谷物不溶性膳食纤维测定方法研究

2. 6 关于磷酸盐缓冲溶液的配制
原 GB/ T 9822- 1988 以及 AACC 32- 20( 1982) 和 AACC 32- 20( 1999) 对磷酸盐缓冲溶液的配制, 只 是说明用 0. 1 mol/ L 磷酸氢二钠( Na2HPO4 ) 和 0. 1 mol/ L 的磷酸二氢钠( N aH2 PO4) 溶液配制 0. 1 mol/ L 的磷酸缓冲液, 没有具体指出用 0. 1 mol/ L 的磷酸氢 二钠 ( N a2 H 2 PO4 ) 和 0. 1 mol/ L 的 磷 酸 二 氢 钠 ( N aH2 PO) 4 溶液 的实际 体积 毫升 数。参考 GB/ T 5009. 88- 2003 5 的规 定, 具体确定了用 0. 1 mol/ L 的磷酸氢二钠( N a2H PO4) 溶液 38. 7 mL 和 0. 1 mol/ L 的磷酸二氢钠( N aH 2 PO4 ) 溶液 61. 3 mL, 配制成 0. 1 mol/ L 的磷酸盐缓冲液( pH 为 7. 0) 。
基金项目: 20050484- T - 449 国家标准修订研究内容之一
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粮食 储藏
2008( 4)
mL 乙二醇- 乙醚溶入 700 mL 热水中, 然后加入到 第一种溶液中。将 4. 56 g 磷酸氢二钠溶于 150 mL 热水中, 再加入到第一种溶液中。 1. 2. 9 磷酸盐缓冲液溶液的配制 用 0. 1 mol/ L 的 磷酸氢二钠( N a2H PO4) 溶液 38. 7 mL 和 0. 1 mol/ L 的磷酸二氢钠( N aH2 PO4) 溶液 61. 3 mL, 配制成 0. 1 mol/ L 的磷酸盐缓冲液( pH 为 7. 0) 。 1. 2. 10 2. 5% - 淀粉酶溶液( W/ V) 称取2. 5 g - 淀粉酶( 北京产, 酶活力单位不小于 4000) 。溶于 100 mL pH7. 0 的磷酸盐缓冲液溶液中, 离心, 过滤, 滤过的酶溶液备用。
关键词 谷物 不溶性膳食纤维 测定方法
近年来在世界范围内掀起了一股功能性食品的 热潮, 功能性食品是食品科学研究的前沿, 膳食纤维 作为功能性食品的重要基料已成为研究的热点。研 究表明, 膳食纤维能有效地预防结肠癌、便秘、冠心 病、糖尿病等疾病的发生, 与蛋白质、脂肪、可利用碳 水化合物、维生素、矿物质的消化吸收有关 1 。
2. 7 谷物各主要品种不溶性膳食纤维含量的测定 ( 20~ 30 目)
依照 AACC 32- 20( 1999) 规定, 我们对谷物各主 要品种的不溶性膳食纤维含量进行了测定( 20 目~ 30 目) , 结果如表 7( n= 3) 。
纤维。
2. 2 谷物样品的粉碎细度 按 AACC32- 20( 1999) 规定, 谷物的粉碎细度为
20~ 30 目( 粉碎机筛孔 1 mm) 。实验中以调温电炉 加热作为测定仪器, 以小麦粉作为测定材料, 将小麦 粉碎, 全部通过规定标准筛作为小麦粉的粉碎目数, 测定不同粉碎目数的小麦粉的不溶性膳食纤维含量, 结果见表 2。
表 2 粉碎细度对小麦粉不溶性膳食纤维含量测 定的影 响
目数 < 20
20 30 40 50 60
过滤时间( min) 20 40 80 90 90 100
IDF( % ) 11. 31 10. 23 9. 77 9. 16 8. 92 8. 80
从表 2 看出, 谷物样品的粉碎细度对不溶性膳食 纤维含量的测定影响较大, 粉碎粒度越细, 不溶性膳 食纤维含量的测定值越低, 且过滤越困难, 过滤时间 越久。谷物样品的粉碎细度以 20 目 ~ 30 目为 宜。 这也符合 AACC 32- 20( 1999) 的规定。
第 37 卷
谷物不溶性膳食纤维测定方法研究
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谷物化学与品质分析
谷物不溶性膳食纤维测定方法研究
程建华 熊升伟 姜 涛 王德谦 ( 国家粮食局成都粮食储藏科学研究所 610031)
