P2Y12受体抑制剂对骨癌痛大鼠脊髓p38MAPK信号通路及炎性因子的影响

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鞘内注射氢水对病理性疼痛大鼠脊髓背角p38MAPK和TNF-α影响的实验研究

鞘内注射氢水对病理性疼痛大鼠脊髓背角p38MAPK和TNF-α影响的实验研究陈巍;陈前波;严晓娣;周双琼;袁红斌;孙彭龄【期刊名称】《临床军医杂志》【年(卷),期】2013(0)11【摘要】目的探讨在坐骨神经窄缩引起的神经病理性疼痛模型（ccI）中鞘内注射氢水的镇痛效果以及对脊髓背角p38MAPK、TNF-α的影响。

方法将30只SD大鼠随机均分为三组：假手术组、CCI对照组（予以鞘内注射生理盐水）和实验组（予以鞘内注射氢水）。

于复制CCI术前半小时以及术后第1～3天鞘内注射药物，剂量为0．1ml／kg。

于复制CCI术前2h以及术后第4～10天测定大鼠右足机械痛阈值；术后第10天检测损伤侧脊髓背角p38MAPK、TNF—α mRNA水平。

结果与假手术组比较，CCl对照组和实验组机械痛阈值显著降低（P〈0．01）。

CCI 对照组与实验组比较CCI术后第4～6天两组机械痛阈值有统计学差异（P 〈0．05），术后第7～10天两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。

与CCI对照组比较，实验组在CCI术后第10天损伤侧脊髓背角TNF—α 及p38MAPK水平表达降低。

结论鞘内注射氢水可降低CCI动物模型损伤侧脊髓背角的p38MAPK和TNF—α水平，从而减轻CCI疼痛模型术后神经病理性痛。

【总页数】4页(P1101-1104)【关键词】氢水;p38MAPK;活性氧;神经病理性疼痛模型;肿瘤坏死因子-α【作者】陈巍;陈前波;严晓娣;周双琼;袁红斌;孙彭龄【作者单位】解放军第二军医大学附属长征医院麻醉科【正文语种】中文【中图分类】R441.1【相关文献】1.鞘内注射米诺环素对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角表达CD55的影响 [J], 朱海娟;王金保2.鞘内注射KN-93对神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏和脊髓背角pCREB的影响[J], 王迎斌;王书宝;谢建琴;梁铭;石翊飒3.鞘内注射SB203580对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角环氧化酶-2表达的影响 [J], 王刚;黄长盛;王懿春;郭曲练;蒋海鹰;文继舫4.鞘内注射GDNF对神经病理性痛大鼠脊髓背角p38MAPK蛋白表达的影响 [J], 贾东林;吴新民;郭向阳;张利萍;郭建荣5.电针对神经病理性疼痛大鼠损伤处脊髓背角形态及p38MAPK蛋白表达的影响[J], 周晔; 吴巧云; 屠文展; 周科成; 楼新法; 杨观虎; 蒋松鹤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

通过p38通路对肿瘤的抑制途径

• MEK（MAPK/ ERK kinase）：为MAPKKs的别名，通过使酪氨酸和丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化激活ERK蛋白激酶。 • OIS（癌基因诱导的衰老器）：在正常细胞中一种被一些癌基因作为抗肿瘤防御反应诱导的过早衰老的形式。 • MKK4：使p38和JNK激酶通过酪氨酸和丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化激活。 • p27kip1：一个27 kDa的蛋白，蛋白激酶抑制蛋白1（标 kip1）。它通过抑制蛋白激酶活性介导细胞周期的逮捕。 • Wip1（野生型p53基因诱导磷酸酶1）：一个多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶参与DNA损伤反应，基因诱导的衰老反应和肿瘤。
• 与MKK无关的p38活化也已经被观察到。诱导后，p38的活性下降是通过调节双特异性蛋白激酶磷酸酶-1，- 4或- 5，或其他如蛋白磷酸酶2C型和野生型p53基因诱导磷酸酶1 （Wip1）而实现的。许多p38的基板，包括丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，转录因子和细胞周期调控，已被确定为p38的功能调解员。 • 在这里，我们回顾了p38通路在肿瘤抑制方面的作用。由于以前的资料已讨论了p38对细胞周期调控和增殖的作用，我们专注于最近发现的p38通路在参与细胞调控过程中的作用，直接有助于抑制肿瘤，包括原癌基因诱导的衰老器（OIS），复制性衰老，接触抑制和DNA损伤反应（图1）。 • 而p38在促进血管生成和肿瘤转移中的作用将不予讨论。
The pathways to tumor suppression via route p38
通过p38通路对肿瘤抑制途径
王晓娟
名词解释
• DMBA（7,12 - dimethylben zanthracene）：一种环境诱变剂，通过化石燃料的完全燃烧形成的。这是一种小鼠肿瘤致癌模型常用物质。 • TPA（12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate）：一种蛋白激酶C通路激活剂。这是一种常用的小鼠肿瘤致癌模型的启动者。 • ERK（Extracellular signal – regulated protein kinase）：三大蛋白激酶之一。 • ATM（共济失调毛细血管扩张症突变）和ATR（共济失调毛细血管扩张症突变）和Rad3：丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，激活检查点信号毒性反应的压力，从而可以用作DNA 损伤感应器。

