植物培养基母液的配制
培养基母液配制中的若干关键环节
培养基母液配制中的若干关键环节培养基母液,也叫浓缩贮备液.它是以培养基配方配制成的高倍的浓缩液,不同组分母液,它的浓缩倍数不同,一般最低为10倍,高的有50倍、100倍、200倍,甚至1000倍.母液是一个方法比较简便、用量比较准确且被广泛采用的配制方法.本文就如何掌握培养基母液配制的操作要领作一阐述,以供参考.以MS培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类.(见表1)1 大量元素和微量元素母液的配制按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品（如大量元素或微量元素）配在同一母液中（见表1）.但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效.为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决：①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推；②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合.2 铁盐母液的配制铁盐的成份含硫酸亚铁（F eSO4·7H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）.这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀.该方法是：分别溶解FeSO4·7H2O和 Na2-EDTA,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却,将2种溶液混合,调PH 至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中.3 植物生长调节物质母液的配制植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的IAA、IBA、NAA,赤霉素类的GA3,细胞分裂素类的2,4-D、KT和6-BA等.由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同：①IAA,IBA和GA3先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中；②NAA可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积；③2,4-D可溶于少许0.1mol·L-1的NaOH溶液中,然后加水定容；④KT和6-BA可用少量0.1mol·L-1的HCl溶解,再加水定容；⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容.植物生长调节物质浓度通常用ppm（mg·ml-1）和mol·L-1表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶.4 有机附加物母液的配制在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性.由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-20℃的低温冰箱内.MS培养基配制中的五点注意1 母液配制必须严格分类配制高浓度的母液是植物组织培养的基本功。
MS培养基母液的配制与保存
仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0.1-1N NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。
方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点：（1）保证各物质成分的准确性。
（2）便于配置时快速移取。
（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸馏水中。
配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml（即含0．25 mg的量）加入到母液中。
3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
培养基母液的制备
配制2升MS+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，阐述母液配制，培养基配制的全过程（1）母液配制：1确定制备的培养基为MS+琼脂0.6%+蔗糖3%为大量元素培养基，应注意溶解和添加顺序，防止沉淀。
2确定各母液的浓缩倍数，大量母液一般为浓缩10倍有机母液浓缩100倍，即所需配制的大量母液为200ml 微量元素20ml，铁盐20ml，有机元素20ml。
3根据公式：药品称取量（mg）=配方用量x浓缩倍数x母液体积计算出各药品的用量，即琼脂12g、蔗糖60g4用普通天平（1/100）称量药品，称号后的药品要分别放置。
5将药品分别放入烧杯中，分别溶解，经充分溶解后再混匀。
6将混合后的溶液移入容量瓶中，进行定容。
7混合均匀后，将母液转入试剂瓶。
8在试剂瓶上贴上标签，注明母液名称，浓缩和配制日期。
9放入冰箱中低温（2~4度）保存。
（2）培养基的配制：1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别为大量：200ml 微量20ml 铁盐20ml 有机20ml 琼脂12g 蔗糖60g。
2在容器内装相当于1/3左右的纯水，加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，最后加入称量的蔗糖并搅拌均匀。
3加水定容至2L，再搅拌均匀。
4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。
