植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定
小黑豆相关生理指标测定1.表型变化：鲜重、株高、主根长和叶面积鲜重：取处理好的植株，擦干根和叶表面水分，测量整株植物的重量，每个测6个重复。
株高：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度，记录，每个测6个重复。
主根长：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到主根最远点长度，记录，每个测6个重复。
叶面积：取处理好的植株，选择第二节段的叶片，测量叶面积，叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长，测叶片最窄处长度作为叶的宽，叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测6个重复。
2.总蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）和H2O2含量测定样品处理：取0.5g样品（叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净），速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入1.5ml的Tris-HCl（pH7.4）抽提，将抽提液转移到2ml的EP管中，于4℃，12000rpm离心15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于总蛋白、丙二醛（MDA）、可溶性糖和H2O2含量测定。
总蛋白测定（Bradford法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul 样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y代表蛋白含量，X代表OD595)，计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定：样品反应体系（1ml蒽酮+180ul ddH2O+20ul样品提取液）；空白对照（1ml蒽酮+180ul ddH2O），测定OD625后带入标准曲线：Y=0.0345X+0.0204(Y代表OD625，X代表可溶性糖含量（ug）)蒽酮配方：称取100mg蒽酮溶于100ml稀硫酸（76ml浓硫酸+30mlH2O）.注意：浓硫酸加入水中时，一点一点递加，小心溅出受伤。
丙二醛（MDA）测定：在酸性和高温条件下，丙二醛可与硫代巴比妥（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮，在532nm处有最大吸收波长，但该反应受可溶性糖的极大干扰，糖与TBA的反应产物在532nm处也有吸收，但其最大吸收波长在450nm处。
植物生理学与生物化学研究方法
植物生理学与生物化学研究方法植物生理学和生物化学是对植物生命过程进行深入研究的两个重要学科。
植物生理学研究植物在生长发育、代谢过程以及环境适应等方面的生理机制，而生物化学则着重于研究植物细胞和分子水平上的化学成分和反应。
本文将重点介绍植物生理学和生物化学研究中常用的方法和技术。
一、植物生理学研究方法1.生长分析法生长分析法是研究植物在时间和空间上的生长变化的一种重要方法。
它可通过测量植物的高度、叶面积、根系长度等参数，定量分析植物各组织器官的生长速率，并研究生长速率与外界环境因素的关系。
2.生理生化测定法生理生化测定法是研究植物代谢水平和功能活性的重要手段。
例如，酶活性测定可用于研究植物代谢过程中的关键酶活性变化；叶绿素含量测定可反映叶片光合能力水平；光谱测定可用于分析植物组织中的各种生物分子的含量和结构等。
3.生物学指标法生物学指标法是以某一生理生化指标作为植物对环境适应能力的评价指标。
例如，水分利用效率可通过测定植物封闭室内的水分蒸腾量和生物产量来评价植物对水分利用的效率；抗寒力可通过测定植物在低温下的生存能力和生长状态来评价植物的寒冷适应性等。
二、生物化学研究方法1.色谱分析法色谱分析法是生物化学领域中广泛应用的分离和定量分析方法。
其中，气相色谱法可用于分析植物挥发性成分和气体代谢产物；液相色谱法可用于分析植物中的有机酸、氨基酸、生物碱等物质。
2.质谱分析法质谱分析法是一种高灵敏度、高分辨率的分析技术，可用于鉴定植物中微量物质的种类和结构。
