 药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219 g～0.242 g。 精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g），置分液漏斗中，加水15ml，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20 ml，10 ml，10 ml，10ml），提取氯仿液用同一分水10ml洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L氢氧化钠液滴定，即得。每1ml 0.1mol/L氢氧化钠液相当于18.02mg的C9H8O4。 按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 平均片重 称样量 片＝W T /? ? ? W f V g 其中：T－为滴定度；V－消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定 一、目的要求 1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。 2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。 各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理 COOH O C O CH 3 + NaOH COONa O C O CH 3 + H 2O 等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。 2、对乙酰氨基酚的测定原理
3、咖啡因的测定原理 N N O O H 3C 3 N N ＋2I+KI+H 2SO 4N N O O H 3C 3 N CH 3N HI I 4+KHSO 4 CH 3 I 2(剩余)+2Na 2S 2O 3 2NaI+Na 2S 4O 6 三、实验方法 取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定 药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为 0.219g ～0.242g 。 精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ，10ml ，10ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。 按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 平均片重称样量 片＝ W T /⨯⋅⋅W f V g 其中：T －为滴定度；V －消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子 （二）对乙酰氨基酚的含量测定 药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120g ～0.132g 。 精密称取上述细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.25g ），置锥形瓶中，加稀硫酸25ml ，缓缓加热回流60分钟，冷却至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液(1→2)40ml ，分数次洗涤，每次5m1，合并滤液与洗液，加溴化钾3g 溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，在不低于20℃的温度下，用0.lmol/L 亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取
对乙酰氨基酚片的质量分析
对乙酰氨基酚片的质量分析 一、 实验原理： 对乙酰氨基酚结构中含有苯环共轭系统，在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm 波 长处有最大吸收，其吸收系数为%11cm E 715。 C 8H 9NO 2 151.16 二、主要仪器和试剂： 电子天平、容量瓶、分光光度计、移液管等 对乙酰氨基酚片（0.3g ），三氯化铁试液，稀盐酸，亚硝酸钠试液，碱性β-萘酚试液，0.4% NaOH 等 三.实验流程： 四、实验方法： 【鉴别】 （1）本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。 （2）取本品约0.1g ，加稀盐酸5ml ，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml ，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml 稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml ，振 对乙酰氨基酚质量标准 项 目 法 定 标 准 企 业 内 控 标 准 性 状 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦，在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中略溶 本品为白色结晶或结晶性粉末；无 臭，味微苦，在热水或乙醇中易溶， 在丙酮中溶解，在水中略溶 熔 点 应为168～172℃ 为168～172℃ 鉴 别 应均呈正反应 均呈正反应 检 查 酸 度 pH 值应为5.5～6.5 pH 值应为5.5～6.5 乙醇溶液的澄清度与颜色 应符合规定 符合规定 氯 化 物 应不大于0.01% 小于0.01% 硫 酸 盐 应不大于0.02% 小于0.02% 有关物质 应符合规定 符合规定 对氨基酚 应不大于0.005% 小于0.005% 干燥失重 应不得过0.5% 小于0.5% 重 金 属 应不得过百万分之十 小于百万分之十 含量 含量测定 按干燥品计算含对乙酰氨基酚应为98.0%～102.0% 按干燥品计算含对乙酰氨基酚应为98.0%～102.0% 类 别 解热镇痛药 解热镇痛药
实验三-复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定 、目的要求 1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。 2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。 各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a =3.27X 10-4,可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b =0.7X 10-14,不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理 等当点时,由于生成物水杨酸钠的水解,溶液呈微碱性,所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。 2、对乙酰氨基酚的测定原理 COOH O OC +NaOH CH 3 3 COONa O +H 2O OCCH 3 3
3、咖啡因的测定原理O CH 3 H 3CNH 3C N 3N ＋2I+KI+H 2SO 4N O N N O CH 3 3 I 2（剩余）+2Na 2s 2O 32NaI+Na 2s 4O 6 三、实验方法 取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定 药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219g 〜0.242g 。 精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ）,置分液漏斗中，加水15ml ,摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ,10ml ,10ml ,10ml ）,提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 804。 按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 g /片=T ".f xW W 平均片重 称样量 其中：T 一为滴定度；V —消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子 酣战指示液取酶酰1外加乙醉100ml 使溶解，即得付 变色池围仅无色》红人 （二）对乙酰氨基酚的含量测定 CH 3N HII 4+KHs04 CH 3 3 COOH 碘与淀粉作用，变蓝 O II —C-CHj 终点时4HCI+2Kl +2KCL+2Mme1+ 2 +NaNO 2——AHO
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量 复方对乙酰氨基酚的概述：复方对乙酰氨基酚是对乙酰氨基酚、异丙基安替比林和咖啡因的 复方制剂，主要用于治疗头痛、牙痛、月经痛、神经痛、风湿痛及感冒引起的发热等。异丙 基安替比林的极性弱，与对乙酰氨基酚和咖啡因的极性相差很大，且这3组分的紫外吸收特 征及溶解度也有较大差异, 因此建立同时测定这3 组分血药浓度的色谱方法存在较大困难，目前尚未见相关报道。 二、实验部分 1.仪器与试剂 (1)仪器。日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，配UV检测器，N-2000双通道色谱工作站，BS 224 S型电子天平。 （2)试剂。对乙酰氨基酚标准品，咖啡因对照品，异丙安替比林标准品；复方对乙酰氨基酚 片II；甲醇。 2.溶液的配制 (1)标准储备液的配制。分别精密量取对乙酰氨基酚标准品（约25mg）、咖啡因标准品（约 10mg）、异丙安替比林标准品（约15mg）置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水 （70∶30）溶解并稀释到刻度。其中对乙酰氨基酚的浓度约为0.5mg/ml，咖啡因的浓度约为0.2mg/ml，异丙安替比林的浓度约为0.3mg/ml。 (2)对照液的制备。