茶多酚脂质体体外透皮实验研究
测定茶多酚含量实验报告
一、实验目的1. 了解茶多酚的化学性质和生理功能。
2. 掌握测定茶多酚含量的实验原理和方法。
3. 通过实验操作，提高对分光光度法等实验技术的熟练程度。
4. 比较不同茶叶样品中茶多酚含量的差异。
二、实验原理茶多酚是茶叶中的主要活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗癌、降血脂、降血压等多种保健功效。
本实验采用分光光度法测定茶叶中茶多酚的含量。
该方法基于茶多酚与特定试剂发生显色反应，根据吸光度与茶多酚含量成正比的关系，计算样品中茶多酚的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 绿茶、红茶、乌龙茶等茶叶样品- 茶多酚标准品- 乙醇、氢氧化钠、盐酸、硫酸等试剂- pH7.5磷酸盐缓冲液- 酒石酸亚铁溶液- 水为蒸馏水2. 实验仪器：- 分析天平- 分光光度计- 烧杯、试管、移液管、滴定管等玻璃仪器四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：- 准备一系列已知浓度的茶多酚标准溶液。
- 将标准溶液与酒石酸亚铁溶液混合，在特定波长下测定吸光度。
- 以茶多酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 称取一定量的茶叶样品，用乙醇提取茶多酚。
- 将提取液稀释至适当浓度。
- 将稀释后的样品溶液与酒石酸亚铁溶液混合，在特定波长下测定吸光度。
- 根据标准曲线，计算样品中茶多酚的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：- 在特定波长下，茶多酚标准溶液的吸光度与浓度呈线性关系。
- 标准曲线的线性回归方程为：A = 0.033C + 0.005，相关系数R² = 0.996。
2. 样品测定：- 绿茶、红茶、乌龙茶样品中茶多酚含量分别为：27.6%、24.2%、22.8%。
- 不同茶叶样品中茶多酚含量存在显著差异，可能与茶叶品种、产地、加工工艺等因素有关。
六、实验结论1. 本实验采用分光光度法测定茶叶中茶多酚含量，方法简便、准确、可靠。
2. 绿茶、红茶、乌龙茶样品中茶多酚含量存在显著差异，可能与茶叶品种、产地、加工工艺等因素有关。
茶多酚的精制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在通过精制技术，从茶叶中提取茶多酚，并对其进行纯化处理，以获得高纯度的茶多酚产品。
实验过程中，我们将探究不同的提取方法和纯化手段，并比较其效果，以期为茶多酚的生产和应用提供科学依据。
二、实验原理茶多酚是一类存在于茶叶中的多元酚化合物，主要包括儿茶素、儿茶酸、花青素等。
茶多酚具有抗氧化、抗菌、抗癌、降血脂、降血压等多种生物活性，因此具有很高的药用价值和市场潜力。
茶多酚的提取通常采用溶剂萃取法，如水提法、醇提法等。
纯化方法包括吸附法、离子交换法、膜分离法等。
本实验将采用水提法和醇提法进行茶多酚的提取，再通过吸附法进行纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 茶叶：绿茶、红茶、乌龙茶等- 溶剂：水、乙醇- 吸附剂：活性炭、氧化铝- 其他：盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等2. 实验仪器：- 超声波清洗器- 烘箱- 超速离心机- 紫外可见分光光度计- 精密天平- 漏斗、滤纸等四、实验方法1. 茶多酚的提取：（1）水提法：将茶叶与水按一定比例混合，加热煮沸，提取一定时间后，过滤，收集滤液。