雷公藤乙素对糖尿病肾病大鼠肾组织p-p38MAPK TNF-α及IL-1β表达的影响

中国中医药科技2021年

11月第28卷第6期Nov. 2021 Vol. 28 No. 6

・

897・

雷公藤乙素对糖尿病肾病大鼠肾组织p-p38MAPI<

TNF-a及IL-10表达的影响

杨朔，胡俊华，王亚娟，王吉娜，胡蕾

(舟山市中医院肾内科•浙江舟山316000)

摘要目的:探究雷公藤乙素对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织磷酸化丝裂原活化蛋白激酶

p38(p -

p38MAPK)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)及白介素-lp(IL - lp)的影响。方法：SD雄性大鼠30只随机分为正常对照组、模型组、雷公藤乙素组，各组均为10只

。采用链状佐菌素(STZ)注射方法制作大鼠糖

尿病肾病模型，模型成功后，雷公藤乙素组以雷公藤乙素［200^(kg • d)］灌胃，正常对照组

、模型组予

等容积生理盐水灌胃给药，连续给药8周。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血糖、肌肝、尿素氮水平；

光

镜观察肾组织病理形态变化，免疫组化检测各组大鼠肾组织TNF - a、IL-13表达,Western Blot检测肾组织p - p38MAPK蛋白表达。结果:雷公藤乙素组大鼠肾功能指标及蛋白尿较模型组均有明显好转；肾小

球系膜细胞增生及肾小管水肿均减轻。TNF -a、IL - 1|3在正常对照组肾组织表达极少；TNF - a、IL-lp

在模型组表达显著增强；雷公藤乙素组TNF - a、IL - ip表达明显低于模型组。模型组肾组织p -

p38MAPK表达与正常对照组比较显著增强，雷公藤乙素组较模型组表达减弱。结论：雷公藤乙素能明显改善糖尿病肾病大鼠的肾损伤，其机制可能与减少炎症因子TNF-a.IL-lp的表达，

下调肾组织

p38MAPK的蛋白表达有关。

关键词雷公藤乙素;糖尿病肾病;病理学；p-p38MAPK

；TNF-a；IL-13

；

大鼠

Effects of Triptolide on p - p38MAPK,TNF - a and

大鼠脊髓小胶质细胞p38 MAPK介导rrIL-1β 诱导的机械痛敏

大鼠脊髓小胶质细胞p38 MAPK介导rrIL-1β 诱导的机械痛敏魏绪红;杨涛;宫庆娟;信文君;周丽君;刘先国【期刊名称】《中山大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2010(031)003【摘要】[目的]观察大鼠脊髓背角丝裂原活化蛋白激酶家族中的p38(p38 MAPK)在坐骨神经周围给予重组大鼠白细胞介素-1β(rrIL-1β)引起的病理性疼痛中的作用.[方法]通过检测大鼠50%机械刺激撤足阈值的变化观察坐骨神经周围给予rrIL-1β是否引起病理性疼痛,免疫组织化学观察给予rrIL-1β后1,7 d脊髓背角p38及小胶质细胞激活的情况.[结果]0.1和1μg/L rrIL-1β可引起大鼠双侧后爪机械刺激痛阈下降,持续50 d左右.此外,1μg//L rrIL-1β可引起给药同侧腰5脊髓背角p38 MAPK和小胶质细胞明显激活.磷酸化p38 MAPK与小胶质细胞标记物Ⅲ型补体受体(OX-42)呈现明显共存.预先给予p38抑制剂可防止rrIL-1β引起机械痛敏.[结论]大鼠脊髓背角小胶质细胞p38 MAPK信号途径的激活介导坐骨神经周围给予rrIL-1β引起的机械痛敏.【总页数】5页(P327-331)【作者】魏绪红;杨涛;宫庆娟;信文君;周丽君;刘先国【作者单位】中山大学,中山医学院生理学教研室//疼痛研究中心,广东,广州,510089;中山大学,附属第二医院麻醉科,广东,广州,510120;中山大学,中山医学院生理学教研室//疼痛研究中心,广东,广州,510089;中山大学,中山医学院生理学教研室//疼痛研究中心,广东,广州,510089;中山大学,中山医学院生理学教研室//疼痛研究中心,广东,广州,510089;中山大学,中山医学院生理学教研室//疼痛研究中心,广东,广州,510089【正文语种】中文【中图分类】R338【相关文献】1.脊髓背角胶质细胞及p38 MAPK参与介导髓核致炎大鼠神经根痛 [J], 王益敏;易增兴;林世清;张嘉明;蔡哲;贺秋兰;魏明;孙来保;邹学农2.脊髓TLR4/p38MAPK级联活化介导持续性术后痛时TNF-α的增加 [J], 胡兴国;阳红艳;文锟;张云翔;曾因明3.P物质通过p38MAPK途径激活小胶质细胞参与大鼠热痛敏感的形成 [J], 尹艺儒;米鹏霞;张宇;张策;赵欣4.脊髓小胶质细胞SFKs介导rrTNF诱导的机械痛敏 [J], 魏绪红;杨涛;刘翠翠;宫庆娟;信文君;周丽君;刘先国5.脊髓灰质后角小胶质细胞p38MAPK通路激活与P2X7受体活化在介导硼替佐米诱导的神经病理性疼痛中的关系 [J], 郭艳;王震;田广平;李振中;刘真因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