常用的质谱技术包括质谱-质谱联用技术（MS-MS）、电喷雾质谱技术（ESI-MS）、气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）等。
3.荧光显微镜技术荧光显微镜技术是一种通过利用植物中的特定荧光探针来标记和可视化特定分子或结构的技术。
例如，利用叶绿素的自然荧光和活性氧荧光染料，可以观察植物光合作用过程中的能量传递和损伤情况。
总结：综上所述，植物生理学与生物化学研究方法多种多样，每一种方法都有其适用范围和特点。
植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定植物生理生化指标测定是研究植物生长发育和适应环境的重要手段之一、通过测定植物的生理生化指标，可以了解植物的代谢活动、光合作用强度、水分状况、营养状况等，从而为植物生长调控、抗逆性研究提供依据。
下面将从光合作用测定、水分状况测定和营养状况测定三个方面对植物生理生化指标测定进行详细介绍。
光合作用是植物生长发育的重要过程之一，也是植物蓄积养分和能量的主要途径。
常用的光合作用测定指标有净光合速率、光饱和点、光补偿点和光抑制。
净光合速率是指单位时间内单位叶面积净光合产物的量，可以通过测定二氧化碳吸收量和氧气释放量来计算。
光饱和点是指植物的净光合速率达到最大值时的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率来得出。
光补偿点是指净光合速率和呼吸速率相等的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率和呼吸速率来确定。
光抑制是指过高或过低的光强度对植物光合作用的影响，可以通过测定光强对净光合速率的影响来评价。
水分状况是植物生理生化指标测定的重要方面之一，也是植物生长发育和适应环境的关键因素之一、常用的水分状况测定指标有相对含水量、蒸腾速率和水分利用效率。
相对含水量是指植物组织中的相对含水量与干重的比值，可以通过称量植物组织的湿重和干重来计算。
蒸腾速率是指单位时间内单位叶面积水分蒸腾的量，可以通过测定植物的蒸腾量和叶面积来计算。
水分利用效率是指植物单位干物质产量所需要的水分量，可以通过测定植物的干物质产量和水分消耗量来计算。
营养状况是植物生理生化指标测定的另一个重要方面，也是植物生长发育和代谢活动的基础。
常用的营养状况测定指标有叶绿素含量、叶绿素荧光参数和土壤养分含量。
叶绿素含量是评价植物叶绿素合成和叶绿素降解的指标之一，可以通过植物叶片中叶绿素的提取和测定来得出。
叶绿素荧光参数是评价光能利用效率和光能转化效率的重要指标之一，可以通过叶绿素荧光仪来测定。
土壤养分含量是评价土壤中不同营养元素含量的指标之一，可以通过土壤样品的提取和测定来得出。
《植物生理生化》实验指导
令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。
其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。
本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。
分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。
通常用α表示分配系数。
在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。
由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。
植物体内可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定
植物体内可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定摘要：目的通过标准曲线的绘制，测定白菜、芹菜、菠菜中可溶性蛋白和可溶性糖的含量，了解可溶性糖和可溶性蛋白的测定方法。
方法分别用蒽酮法和考马斯亮蓝染色法来测定植物体内可溶性糖和可溶性蛋白的含量。
结论关键词：白菜；芹菜；菠菜；可溶性蛋白含量；可溶性糖含量；蒽酮法；考马斯亮蓝染色法1 引言植物体内的可溶性糖和可溶性蛋白含量是重要的生理生化指标。
在作物的碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。
它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。
可溶性蛋白是植物体内氮素存在的主要形式，其含量的多少与植物的代谢和衰老有密切的关系，同时它与植物体维持渗透压抗脱水也有很大关系。