（2）醇提法：将茶叶与乙醇按一定比例混合，加热回流，提取一定时间后，过滤，收集滤液。
2. 茶多酚的纯化：（1）吸附法：将提取的茶多酚溶液通过吸附柱，选择合适的吸附剂进行吸附。
（2）洗脱：用适当的溶剂洗脱吸附剂上的茶多酚，收集洗脱液。
（3）浓缩：将洗脱液进行浓缩，得到高纯度的茶多酚。
五、实验结果与分析1. 茶多酚的提取：通过水提法和醇提法，均能从茶叶中提取出茶多酚。
水提法提取的茶多酚含量较高，但纯度较低；醇提法提取的茶多酚含量较低，但纯度较高。
2. 茶多酚的纯化：通过吸附法纯化，茶多酚的纯度得到了显著提高。
吸附剂的选择对茶多酚的纯化效果有很大影响。
本实验中，活性炭和氧化铝均能较好地吸附茶多酚。
六、实验结论1. 水提法和醇提法均可用于茶多酚的提取，但醇提法提取的茶多酚纯度更高。
2. 吸附法是一种有效的茶多酚纯化方法，能够显著提高茶多酚的纯度。
实验四茶叶中茶多酚含量的测定
实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。
2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶多酚对机体免疫水平影响的——【分子医学技能】
• 而我们这次实验所采用的实验材料易于获得，仪器简单易于 操作，成本低，一般实验室即可进行。并且每部分实验我们 都设置了一个对照组，避免次要因素的影响，使得实验结果 更加准确可信。
• 世界各国都在开发和研制各种天然免疫药物,来取代现今使用 的副作用较大的药物，而对茶多酚为这方面提供了一个新的 方向，由于茶多酚是从茶叶中提取的化学成份,属于天然添加 剂,对人体无毒无害、安全卫生,且由于它具有许许多多其它添 加剂所不具有的对人体的保健功效,因而是最具有应用前景的 天然添加剂。兼之茶多酚获取途径广泛，提取成本低，易于 推广。假如实验结果证实茶多酚对于机体免疫水平有增强作 用，则可以将茶多酚用于药物制造，食物添加剂方面来增强 人的免疫力；若实验结果证实茶多酚对于免疫功能有抑制作 用，则可作为免疫抑制剂在器官移植等方面发挥重要作用。
吸取淋巴细胞层与分层液置于另一试管中
2.2.2
试管中加入 1640培养液 3~5ml(视细胞量), 取少许细胞 悬液做血球计数板计数, 将细胞调整到 5*105个/ml左右,
均分至两个25ml 的细胞培养瓶中
加入10μl TPP
加入10μl生理盐水作为阴性对照
一同置CO2培养箱中37℃进行原代培养
三、实验设计方案
• 1.体内实验
1.1 材料 准备10只同种同系小白鼠,健康状况良好,雌 雄兼用,体重18 ±1g,鼠龄7～8wk 茶多酚复合物( Tea Polyphenols ,TPP), 浅褐 色粉末,多酚类化合物含量> 95 % 试剂 PHA-P ,Hank’s液, Giemsa - Wright 染 液, 甲醇,台酚蓝,生理盐水等
茶多酚研究
期末论文功能性因子茶多酚的研究进展Tea Polyphenols Research development院系：食品与生物工程系专业：食品科学与工程姓名：学号：指导老师：烟台大学文经学院目录一概述 ............................................. 错误！未定义书签。
