雌二醇霜剂透皮吸收示踪研究.

雌二醇霜剂透皮吸收示踪研究

摘要用3H-E

2作示踪剂，对雌二醇(E

2

)霜剂的透皮吸收速率和生

物利用度进行了研究。霜剂小鼠离体皮肤渗透速率为3.80ng．cm－2．h－1；小鼠在

体内透皮吸收速率，6h内平均为4.72 ng．cm－2．h－1；与大白鼠静注给药相比，霜剂经皮给药的生物利用度为25.5%。

关键词雌二醇; 3H-雌二醇; 霜剂; 透皮吸收; 生物利用度

中分类号：Q5-3 文献标识码：A

文章编号：1005-8915(2000)03-0169-03

Study on Percutaneous Absorption and Bioavailabitity of

Estradiol (E2) Cream

Shen Zilong，Wang Xiaofei，Shen Yanning，Wang Hong （Department of Biotechnic Resasearch Center，China Pharmaceutical

University)

Abstract The percutaneos absorption and bioavailability of E

2

cream

were studied by 3H-E

2

as a tracer.Experiment results have showed that

the average permeability(mg．cm－2．h－1)of E

2

cream through skin in mice in vitro is 3.80 and the average rate of percutaneoues absorption of

E

2

cream in vivo in mice is 4.72ng．cm－2．h－1.The bioavailability of

E

2

cream in rats is 25.5%.

Key Words Estradiol(E

2

)，3H-Estradiol， cream， Percutaneous absorption，Bioavailability

雌激素替代疗法已用于因雌激素缺乏而引起疾病治疗，而且已成为首选药物［1～3］。雌激素可通过注射，口服和经皮给药途径进入体内，然而，前两种途径由于一时血浓过高(峰谷效应)，肝脏灭活(首过效应)，而致副作用，且疗效欠佳，因此经皮给药是较好的选择。国内外许多研究表明雌激素容易透过皮肤，使体内浓度达到正常值，而且可避免口服肝脏首过效应的副作用，用药方

便，可随时中断用药，疗效好。E

2

(雌二醇)霜为每日给药的经皮给药制剂，较

之已生产上市的周效贴片，具有与正常人自身分泌激素相近的模拟性，即每日晨涂擦后产生的吸收峰与人体分泌雌激素的时间接近，从而避免了外源性雌激素恒释吸收而可能产生对人体自身分泌雌激素能力的负反馈抑制的副作用。

本文用3H-雌二醇作为示踪剂，对霜剂中雌二醇透皮吸收和霜剂的生物利用度进行了研究，为临床应用研究提供必要的数据。

1 实验材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物昆明种小白鼠，雌性，体重20±2g;SD大白鼠，雌性，体重200～250g。

1.1.2 试剂和仪器Estradiol，由浙江省仙居制药厂提供；3H-E

2

，由中国原子能科学院提供，放射性比活性为1.63×109Bq/mg，放射化学纯度为95%；雌二醇霜由中国药科大学生物技术中心制备(含1%Azone促渗剂)；液体闪烁计数器为美国贝克曼公司LS-5801型。

1.2 实验方法

1.2.1 小鼠离体皮肤透过速率测定［4］取健康小鼠6只，剪净腹部皮肤上的毛，面积约为5cm2，处死动物，取皮，刮去皮下脂肪和肌肉，剪成Φ2cm的圆

形皮肤一片，置于流通扩散室中，皮肤上涂上E

2霜，剂量30mg(含有3H-E

2

3.27×104Bq，E

2

0.300μg)，活性面积3.14cm2；接收液为生理盐水加10% PEG400混合液；流速为6ml．h－1；实验共进行8h。

1.2.2 E

2

霜在体内透皮吸收［5］

1.2.2.1 小鼠iv. 3H- E

2

尿、粪排泄分数的测定取健康雌性小鼠5只，体

重15～20g，尾静脉注射3H-E

2溶液0.5ml，剂量0.30μg E

2

/只。给药后小鼠置

代谢笼中，自由摄食，饮水，收集72h内尿液与粪便。测定并记录尿液体积，

粪便重量。取40μl尿液，0.2g粪便置于闪烁瓶中，加高氯酸和过氧化氢各2滴，于70～80℃水溶液中消化，脱色，加适量乙二醇乙醚作助溶剂并加3ml闪烁液，配成均相样品，用液体闪烁计数器测定。

1.2.2.2 E

2

霜在体透皮速率测定取健康雌性小鼠5只，体重15～20g，前背

部皮肤去毛，面积4cm2，在去毛皮肤上涂30 mg含3H-E

2

霜剂，剂量0.30μg

E

2

/只。用纱布和橡皮膏固定，给药后小鼠置代谢笼中，自由摄食、饮水。给药6h后取下纱布和橡皮膏，擦去皮肤上残余药膏，在代谢笼中喂养72h，收集全过程中尿样，测量体积。取尿样400μl，用高氯酸和过氧化氢消化、脱色，液体闪烁计数器测定放射性活性。计算出经皮给药的尿排泄总放射性活性，以此

值除以实验1.2.3.1中iv后排泄分数(0.815)即可得到E

2霜剂中E

2

透皮吸收进

入体内的总量，再除以给药时间和面积，即可计算出E

2霜剂中E

2

透皮速率。

1.2.3 E

2

霜生物利用度测定

1.2.3.1 血液中3H-E

2

放射性活性百分含量［6］

大鼠经皮给药血液中3H-E

2

放射性活性百分含量测定：取雌性大鼠3只，

剪净背部毛，面积9cm2。将含3H-E

2

的霜涂于去毛皮肤上，用纱布和橡皮膏固

定，于给药后1 h，4 h和8 h分别摘眼球采血约1ml，离心得血清，以E

2

标准品对照，标准品浓度为0.1 μg/ml。以苯-丙酮（4∶1）溶液为展开剂，在硅

胶纸上对各采样点进行层析，分离E

2

与其代谢物，分别测定各段放射性活性。

大鼠静脉注射3H-E

2血液中3H-E

2

放射性活性测定：取雌性大鼠3只，乙醚

麻醉固定，股静脉注射3H-E

2

溶液，于给药后1 h，4 h和8 h分别摘眼球采血

适量，离心得血清，按1.2.3.1方法测得大鼠静脉注射E

2

后不同时间血清中

3H-E

2

在总放射性活性中百分含量。

1.2.3.2 E

2

霜透皮制剂生物利用度雌性大鼠12只，体重150～200 g，随机

分为2组，每组6只。一组股静脉给药，剂量：中剂量，3.82μg E

2

/kgBw。另

一组经皮给药，中剂量：3.82μg E

2

/kgBw，在大鼠前背部剪净毛，面积为

8cm2，在去毛皮肤上涂以含3H-E

2

霜并用纱布和橡皮膏固定，于给药后0.5h，1h，2h，4h，6h，8h，12h，24h和48h股动脉或割尾采血100μl于闪烁瓶