摘 要 修改采用 AACC32- 20( 1999) 不溶性膳食纤维测定方法 , 对原国家标准 GB/ T 9822- 1988 谷物不溶性膳食纤维测定方法 进行了研究和讨论分析。结果表明, 纤维测定仪器 可以作为谷物不溶性膳食纤维的测定仪器, 样品的粉碎粒度为 20- 30 目, - 淀粉酶浓度为 2. 5% ( W/ V) , 取消了试剂中的十氢萘, 样品不溶性膳食纤维测定值的相对误差小于 10% 。
2. 3 - 淀粉酶溶液浓度
原 GB/ T 9822- 1988 中 - 淀粉酶溶液配制浓 度经计算为 0. 005% ( W/ V) , 而 AACC 32- 20( 1982) 和 AACC 32- 20( 1999) 都规定 - 淀粉酶溶液配制 浓度为 2. 5% 。为此, 以小麦粉( 20 目) 为材料验证如 下( n= 6) 。
果如表 1。
表 1 测定设备对玉米不溶性膳食纤维测定的影响
测定值
调温电炉加热 纤维测定仪器
过滤时间 ( min) > 90 80
测定值 (%) 8. 41 8. 46
标准偏差 (%) 0. 15 0. 07
由表 1 看出, 按 AACC 32- 20( 1999) 规定的方法 进行玉米不溶性膳食纤维测定, 用调温电炉加热设备 和用 Tecator 1010 纤维测定仪器测定结果一致, Teca t or 1010 纤维测定仪器可以用于测定谷物不溶性膳食
1. 3 实验步骤和方法
1. 3. 1 测定方法按 AACC32- 20( 1999) 规定操作。 1. 3. 2 仪器设备对玉米不溶性膳食纤维测定影响研 究。 1. 3. 3 谷物样品的粉碎细度对小麦粉的不溶性膳食 纤维含量测定的影响研究。 1. 3. 4 - 淀粉酶溶液浓度对小麦粉的不溶性膳食 纤维含量测定的影响研究。 1. 3. 5 十氢萘对谷物不溶性膳食纤维含量测定的影 响。 1. 3. 6 样品精密度测定研究。
2. 5 方法精密度测定研究
为了研究测定方法的精密度, 我们以微晶纤维素
作材料添加到谷物样品中, 测定微晶纤维素的回收率
来进行。
首先, 我们以微晶纤维素作样品材料, 不用谷物
样品, 用调温电炉加热法和用 Tecator 1010 纤维测定
仪器, 按 AACC32- 20( 1999) 规定的方法测定纯微晶
纤维素的回收率, 结果见表 5。
表 5 纯微晶纤维素回收率测定
( 单位: % )
调温电炉 98. 9
Tecartor 1010 97. 7
由表 5 测定结果可知, 微晶纤维素可以作为试验 材料添加到谷物样品中测定其回收率, 可以达到研究
方法精密度的目的。
进一 步, 我 们 以 玉 米 粉 ( 30 目 ) 为 材 料, 按 AACC32- 20( 1999) 规定的方法进行玉米不溶性膳食
纤维精密度测定( n= 6) , 同时对比定量添加微晶纤维 素测定其回收率, 结果如表 6。
表 6 精密度和回收率测定
( 单位: % )
测定值
平均值 相对极差
8. 40
8. 57
8. 38
IDF
8. 50
8. 45
8. 48
来自百度文库
8. 46 5. 64
回收率 99. 3 100. 4
101. 2 99. 9
2. 4 十氢萘对谷物不溶性膳食纤维含量测定的影响
AACC 32- 20( 1999) 取消了十氢萘作为加热过
第 37 卷
谷物不溶性膳食纤维测定方法研究
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程中的消泡剂。为此, 实验中以小麦粉( 20 目) 为材 料, 对 AACC32- 20( 1982) 进行了验证( n= 3) , 表 4 为实验结果。
2 结果和讨论
2. 1 仪器设备
实验中增加了纤维素测定仪器即国内外生产的
符合测定原理, 且测定结果一致的仪器作为测定仪 器。以玉米( 30 目) 为材料, 用调温电炉加热法和用 Tecator 1010 纤维测定仪器, 按 AACC 32- 20( 1999) 规定的方法进行玉米不溶性膳食纤维测定( n= 6) , 结
99. 1 100. 2
100. 1
2. 10