精密量取对乙酰氨基酚储备液10ml，咖啡因储备液5ml、异丙安替比林储备液10ml，并分别置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）稀释至刻度，使其浓 度分别约为0.1mg/ml、0.02mg/ml、0.06mg/ml，作为对照液。 (3)标准溶液的配制。分别精密移取三组分的储备液，置于25ml容量瓶中，加混合溶剂稀释 至刻度，配成五种不同浓度的标准溶液。 (4)供试品溶液的制备。取20片复方对乙酰氨基酚片，精密称定（平均片重0.6539g），充分研细，精密量取适量（约相当于对乙酰氨基酚250mg）置50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇- 水（70∶30）30ml，超声提取15min，加混合溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤 液2ml，置50ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，作为供试液。 结果表明：对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林的出峰时间分别为2.765min、3.290min、12.990min；对乙酰氨基酚、咖啡因、异丙安替比林的分离度分别为1.92、1.92、7.28。 4.线性关系试验 精密移取各标准液依次经0.45微孔滤膜过滤，各进样20ul，以浓度对峰面积作线性回归。 结果表明：对乙酰氨基酚在浓度为0.02008-0.1004mg/ml范围内线性良好，回归方程为 Y=98.681x+0.0145，r=0.9990。异丙安替比林在浓度为0.013-0.066mg/ml范围内线性良好，回 归方程为Y=241.29x+0.1578，r=0.9996。咖啡因在浓度为0.004-0.021mg/mi范围内线性良好，回归方程为Y=332.14x+0.2912，r=0.9995. 5.稳定性试验 将供试品溶液分别放置0h、1h、2h、4h、6h、8h和24h，进样20μl，测定三组分峰面积。 结果表明，峰面积的RSD为0.23%，对乙酰氨基酚在24小时内稳定。峰面积的RSD为0.56%，异丙安替比林在24小时内稳定。峰面积的RSD为0.25%，咖啡因在24小时内稳定。
对乙酰氨基酚的鉴别
对乙酰氨基酚的鉴别
对乙酰氨基酚的鉴别、结构确证及含量测定 姓名：胡玥 学号：15401312 (一)实验题目 对乙酰氨基酚的鉴别、结构确证及含量测定 (二)实验目的 了解对乙酰氨基酚化学性质。 掌握对乙酰氨基酚的鉴别方法。 学会运用仪器对对乙酰氨基酚进行测定。 (三)实验内容与原理 对乙酰氨基苯酚（C8H9NO2）为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。对乙酰氨基酚(扑热息痛,PCM)为乙酰苯胺类药物,具有解热、镇痛的功效,在中西药及其制剂中使用很广,适用感冒引起的发热、头痛、关节痛、风湿病的骨骼肌疼痛以及各种神经痛、偏头痛、痛经等症。其含量测定对于研究药物的药理作用、临床疗效、合理用药、开发资源、质量控制等具有重要意义。
1.对乙酰氨基酚的鉴别方法：呈色反应鉴别法。 以一定浓度的对乙酰氨基苯酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配合物。 2.对乙酰氨基酚的结构确认：红外光谱鉴别法。 红外吸收光谱是由分子的振动—转动能级跃迁产生的光谱。 化合物中每个官能团都有几种振动形式，在中红外区相应产生几个吸收峰，因而特征性强。除了极个别化合物外，每个化合物都有其特征红外光谱，所以，红外光谱是定性鉴别的有力手段。 3.对乙酰氨基酚的含量测定：高效液相色谱法。 色谱法对于多组分混合物既能分离，又能提供定量数据，定量的紧密度为1%--2%。峰面积与组分含量成正比，可利用峰面积定量。定量方法分为归一化法、外标法、内标法、内标标准曲线法等。本实验采用内标法，内标法指以一定量的纯物质作为内标
复方对乙酰氨基片剂质量分析
复方对乙酰氨基片剂质量分析 一、实验目的 1.掌握复方对乙酰氨基片剂的鉴别方法。 2.掌握复方对乙酰氨基片剂的含量测定方法。 3.掌握复方对乙酰氨基片剂的杂质检查方法。 二、实验原理 【复方对乙酰氨基酚的处方】 对乙酰氨基酚126g 阿司匹林230g 咖啡因30g 制成1000片阿司匹林为含有酚羟基的水杨酸，可与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物。咖啡因具有黄嘌呤结构，有紫脲酸铵鉴别试验。 色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 三、仪器与试剂