利塞膦酸钠对神经病理性疼痛大鼠脊髓胶质细胞活化的影响及镇痛作用

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ（Ｒｉｓ）ｏｎｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎａｎｄｇｌｉａｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｒａｔｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｏｐｅｒａｔｅｄｉｎＯｃｔｏｂｅｒ２０１６ｔｏＦｅｂｒｕａｒｙ２０１８ａｔ
【关键词】二磷酸盐类；脊髓；小胶质细胞；ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶类；神经痛
ＥｆｆｅｃｔｏｆｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅｏｎｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｇｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｎｒａｔｓＬｉａｎＹｉｗｅｎ＋，ＢｕＨｕｉｌｉａｎ，Ｘｕｔｉｔｉａｎ，ＭａＭｉｎｙｕ．’ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｉｎＭａｎａｇｅｍｅｎｔ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ，ＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ４５００５２，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＭａＭｉｎｙｕ，Ｅｍａｉｌ：ｍｍｉｎｙｕ＠１２６．ｃｏｍ
塞旦痿厦堂苤盍２Ｑ１８生§目筮１４鲞筮３甥￡４也￡！ｉｎ』，血塑２Ｑ１８，ｙＱ！：１４：盥！：３
利塞膦酸钠对神经病理性疼痛大鼠脊髓胶质细胞活化的影响及镇痛作用
连一闻卜慧莲许继田马民玉
【摘要】目的探讨利塞膦酸钠（ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ，Ｒ１Ｓ）对大鼠神经病理性疼痛及脊髓背角胶质细胞活化的影响。方法本研究在２０１６年１０月至２０１８年２月于郑州大学第一附属医院进行，以脊神经结扎（ＳＮＬ）模型为基础将雄性ＳＤ大鼠７２只随机分为６组：脊神经结扎组即手术组（ＳＮＬ组），利塞膦酸钠（ＲＩＳ）低剂量治疗组【Ｒ（Ｌ）组］、中剂量治疗组［Ｒ（Ｍ）组］、高剂量治疗组【Ｒ（Ｈ）组】，假手术组（Ｓｈａｍ组）及对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ组）。皮下注射ＲＩＳ各组剂量分别为０．１、０．５、１ｍｇ／ｋｇ，分别在术后０～１４ｄ时测定各组大鼠的机械缩足反应（ＭＷＴ）阈值，运用免疫组织荧光染色检测各组０Ｘ４２、ＧＦＡＰ及ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白的表达情况，采用蛋白印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）法检测各组ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ表达的变化。结果与Ｓｈａｍ组相比，ＳＮＬ组、Ｒ（Ｌ）组、Ｒ（Ｍ）组及Ｒ（Ｈ）组术后各时点ＭＷＴ水平均下调（Ｐ＜０．０５），Ｒ（Ｌ）组、Ｒ（Ｍ）组及Ｒ（Ｈ）组在术后５、７、１０、１４ｄ时各指标均优于ＳＮＬ组（Ｐ＜０．０５）。在术后７ｄ时，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示，与ｓｈａｍ组比较，ＳＮＬ组ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ表达水平升高（Ｐ＜Ｏ．０５）；与ＳＮＬ组相比，Ｒ（Ｍ）组ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ表达水平降低（Ｐ＜ｏ．０５）；组织免疫荧光染色结果显示，与Ｓｈａｍ组相比，ＳＮＬ组及Ｒ（Ｍ）组脊髓背角ＯＸ４２、ＧＦＡＰ及ｐ—ｐ３８ＭＡＰＫ表达水平升高（Ｐ＜０．０５）；与ＳＮＬ组比较，０Ｘ４２及ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ标志蛋白表达水平降低（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论皮下注射利塞膦酸钠可缓解大鼠神经结扎所致神经病理性疼痛，其机制可能是通过抑制ｐ３８ＭＡＰＫ通路激活进而抑制脊髓背角小胶质细胞活化发挥镇痛作用。