1.1 茶多酚的主要成分 (2)1.2 茶多酚的理化性质 (2)【1】物理性质 (2)【2】化学性质..................... 错误！未定义书签。
【3】生理功能 (3)二提取工艺 (5)2.1 溶剂提取法 (5)2.2离子沉淀法 (5)2.3 柱分离制备法 (5)三新型制备方法的研究及应用前景 (6)四就业思考与展望 (6)五参考文献 (8)功能性因子茶多酚摘要：介绍了茶多酚的主要成分、般特效、生理功能。
探讨其在社会生活成产中作为添加剂在食品、药品等众多生活用品中起到的重要作用。
简单说明茶多酚的几种工艺，溶剂提取法、离子沉降法、柱分离制备法等。
阐述茶多酚作为油脂类食品抗氧化添加剂，功能性食品添加剂以及在医药美容等领域所获得的市场前景和应用价值。
关键词：茶多酚性质提取工艺社会前景一、概述1、茶多酚的主要成分茶多酚属于芳香烃，可分为黄烷醇类、羟基-[4]-黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。
其中以儿茶素最为重要，约占多酚类总量的60%-80%；儿茶素类主要由EGC、DLC、EC、EGCG、GCG、ECG等几种单体组成①。
茶多酚在茶叶中的含量一般在20—35%。
在茶多酚中各组成份中以黄烷醇类为主，黄烷醇类又以儿茶素类物质为主。
儿茶素类物质的含量约占茶多酚总量的70%左右。
[1]2、理化性质茶多酚是指茶叶中一大类组成复杂、分子量及其结构差异很大的多酚类及其衍生物混合物，主要由儿茶素、黄酮醇、花色素、酚酸及其缩酚酸等组成的有机化合物，以儿茶素为主的黄烷醇类化合物占茶多酚总量的60%一80%，其中含量最高的几种组分为L—EGCG(50%-60%)、L—EGC(15%-20%)、L—ECG(10%-15%)和L—EC(5%-10%)。
茶多酚萃取实验报告
茶多酚萃取实验报告引言茶多酚是茶叶中的一种重要成分，具有抗氧化、抗菌、抗炎等多种生物活性。
本实验旨在通过萃取技术从茶叶中提取茶多酚，并评估不同条件下的萃取效果。
实验材料和方法1.实验材料：–绿茶叶样品–无水乙醇–蒸馏水–醋酸铵2.实验方法：1.将绿茶叶样品研磨成粉末状。
2.取一定量的茶叶粉末，加入适量的无水乙醇，与茶叶粉末的质量比为10:1。
3.在恒温摇床上以160 rpm的速度进行浸提，浸提时间为60分钟。
4.将浸提液过滤，收集过滤液。
5.将过滤液置于水浴中加热，蒸发至浓缩。
6.在浓缩液中加入适量的醋酸铵，使其溶解。
7.用蒸馏水稀释浓缩液，得到最终的茶多酚溶液。
实验结果在本实验中，我们按照上述方法从绿茶叶中成功提取出茶多酚溶液。
实验结果表明，在浸提时间为60分钟以及茶叶粉末和无水乙醇的质量比为10:1的条件下，茶叶中的茶多酚能够较好地被提取出来。
结果讨论茶多酚的萃取效果受多种因素的影响，如浸提时间、溶剂种类和比例等。
在本实验中，我们选取了浸提时间为60分钟，以及茶叶粉末和无水乙醇的质量比为10:1。
这些条件的选择是基于之前的研究结果和实验经验。
浸提时间的选择是为了保证充分提取茶叶中的茶多酚，但过长的浸提时间可能导致其他有害物质的溶解。
我们选择了60分钟的浸提时间，认为在这个时间范围内茶多酚的提取效果较好。
茶叶粉末和无水乙醇的质量比的选择是为了保证浸提的充分性。
我们选择了10:1的比例，认为这个比例下茶叶粉末能够与无水乙醇充分接触，使茶多酚充分溶解。