（1）仪器：50ml量瓶，10ml量瓶，5ml移液管，烧杯，微量进样器，高效液相色谱仪，研钵，电子天平 （2）试剂：乙醚、三氯化铁试液、氯仿、盐酸、氯酸钾、氨气、氢氧化钠试液、无水氯仿、亚硝酸钠试液、稀盐酸、5%的乙醇、冰醋酸、无水乙醇、硫酸铁铵指示液 四、实验流程 鉴别试验→游离水杨酸的检查→崩解时限检查→含量测定→统计计算 五、实验步骤 1.鉴别试验 取本品3g，研细，加乙醚20ml，浸渍提取，滤过，蒸去乙醚，残渣照下述方法实验： （1）取残渣适量，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。 （2）取上述剩余残渣，加氯仿浸渍提取2次，每次15ml，滤过，蒸去氯仿，将残渣分为二份：一份加盐酸1ml溶解后，加氯酸钾0.1g，置水浴上蒸干，残渣遇氨气即显紫色，再加氢氧化钠试液数滴，紫色即消失；另一份加稀盐酸5ml置水浴中加热40分钟，放冷，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml，振摇，即显红色。 2.游离水杨酸的杂质检查 取本品的细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.1g），加无水氯仿3ml,不断搅拌2分钟，用无水氯仿湿润的滤纸滤过，滤渣用无水氯仿
复方对乙酰氨基酚片的含量测定
复方对乙酰氨基酚片的含量测定 一、实验目的与要求 1. 掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法； 2. 掌握复方片剂的分析特点； 3. 熟悉亚硝酸滴定法的原理及操作方法。 二、实验原理 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主要成分。 NH HO O 对乙酰氨基酚 COOH OCOCH3 乙酰水杨酸 N N N O O .H 2 O 咖啡因 各成分之间性质差异较大。对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，含酰胺基，呈中性，但具有潜在的芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；乙酰水杨酸为芳酸类药物，其水溶液呈酸性，K a = 3.27×10-4，可用酸量法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b＝0.7×10-14，采用一般生物碱的含量测定方法不能准确测定其含量，但可将其与碘发生定量沉淀后，再用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1. 乙酰水杨酸的测定原理 COOH OCOCH3 NaOH COONa OCOCH3H 2 O ++ 由于生成的水杨酸钠属强碱弱酸盐，故易水解使溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂---酚酞。 2. 对乙酰氨基酚的测定原理
HO NHCOCH 3 H +2HO NH 2.HCl + CH 3COOH HO NH 2.HCl + NaNO 2 HO N 2.Cl + 2 H 2O 2 NaNO 2I 2 + 2 KCl + 2 NaCl + 2 NO + 2 H 2O 以淀粉碘化钾指示反应终点。 3. 咖啡因的测定原理 N N O O H 3C 3 N N ＋ 2 I + KI + H 2SO 4 N N O O H 3C 3 N CH 3N HI I 4+ KHSO 4 CH 3I 2 (剩余) + 2 Na 2S 2O 3 2 NaI + Na 2S 4O 6 三、实验材料、试剂与仪器
常用解热镇痛药中对乙酰氨基酚含量测定
描述： 【摘要】本实验的目的是检测几种常用解热镇痛药中对乙酰氨基酚成分的含量。主要是利用高效液相色谱法及其相关手段，对5种解热镇痛药中对乙酰氨基酚成分的含量进行分析和测定。经实验证实，对乙酰氨基酚含量测定线性范围在6.25～200μg？mL-1，相关系数r=0.9997。高效液相色谱法的分离效果灵敏度高、重复性好，可用于多种解热镇痛药中对乙酰氨基酚含量的测定。 【关键词】解热镇痛药；对乙酰氨基酚；高效液相色谱法 0 前言 对乙酰氨基酚，又称扑热息痛，是大多数解热镇痛药中的主要成分。近年来，由于对乙酰氨基酚产生的胃肠道不良反应、肾毒性及造血系统的不良反应较同类的阿司匹林等解热镇痛药小，因此，临床用于常见的感冒发热、儿科的急性呼吸道感染发热以及紧张性头痛、关节痛和癌痛的三阶梯治疗等。对乙酰氨基酚的常用剂量安全可靠，在大多数国家为非处方药（OTC），但该药的滥用和过量使用引起的不良反应和严重的肝脏毒性已日益引起人们的关注。因此，研究常用解热镇痛药中的对乙酰氨基酚的含量，在临床医学方面具有十分重要的意义。本实验就是利用高效液相色谱法，对5种常用解热镇痛药中对乙酰氨基酚成分的含量进行分析和测定，并对药品质量进行粗略的评估。将药房购得5种常用的含有对乙酰氨基酚的解热镇痛药，研磨成粉末状后用三蒸水溶解并稀释至适宜浓度，最后采用高效液相色谱法对其中对乙酰氨基酚的含量进行定性和定量分析。此方法操作简单，且可以得到较为直观的实验结果。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验试剂与药品 水：三蒸水，实验室自制；对乙酰氨基酚标准品：中国药品生物制品检定所提供；对乙酰氨基酚片（扑热息痛）：东北制药总厂，国药准字H21020448；泰诺--酚麻美敏片：上海强生制药有限公司，国药准字H20010115；散列通--复方对乙酰氨基酚片Ⅱ：西南药业股份有限公司，国药准字H20013003；百服咛--氨酚伪麻美芬片（日片）：中美上海施贵宝制药有限公司，国药准字H10970388；百服咛--氨麻美敏片Ⅱ（夜片）：中美上海施贵宝制药有限公司，国药准字H10970387均购于药房。 1.1.2 分析型HPLC液相条件 1.2 方法 1.2.1 供试液的制备
