鸡蛋清中提取溶菌酶

• 结晶：用1mod/l的NaOH溶液调节PH为9.5-10.0,边 搅拌边加，避免过碱引起蛋白质变性。于4℃条件 下静置过夜，至结晶析出。 • 结晶过滤或分离：用滤纸或尼龙布过滤，或用离 心机离心10min，得到溶菌酶结晶。 • 结晶洗涤：用丙酮将溶菌酶结晶洗涤数次（一般3 次即可）。 • 干燥：将溶菌酶结晶在常温或（50-60） ℃条件 下干燥制成成品，水分含量质量分数约为（2-3） %。
溶 菌 酶
溶菌酶
• 溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）， 由 129个氨基酸组成的一种无毒、无副作用，又具有一定的 溶菌作用碱性球蛋白，可溶于水和酸性溶液，而且耐热 （pH4～7的范围内，在100℃处理1min仍有近100%的活 力，但在碱性环境条件下，酶稳定性较差 ），耐干燥，在 室温下可长期存放，性质稳定。溶菌酶存在于人体的各个 组织中，如心、脏、脾、肺和肾等，其中以肾和肺中含量 最高。鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、 尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量 最为丰富。植物中有溶菌酶， 目前已从木瓜、无花果、芜 菁、大麦等植物中分离出溶菌酶，其分子量较大，约为 24000～29100。
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溶菌酶的应用
• 医药方面
溶菌酶作为一种存在于人体正常体液及组织中的 非特异性免疫因素，具有多种药理作用，它具有 抗菌、抗病毒、抗肿瘤等功效，目前日本已生产 出医用溶菌酶，其适应症为出血、血尿、血痰和 鼻炎等。
食品和发酵工业
• 溶菌酶是一种无毒、无副作用的蛋白质，又 具有一定的溶菌作用，因此可用作食品防腐 剂。现已广泛应用于水产品、肉食品、蛋糕、 清酒、料酒及饮料中的防腐；还可以添入乳 粉中，使牛乳人乳化，以抑制肠道中腐败微 生物的生存，同时直接或间接地促进肠道中 双歧杆菌的增殖。此外，还能利用溶菌酶生 产酵母浸膏和核酸类调味料等。
工艺流程
原料 → 清洗 → 去蛋壳 → 分离蛋清 → 搅拌 → 过滤 → 加盐 → 调节pH值 → 结晶 → 干燥 → 成品 → 包装
实验步骤
• 选择新鲜鸡蛋，蛋清的pH值不能低于8.0，否则不 能用。 • 清洗:用水洗掉蛋壳表面的不洁之物。 • 将鸡蛋的两端各敲一个小洞，使蛋清流出。 • 用搅拌机搅拌，将蛋清搅拌稠度均匀即可，以不 引起泡沫为宜，防止由于起泡引起蛋白质的泡沫 变性，而影响溶菌酶活性及产率。 • 过滤：用双层纱布将稠度均匀的蛋清过滤，滤除 蛋清溶液中的脐带块及蛋壳等。 • 加盐：按50:1的比例（NaCl:蛋清液），向蛋清液 中加入NaCl细粉，边搅拌边加入促使NaCl细粉及 时溶解，以避免NaCl沉于容器底部，而因局部浓 度过高而产生大量的白色沉淀
细胞工程
• 溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能，以 此酶处理细菌可得到原生质体，因此，溶菌 酶是基因工程、细胞工程中细胞融合操作必 不可少的工具酶。
鸡蛋清中提取溶茵酶
• 材料 原料：鸡蛋、NaOH、NaCl、丙酮 仪器与设备：搅拌器（200-300r/min）,离 心机（4000r/min），抽滤机