546-系统性红斑狼疮实验室检查路径

系统性红斑狼疮的实验室检查PPT1—377同志们大家好我们讲第二节系统性红斑狼疮的实验室检查这也是我们今天讲的一个重点的这个部分。

那么上一节课我们讲到系统性红斑狼疮的临床表现它是一个多系统、多脏器的损害但是早期往往并不典型可能仅仅是一个器官脏器的病变但是呢我开始强调过就是我们做临床医生应该有这样一个，思想有这样的一个意识见到一个病人发烧不明原因，如果又发现他不久又出现了别的问题，关节、皮肤、肾脏一定要想到，特别是女病人一定要想到她是不是红斑狼疮，那这时候的诊断从临床上特别依赖实验室，如果你是临床医生那你一定要掌握关于狼疮的实验室诊断有哪些指标那么这些指标怎么去评价怎么去认识？如果你是从事实验室工作的那你就要对这些指标从方法学、各个方面你要建立一个完整的概念，用什么方法做？原理是什么？注意哪些问题所以我们这一节无论对临床医生还是对检验的同志都是很重要的一部分内容。

PPT2—263我还有用一个表，这个表呢我先概括的把这个表介绍一下，我下面的讲课主要是围绕这个表来进行的，那么遇到一个多系统损害早期的症状仅仅表现一个系统损害和不明原因发烧，关节炎、蛋白尿、胸膜炎等等，这是我们说过，我们在上一表我们说过一定要做一个初筛那就是血沉和CRP它会增快增高的，这时候呢你如果想到是狼疮你要从两个方面去查，一个做些基础免疫学检查这个我们在上一节课也谈到了比如说他免疫球蛋白增高，IgG、IgA、IgM都增高那么血沉蛋白电泳是一个多克隆的球蛋白增高另外呢做些补体检查，不管他总补体的测定，单个的补体水平的测定低的它存在一个低补体血症那这是狼疮一个特点。

那这一特点呢都属于基础免疫学的检查不是我今天所讲的主要内容但是我在这里面告诉大家了你必须要做，做完的结果是什么我也告诉大家。

那么下面呢你既然是狼疮那就一定要有自身抗体那所以重点我们来讲自身抗体的检测。

那么自身抗体检测里面我们说有组织特异性的有组织非特异性的那你比如说组织特异性的有些病人有贫血的话那他为什么贫血？自身免疫一定要抗红细胞抗体那你要做Coommbs实验，Coombs实验是阳性的那么就证明了他体内有抗红细胞的抗体，那你要做一个血小板抗体，假如这个病人血小板减少的话你要做一个抗血小板抗体，那么如果这个病人还有一些血栓的一些表现，那么或者有在女同志有习惯性流产那你就要想她会不会是抗磷脂抗体的综合症呢？那你要做一个抗心磷脂的抗核的抗体阳性另外呢另外把有些病人类风湿因子也是阳性的，但是他不是类风湿性关节炎它仍然是类风湿阳性。

那么这些也不是我今天这一节课讲的内容，但是我告诉大家那么只有针对性的对贫血的Coombs实验要做，血小板减少的你要查血小板抗体，你有习惯流产的血栓的你要查心磷脂抗体。

那么今天我主要讲的是这一个就是组织非特异性的抗体那就是抗核抗体，以抗核抗体为代表的这一类抗体。

那首先我们当然必须你必须要查抗核抗体，那抗核抗体阳性说明他很可能是红斑狼疮但他不一定就是红斑狼疮你必须要做另外两个抗体，就是抗双股DNA抗体、抗ENA抗体那这两个抗体做完了如果说有阳性的，那么他狼疮基本上就拍板了，就定了。

当然你还想了解抗核抗体里面是什么抗体？我还要刨根问底，那你就刨根问底那你就去做不同类型的抗核抗体检测这个呢如果我们不是从事专业和研究的话我们就没有必要了，就诊断狼疮就行了，你干嘛还去抠哪个抗核哪个抗体呢？好，我们如果这儿你没听明白下面我讲抗核抗体你就会听明白因为抗核抗体是个总称，抗核抗体有几十种到底是哪一种那你就要查各特异性的抗体检测。