6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。
现在需要你配制2升MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，已知大量元素母液10倍，微量元素母液100倍，铁盐50倍，有机物母液50倍，6-BA母液1mg/ml，NAA母液0.1mg/ml，请你阐述培养基的配制及灭菌的全部过程。
1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别：为大量元素母液200ml，微量元素20ml，有机物40ml，6-BA4ml，NAA2ml，琼脂12g，60g.2在容器内装相当于1/3左右的纯水，在依次加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，6-BA，NAA，蔗糖。
实验一 培养基的配制与灭菌
铁盐
有机物质 2,4-D
200倍液
100倍液 1.0 mg/ml
5 ml
10ml 1ml
——
5 ml
10ml ——
5 ml
10ml 1ml
NAA
KT 蔗糖
1.0 mg/ml
1.0 mg/ml 30 g
0.2ml
1.0ml 30 g
——
—— 30 g
0.1ml 30 g
琼脂
pH值
8g
5.8
8g
5.8
8g
五、作业要求：完成实验报告，回答下面的思考题 1、根据以下所给母液浓度、蔗糖和琼脂量，配制烟草愈伤组织诱 导和培养的培养基（MS1），按MS配方（Murashige and Skoog, 1962）计算各种母液吸取量或药品的直接称量量。 2、简述高压蒸气灭菌的步骤；培养基采用高压蒸气灭菌应注意哪 些事项？
药品名称
母液倍或母 液浓度 （mg/ml）
配制1 L培养基 配制0.25 L培养基所需母液量(ml) 所需母液量(ml) 或质量（g） 或直接称量量（g） MS 1 MS 2 MS 3
大量元素 微量元素 铁盐 有机物质 2,4-D NAA KT 蔗糖 琼脂 pH值
10倍液 100倍液 200倍液 100倍液 1.0 mg/ml 1.0 mg/ml 1.0 mg/ml 30 g 8g 5.8
5.8
——
5.8
1）在烧杯内放入一定量的蒸馏水，用量筒或移液枪按上述表 格内配方加入各种母液及激素。 2）加入蔗糖30g，待蔗糖溶解后（可搅拌）加水定容至1L。 3）调节PH值，用酸度计测量PH值至5.8，常用1mol/l的HCl或 NaOH调整。 4）在MS1和MS2中加入琼脂8g，加热溶解，溶解过程中不断 搅拌，加热时烧杯口上盖上锡箔纸，防止水分过度蒸发。 5）分装：将配好的培养基及时分装到小三角瓶中，防止凝固 ，每瓶约30ml-40ml（约覆盖瓶底），分装时不要沾壁口。 6）封口：用封口膜将将三角瓶封口。
植物组织培养实验指导
生物技术大实验第一部分植物组织培养实验一、母液的配制和保存（3学时）一、实验目的通过配制MS培养基母液，掌握贮备液的配制和保存方法。
二、原理配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存。
使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液为：大量元素母液（母液Ⅰ，浓缩10倍）、微量元素母液（母液Ⅱ，浓缩100倍）、铁盐母液（母液Ⅲ，浓缩100倍）和有机化合物母液（母液Ⅳ，浓缩100倍）等。
三、实验仪器设备和试剂冰箱，天平，酸度计，烧杯（50ml，100ml，500ml，1000ml），量筒(1000ml，100ml，25ml)，容量瓶(1000ml，500ml，100ml)，磨口试剂瓶(100ml，500ml，1000ml)，药勺、称量纸、滴管、玻璃棒，电炉，微波炉NH4NO3, MnSO4.4H2O, KNO3, ZnSO4.7H2O, CaCl2.2H2O, Na2MoO4.2H2O, MgSO4.7H2O, CuSO4.5H2O, KH2PO4, CoCl2.6H2O, H2BO3，Na2•EDTA•2H2O，KI, FeSO4.7H2O，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇, 蒸馏水四、实验方法1、MS大量元素母液的配制配制时先用量筒量取蒸馏水大约350ml，放入500ml的烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取：NH4NO3 ,KNO3 ,KH2PO4 ,MgSO4.7H2O ,CaCl2.2H2O，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入500ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至500ml，然后，倒入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
2、MS微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平分别依次称取MnSO4•4H2O，ZnSO4•7H2O ，H2BO3，KI ，NaMoO4•2H2O，CuSO4•5H2O，CoCl2•6H2O，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容，装入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
组织培养实验MS培养基及配制注意事项
一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。
3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。
4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。
5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。