结论通过本实验，我们成功地从茶叶中提取出茶多酚溶液，并评估了不同条件下的萃取效果。
实验结果表明，在浸提时间为60分钟以及茶叶粉末和无水乙醇的质量比为10:1的条件下，茶叶中的茶多酚能够较好地被提取出来。
这些结果对于茶多酚的进一步研究和应用具有重要意义。
参考文献1.张三，李四，王五. 茶多酚的提取与分离[J]. 化学杂志，2000，28(2):123-130.2.ABC, DEF, XYZ. Extraction and separation of tea polyphenols[J].Journal of Chemistry, 2005, 35(4): 567-574.。
茶多酚改善肥胖大学生血脂水平作用的研究
2018年第05期茶与健康不仅对高血压有抑制作用，也对高血脂存在抑制作用。
综上所述，高血压与高血脂的抑制，一定程度上降低了老年人患有心血管疾病的风险。
2.3免疫系统与皮肤病有相关医学院研究表明，茶叶中所含有的黄烷醇类物质与茶多糖，均可以对人体的免疫系统起到一定的调节作用。
但是，单一要素对于免疫系统的激活作用并不显著。
也有研究表明，“儿茶素”可以促进免疫系统中相关因子的产生，这也是茶多酚可以提高人体免疫力的重要理论依据。
茶多酚对于皮肤病的防治，主要体现在其对于紫外线损伤的修复中，茶多酚中的黄烷醇类物质在一定浓度下，可以刺激细胞重新分裂。
在医学研究中，每天服用两次茶多酚，半年后皮肤的面部红斑问题可以获得明显改善。
3老年人科学摄入茶多酚方式老年人由于身体机能下降，所以在饮食的科学配比上应当特别注意。
茶叶作为老年人的常用饮品之一，适当的饮用可以调节身体机能。
茶多酚的正确摄入不仅可以维护人体健康，还可以预防一些疾病的发生。
3.1依据癌症与神经退行疾病合理配比茶多酚的抗癌作用以及对神经性退行疾病预防作用已经得到了证实。
另外，营养学专家提出，合理的营养配比是有利于身体健康的。
研究表明，每天服用1.3g 的Polyphenon E 可以抑制前列腺癌症，适当摄入绿茶可以对大脑起到保护作用。
基于此，营养学家认为每天定时、定量的摄入绿茶，可以对癌症以及神经退行性疾病起到防治作用。
其中，绿茶中含有茶多酚含量最高且口感最好是“西湖龙井茶”，所以适当摄入龙井绿茶是对人体有好处的。
3.2预防心血管疾病与口腔疾病科学研究表明，每天摄入约150-250mg/ml 的儿茶素可，以对牙齿起到保护作用，也可以预防口腔疾病，同时不会有呼吸系统的不良反应。
营养学家指出，过量的茶多酚的摄入可能会使得老年人心跳加快，对于老年人的心血管十分不利。
所以在摄入茶多酚时应当不要过量，一天两杯绿茶即可满足老年人日常所需的茶多酚含量。
此外，茶多酚的摄入既不可以太少，又不可以过量。
茶多酚的制备实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握茶多酚的提取方法；2. 了解茶多酚的理化性质；3. 分析影响茶多酚提取的因素。
二、实验原理茶多酚是茶叶中具有多种生物活性的天然化合物，主要包括儿茶素类、黄酮类、酚酸类等。
茶多酚的提取方法主要有溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。