白菜是十字花科芸薹属叶用蔬菜，味道鲜美可口，营养丰富，素有“菜中之王”的美称，为广大群众所喜爱。
芹菜属伞形科植物，富含蛋白质、碳水化合物、胡萝卜素、B族维生素、钙、磷、铁、钠等，同时，具有有平肝清热，祛风利湿，清肠利便、润肺止咳、降低血压、健脑镇静的功效。
菠菜藜科一年生草本植物，菠菜含有丰富的维他命A、维他命C及矿物质，它对各种贫血症和糖尿病、肺结核、高血压、风火赤眼等诸多疾病可起辅助治疗作用。
2 材料与方法2.1 植物体内可溶性糖含量的测定2.1.1材料新鲜的白菜、芹菜、菠菜叶片（剪碎后各取0.5—1.0g）2.1.2试剂葡萄糖标准溶液（200ug/ml)、蒽酮试剂2.1.3仪器设备分光光度计；分析天平；恒温水浴；试管；三角瓶；移液管；剪刀；玻璃棒；滤纸；研钵2.1.4测定方法样品中可溶性糖的提取：称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ～1.0 g （或干样粉5～100 mg ），放入大试管中，加入15 ml 蒸馏水，在沸水浴中煮沸20 min，取出冷却，过滤入100 ml 容量瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。
(整理)植物生理指标测定方法
A600—在600nm波长下测得的吸光度值
﹡—1.55×105为摩尔比吸收系数
C糖、CMDA分别是反应混合液中可溶性糖、MDA的浓度。
1.按下式计算提取液中MDA浓度
反应液体积（ml）
CMDA×—————————
1000
提取液中MDA浓度（μmol·ml－1）= ———————————————
四、实验步骤
1、脯氨酸标准曲线的制作
1.1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0～12μg的脯氨酸标准液。加入表中试剂后，置于沸水浴中加热30min。取出冷却。以去离子水溶液为空白对照，在520mm波长处测定吸光度（A）值。
试剂
管号
0
1
2
3
4
5
10μg·ml-1脯氨酸标准液（ml）
蒸馏水（ml）
冰醋酸（ml）
【3】无水酒精和80%丙酮等体积混合提取
实验二、
一、原理
植物组织在受到各种不利的环境条件（如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染）危害时，细胞膜的结构和功能首先受到伤害，细胞膜透性增大。若将受伤害的组织浸入无离子水中，其外渗液中电解质的含量比正常组织外渗液中含量增加，组织受伤害越严重，电解质含量增加越多。用电导仪测定外渗液电导率的变化，可反映出质膜受伤害的程度。在电解质外渗透的同时，细胞内可溶性有机物也随之渗出，引起外渗液可溶性糖、氨基酸、核苷酸等含量增加，氨基酸和核苷酸对紫外光有吸收，对紫外分光光度计测定受伤害组织外渗液消光值，同样可反映出质膜受伤害的程度。用电导仪法和紫外法测定结果有很好的一致性。
二、原理
磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。然后用酸性茚三酮加热处理后，茚三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。
最新植物生理指标测定方法
实验一植物叶绿素含量的测定（分光光度法）(张宪政，1992)一、原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A＝αCL式中：α比例常数。
当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。
各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。
如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。
这就是吸光度的加和性。
今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。
在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
高等植物中叶绿素有两种：叶绿素a 和b，两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
叶绿素a和叶绿素b的比值反映植物对光能利用效率的大小，比值高则大，则反之。
二、材料、仪器设备及试剂试剂：1）95%乙醇（或80%丙酮）三、实验步骤称取剪碎的新鲜样品0.2～0.3g，加乙醇10ml，提取直至无绿色为止。