P2Y12受体拮抗剂

P2Y12受体拮抗剂是一类作用于血小板P2Y12受体, 对二磷酸腺苷引起的血小板聚集起抑制作用的药物, 临床上主要用于预防和治疗心血管疾病的血栓事件.P2Y12受体拮抗剂与阿司匹林联用的双重抗血小板治疗方案, 是各种指南推荐、临床上经常使用的心血管病抗栓治疗方案.目前, 临床上可供选用的P2Y12受体拮抗剂有氯吡格雷、普拉格雷和替格瑞洛, 这些药物各自有哪些作用特点, 疗效和平安性又有何不同？氯吡格雷氯吡格雷是第二代P2Y12受体拮抗剂（注：第一代P2Y12受体拮抗剂为1979年上市的噻氯匹定, 其副作用较多, 在临床应用中逐渐被氯吡格雷所取代）, 其在化学结构上属噻吩并吡啶类化合物, 是前体药物, 需要在肝脏中通过细胞色素 P450（CYP 450）酶代谢成为活性代谢物后, 才会不成逆地抑制P2Y12受体, 抑制血小板的聚集反应.因此, 氯吡格雷抗血小板活性的发挥存在延迟现象, 即起效时间比力长.氯吡格雷在临床应用中存在一些缺陷, 包括：消除半衰期较长, 个体不同较年夜, 部份患者服用该药后未发生抗血小板效果即“氯吡格雷抵当”, 与质子泵抑制剂（PPI）合用时可能会升高不良反应的发生率.目前, 已经明确CYP 2C19是与氯吡格雷抵当相关的代谢酶之一, 美国食品与药物管理局（FDA ）已增加了氯吡格雷的黑框警告, 建议临床医生选用氯吡格雷前对患者进行基因检测, 对弱代谢患者应增加剂量.普拉格雷普拉格雷是第三代P2Y12受体拮抗剂, 同氯吡格雷相同, 此药也是噻吩并吡啶类化合物和前体药物, 需要在体内转化为其活性代谢产物后, 才会不成逆地抑制P2Y12受体从而发挥作用.研究显示, 与氯吡格雷的标准剂量或更年夜剂量相比, 普拉格雷对血小板的抑制作用更快、更继续、更强.同时, 由于普拉格雷的强抑制血小板聚集的作用, 也增加了其出血风险.替格瑞洛与噻吩并吡啶类药物（氯吡格雷和普拉格雷）的化学结构分类分歧, 替格瑞洛是一种环戊烷三唑并吡啶类的新型抗血小板药物, 故之前的中文名“替卡格雷”现已更换为“替格瑞洛”.与氯吡格雷和普拉格雷相比, 替格瑞洛是第一个可以口服却不需要生物转化就可直接发挥药效且可与P2Y12受体可逆结合的抗血小板药物.因其与受体的结合是可逆性的, 故一天须服药2 次.替格瑞洛具有快速起效、非前体药物可直接作用、不受个体基因不同影响等优势, 且与血小板可逆结合, 停药后血小板功能迅速恢复.与普拉格雷类似, 替格瑞洛对P2Y12受体的抑制效果也要强于氯吡格雷.替格瑞洛的疗效已经PLATO研究证实, 被国内外多部指南列于一线推荐位置, 欧洲指南更是在2011年将替格瑞洛的推荐级别列于氯吡格雷之前, 在替格瑞洛或普拉格雷不能使用的患者中才推荐使用氯吡格雷.上述三种药物主要药理学性质和药代动力学参数比力见表.小结氯吡格雷临床适应证较广泛, 禁忌证相对较少, 是目前临床上双重抗血小板治疗的首选药物, 但其疗效受到基因多态性的限制, 存在起效缓慢、可能与PPI 发生药物间相互作用等缺陷, 限制了其在临床中的应用.与氯吡格雷相比, 普拉格雷和替格瑞洛起效更迅速、个体不同小、对血小板抑制活性更高, 但出血风险亦增加, 也在一定水平上限制了其临床应用.分歧的P2Y12受体拮抗剂具有分歧的作用特点, 在疗效和平安性方面各具优势, 孰优孰劣不能一概而论.临床医生在选用P2Y12受体拮抗剂前, 应首先对患者进行评估, 可根据分歧的患者情况选择分歧的药物.临床医生在考虑药物作用特点和个体差此外同时, 亦应权衡药物的疗效和平安风险, 从而提高药物的临床治疗效果、减少不良事件的发生, 使患者最年夜水平受益.氯吡格雷的局限性氯吡格雷上市至今已有二十年时间, 期间各国学者进行了年夜量的临床研究, 极年夜的推动了ACS患者抗栓的进展, 增进了以氯吡格雷为基础的抗栓战略不竭优化及演变.尽管氯吡格雷非常优秀, 但自身仍存在一定局限性, 因此有学者检验考试研发能够克服氯吡格雷缺陷的新型药物.首先是氯吡格雷拮抗血小板的力度偏弱, 平均IPA在55%左右；其次氯吡格雷的前体药无效, 需经过肝脏代谢（两个步伐）后才华发挥作用, 这一过程中氯吡格雷代谢产物易与其他药物发生相互作用, 招致药效的个体间不同较年夜；再者是氯吡格雷起效较慢, 75 mg/天需要4~5天才华到达满意效果, 300 mg/天需4~6小时起效, 600 mg/天需要2小时, 但仍无法满足急诊PCI需求；最后是氯吡格雷作用不成逆, 患者停药后5~7天才华恢复血小板活性, 难以应对年夜出血事件或需紧急手术的情况.新型P2Y12受体抑制剂目前已经做到二期、三期临床或上市使用的四种新型药物包括普拉格雷、替格瑞洛、坎格瑞洛和依诺格雷.普拉格雷是最早呈现的有望取代氯吡格雷的药物, 与氯吡格雷相比, 普拉格雷有两个优点：一是起效时间稍快, 1个多小时即可发挥作用；虽然普拉格雷也需要经过肝脏代谢（一步代谢）,但减少了个体不同；二是比氯吡格雷更有效的抑制血小板活性,对血小板活性的压制可达60%~70%.基础研究显示普拉格雷较氯吡格雷略有进步, TRITON-TIMI 38研究就验证了这一观点, 但其结果其实不理想, 因为普拉格雷在减少患者事件的同时也增加了年夜出血风险, 尤其是在≥75岁及有卒中史患者中, 该药在急诊PCI患者中有一定用武之地.替格瑞洛与氯吡格雷相比, 替格瑞洛是非前体药, 不需要经肝脏代谢, 进入人体后快速起效, 半小时对血小板的抑制作用即可达40%, 2小时可达80%, 而且个体不同比普拉格雷更小；第二是效果可逆, 当患者发生年夜出血或需紧急手术时可及时处置.PLATO研究在43个国家的862家中心纳入了18624例患者, 结果发现受试者终点事件下降, 且出血事件无显著性增加, 因此近期的年夜量指南都予以了优势推荐.坎格瑞洛坎格瑞洛是一种静脉用ADP受体拮抗剂, 注射5分钟内即可到达满意的血小板抑制效果, 防止了口服药经吸收、代谢才华发挥作用的过程, 可用于急诊患者的快速抗血小板治疗.早期研究包括CHAMPION-PCI与CHAMPION-PLATFORM, 各入选5000余例冠心病患者进行治疗, 结果其实不理想, 但给出了一定希望；另一项是CHAMPION PHOENIX研究, 其设计方案较以往有所改进, 更贴合临床实践, 结果坎格瑞洛组患者死亡、心梗及血栓事件明显减少, 可是部份年夜出血事件增加.针对坎格瑞洛的荟萃分析显示, 坎格瑞洛治疗对总体死亡事件无明显影响, 但支架内血栓明显减少, 心梗事件有下降趋势, 但无统计学不同；小出血及中等水平出血有所增加.因此该药的临床应用仍存在很多困惑, 静脉用药与口服用药的切换过程也存在问题.。