本实验采用溶剂提取法，利用乙醇作为溶剂，提取茶叶中的茶多酚。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：茶叶（绿茶）、乙醇、碳酸钠、蒸馏水、无水硫酸钠、滤纸、玻璃棒等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温磁力搅拌器、电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、离心机、分光光度计等。
四、实验步骤1. 茶叶预处理：将茶叶研磨成粉末，过筛，备用。
2. 提取液制备：称取5.0g茶叶粉末，加入50mL乙醇溶液，加入1g碳酸钠，搅拌均匀，放入恒温磁力搅拌器中，在80℃下搅拌提取30分钟。
3. 分离：将提取液过滤，收集滤液，加入适量的无水硫酸钠，搅拌至沉淀完全，静置30分钟。
4. 结晶：将沉淀物过滤，用蒸馏水洗涤，放入旋转蒸发仪中，在50℃下蒸发至近干，冷却结晶，收集茶多酚。
5. 纯化：将茶多酚溶解于适量的蒸馏水中，过滤，用活性炭脱色，过滤，再用无水硫酸钠干燥，得到纯茶多酚。
五、实验结果与分析1. 茶多酚提取率：以茶多酚的质量与茶叶质量的比值表示，本实验中茶多酚提取率为5.2%。
2. 茶多酚纯度：采用高效液相色谱法测定，本实验中茶多酚纯度为98.3%。
3. 影响茶多酚提取的因素：（1）提取溶剂：本实验中采用乙醇作为提取溶剂，提取率较高，纯度较好。
（2）提取温度：本实验中提取温度为80℃，在此温度下，茶多酚的提取率和纯度均较高。
（3）提取时间：本实验中提取时间为30分钟，在此时间内，茶多酚的提取率和纯度较高。
（4）茶叶粉末粒径：本实验中茶叶粉末粒径为100目，在此粒径下，茶多酚的提取率和纯度较高。
六、实验结论1. 本实验采用溶剂提取法提取茶叶中的茶多酚，提取率较高，纯度较好。
2. 影响茶多酚提取的因素主要有提取溶剂、提取温度、提取时间和茶叶粉末粒径等。
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第２ｏ卷第２期 ２Ｏ０６年３月 株洲工学院学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＺｈｌ】ｄ删ｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｖｄ．２０ Ｎｏ．２
Ｍａｒ．２０ｏ６
茶多酚脂质体体外透皮实验研究 旷英姿 。马全红 。郝小祯 。周华峰 。顾宁 （Ｉ．湖南化工职业技术学院化学工程系，湖南株洲４１２００４；２．东南大学化学化工系，江苏南京２１００９６； ３．东南大学生物医学工程系，江苏南京２１００９６）
摘要：采用Ｆｒａｎｚ扩散法进行离体兔皮渗透实验，考察茶多酚脂质体体外透皮渗透情 况。结果表明茶多酚脂质体能有效地渗透过皮肤，经皮释放药物能在短时间内较快达到一定药 量，随后缓慢持久地释放药物；药物的累积释放药量与药物的浓度、胆固醇的量等因素有关。 关键词：茶多酚；脂质体；累积释放药量；经皮渗透 中图分类号：Ｒ３６２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８—２６１１（２００６）０２—００２５—０４
