激光荧光检查法在肿瘤定位诊断中的应用.

激光荧光检查法在肿瘤定位诊断中的应用
[ 08-01-14 17:03:00 ] 作者：刘昊，陈美兰，郭仁舆编辑：studa20
【摘要】目的探讨激光荧光检查法在肿瘤定位诊断中的应用价值。

方法以荧光素钠、光卟啉等作为荧光物质，以氦镉激光、氩Ar+激光和KTP激光作为激发光源，对1400例宫颈病变、56例食道病变、133例胃病变、37例
膀胱肿瘤和14例脑肿瘤进行定位诊断，并结合组织形态学方法证实荧光物质在肿瘤组织中的分布特征。

结果激光荧光检查法对上述患者病情均能够明确确诊，对肿瘤的早期定位诊断起到了重要的帮助。

结论激光荧光检查法可作为早期肿瘤的定位诊断方法，值得在临床上广泛使用。

【关键词】激光荧光检查法；肿瘤；诊断
Laser photodynamic therapy with hematoporphyrin derivative in tumor diagnosis
ABSTRACT: Objective To investigate the efficacy of photodynamic therapy (PDT) for tumor diagnosis. Methods A total of 1400 patients with the cervix of uterus disease, 56 patients with gullet disease, 133 patients with stomach diseases, 37 patients with urinary bladder tumor and 14 patients with brain tumor underwent diagnosis with PDT, combination of He cd laser, Ar+ laser, and KTP laser. Results All of the patients could be explicitly diagnosed by this method, which indicated that PDT helped greatly in early tumor diagnosis. Conclusion PDT can be an effective diagnostic method for tumors of early stage, and should be widely applied clinically.
KEY WORDS: photodynamic therapy; tumor; diagnosis
肿瘤组织对含有荧光物质的趋向性吸收比正常组织多而排泄缓慢，在特定光线的照射下肿瘤组织内的荧光物质会被激发出特有荧光。

激光荧光检查法是利用肿瘤组织的这一特性来确定肿瘤的位置和范围，为肿瘤、特别是早期肿瘤的定位诊断和治疗提供帮助。

自20世纪70年代起始，我院曾用荧光素钠[1]、光卟啉等作为荧光物质，用氦镉激光、氩Ar+激光、KTP激光作为激光光源用于各种肿瘤的定位诊断，并结合组织形态方法，来证实荧光物质在肿瘤组织中的分布特征。

现将研究概况简述于下。

1 材料与方法
1.1 荧光物质荧光素钠：三苯甲烷衍生物，为生物染料，橙红色粉末，无毒、无味，极易溶于水，在特定波长光的激发下可产生黄绿色荧光，其峰值为522nm。

服后半小时血液浓度可达高峰，3-4h后下降，10min后尿内开
始排泄，72h排泄完毕。

光卟啉：血卟啉的衍生物(hemetopororphyrin
derivative, HPD)，其结构与血色素十分相似，为深红色粉末或用其制成的同色水溶液，在吸收360-410nm的波长后可发出630-690nm的红色荧光。

进入人体后由肝脏解毒，血液中的半衰期为24h，48-72h正常组织中的光卟啉接近排完。

基本无毒，皮肤光毒反应的发生率极低，且极易治疗。

1.2 激光氦镉(He Cd)激光：波长441.6nm，多膜，半外腔，连续输出，功率10-30mW，光学玻璃传导束。

该激光用于荧光素钠组。

氩(Ar+)激光：波长488-514nm，连续输出，功率0-6W，实用功率200mW，光导纤维传输。

KTP激光：是晶体倍频的掺铷钇铝石榴石(Nd YAG)激光的简称，波长532nm，功率0-16W，连续脉冲输出，脉冲宽度80-150ns，频率3000-
5000pps，光纤传输。

Ar+、KTP激光只用于HPD组。

各种带有荧光滤光装置的检查镜、内窥镜等辅助检查装置。

1.3 给药方法及结果判定标准
1.3.1 荧光素钠组口服：受检查者空腹服用小苏打2g，水200mL(荧光素钠在碱性环境中吸收较好)，10min后服荧光素钠片剂2g，2-8h后进行检查。