基于p38MAPK信号通路分析咪达唑仑对腰椎间盘突出症模型大鼠疼痛的影响

基于p38MAPK信号通路分析咪达唑仑对腰椎间盘突出症模型大鼠疼痛的影响刘建;叶玉军;刘树民;刘爽【期刊名称】《中国骨伤》【年(卷),期】2023(36)1【摘要】目的:探究基于p38MAPK信号通路分析咪达唑仑对腰椎间盘突出症模型大鼠疼痛的影响。

方法:选取50只SPF级别SD健康大鼠,雌雄各半,随机分为正常组,模型组,低、中、高剂量组,模型组和低、中、高剂量组先建立腰椎间盘突出症模型。

正常组、模型组大鼠腹腔注射生理盐水,低、中、高剂量组大鼠腹腔注射咪达唑仑,分别按30、60、90 mg/kg给药。

采用酶联免疫吸检测大鼠血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)、P物质(substance P,SP)、神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)水平,采用Western blot检测各组大鼠组织中p38 MAPK,基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP3)蛋白表达。

结果:模型组大鼠TNF-α、IL-1β、β-EP水平较正常组高,5-HT水平低于正常组(P<0.05);低、中、高剂量组大鼠TNF-α、IL-1β、β-EP水平较模型组下降、5-HT水平升高(P<0.05)。

模型组大鼠较正常组SP、NPY水平上升(P<0.05);低、中、高剂量组较模型组大鼠SP、NPY水平下降(P<0.05)。

模型组较正常组大鼠p38 MAPK、MMP-3表达上升(P<0.05),低、中、高剂量较模型组大鼠p38 MAPK、MMP-3表达下降(P<0.05)。

结论:咪达唑仑可以改善腰椎间盘突出症模型大鼠的免疫炎症反应,可能是通过p38MAPK信号通路调控来实现的。

p38MAPK

Ｐ — ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白表达，ＥＬＩＳＡ检测细胞分泌ＴＮＦ一０【，ＩＬ一６水平。结果：与Ａ组比较，Ｂ组ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白含量培养液上清中ＴＮＦ一（ｉｔ、ＩＬ．６含量都明显升高（Ｐ＜０．０５）；与Ｂ组比较，ｃ组Ｐ．ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白明显抑制（Ｐ＜０．０５），培养液上清中ＴＮＦｄ、ＩＬ一６含量都明显下降（Ｐ＜０．０５）；与Ａ组比较，ｃ组Ｐ — ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白明显抑制
信号通路可作为抑制炎性骨溶解的新靶点，对临床上防治人工关节置换术后无菌性松动具有重要意义。关键词ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶；ｐ３８ＭＡＰＫ抑制剂；巨噬细胞；肿瘤坏死因子一ｏｔ：白介素一６
ＲＡＷ２４６．７ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＣｕｌｔｕｒｅｄｍａｅｒｏｐｈａｇｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄａｓ￣ｌｌｏｗｓ：ｇｒｏｕｐＡ：Ｃｏｎｔｒｏｌ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡ０Ｊｉａｎ — ｎｉｎｇＥ — ｍａｉｌ：ｚｈａｏｊｉａｎｎｉｎｇ．０２０７＠１６３．ｔｏｍ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＳＢ２０３５８０ｏｎｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆＴＮＦ — ｏｔａｎｄＩＬ一６ｉｎ

p38mapk特异性抑制剂sb203580在胰性脑病中的作用

p38mapk特异性抑制剂sb203580在胰性脑病中的作用Effect of p38MAPK specific inhibitor SB203580 on pancreaticencephalopathy作者 ***1 ***2单位Author Company摘要：由于急性胰腺炎的作用下，会引发一系列并发症，作为其中具有高死亡率的一种胰性脑病，展开了大量的研究。

本文就胰性脑病的基本情况以及发病机制、p38mapk特异性抑制剂sb203580以及p38mapk特异性抑制剂sb203580在胰性脑病中的作用进行阐述，希望能够为胰性脑病的防治提供一定的理论基础。

关键词：p38mapk；特异性抑制剂；sb203580；胰性脑病；细胞因子Abstract:Because of the effect of acute pancreatitis, it can lead to a series of complications, which is a kind of pancreatic encephalopathy with high mortality. In this paper, the basic situation of pancreatic encephalopathy and the pathogenesis, p38MAPK specific inhibitor SB203580 and p38MAPK specific inhibitor SB203580 in the role of pancreatic encephalopathy, hoping to provide a theoretical basis for the prevention and treatment of pancreatic encephalopathy.Key words: p38MAPK; specific Key words; SB203580; pancreatic encephalopathy; cytokine1 前言胰性脑病（pancreatic encephalopathy,PE）是急性胰腺炎的一项重要并发症，在1923年由Lowell发现了出现相应症状的患者，并且在1941年首次提出了PE的概念。

基于PI3K-Akt-mTOR信号通路观察帕瑞昔布钠改善大鼠神经病理性疼痛的作用机制

叶勇,林辉,汪娜,陶勇*(成都市双流区第一人民医院麻醉科,四川成都610200)