PPT3—392好，那我们现在就开始讲关于红斑狼疮的自身抗体的前提，自身抗体的检查项目。

PPT4—267第一个抗核抗体，什么叫抗核抗体就是能和细胞核成分及其相同物结合的形成抗原抗体附和物的自身抗体我们就叫做抗核抗体，不要把抗核抗体只针对细胞核也包括细胞浆的很多成分实际上就是抗细胞的抗体，说的更大众化一点更能宽泛的理解它就是针对细胞的所有成分的抗体它不一定就是细胞核。

那么目前已经有几十种的抗核抗体形成一个所谓的抗核抗体谱所以它不是一个东西它是几十个的总称。

PPT5—274那么根据到底是哪一种类型的抗核抗体是针对我们细胞的哪一种成分呢？我们又分为五大类就是抗DNA抗体抗组蛋白抗体，抗非组蛋白抗体，抗核仁抗体和抗其他细胞抗体这五大类。

PPT6—413一类抗DNA抗体，包括抗双股DNA抗体，还包括抗单股DNA抗体，抗组蛋白抗体包括抗总的组蛋白抗体还有抗里面具体的H1、H2A、H3、H4的抗体，抗非组蛋白抗体又包括了抗核可能性成分也就是ENA，那ENA里又分为什么2N、2NP，SM、SSA、SSB、SCL-70、Jo-1等，那么这些东西呢大家觉得名字好古怪呀，是，那么这些名字的起法有的其实绝大部分都是根据这个，这个抗原的性质来取的，你比如说2N指的是，2NP指的是核糖核酸，就是这细胞里面的核糖核酸的抗体，那就叫做抗2NP是吗？就是针对的这个核糖核酸的你比如说SCL-70是针对的DNA 里面的拓扑异构酶1针对这个的，你比如说着丝点的抗体叫做ACA它针对着丝点的抗体。

那有的就很古怪比如SM，它是什么呢？它是个人名他是首先从一个病人身上找到一个抗体，这个抗体呢当时不知道是什么，干脆就以他的名字，这个病人叫史密斯就用他的名字命名了抗体叫SM。

那么还有呢这是一大类，一大类的叫抗非组蛋白抗体。

第四类抗核仁抗体当中的细胞核里的核仁又包括一些SSrRNA，U3-nRNA、Pm-sd/Pm-1等等等等，大家不要去记这些东西这是很专业的东西。

大家还要看第五个抗其他细胞成分抗体，高尔基体、中心体、线粒体、肌动蛋白、细胞角蛋白，这个核层蛋白抗体等等。

总而言之我通过这张幻灯片的讲解你就会认识到抗核抗体是个复杂的东西，我们查的抗核抗体只是个总称，到底是针对哪一个呢？那你要想查你就去慢慢查去我们根据商业的实验盒我都可以找到这些试剂都可以去做但是没有必要，没有必要。

PPT7—420好，方法，那么抗核抗体用什么来测呢？那么说方法很多，大家说目前主要的是用间接免疫荧光法简称为IFT，那么这种东西的原理我们下面还要讲我这里先不作为详细介绍了一会儿在讲方法学的时候还要讲这个问题。

首先呢我们要查血里面有没有抗体，有没有抗核抗体对不对呀？那你要做的时候你一定要用抗原来做，对吧？抗原加抗体就结合了我们看不见我们加了荧光，带了荧光我们在显微镜下看见了，它因为闪光了叫做间接免疫荧光因为还带了荧光就是免疫法，它又是间接它是利用了一个抗原，靶抗原我不是直接插进抗体我跟你抗原结合能结合上你就是抗体，你结合不上那就不是，所以这是间接免疫荧光法。

那当然这荧光就结合到细胞里面的不同成分，因为我们说抗核抗体是个总称，每个人都不一样，病人A、病人B、病人C抗核抗体都不一样所以在结合的时候可能病人A结合的是这一部分，病人B结合的那一部分，病人C结合的又是另一部分所以这样就形成了一个什么呢？荧光的一个图形，荧光一亮亮在不同地方这就是所谓的模型。

PPT8—277那这模型呢现在大概分为均质型、周边型、核仁型、斑点型、散点型大概就这六类，每一个模型所包含的抗体不同，临床意义也有所区别，下面我们就来。

PPT9—414核型。

好，这张幻灯片子大家一看整个细胞都是荧光，很均匀叫均质型，核质的染色均匀一致。

那么这个这种类型我们叫均质型那么这里面主要是针对的抗双股DNA的抗体或针对的是组蛋白的抗体，以前不说了吗？抗核抗体是个总称里面有的是双股DNA的，有的是别的组蛋白的非组蛋白的等等是吧？这种核型可能说你的抗体主要是抗双股DNA抗体或者是抗组蛋白抗体，能够显得出这样一种均一性、均质型的这样一个核型这样的模型。