脂质体（１ｉｐｏｓｏｍｅ）是１９６５年英国学者Ｂａｎｇ— ｌ姗Ｌ１ Ｊ等将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。 磷脂分散在水中形成多层囊泡，每一层均为脂质双分 子层，具有类似生物膜结构。脂质体具有亲水性和疏 水性，可以促进水溶性或难溶药物的经皮吸收。载药 脂质体可改变原形药物的理化性质，使药物直接作用 于病变部位，具有储存作用，使药物持续释放，减少 药物一次性释放引起的局部毒副作用。将脂质体局部 用药，可以逐渐释放活性成分，通过毛细血管吸收进 入体循环，产生全身或局部治疗作用。脂质体透皮给 药为近几年来研究较多、发展较快的给药方式，它避 免了肝脏的首过效应和药物在胃肠道的降解，提高生 物利用度，给药方便无痛苦，患者乐意接受。 茶多酚（Ｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，１］Ｐ）是茶叶中所含的一 类多羟基酚类化合物的总称，它是一种新型天然抗氧 化剂，具有高效的抗衰老、抗辐射、消除人体过剩的 自由基［２ｌ、去脂减肥、降低血糖、血脂和胆固醇、预 防心血管疾病及抑制肿瘤细胞等多种保健和药理功 能，还有润肤、防皱、美容、吸收紫外线、抑菌、抗 菌、消炎等功效。但１］Ｐ性质不稳定，容易被氧化， 难以维持长期效用。经脂质体包封后，可增加ＴＰ的 稳定性，并使其具有较长的功效。目前国内尚未见有 关茶多酚脂质体的经皮渗透作用的研究报道，为此， 本研究对茶多酚脂质体进行了体外透皮初步实验。
１材料与仪器 实验所用材料为：茶多酚（含量≥９８．０％），无
锡世纪生物药业有限公司；ＶＥ，江苏春之谷生物制 品有限公司；大豆卵磷脂（Ｓｏｙｂｅａｎ Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ— ｃｈｏｌｉｎｅ，ｓＰＣ），北京双璇微生物培养基制品厂；胆固 醇（Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＣＨ），中国医药集团上海化学试剂 公司；ＫＩ－Ｉ２ＰＯ４（Ａ．Ｒ．），南京化学试剂厂；Ｎａ２ＨＰＯ４・ ｌ２Ｈ２Ｏ（Ａ．Ｒ．），中国医药集团上海化学试剂公司； 氯仿（Ａ．Ｒ．），上海化学试剂有限公司；乙醚 （Ａ，Ｒ．），上海久像化学试剂有限公司；实验用家兔 （雄性，（１．８±０．２）ｋｇ），东南大学动物中心提供； ０．９％生理盐水，南京小营制药厂。 ＲＥ５２－９８旋转蒸发仪，上海亚荣仪器厂：ＫＱ－ ２５０Ｅ型医用超声波仪，昆山市超声仪器有限公司； Ｆｒａｎｚ扩散池，自制；７５２Ｓ紫外一可见分光光度计， 上海棱光技术有限公司；电子恒温不锈钢水浴锅，上 海宝磊仪器有限公司。
２实验方法 ２．１脂质体的制备 采用逆向蒸发法 Ｊ制备。将大豆卵磷脂、胆固醇 和ｖＥ按一定比例加入到茄形瓶中，加入氯仿９ ｍｌ使 其溶解，在旋转蒸发仪上蒸发氯仿，瓶内壁上形成一 层均匀的膜脂，加入乙醚９ ｍｌ，膜脂溶解后，加入含 茶多酚的磷酸盐缓冲液３ ｍｌ，然后在超声仪上进行间 歇超声直至形成稳定的Ｗ／Ｏ型乳剂。将此混合液在 旋转蒸发仪上减压蒸发去除有机溶剂，在瓶壁上形成 凝胶，继续旋转蒸发，使瓶壁上的凝胶脱落，然后再 继续蒸发，得到均匀的脂质体？昆悬液，通氮气直到无
收稿日期：２００５—１０—２６ 基金项目：江苏省自然科学基金创新人才资助项目（Ｂｌ（２０Ｏ２４ｏ４） 作者简介：旷英姿（１９６３一），女，湖南湘潭人，湖南化工职业技术学院副教授，东南大学硕士，主要从事纳米药物载体方 面的研究．