摇摇摘要:目的探究基于PI3K-Akt-mTOR信号通路观察帕瑞昔布钠改善大鼠神经病理性疼痛(NP)作用。方法采用

压迫损伤坐骨神经的方法构建大鼠NP模型,实验分为模型组,低剂量组,高剂量组,以造模过程中不进行结扎的大鼠作为对照组。造模之后第8天开始给药,低、高剂量组分别给予2、4滋g/g的帕瑞昔布钠,每天1次,连续1周,对照组以及模型组给予等量的生理盐水。检测各组大鼠坐骨神经机械刺激缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期以及冷缩足反射阈值。对L4-L6段脊髓进行HE染色以及原为末端标记(TUNEL)检测。采用Westernblot检测各组大鼠脊髓组织中P13K、p-Akt以及mTOR的蛋白水平。结果与对照组比较,模型组大鼠机械刺激缩足反射阈值与热缩足反射潜伏期明显降低

(P<0.05),冷缩足反射阈值、脊髓组织细胞凋亡比例及P13K、p-Akt以及mTOR的蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,底、高剂量组大鼠械刺激缩足反射阈值与热缩足反射潜伏期明显升高(P<0.05),冷缩足反射阈值、脊髓组织细胞凋亡率及P13K、p-Akt以及mTOR的蛋白表达明显降低(P<0.05),高剂量组变化更为明显。结论帕瑞昔布钠具有改善大鼠NP的作用,且该作用机制可能与PI3K-Akt-mTOR信号通路密切相关。摇摇关键词:摇帕瑞昔布钠;摇PI3K-Akt-mTOR信号通路;摇大鼠;摇神经性病理疼痛

摇摇中图分类号:R741.02摇摇文献标志码:A摇摇文章编号:1001-5248(2020)12-0084-05

基金项目:四川省卫生健康委员会项目(No.2020ZA009)作者简介:叶勇(1974-),男,专科,主治医生。从事专业麻醉医学。*通信作者

摇摇神经病理性疼痛(neuropathicpain,NP)是一种由于中枢或者外周神经系统受损以及功能失调而引发的疼痛,其主要病理特征包括自发性疼痛、痛觉过敏和超敏等,严重影响患者的生活质量也1页。相关研究报道NP的发病率高达8.0%,在我国约有9000万NP患者也2页。环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是合成前列腺素(prostaglandin,PG)的重要限速酶之一,影响着NP的发生和发展,COX-2的抑制可有效缓解炎性疼痛也3页。帕瑞昔布钠是一种非甾体类抗炎药,对COX-2具有高选择性抑制作用,研究发现,帕瑞昔布钠对于治疗NP具有良好的效果也4页,但其作用机制尚未阐明。磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/丝-苏氨酸蛋白激酶(serine-threoninekinase,AKT)是一条促进细胞生存的重要通路。目前已发现PI3K/AKT能够影响COX-2的表达,且在NP的治疗中发挥着重要的作用也5页。本研究拟采用采用坐骨神经结扎慢性损伤的方法构建大鼠NP模型,探讨帕瑞昔布钠对NP的镇痛作用及其相关的作用机制。1摇材料和方法1.1摇实验动物摇SPF级SD雄性大鼠,7~8周龄,体质量(200依20)g,共计36只,从成都百裕制药股份有限公司采购,动物的使用许可证号SYXK(川)2019-222;本研究中所有动物实验操作均经本院实验动物管理伦理委员会审核批准(IACUC批准号:2019-079)。(1)主要试剂:帕瑞昔布钠注射液(特

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温州医学院硕士学位论文途塞题目！里２Ｙ１２量佳塑剑赳过置痤痘太鼠登壁卫兰墨丛△￡Ｋ焦呈通路丞塞：隆固王笪毖堕

答辩委员会主席：蔓仨出

答辩委员会成员：蔓仨出

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第一部分Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂对骨癌痛大鼠痛阈及脊髓ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶表达的影响材料与方法结果…一一分析与讨论一，Ｊ、结一～一参考文献一附图一１３一…１８２０２３————２４２６第二部分Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂对骨癌痛大鼠脊髓ＩＬ－１Ｄ、ＩＬ一６表达的影响材料与方法结果一一一分析与讨论一一～一…～一一一Ｊ、结～一……一一

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综述及参考文献学位论文独危４・｝生声明～一……一一

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——————————５４温卅ｌ医学院硕士学位论文中文摘要