由表 6 得知, 玉米粉不溶性膳食纤维密度测定( n = 6) 值在 8. 40% ~ 8. 57% , 平均值 8. 46% , 相对极差 5. 64% , 符合在重复条件下获得的两次独立测定结果 的绝对差值不得超过算术平均值的 10% 的规定。定
量添加微晶纤维素其回收率在 99. 1% ~ 101. 2% , 平 均值 100. 1% , 相对极并 2. 10% , 符合回收率测定要 求。
由于技术的发展, 检测仪器化的普及和运用, 使 用先进可靠的仪器进行检测势必已成方向, 因此, 在 研究中力求反应这一现实。
在原国家标准 GB/ T 9822- 1988 中, 谷物样品的 粉碎细度规定为 20~ 60 目。而 AACC32- 20( 1982) 和( 1999) 规定谷物样品的粉碎粒度为 20 目~ 30 目。 因此, 有必要对此问题进行验证研究。
表 3 - 淀粉酶溶液浓度对测定影响
测定值
0. 005% 2. 5%
过滤时间 ( min) 30 30
IDF ( %) 12. 22 10. 44
标准偏差 ( %) 0. 11 0. 08
表 3 说明, - 淀粉酶溶液浓度对谷物不溶性膳 食纤维含量的测定影响较大, 结合表 2、表 4 的测定数 据, 故在实验中恢复采用 2. 5% ( W/ V) 的 - 淀粉酶 溶液浓度。
十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠( EDTA ) 、 四硼酸钠( 硼砂) ( N a2 B4 O7 . 10H2 O) 、磷酸氢二钠、乙 二醇 乙醚、磷酸、磷酸二氢钠。
以上试剂均为分析纯级。 1. 2. 8 中性洗涤剂的制备 将 18. 61 g 乙二胺四乙 酸钠( EDTA ) 和 6. 81 g 四硼酸钠( 硼砂) 混合, 加入 150 mL 水加热溶解, 另将 30 g 十二烷基硫酸钠和 10
不溶性膳食纤维的测定采用中性洗涤剂处理, 残 基利用 - 淀粉酶水解去除水溶性碳水化合物和蛋 白质而得以测定 2, 3 。
原 谷物不溶性 膳食纤维 测定方法 国家 标准 GB/ T 9822- 1988 4, 5 , 对 应 于 AA CC32- 20( 1982) 不溶性膳食纤维测定方法 ( 英文版) 与 AACC3220( 1982) 的一致性程度为非等效。而 AACC32- 20 ( 1999) 对 AACC32- 20( 1982) 进行了修改, 主要是取 消了试剂中的十氢萘作为消泡剂和部分编辑性的修 改。
表 4 十氢萘对不溶性膳食纤维含量测定的影响
测定值
加入 2 mL 不加入
过滤时间 ( min) 60 40
IDF (%) 10. 45 10. 45
标准偏差 (%) 0. 05 0. 05
从表 4 看出, 对于 AACC 32- 20, 加入或不加入 十氢萘, 对谷物不溶性膳食纤维含量测定均无影响, 但加入十氢萘后, AACC 32- 20( 1982) 在过滤时, 过 滤时间明显延长。因此 AACC 32- 20( 1999) 中取消 了十氢萘作为加热过程中的消泡剂。
1 材料和方法
1. 1 仪器设备 1. 1. 1 分析天平: 1/ 10000 1. 1. 2 Tecat or 1010 纤维测定仪器 1. 1. 3 马福炉( 500 ~ 600 ) 1. 1. 4 提取装置: 在可调节温度的电加热板上, 安装 有 300 mL 烧瓶, 其上安有冷凝装置。该电加热板能 将 200 mL、25 的水在 5 min~ 10 min 内加热至沸。 1. 1. 5 电烘箱: 可控制温度 110 ~ 130 。 1. 1. 6 电热恒温培养箱: 可控制温度 37 2 。 1. 1. 7 粉碎机: 粉碎细度为 20 目~ 30 目( 粉碎机筛 孔 1 mm) 。 1. 2 主要试剂
在原国家标准 GB/ T 9822- 1988 中, - 淀粉酶 浓度 经 计 算 为 0. 005% ( W/ V ) , 而 AACC32 - 20
( 1982) 和 AACC32- 20 ( 1999) 都规定 - 淀粉酶溶 液配制浓度为 2. 5% ( W/ V) , 因此, 也有必要对此问 题进行验证研究。