实验题目 复方对乙酰氨基酚片的质量分析1
复方对乙酰氨基酚片的质量分析 实验设计
一、实验题目复方对乙酰氨基酚片的质量分析 二、实验目的： 1、了解复方对乙酰氨基酚片质量分析方法； 2、了解复方对乙酰氨基酚片的一些常规检查及测定； 3、掌握复方对乙酰氨基酚片各成分含量测定的基本原理和操作方法； 4、掌握复方对乙酰氨基酚片的分析特点。 三、实验原理(或依据)： 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。 反应式表示如下： 对乙酰氨基酚的测定原理（重氮化法) 乙酰水杨酸的测定原理（酸量法） 咖啡因的测定原理(碘量法）
四、主要设备和试剂： 电子天平、升降式崩解仪、溶出仪、锥形瓶、滴定管、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、移液管等 0.1mol/l HCL 溶液0.4g/lNaOH 稀硫酸溴化钾 0.lmol/L亚硝酸钠液氯仿中性乙醇0.1mol/L氢氧化钠液淀粉指示液酚酞指示液 0.1 mol/L碘液等 五、实验流程： 1、重量差异检查 2、崩解时限检查 3、溶出度的测定 4、含量测定 六、实验方法： 1、重量差异检查 取复方对乙酰氨基酚片10片，精密称定总重量（算平均片重），记录，再分别精密称定每片的重量，记录（每片的重量与平均片重相比较）。 2、崩解时限检查 取复方对乙酰氨基酚片6片于升降式崩解仪中崩解，记录崩解时间。 3、溶出度的测定 量取1000ml 0.1mol/l HCL 溶液放入溶出杯中，取复方对乙酰氨基酚片6片精密称定，记录，投入六个转篮中，转速为每分钟100转，经30分钟时，分别量取溶液5ml滤过，初滤液弃去，精密量取续滤液1.5ml，置于25ml 容量瓶中，用0.4g/lNaOH 溶液定容，摇匀，以NaOH 溶液作参比溶剂，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算出每片的溶出量。附：计算公式：溶出量%=[(A/W)/(A*/W 平均)]×100% 4、含量测定 取本品20片，精密称定，记录，研细，备用 A.对乙酰氨基酚的含量测定 精密称取上述细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.25 g），置锥形瓶中，加稀硫酸25 ml，缓缓加热回流60分钟，冷却至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液 (1→2)40ml，分数次洗涤，每次5m1，合并滤液与洗液，加溴化钾3g溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，在不低于20℃的温度下，用0.lmol/L亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色的条痕，停止滴定，5分钟后再蘸取少许，划过一次，如仍显蓝色的条痕，即达终点。 每lml的0.l mol/L亚硝酸钠液相当于15.12mg的C 8H 9 NO 2 。 按下式计算每片含对乙酰氨基酚的克数： 式中：0.01512为亚硝酸钠液的实际浓度，0.1为亚硝酸钠液的理论浓度B.乙酰水杨酸的含量测定
中成药中对乙酰氨基酚含量测定的4种方法及比较
中成药中对乙酰氨基酚含量测定的4种方法 及比较 【关键词】中成药 摘要：目的：运用4种含量测定方法测定中成药中对乙酰氨基酚的含量，并比较其精确度、回收率和适应性。方法：采用滴定法、双波长分光光度法、紫外吸收系数法及高效液相色谱法。结果：四种方法所测的含量有所不同。结论：用高效液相色谱法测定中成药中对乙酰氨基酚的含量，方法简便、准确、专属性强。 关键词：四种中成药;对乙酰氨基酚; 四种含量测定 Comparison of Four Methods for the Determination of Paracetamol in Traditional Chinese Medicine Abstract: Objective: Use four methods to determine paracetamol to comparison theirison accuracy, recovery and applicability. Methods: Determination of paracetamol in traditional Chinese medicine with titration. Two wave length spectrophotometry. Uv spectrophotometry and Hplc. Results: The results of four methods are not same. Conclusious: The Hplc method was accurate and specific to determine the content of paracetamol in traditional chinese medicine. Key words: Four traditional chinese medicine；Paracetamol; Four content determination 对乙酰氨基酚又称扑热息痛，现其在中西结合治感冒制剂中