把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内，以95%乙醇为空白，在波长663nm和645nm下测定吸光度。
四、实验结果按计算丙酮法（Arnon法）【可以用于丙酮乙醇混合法和80%丙酮提取法的计算】叶绿素a的含量（mg/g）=（12.71⨯OD663– 2.59⨯OD645）V/1000*W叶绿素b的含量（mg/g）=(22.88OD645– 4.67OD663) V/1000*W 叶绿素a、b的总含量（mg/g）=(8.04⨯OD663+20.29⨯OD645) V/1000*W 按Inskeep公式叶绿素a的含量（mg/g）=（12.63⨯OD663– 2.52⨯OD645）V/1000*W叶绿素b的含量（mg/g）=(20.47OD645– 4.73OD663) V/1000*W叶绿素a、b的总含量（mg/g）=(7.90⨯OD663+ 17.95⨯OD645) V/1000*W 注：1、叶绿素a和叶绿素b的比值反映植物对光能利用率【1】比如阳生植物叶绿素a和叶绿素b的比值较大【2】阴生植物叶绿素a和叶绿素b的比值较小2、丙酮-------熔点:-94℃；沸点:56.48℃；是一种无色透明液体，有特殊的辛辣气味易溶于水和甲醇、乙醇、乙醚、氯仿、吡啶等有机溶剂.下一步实验方法比较【1】95%乙醇直接提取（√）【2】95%乙醇加热提取（冯瑞云，1985）【3】无水酒精和80%丙酮等体积混合提取实验二、不良环境对植物细胞膜的伤害（(张宪政，1992)）一、原理植物组织在受到各种不利的环境条件（如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染）危害时，细胞膜的结构和功能首先受到伤害，细胞膜透性增大。
植物的生理生化研究实验
准备实验材料，设置呼吸作用抑制剂处理组和对照组，观察并记录 植物的生长情况。
数据分析
对比处理组和对照组的植物生长数据，分析呼吸作用对植物生长的 影响及机制。
05
植物矿质营养与代谢实验
测定植物体内矿质元素含量
原子吸收光谱法
利用原子吸收光谱仪测定植物样品中矿质元素的含量，该方法具有灵敏度高、选 择性好、精密度高等优点。
应用价值
实验结果可为农业生产、生态环境保护等领域提供科学依据和技术支持。例如，通过了解植物对不同环境条件的 适应机制，可以指导农业生产中合理施肥、灌溉等措施的制定；同时，对于植物抗逆性、抗病性等方面的研究也 可为植物育种和病虫害防治提供新的思路和方法。
提出进一步研究的设想和建议
深入研究特定基因或蛋白质的功能
质壁分离观察
利用显微镜观察质壁分离后的细胞形 态，了解细胞壁的弹性和原生质体的 收缩情况。
分析水分在植物体内的运输途径
长距离运输
通过测定植物不同部位的水势和含水量，分析水分在植物体内的长距离运输途 径和机制。
短距离运输
利用显微技术观察植物细胞间的水分移动，了解水分在细胞间的短距离运输方 式和过程。
信号传导机制探讨
深入研究激素与受体结合后的信号传导过程，揭示激素调控植物生长发 育的分子机制。
03
激素互作分析
研究不同激素间的相互作用关系，探讨它们在植物生长发育中的协同或
拮抗作用。
07
实验结果分析与讨论
对实验数据进行统计分析
数据收集与整理
详细记录实验过程中的各项数据，包括植物的生长情况、生理生 化指标等，并进行分类整理。
分析环境因素对光合作用的影响
实验原理
研究光照强度、温度、CO2浓度等环境因素对光 合作用的影响。
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---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------植物生理生化指标测定小黑豆相关生理指标测定 1. 表型变化：鲜重、株高、主根长和叶面积鲜重：取处理好的植株，擦干根和叶表面水分，测量整株植物的重量，每个测 6个重复。
株高：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到植株最高点的高度，记录，每个测 6 个重复。
主根长：取处理好的植株，测量从根和茎分隔处到主根最远点长度，记录，每个测 6 个重复。
叶面积：取处理好的植株，选择第二节段的叶片，测量叶面积，叶面积测量方法是测每个叶片最宽处长度作为叶的长，测叶片最窄处长度作为叶的宽，叶片长和宽的乘积即为叶表面积。
每个测 6 个重复。