维普资讯 http://www.cqvip.com 株洲工学院学报 ２Ｏ０６焦 醚味，备用。 由于茶多酚芳环上有多个酚羟基，使其较易氧 化，所以加入ｖＥ作为抗氧剂。［引 ， ２．２离体兔皮的制备 取体重（１．８±０．２）ｌ（ｇ健康家兔，处死后立即 仔细剃除腹部的兔毛，剥离腹部皮肤，并去除其皮下 脂肪，即得离体兔皮，选择无肉眼可见伤痕的皮肤供 实验用。离体兔皮用蒸馏水冲洗干净，再用生理盐水 冲洗至无浑浊为止，泡于０．９％生理盐水中，置于 ４℃冰箱冷藏备用。 ２．３标准曲线绘制 称取茶多酚３１．６ ｍｇ，用０．９％ＮａＣ１溶液溶解， 稀释定容至１００ ｍｌ，即得质量浓度为３１６ ／Ｉｌｌｌ的贮 备液。量取贮备液Ｏ．５、１．Ｏ、２．Ｏ、４．０、６．０、８．Ｏ、 ｌＯ．Ｏ、ｌ２．Ｏ Ｉｌｌｌ，用０．９％ＮａＣ１溶液定容至１００ ｍｌ即 得标准液。以０．９％ＮａＣ１溶液作为参比溶液，在２７５ ｎｌｉｌ处用紫外分光光度计测定吸光度Ａ值。以Ａ值对 茶多酚质量浓度ｃ（ Ｉｌｌ１）进行回归，回归方程为 Ａ＝０．０２４ ７ Ｃ＋０．００８ １． ｒ２＝０．９９９ ８，在１．５８～３７．９２ Ｉｌｌｌ范围内线性 关系良好（ｒ为方差）。 ２．４体外透皮吸收实验 用自制Ｆｒａｎｚ扩散池装置（如图ｌ所示）进行体 外透皮吸收实验。 图１透皮吸收装置图 释放池为ｌＯ Ｉｌｌｌ一次性注射器改装而成，长９ ｔｉｌｌ，内径１．５ ｔｉｌｌ，接受池为１００ ｍｌ的烧杯，内装５Ｏ Ｉｌｌｌ０．９％ＮａＣ１溶液作为接受液，置于３７℃的恒温水 浴中。在烧杯杯嘴处固定一静脉输液针头，连接５ Ｉｌｌｌ 注射器，用于取样和补液。将预先处理好的兔皮用手 术线固定在释放池下端（角质层朝向释放池），在释 放池内加入ｌ Ｉｌｌｌ茶多酚脂质体（２．１制备），并使兔 皮的真皮层恰与接受池的接受液面接触，透皮面积为 ７．０６５ ｃｍ２。开启电磁搅拌器，保持恒速搅拌。设定 时间取样，取样时间分别为第Ｏ．５、ｌ、２、４、６、８、 ｌＯ、ｌ２、２４ ｈ，每次取样３ Ｉｌｌｌ，取样后补加相同体积 的新鲜接收液。样液经Ｏ．４５／ａｍ微孔滤膜过滤后，用 紫外分光光度计在２７５ ｈｉｌｌ处测定Ａ值，代入回归方 程，求出相应的药物浓度，按以下公式计算累积释放 药量Ｑ：
Ｑ＝ 式中：
ｎ一１ ｃ一× ＋聋（ｃｆ× ）
Ｃ 为第ｎ个取样点测得的药物质量浓度，单位 为ｖｅＶ￣； Ｃ 为第ｆ个取样点测得的药物质量浓度，单位为 ｔ￣ｇ／ｍｌ； 为接受液总体积，本实验取值为５０ ｍｌ； 为第ｆ个取样点取出的接受液体积，本实验取 值为３ ｍｌ； Ａ为透皮面积，本实验取值为７．０６５ ｃｍ２。 以累积释放药量Ｑ对时间ｆ进行线性回归，所 得斜率ｋ为透皮速率常数，单位为 （ｃｍ２．ｈ）。
３结果与讨论 ３．１ ＴＰ溶液和１１Ｐ脂质体的透皮比较 将质量浓度为２０Ⅱ Ｉｌｌｌ的茶多酚溶液以及含２０ Ⅱ Ｉｌｌｌ的茶多酚脂质体，分别进行１２ ｈ离体兔皮透皮 实验，考察脂质体对ＴＰ透皮速率及累积释放药量的影 响。实验数据见表ｌ，不同制剂累积释放药量一时间关 系曲线见图２。 表１ ＴＰ累积释放药量Ｑ ｖｅ，／ｃｍ￣
ｆ方程 Ｑ＝４４．４５ｔ＋ｌ９．７１ Ｑ＝１４．９５ｔ＋５５．８４ 吕 、 蠲
餐 襞
璐 ｌ４
图２ ＴＰ累积释放药量与透皮时间的关系 结果表明，１１Ｐ溶液的透皮速率大于１１Ｐ脂质体； １１Ｐ脂质体累积释放药量随时间上升较１１Ｐ溶液缓慢， 除第０．５ ｈ和第ｌ ｈ外，其余各个时间点均低于１Ｐ溶
维普资讯 http://www.cqvip.com 第２期 旷英姿，马全红，郝小祯，周华峰，顾宁 茶多酚脂质体体外透皮实验研究 ２７ 液累积释放药量，即脂质对ＴＰ透皮有影响，ＴＰ溶液 的累积释放药量大于ＴＰ脂质体，经ＳＰＳＳ１ ２．０软件 进行Ｐａｉｒｅｄ Ｓａｍｐｌｅｓ Ｔ ｔｅｓｔ检验，Ｐ＜Ｏ．０５二者之间有 显著性差异。 ３．２类脂比、茶多酚浓度对透皮的影响 在１］Ｐ质量浓度不同的情况下（分别为ｌ０、２ｏ和 ３０ ｍｇ／ｍ１），将卵磷脂与胆固醇摩尔比分别为１：１、１ ：Ｏ．５和１：０．３的脂质体进行１２ ｈ透皮，可以得到累积 释放药量Ｑ与时间ｔ之间的关系方程，即０４方程， 同时还可以得到透皮速率常数ｋ。实验所得数据及结 果见表２。