此给药途径适用于除上消化道部位外的所有病变检查。

灌肠：术前排空大便，必要时做清洁灌肠。

用2g荧光素钠溶于50mL温水内，保留灌肠4-12h后开始检查。

检查：开启激光器，将激光通过内镜传光系统或光导纤维(经活检通道)照向病变组织表面，有黄绿色荧光出现时即为阳性。

按其强弱可分为：阳性：呈黄绿色透亮区(黄绿中透白)，有层次感，往往伴有组织外观异常、血管增生等变化；可疑阳性：呈黄绿色荧光区，无立体层次感，无明显组织形态变化或血管异常；阴性：无荧光现象或局部组织异常。

1.3.2 光卟啉组静脉给药：作皮试，阴性者按5mg/kg体重计算给药量，避光静脉快速滴入，于24-48h后开始检查，该法适用于各种部位肿瘤。

皮肤贴服法：将HPD注射液不断滴向覆盖与病灶表面的薄棉片上，保持棉片湿润4 h，取掉棉片，仔细清洗病灶表面，经过4-6h，即可开始检查。

此法只适用于体表或浅腔洞部位病灶的检查。

膀胱灌注法：查前禁水4h，HPD 100mg直接注入排空后的膀胱内。

变换体位(保留2-4h内不小便最好)，4-6h后排空膀胱，用膨腔液(硼酸水或生理盐水)冲洗2h后，即可开始检查。

只局限于膀胱肿瘤。

检查：用药24-48h开始检查，将激光导至病变表面。

可在病变处发现有橘红色荧光为阳性，也可呈亮橘红色。

血运或含水分较多的肿瘤可呈粉红色或白色透亮感；可疑阳性为散在暗红色区域；阴性，无异常发现，亦无红色点片区。

所有检查病例均送活体组织病理检查确定诊断。

1.4 组织形态学检查①在荧光素钠检查组中取呈阳性结果者胃癌10例、慢性萎缩性胃炎9例、宫颈癌32例、慢性宫颈炎32例，做以下处理并做荧光显微镜观察；另取10例阴性组的慢性宫颈炎标本做同样处理、对照。

②取活检组织直接石蜡包埋连续切片，不做任何染色，以荧光显微镜观察荧光的组织分布及其强度。

③与前片前后相邻的切片分别染以苏木素伊红及甲绿派诺宁，用一般光学显微镜观察，确定发荧光的组织成分，印证荧光现象与细胞化学所示核酸的关系。

④用人的唾液孵育切片，使唾液中的RNA酶消除细胞中
的RNA，观察对荧光现象的影响，以判定渗入细胞内的荧光素钠与RNA的关系。

2 结果
2.1 临床检查结果
2.1.1 荧光素钠组①宫颈病变：将氦镉激光导向宫颈表面，借助阴道镜辅助观察，共检查宫颈病变1400例，其中宫颈光滑者(阴道镜下也无异常改变)277例，Ⅰ°糜烂287例，Ⅱ°糜烂510例，Ⅲ°病变362例，其他病变12例。

其检查结果见表1。

表1 激光荧光在阴道的检查结果（略）
Table 1 Results of laser fluorescence vaginoscope inspection
*Include amoebapalacetrachelitis, granulationtissue, carcinomaofvaginaetal
②食道、胃：用氦镉激光作为激光光源，用自制的特殊装置将激光经纤维胃镜的传光束导向病变表面，共检查食道45例、胃107例。

其结果为：食道45例，阳性25例，其中鳞癌13例、腺癌1例、重度非典型性增生4例、非典型性增生1例；阴性11例，食道息肉2例、憩室3例、食道炎伴非典型性增生4例、正常2例。

胃镜检查107例，其中阳性34例，分别为胃癌24例、萎缩性胃炎+重度非典型性增生7例、胃柿石合并胃溃疡3例；可疑阳性21例，慢性溃疡7例、溃疡+萎缩性胃炎5例、萎缩性胃炎4例、胃柿石伴溃疡2例、胃黏膜脱垂伴胆汁返流伴黏膜糜烂3例。

阴性73例中无1例癌症患者，但有萎缩性胃炎+重度非典型性增生9例、胆汁返流性胃炎伴黏膜糜烂5例，余均未发现异常。