第一部分Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂对骨癌痛大鼠痛阈及脊髓ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的鞘内注射Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂ＭＲＳ２３９５，研究脊髓Ｐ２Ｙ１２受体在大鼠骨癌痛中的作用及其对１３３８丝裂原活化蛋白激酶（ｐ３８ＭＡＰＫ）表达的影响。方法雌性ＳＤ大鼠４０只，用随机数字表法分为５组（ｎ＝８）：正常组（Ｎ）、假手术组（Ｓ）、ＤＭＳＯ溶剂骨癌痛组（ＤＡ）、骨癌痛组（Ａ）、骨癌痛镇痛组（ＭＡ）。Ｎ组大鼠不进行任何处理，ｓ组大鼠左胫骨上端骨髓腔注入Ｈａｎｋ’ｓ液１０灶１，ＤＡ组、Ａ组、ＭＡ组大鼠左胫骨上段注入经腹水培养的Ｗａｌｋｅｒ２５６癌细胞ｌＯｇｌ建立骨癌痛模型。除Ｎ组外，其余四组大鼠建立骨癌痛模型的同时，选择腰３—４问隙行鞘内注管，建模后第９－１２天各组大鼠每日分别行鞘内注药，Ｓ组、Ａ组注射０．９％生理盐水，ＤＡ组注射５％二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）溶剂，ＭＡ组注射ＭＲＳ２３９５（４００ｐｍｏｌ／ｔｉｌ，溶于５％ＤＭＳＯ溶液），容量各１５ｕｌ。鞘内注药前、后每ｌＯ分钟测量一次大鼠左后足机械痛阈。术后第１２天鞘内注药测定机械痛阈值后，取Ｌ４～６脊髓，采用免疫组化及免疫荧光法测定脊髓背角磷酸化ｐ３８ＭＡＰＫ（ｐ—ｐ３８ＭＡＰＫ）表达水平。结果各组大鼠基础痛阈值无统计学差异（尸＞０．０５）；建模后第９天，与Ｎ组、Ｓ组比较，ＤＡ组、Ａ组、ＭＡ组大鼠左后足机械痛阈值下降（Ｐ＜Ｏ．０１）；ＭＡ组与ＤＡ组、Ａ组比较，鞘内注射Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂后大鼠机械痛阈值增高，差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５），但与Ｎ组、Ｓ组比较，ＭＡ组机械痛阈值仍低于正常（Ｐ＜Ｏ．０１）。第９—１ｌ天给药后第２０分钟痛阈峰值，与造模后第９天首次给药前的基础痛阈值比较，差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。采用盲法测定阳性细胞数以及ＩＯＤ数值反映磷酸化ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白表达水平：ＤＡ组、Ａ组、ＭＡ组脊髓ｐ－ｐ３８ｂｉｋＰＫ蛋白表达高于Ｎ组、Ｓ组，差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）。与ＤＡ组、Ａ组比较，ＭＡ组脊髓ｐ－ｐ３８ＭＡＰＫ表达减少，差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）：免疫荧光双标显示脊髓背角１３－Ｄ３８ＭＡＰＫ与小胶质细胞共表达，而与星形胶质细胞和神经元未见共表达。结论鞘内注射Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂ＭＲＳ２３９５可能通过抑制脊髓背角的

ｐ３８ＭＡＰＫ磷酸化程度部分减轻大鼠骨癌疼痛。【关键词】骨癌痛；Ｐ２Ｙ１２受体；ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶；脊髓温州医学院硕士学位论文第二部分Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂对骨癌痛大鼠脊髓ｌＬ－１Ｂ、Ｉｋ－６表达的影响

目的观察鞘内注射Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂ＭＲＳ２３９５对骨癌痛大鼠炎性因子表达的影响，探讨Ｐ２Ｙ１２受体与炎性因子在骨癌痛发病机制中的可能作用。方法雌性ＳＤ大鼠３２只，采用随机数字表法均分为四组（ｎ＝８）：假手术组（Ｓ组）、～１ＲＳ２３９５组（Ｍ组）、胫骨癌痛组（Ａ组）、胫骨癌痛ＭＲＳ２３９５镇痛组（凇组）。Ｓ组：左胫骨上端骨髓腔注入Ｈａｎｋ’Ｓ液１０９ｌ，模型制备成功后第９－１２天，鞘内注射０．９％生理盐水１５ｕ１／ｄ；Ｍ组左胫骨上端骨髓腔注入Ｈａｎｋ’Ｓ液１０９ｌ模型制备成功后第９一１２天，鞘内注射ＭＲＳ２３９５（４００ｐｍｏｌ／ｕ１）１５ｕ１／ｄ：Ａ组：左胫骨上端骨链腔注入Ｗａｌｋｅｒ２５６癌细胞悬液１０９ｌ，模型制备成功后第９一１２天，鞘内注射０．９％生理盐水１５ｕ１／ｄ；ＭＡ组：左胫骨上端骨髓腔注入Ｗａｌｋｅｒ２５６癌细胞悬液１０ｐｌ，模型制备成功后第９－１２天，鞘内注射ＭＲＳ２３９５（４００ｐｍｏｌ／ｕ１）１５ｕ１／ｄ。骨癌痛造模同时均进行腰３—４间隙鞘内置管，术后第９－１２天鞘内注药前、后每１０分钟测试一次大鼠左后足机械痛阈值，术后第１２天鞘内注药测定机械痛阈值后，取Ｌ４－Ｌ６脊髓，采用酶联免疫吸附测定法测脊髓炎性因子ＩＬ一１Ｂ、ＩＬ一６的表达情况。结果建模后第９天，与Ｎ组、ｓ组比较，Ａ组、ＭＡ组机械性痛阈值下降（Ｐ＜０．０１），与Ａ组比较，ＭＡ组大鼠鞘内注射ＭＲＳ２３９５后大鼠机械痛阈值增高（Ｐ＜０．０５）。Ｅ１ｉｓａ结果显示：Ｎ组与Ｓ组比较差异无统计学意义（胗Ｏ．０５）；与Ｎ

组、Ｓ组比较，Ａ组和ＭＡ组大鼠脊髓ＩＬ一１Ｂ和ＩＬ．６含量均明显升高俨＜０．０１）；

与Ａ组比较，ＭＡ组大鼠鞘内注射ＭＲＳ２３９５后ＩＬ．１Ｂ和ＩＬ．６含量明显降低俨

＜０．０１），差异有统计学意义。结论鞘内注射Ｐ２Ｙ１２受体抑制剂ＭＲＳ２３９５可部分减少骨癌痛大鼠脊髓炎性因子ＩＬ一１Ｂ和ＩＬ一６的表达，因而脊髓小胶质细胞Ｐ２Ｙ１２受体介导了炎性因子的

