乙酰肝素酶和血管内皮生长因子在原发性膜性肾病患者肾小球内表达意义

乙酰肝素酶和血管内皮生长因子在原发性膜性肾病患者肾小球内的表达及意义【摘要】目的：探讨乙酰肝素酶（heparanase,hpa）和血管内皮生长因子（vegf）在原发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy，imn）患者肾小球中的表达及与蛋白尿的关系。

方法：用免疫组化法检测36例imn患者与6例正常对照者肾小球内hpa和vegf的表达情况。

结果：（1）hpa 和vegf在对照组正常肾组织的肾小球基底膜及肾小管上皮细胞仅有少量表达。

在imn组肾小球基底膜及肾小管上皮细胞表达较对照组均明显增强（p0.05），肾小球内vegf表达差异有显著性（p0.05）. there was significant difference of the expression of vegf between i and ii stage imn group（p0.05）（表2）。

表2 imn与对照组患者肾小球hpa和vegf的表达情况*:p0.05,无统计学意义，在i期imn vegf与24小时尿蛋白定量呈正相关关系，r0.38,p<0.05,有统计学意义；二者与血肌酐均无相关性。

2.4 hpa与vegf之间相关性分析:hpa与vegf之间无明显相关性，但在i期imn二者呈正相关关系，r0.39,p<0.05，有统计学意义。

3 讨论imn的病因及发病机理并不十分清楚。

可能涉及到基因多态[8]、自身免疫、炎症反应、矫枉失衡等多方面的问题。

imn病变主要位于肾小球滤过膜，以肾小球脏层上皮细胞下嗜复红物质广泛沉积、gbm空泡变、僵硬、增厚、“钉突”形成、链环变等为特征。

肾小球滤过膜主要包括有孔的内皮细胞、肾小球基底膜（glomerular basement membrane, gbm）和上皮细胞。

iv型胶原形成gbm的基本骨架，其间还填充着许多物质，包括层粘连蛋白、纤维连接蛋白、巢蛋白、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（hspg）等。

由于gbm参与肾小球滤过膜的滤过，因此以上成份的改变均可能影响肾小球的滤过功能而出现蛋白尿。

hspg是由足细胞和壁层上皮细胞分泌的位于细胞表面、细胞外基质及基底膜的大分子生物物质，由一个核心蛋白、硫酸乙酰肝素（heparin sulfate, hs）及gags侧链组成。

hspg是ecm中非结构蛋白的重要组份，其通过与ecm及细胞的结合发挥生物学功能。

hspg 的作用主要是为肾小球滤过膜的电荷屏障提供阴电荷，也可作为足细胞、内皮细胞和壁层上皮细胞的附着点。

hs为hspg带阴离子的侧链。

hpa于d-葡萄糖醛酸和n-乙酰葡萄糖糖苷键裂解长链hs，使hs成为小分子片段，释放hs相连的致炎因子，破坏hspg，从而调节细胞表面和ecm与hspg结合的各种活性因子的生物学作用，同时还可使hspg上结合的负电荷减少，使gbm的电荷屏障受损。

hspg的减少可导致gbm的选择通透性改变以及肾小球上皮细胞和内皮细胞锚连位点的丧失，同时释放与hspg结合的多种生长因子，包括成纤维细胞生长因子-2（fgf-2）、血管内皮生长因子（vegf）等。

相关生长因子的释放可修复gbm，如不能修复则使gbm形成瘢痕[9]。

炎症刺激、血小板活化可刺激hpa释放。

hpa可诱导炎症基因表达，并可激活内皮细胞产生直接的血管源性反应。

hpa的活性与免疫细胞穿透ecm屏障有关，hpa抑制剂具有抗炎活性[10-11]。

本实验结果表明：hpa在对照组正常肾小球内仅少量表达，而在imn 组肾小球内的表达i期与ii期均明显高于对照组，且与24小时尿蛋白定量呈正相关关系。

提示hpa参与imn蛋白尿的形成。

此研究有别于holt等的结果[12]与vicki等的动物实验结果一致[3]。

hpa降解或破坏hspg时可以释放vegf。

vegf可能具有正反两方面的作用[13]。

首先vegf可能具有肾脏保护作用。

因其有促进内皮细胞增殖、分化、存活、促进血管生长、建立侧枝循环和改善血流动力学等生物学作用。

另有观点认为vegf对肾脏也有有害的一面。

vegf能够减少gbm的阴离子数目，诱导肾小球内皮细胞的小窗形成，vegf可能通过同时影响gbm的电荷屏障及机械屏障而影响肾小球的通透性，vegf分泌的异常增加可以导致肾小球滤过膜对血浆蛋白通透性的增加，从而导致蛋白尿的形成。

本实验结果显示vegf 在对照组正常肾小球有少量表达，而在imn表达增加，但随分期分组的不同其表达量不同，ii期imn患者肾小球内vegf的表达显著低于i期imn患者，与24小时尿蛋白定量无明显相关性，i期imn患者肾小球内vegf表达与24小时尿蛋白定量呈正相关关系。

有别于honkanen等的结果，此现象可从不同角度理解：（1）vegf并非imn患者肾小球损害与尿蛋白增加的主要参与者。

相反，vegf可能以保护血管为主，有利于imn向好的方向转归，即vegf高表达者病理损害轻，低表达者病理损害重。

（2）也可理解为vegf表达减少可能与imn进展、足细胞减少、分泌vegf减少有关。

vegf是与hspg相连的生长因子，即hspg是vegf的储存池，hpa 水解hspg的同时释放vegf，且内源性hpa调控vegf的基因表达。

故vegf随着hpa的增多而增多。

另一方面vegf又可减少hpa的释放[14]。

本实验结果显示：hpa表达与vegf表达无明显相关性，但在i期imn二者之间呈正相关关系。

以上结果表明：hpa、及vegf 两因子之间具有一定的相关性。

综上所述，本文探讨了hpa及vegf在imn患者肾小球内的表达变化及意义。

实验结果提示肾小球内hpa的异常表达对imn的发展及蛋白尿的形成具有一定作用，而适当水平的vegf并非imn患者肾损害的主要参与者，相反其对肾小球滤过膜可能具有一定的保护作用。

通过对imn患者肾小球内hpa及vegf表达变化的认识，可以为imn的适当治疗提供依据。

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