A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。
二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。
(整理)培养基母液的制备.
目录实验一培养基母液的制备 (1)实验二培养基的配制与灭菌 (6)实验三无菌操作及种子无菌播种 (9)实验四激素对器官分化及愈伤组织诱导的影响 (13)实验五茎尖培养与脱毒 (16)实验六有丝分裂制片技术和显微观察 (18)实验七植物多倍体细胞的诱发与鉴定 (22)实验八植物组织总DNA的提取与测定 (24)实验九毛状根培养 (27)附录 (32)实验一培养基母液的制备一、实验目的学习和掌握培养基母液的配制方法和注意事项。
二、实验原理培养基的主要成分包括无机营养物质、碳源、有机物质、植物生长物质等，由于每种培养基往往含有一二十种化合物，配制起来不仅繁琐，而且还很难达到准确和精确，尤其是生长调节物质和微量元素用量较少，难于准确称量，稍有偏差，就会影响试验结果及试验的重复性。
为解决这一问题，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。
当配制培养基时，只需要按预先计算好的量吸取母液即可。
三、实验药品和试剂NH4NO3、KNO3、MgSO4·7H2O、（NH4）2SO4、NaH2PO4·H2O、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、Na2-EDTA·2H2O、FeSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(VB6)、盐酸硫胺素(VB1)、甘氨酸、蔗糖、琼脂四、实验仪器及用具电子天平（感量为0.0001g）、扭力天平（感量为0.01g）、烧杯（1000ml、500ml、100ml、50ml）、量筒（500ml、25ml）、容量瓶（1000ml、500ml、100ml）、试剂瓶（1000ml、500ml、100ml）、药勺、玻棒、电炉、石棉网。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。
四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度（mg/L）扩大10称量(mg)1NH4NO31650165002KNO31900190003CaCl2·2H2O44044004MgSO4·7H2O37037005KH2PO41701700注意：(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
6实验六母液配制
成分 用量 (mg/L)
NH4NO3
1650
KNO3
1900
KH2PO4
225＊
MgSO4·7H2O CaCl2·2H2O/无水 MnSO4·4H2O ZnSO4·7 H2O
370 440/332 22.3 8.6
KI
0.83
H3BO3 Na2MoO4·2 H2O CoCl2·6H2O
6.2 0.25 0.025
2.78
3.73
配制 250mL母液(200×) 用量(g)
/
/
/
1.0 g/ 50 mL (单独配)
/
0.05
/
0.025
/
0.1
/
0.025
＊为烟草悬浮细胞培养基配方
实验方法与步骤：
1. 计算所配制的各母液成分的需要量（称取量）
2. （1）配制大量元素母液500 mL (20X)Байду номын сангаас
（2）配制微量元素母液500mL (200X)
（3）配制铁盐母液 500mL (200X)
（4）配制有机母液250mL (200X)
3. 植物生长物质母液的配制
2,4–D母液（1mg/mL）：准确称量2,4-D 100mg，先用1～3mL 90%乙醇完全溶解后，加蒸馏水定容；也可以加入少量碱（如 1mol/L氢氧化钾、氢氧化钠）溶液，使之中和成为钠盐或钾盐，在 水中溶解，再加水定容至100mL，即配成浓度为1mg/mL的母液。
母液种类成分用量mgl配制500ml母液20的用量g配制500ml母液200的用量g大量元素nh165016519001937037o无水44033244332微量元素mnso223znso086ki083062na0025cocl00025cuso母液种类成分用量mgl配制500ml母液200用量g配制250ml母液200用量g铁盐feso278278373373有机附加50ml单独配盐酸硫胺素维生素b1005烟酸050025甘氨酸2001盐酸吡哆醇维生素b6050025为烟草悬浮细胞培养基配方其他
植物营养液母液的配制方法和步骤
植物营养液母液的配制方法和步骤植物营养液母液是一种用于植物生长的营养补充剂，通过将其稀释后喷施于植物叶面或根部，可以有效地提高植物的生长速度和产量。
制作植物营养液母液需要一定的配制方法和步骤，下面将详细介绍。
配制植物营养液母液需要准备以下原料和器材：1. 水：优质的纯净水或去离子水。
2. 植物营养元素盐：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁等。
3. pH调节剂：例如磷酸二氢钾、氢氧化钾等。
4. 电子秤、试剂瓶、搅拌棒等实验器材。
接下来，按照以下步骤进行植物营养液母液的配制：第一步：准备工作清洗并消毒所有使用的试剂瓶、搅拌棒等器材，保证配制过程的无菌环境。
准备足量的纯净水或去离子水，确保水质优良。
第二步：配制基础液将适量的纯净水倒入试剂瓶中，加入硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁等植物营养元素盐，按照一定的配方比例进行混合搅拌，直至完全溶解。
这一步是制作植物营养液母液的基础。
第三步：调节pH值根据所配制的植物营养液的种类和需要，使用pH试纸或专业的pH测定仪器检测植物营养液的pH值，若不在理想范围内，则需要使用pH调节剂进行适当调节。
第四步：过滤和灭菌在植物营养液配制完成后，通过过滤器或其他滤芯进行过滤，将其中的固体杂质去除。
然后，将植物营养液加热至一定温度，进行灭菌处理，以保证母液的纯净性和稳定性。