2. 总蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）和 H2O2 含量测定样品处理：取 0.5g 样品（叶片要去除叶脉、根要先用清水清洗干净），速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入 1.5ml 的Tris-HCl（pH7.4）抽提，将抽提液转移到 2ml 的 EP 管中，于4℃，1 / 812019rpm 离心 15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于总蛋白、丙二醛（MDA）、可溶性糖和 H2O2 含量测定。
总蛋白测定（Bradford 法）：样品反应体系（800ul H2O+200ul Bradford+5ul样品），空白对照为（ 800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线Y=32.549X-0.224(Y 代表蛋白含量， X 代表 OD595)，计算得出蛋白含量。
可溶性糖测定：样品反应体系（1ml 蒽酮+180ul ddH2O+20ul 样品提取液）；空白对照（ 1ml 蒽酮 +180ul ddH2O），Y=0.0345X+0.0204(Y 代表 OD625， X 代表可溶性糖含量（ug） ) 蒽酮配方：称取 100mg 蒽酮溶于 100ml 稀硫酸（76ml 浓硫酸+30mlH2O） .注意：浓硫酸加入水中时，一点一点递加，小心溅出受伤。
丙二醛（MDA）测定：在酸性和高温条件下，丙二醛可与硫代巴比妥（TBA）反应生成红棕色的 3,5,5-三甲基恶唑 2,4-二酮，在 532nm 处有最大吸收波长，但该反应受可溶性糖的极大干扰，糖与 TBA 的反应产物在532nm 处也有吸收，但其最大吸收波长在 450nm 处。
采用双组分分光光度法，可计算出 MDA 含量。
MDA 的计算公式为：MDA（umol/L） =6.45OD532-0.56OD450. 反应体系为：---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 400ul 0.6%TBA+350ul H2O+50ul样品，80℃水浴10min后，测OD532和 OD450。
对照用 Tris-HCl. 0.6%TBA 配方：称取硫代巴比妥 0.6g，溶于少量 1M NaOH 中，待其完全溶解后用 10%TCA（称取 10gTCA 三氯乙酸，溶于 100ml 蒸馏水中，待其溶解即可）定容至 100ml。
H2O2 测定（二甲酚橙法）：样品反应体系（82ul 溶液 A+820ul 溶液 B（A:B=1:10） +150ul 样品提取液），30℃ 水浴 30min，测 OD560。
标准曲线为:Y=0.01734X-0.0555(Y 代表 OD560， X 代表 H2O2 含量) 测定 OD625 后带入标准曲线：溶液 A（200ml）：FeSO4.7H2O 0.1835g； (NH4)2SO4 0.0872g； H2SO4(浓硫酸18M)4.58ml，加水定容。
溶液 B（200ml）：二甲酚橙 0.0234g；山梨醇 6g，加水定容到 200ml 3. 可溶性蛋白、 SOD、 POD 和 CAT 活性测定样品处理：取 0.5g 样品，速在液氮中冻存，在遇冷的研钵中加液氮研磨，然后加入 1.5ml 的 Tris-HCl（pH7.0）（内含有 20%甘油、 1mmol/L ASA（抗坏血酸）、 1mmol/L DTT（二硫苏糖醇）、 1mmol/L EDTA、1mmol/L GSH（还原型谷胱甘肽）、 5mmol/L MgCl2）抽提，将抽提3 / 8液转移到 2ml 的 EP 管中，于4℃，12019rpm 离心 15min，取上清，保存在-20℃下，上清液可用于可溶性蛋白、 SOD、POD 和 CAT 含量测定。
1mmol/L 的 ASA 配制：先配制 10mmol/L 的母液称取 176.13mg 的 ASA，溶于 100ml 的 Tris-HCl（pH7.0）中即可，然后稀释 10 倍即可。
1mmol/L 的 DTT 配制：先配制 10mmol/L 的母液称取 154.25mg 的 DDT溶于 100 ml 的 Tris-HCl（pH7.0）中即可，然后稀释 10 倍即可。
1mmol/L 的 EDTA 配制：用 30mmol/L 的 EDTA 稀释 30 倍即可。
5mmol/L的 MgCl2配制：称取MgCl2.6H2O的 101.5mg溶于100ml的 Tris-HCl（pH7.0），即可。
样品提取液的配制（200ml）：取 10mmol/L 的 ASA 母液 20ml， 10mmol/L的母液 DTT20ml，取 30mmol/L 的 EDTA 母液 7ml，称取 203mg 的 MgCl2.6H2O，最后再量取 20ml 的甘油，将最终体积定容到 200ml，即可。