释放。

【关键词】骨癌痛；Ｐ２Ｙ１２受体；ＩＬ一１Ｂ；ＩＬ一６温州医学院硕士学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔＰａｒｔＩＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＰ２Ｙ１２ＲｅｃｅｐｔｏｒＩｎｈｉｂｉｔｏｒｏｎＰａｉｎ

ＴｈｒｅｓｈｏｌｄａｎｄＳｐｉｎａｌｐ３８ＭＡＰＫｉｎＲａｔＢｏｎｅＣａｎｃｅｒＰａｉｎ

Ｍｏｄｅｌ

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆ

ｐａｉｎ—ｒｅｌａｔｅｄｂｅｈａｖｉｏｕｒａｎｄｉｔｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｐ３８ＭＡＰＫ（Ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ

ｋｉｎａｓｅ）ａｆｔｅｒｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆＭＲＳ２３９５（ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｏｆＰ２Ｙ１２ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ），ｔｏ

ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＰ２Ｙ１２

ｒｅｃｅｐｔｏｒｓａｎｄｐ３

８ＭＡＰＫｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｂｏｎｅ

ｃａｎｃｅｒ

ｐａｉｎ．ＭｅｔｈｏｄＡｔｏｔａｌｏｆ

ｆｏｒｔｙｆｅｍａｌｅＳＤｒａｔｓ，ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ５ｇｒｏｕｐｓ

（胛。８）：ｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐＮ），ｓｈａｍｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐＳ），ｖｅｈｉｃｌｅｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐＤＡ），

ｃａｎｃｅｒｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐＡ），ａｎｄａｎａｌｇｅｓｉａｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐＭＡ）．ＲａｔｓｉｎｇｒｏｕｐＮｗｅｒｅ

ｕｎｔｒｅａｔｅｄ，ｒａｔｓｉｎｇｒｏｕｐＳｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈＨａｎｋ、ＳｓｏｌｕｔｉｏｎｌＯＩｄｉｎｔｏｔｈｅｌｅｆｔｔｉｂｉａｌｍｅｄｕｌｌａｒｙｃａｖｉｔｙ；ｒａｔｓｉｎｇｒｏｕｐＤＡ，ｇｒｏｕｐＡａｎｄｇｒｏｕｐＭＡｗｅｒｅｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈＷａｌｋｅｒ２５６ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ（１０９ｌ，２ｘ１０

７

ｃｅｌｌｓ／ｍ１）ｉｎｔｏｔｈｅｌｅｆｔｔｉｂｉａｌｍｅｄｕｌｌａｒｙｃａｖｉｔｙｔｏ

ｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｍｏｄｅｌｏｆｂｏｎｅｃａｎｃｅｒｐａｉｎ。ＣａｔｈｅｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｗａｓｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙｍａｄｅｉｎｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓｂｅｔｗｅｅｎＬ３ａｎｄＬ４ｖｅｒｔｅｂｒａ

ｅｘｃｅｐｔｇｒｏｕｐＮ．Ｓａｌｉｎｅ（０．９％，１

５９１）Ｗａｓ

ｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｇｒｏｕｐＳａｎｄｇｒｏｕｐＡ，ＤＭＳＯ（５％，１５９１）ｗａｓｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｇｒｏｕｐＤＡ，ａｎｄ

ＭＲＳ２３９５（４００ｐｍｏｌ／Ｉｒｔｌ，１５ｐ１）ｗａｓｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｇｒｏｕｐＭＡｏｎｄａｙ９ｔｏ１２

ｐｏｓｔ－ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ，Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ（ＭＷＴ）ｗｅｒｅ

ｍｅａｓｕｒｅｄｏｎｌｅｆｔ

ｈｉｎｄｐａｗｂｅｆｏｒｅａｎｄｅｖｅｒｙ１０ｍｉｎａｆｔｅｒｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｎｄａｙ９ｔｏ１２

ｐｏｓｔ－ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ．Ｒａｔｓｗｅｒｅｅｕｔｈａｎｉｚｅｄａｆｔｅｒｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ

ａｎｄ

ｍｅａｓｕｒｉｎｇ

ＭＷＴａｔｄａｙ１２ｐｏｓｔ－ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ．Ｌ４—６ｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｔｏ

ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐ－ｐ３８ＭＡＰＫｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄ

ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ．

ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｒｅｗａｓｎｏ

ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｂａｓｅｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｖａｌｕｅ

ｂｅｔｗｅｅｎｇｒｏｕｐｓ（尸＞０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ

ｔｏｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐＮａｎｄ

ｇｒｏｕｐＳ．ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ

ｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓｉｎｇｒｏｕｐＤＡ，Ａ

ａｎｄ

ＭＡｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｏｎｄａｙ９

ｐｏｓｔ’ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏ

ｔｈａｔ

ｉｎｇｒｏｕｐＤＡａｎｄ

ｇｒｏｕｐＡ，ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ

ｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｇｒｏｕｐＭＡ

ＷａＳｉｎｃｒｅａｓｅｄａｆｔｅｒｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（ｐ＜０．０５）．

ＭｅｃｈａｎｉｃａｌｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｇｒｏｕｐＭＡ

ｗａｓｓｔｉｌｌｌｏｗｅｒｔｈａｎｇｒｏｕｐＮ

ａｎｄ

ｇｒｏｕｐＳｐ＜Ｏ．ｏｔ）．Ｔｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｏｆ２０ｍｉｎａｆｔｅｒ

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