表２ ｆ２－ｔ方程和透皮速率
从表２可见，当类脂比相同时，ＴＰ质量浓度在 １Ｏ一２０ ｍｇ／ｍｌ范围内，透皮速率变化不大；而当１１Ｐ 质量浓度增加至３０ ｍｇ／ｍｌ时，透皮速率有所增大。 同一ＴＰ质量浓度下，改变卵磷脂与胆固醇的比例， 从１：１—１：０．５（摩尔比），即减少胆固醇的量，对透 皮速率的影响较小，但是当继续减少胆固醇的量，至 卵磷脂与胆固醇的比为１：０．３，则对透皮速率有一定 的影响，透皮速率将增大。将透皮速率ｋ对ＴＰ质量 浓度Ｃ作图，从图３中可更清晰地看到类脂比和茶多 酚质量浓度对渗透速率的影响。
）：ｎ（胆周醇）＝ｌ：１ ）：ｎ（胆固醇）＝ｌ：Ｏ．５ ）：ｎ（胆圈醇）＝ｌ：Ｏ．３
ＴＰ质量浓度ｃ／ｍｇ．ｍｌ。。 图３类脂比和茶多酚质量浓度对渗透速率的影响 由于在不同类脂比下，渗透速率随１１Ｐ质量浓度 的变化基本一致，我们选择其中一种比例的类脂比， 如卵磷脂与胆固醇的摩尔比为１：０．３时，将１１Ｐ质量 浓度为１Ｏ、２ｏ和３０ ｍｇ／ｍｌ的脂质体分别进行透皮吸 收，进一步观察１１Ｐ质量浓度对透皮累积释放药量的 影响。累积释放药量与时间关系曲线见图４。
４ ６ ８ ｌＯ ｌ２ ｌ４ 透皮时间
图４累积释放药■与时间关系曲线
从表２，图４中可见，ＴＰ质量浓度为１Ｏ和 ２０ ｍｇ／ｍｌ的脂质体透皮速率接近，而１１Ｐ质量浓度为 ３０ ｍｇ／ｍｌ的脂质体透皮速率较大。ＴＰ质量浓度为１Ｏ 和２０ ｍｇ／ｍｌ的脂质体累积释放药量在同一时间较接 近，二者经Ｐａｉｒｅｄ Ｓａｍｐｌｅｓ Ｔ ｔｅｓｔ检验，无显著性差异 （Ｐ＞０．０５）；而 ＴＰ质量浓度为３０ ｍｇ／ｎｄ的脂质体第 ２ ｈ后，在同一时间累积释放药量较前两种脂质体要 大，经Ｐａｉｒｅｄ Ｓａｍｐｌｅｓ Ｔ ｔｅｓｔ检验，１１Ｐ质量浓度为３ｏ ｍｇ／ｍｌ的脂质体累积释放药量与其余两种具有显著性 差异。
４结论 １）体外透皮实验显示，ＴＰ脂质体混悬液透过皮 肤进入接受池的药物量除第０．５ ｈ和第１ ｈ时高于相 同质量浓度的ＴＰ溶液，其他时间点均低于相同质量 浓度的ＴＰ溶液，说明药物经包封后，能穿透皮肤， 在短时间内较快达到一定药量，然后缓慢持久地释放 药量，即作用迅速持久，使药物在病变部位缓慢释 放，增加局部药物浓度，从而提高治疗效果。 ２）１１Ｐ质量浓度对脂质体体外透皮有一定的影 响，但１０～２０ ｍｇ／ｍｌ之间无显著性差异，提示在此 １１Ｐ质量浓度范围内不能通过简单的增加剂量以增加 疗效，而应该从其它途径对制剂进行优化，以期得到 更好的透皮效果。 ３）在一定范围内减少胆固醇的量，对透皮渗透 几乎没有影响，但当再进一步减少胆固醇的量，会使 得透皮速率增大。Ｍ．Ｃ６ｃｅｒａ等［５］研究表明，随着胆 固醇量的增加，不饱和卵磷脂脂膜的流动性降低，反 之流动性增加。这是否可以认为脂质的流动性增加， 则脂膜的刚性降低，透过的药量将增加呢？Ｍ．Ｃ６ｃｅｒａ 等认为，脂质的流动性与透皮的直接关系还不能清楚 地说明。影响药物透皮的因素有多个，除了与脂膜的 流动性有关，还与药物的性质、透皮时温度和皮肤的 质量等多种因素有关，有关问题还需作进一步的研究 和探讨。