可溶性蛋白测定（ Bradford 法）：样品反应体系（ 800ul H2O+200ul Bradford+5ul 样品），空白对照为（800ul H2O+200ul Bradford）。
测定后带入标准曲线 Y=32.549X-0.224(Y 代表蛋白含量， X 代---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 表 OD595)，计算得出蛋白含量。
SOD 测定：SOD 活性的测定是根据照光时，体系中产生氧自由基使硝基四唑蓝还原成蓝色甲 (在 560nm 处有一吸收峰), 而超氧化物歧化酶作为氧自由基的清除剂可抑制此反应。
• 一个酶活单位定义为将硝基四唑蓝的还原抑制到对照一半(50％)时所需的酶量。
14.5mmol/L 的 dl-甲硫氨酸（分子量 149.21）（现用现配）：称取甲硫氨酸216.4mg，加少量 Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用Tris-HCl(pH7.0)定容到 100ml，即可。
30mmol/L 的 EDTA（292.25）（现用现配）：称取 EDTA 药品 876.75mg，加少量 Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用 Tris-HCl(pH7.0)定容到 100ml，即可。
2.25mmol/L 的 NBT（硝基四唑蓝）（817.6）（现用现配）：称取 NBT 药品183.96mg，加少量 Tris-HCl(pH7.0)溶解后，用Tris-HCl(pH7.0)定容到 100ml，即可。
60umol/L 的核黄素(376.36)（现用现配）：先称取 225.81mg 的核黄素，加少量 50mM Tris-HCl(pH7.4)溶解后，用 50mM Tris-HCl(pH7.4)定容到 10ml，配制成60mmol/L 的母液，然后取 100ul 到 100ml 的 Tris-HCl(pH7.4)中，即可配制成60umol/L 的核黄素。
5 / 8测酶活的反应介质：测定前在 54ml 的 14.5mmol/L 的 dl-甲硫氨酸中分别加入EDTA、 NBT 和核黄素各 2ml，此为反应混合液。
酶活测定：在盛有 1.0ml 反应液的试管中，加入适量的酶液（50ul）（以抑制达 50%作用酶浓度为最佳）。
混匀后放在透明的试管架上，于光照培养箱中准确照光 10min后，迅速测定 560nm 处的光密度。
以不加酶液照光液的为对照，计算反应被抑制的百分比。
按下式计算超氧化物歧化酶的活性△AN 酶活力＝─────────────── AOWTV50％式中：酶活力单位为每 min 每ｇ鲜重酶活单位数； AO 为对照试管溶液在 560nm 处的吸光度值; △A 为对照试管溶液在560nm 处的吸光值与加入酶液的反应液在 560nm 处的吸光值的差;N 为酶液总体积； W 为提取酶液的样品鲜重 g； T 为照光时间(10min) ； V 为加入酶液的体积(ml) ； POD 测定（愈创木酚法）：过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。
在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，可用分光光度计测量生成物的含量。
反应混合液配制：---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 在 50ml 的 50mmol/L 的 Tris-HCl(pH7.0)缓冲液中加入 28ul 的愈创木酚，与磁力搅拌器上加热搅拌直至愈创木酚溶解，再加入19ul 的 30%的 H2O2，混合均匀，4℃保存。
酶活测定：取反应混合液 1.0ml，加入 0.1ml 酶提取液， 2min 前后，于470nm处测 OD 值，每隔 1min 读数一次，以每分钟 OD 值的变化表示酶活大小。
（测量时再加入酶液） CAT 测定（H2O2 法）反应缓冲液： 20mM 的 H2O2，使用前在25℃水浴中加热 30min。
酶活测定：取反应液 1.4ml，加入 100ul 酶液，每加完一管立即计时，并迅速在波长 240nm 下测定 30S、 1min30S、 2min30S 时的吸光度，以 Tris-HCl 的作为空白。
以 1min 内 A240 减少 0.1 的酶量为 1 个酶活单位。
代入酶活力公式，以△OD*V/0.1*v*t FW 表示 CAT 活性，所有测定均重复三次。