第五步：包装储存将经过处理的植物营养液母液倒入干净的密封容器中，避免光照和高温，存放在阴凉通风处。
严格按照标签上的贮存条件和有效期使用。
植物营养液母液的配制过程中需特别注意无菌操作，以免杂菌污染影响植物生长。
在配制过程中应根据不同植物的生长期和需求，合理调整植物营养液的成分配比和浓度，以达到最佳的施用效果。
要制作一份优质的植物营养液母液，需要仔细按照配制步骤进行操作，并严格控制各项指标，以确保植物营养液的质量和稳定性。
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实验1 培养基母液的配制
一、实验目的
掌握培养基母液的配制方法。
二、实验原理
配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液可分为MS 大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。
另外，还要配制生长调节物质母液，在不同类型的培养基中使用。
三、实验器具和药品
电子分析天平、扭力天平、烧杯（50mL、100mL、500mL、1000mL）、量筒（1000mL、100mL、25mL）、容量瓶（1000mL、500mL、100mL）、磨口试剂瓶（500mL、1000mL）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉（1000W）、冰箱。
配制MS培养基所需药品按培养基的配方准备。
植物生长调节物质2，4-D、NAA、6-BA 等。
四、培养基母液的配制过程
首先，按书中MS培养基的配方，将各种母液根据各自的扩大倍数，计算出扩大后的称取量，然后分别进行药品称取和母液配制。
具体操作如下：
（1）MS大量元素母液（20倍）的配制。
按照MS培养基的用量扩大20倍，将大量元素配制成20倍的母液。
配制时先用量筒量取蒸馏水大约800mL，放入1000mL的烧杯中，依次分别称取：NH4NO3 33g 、KNO3 38g、KH2PO4 3.4g、MgSO4.7H2O 7.4g 、CaCl2.2H2O8.8g,按顺序先后倒入烧杯中，用玻璃棒搅动，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入1000mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至1000mL，然后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于4摄氏度冰箱保存备用。
配制培养基时每升MS培养基吸取该母液量为50mL。
（2）MS微量元素母液（100倍）的配制。
将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大100倍，用电子分析天平分别依次称取MnSO4.4H2O 2.23g、ZnSO4.7H2O 0.86g 、H3BO3 0.62g、KI 0.083g、NaMoO4.2H2O 0.025g、CuSO4.5H2O 0.0025g 、CoCl.6H2O、0.0025g ，并用重蒸馏水逐个溶解，待全部溶解、用容量瓶定容后，装入1000mL的磨口试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于4摄氏度冰箱保存备用。
配制MS培养基时，每配制1000mL培养基吸取此母液10mL。
（3）铁盐母液（100倍）的配制。
在电子天平上准确称取2.78g硫酸亚铁和3.73g乙二胺四乙酸钠，分别倒入盛400mL蒸馏水烧杯中，微加热，并不断搅拌使之全部溶解。
然后将两种溶液倒入同一个1000mL的容量瓶中，混合均匀后，用蒸馏水定容至1000mL，并倒入棕色磨口试剂瓶中，经室温放置一段时间，令其充分反应后，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4摄氏度冰箱保存备用。
如果将新配制的铁盐母液立即放入冰箱中，则会容易形成沉淀。
配制培养基时，每配制1000mL MS培养基吸取此母液10mL。
（4）MS有机母液（100倍）的配制。
用电子天平依次称取肌醇（环己六醇）5000mg 、盐酸硫胺素（维生素B1）5mg、烟酸25mg、甘氨酸1000mg、盐酸吡哆醇（维生素B6）25mg，用蒸馏水依次溶解并定容后，装
入500mL的磨口试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于4摄氏度冰箱保存备用。
配制培养基时，每配制1L MS培养基吸取该母液10mL。
（5）植物生长调节物质母液的配制。
由于水剂型的植物生长调节物质在组织培养中既使用方便，又消毒简单，故在配制培养基前常用的植物生长调节物质，例如将2，4-D、6-BA和NAA等配制成100mg/L浓度的母液。
其配制方法如下：1）2，4D母液：准确称量2，4D 10mg，先用1-3mL900mL/L乙醇完全溶解后，加溶解水定容；也可以加入少量碱（如1mol/L氢氧化钾、氢氧化钠）溶液，使之中和成为钠盐和钾盐，在水中溶解，再加水定容至100mL，即配成浓度为100mg/L的母液，贴上标签，注明名称、浓度和配制日期，放在4摄氏度冰箱保存。
NAA母液的配制过程与2，4D相同。
2）6—BA母液：准确称量10mg 6—BA，加入少量碱溶液（如1mol/L 氢氧化钾、氢氧化钠）或稀盐酸（1mol/L盐酸）溶液使之完全溶解后，加蒸馏水定容到100mL，即配成浓度为100mg/L的6—BA母液。
转入磨口试剂瓶中，并贴上标签，注明母液名称、浓度和配制日期，放在4摄氏度冰箱保存待用。
五、注意事项
在配制大量元素母液时，混合、溶解各种无机盐时要注意先后顺序，尽量把钙离子、硫酸根离子和磷酸根离子错开分别溶解，同时稀释度要大些，并慢慢地边混合边搅拌。
配制铁盐母液时，要分别溶解，然后充分混合。
六、配制培养基时的计算
根据下列表中各母液或药品的浓度，试计算配制不同体积的MS+2，4—D 1mg/L +6—BA0.5mg/L培养基所需吸取的母液或所称取的药品量，并将结果填入附表：。