PPT10—337这个呢一看就不是了，里面有的有荧光有的没有荧光，叫周边型或者叫核膜型，所以荧光呢主要在细胞核的周围，那么这个呢可能你主要是抗层蛋白的抗体，层蛋白抗体，那么有的时候双股DNA抗体也可以出现这样的核型，也可以出现，所以周边型可能是反应的这个病人体内有抗层蛋白抗体或者有抗双股DNA 抗体。

PPT11—338第三个叫核仁型，核仁，你看这里面细胞核里有两个亮点，亮点就是核仁，就是核仁召染荧光。

那么这个呢又能分为什么核仁颗粒型、核仁均质型我们就不去，这是研究再说我们一般的临床大夫，一般的实验室我们知道核仁型就可以了，那核仁型是什么呢？是有抗U3nRNP的抗体，也就是叫核糖体核蛋白的抗体又称为（？？00：00：40）蛋白的抗体，或者呢还有RNA多聚酶1的抗体，那么还有就是PM1的抗体还有呢7-2RNP的抗体，那么7-2RNP又是一类核糖核蛋白，那这个核仁型它就可能说明体内的抗体比较多，多种。

PPT12—415第四型斑点型这个呢我们因为这个视野比较小，如果放大了你看里面确实是斑斑点点的，斑点型，就是整个的染色是个颗粒状、板块状。

那么这一型呢主要是跟ENA有关系，那么什么叫ENA呢？我们讲ENA就是可溶性可提取性核蛋白，它是非组蛋白的一类，这里面又包括很多种但是总的来讲我们就称为总称的来讲ENA抗体。

当然ENA哪一种那也不好说那还得继续再去分析，总而言之这一型斑点型它是跟ENA抗体是有关系的。

PPT13—443这个呢叫散点型，散点型那么这里面是这个细胞核里面均匀散布的大小一致的着色荧光的颗粒叫散点型，它没有核膜的结构，就它跟前面的斑点型还不太一样我们称为着丝点型它主要是和抗着丝点的抗体是有关系的。

PPT14—278第六这是胞浆型号那么这里主要是针对的胞浆不是细胞核，看啊，它是针对的细胞浆细胞核在中间是空的，那么细胞浆是着荧光的，所以叫胞浆型。

它又分为什么？粗颗粒的、细颗粒的我们不去谈它，那么这种胞浆型主要是跟抗线粒体抗体有关系，跟核糖体抗体有关。

上面呢我给大家介绍了这六种的抗核抗体的这个模型，或者叫核型，那么每种核型都表示病人的血清里面含有不同类型的抗核抗体。

那不同的类型的抗核抗体或者说不同类型的核型都是跟疾病相关的。

PPT15—416那么我们在做抗核抗体的时候我们说我们是用血清的一个，一个稀释的办法我们下面还要详细讲，那么参考范围就是说有的呢报的是阴性的是小于1：100有的报告是小于1：40，那么为什么这样的参考范围不一样呢？有的人说是血清稀释到1：100阴性就正常了，1：40就可以了，这主要取决于不同的实验室采用的不同的稀释方法，关于稀释方法我们下面还要再专门去讨论。

PPT16—279那么抗核抗体的临床意义是什么？那么抗核抗体可以是生理性的它作为自身抗体我前面在讲最开始的时候讲过它可以是生理性的但也可以是病理性的，那么生理性的这个抗核抗体是普遍存在的就是我们身体里都有它可能参与我们一些衰老细胞、死亡细胞、肿瘤细胞的清除那么它的滴度很低，那么和它相应的抗原的这个亲和力也很低一般都是IgM型那么只有这个抗核抗体这个量多的时候那抗核抗体的量多我们不是说像我们用生化的方法定量多少多少毫克、多少多少微摩尔、毫摩尔不是，它是用滴度表示用血清的稀释度来表示，也就是说只有血清稀稀稀稀到一定程度它还阳性，它老阳性那这个时候那血清都已经很稀释的它还阳性我们这时候说明抗核抗体的含量相对就很高了这个时候认为是病理性的具有临床意义的。