-80℃冰冻保存血小板的实验探究

ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｒｉｃｈ
ｐｌａｓｍａ（ＰＲＰ），Ｔｈｅ
ｕｓｅ
ｏｆ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ ａｎａｌｙｚｅｒ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ
ａｎｄ
ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ｂｅｆｏｒｅ
ａｎｄ
ａｆｔｅｒ ｆｒｏｚｅｎ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＰＬＴ，ＰＣＴ，
ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ．Ｆｒｏｚｅｎ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｔ ６ ｈｏｕｒｓ
ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ３ ７－４２。Ｃ，ｒａｐｉｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ａｎｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｐｉｔ，ＭＰＶ，
ＰＤＷ，ＰＣＴ，Ｐ－ＬＣＲ，ＰＨ
ｓｕｃｈ ａｓ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ
ＭＰＶ，Ｐ—ＬＣＲ，ＰＤＷ；ＰＨ
Ｔｅｓｔ Ｓｔｒｉｐｓ ＰＨ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｖａｌｕｅ；Ｒｅｌａｔｅｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ
ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ；Ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ＣＤ６２ｐ
（ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ）．Ｗｉｌｌ
量、形态、物理及化学性质等保持较好且较稳定，此技术条件可用于长期储备血 小板资源，解决目前血小板供不应求的局面，很有希望广泛应用于临床。
关键词：血小板；冰冻保存；二甲基亚砜；Ｐ选择素．
一８０＂Ｃ冰冻保存血小板的实验研究
Ｔｈｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
ｏｎ
Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ａｔ一８０＂Ｃ
ｒｅｓｃｕｅ
ｎｅｅｄ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｏｚｅｎ ｐｌａｔｅｌｅｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄａｔａ．
ａｎｄ ｐｒｏｖｉｄｅ
ａ
Ｍｅｔｈｏｄｓ
Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｗ ｂｌｏｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｅａｌｔｈ ｏｆ ｐｅｏｐｌｅ ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ，ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ｗｉｄｔｈ（ＰＤＷ），ｐｌａｔｅｌｅｔ ｈｅｍａｔｏｃｒｉｔ（ＰＣＴ），ｔｈｅ
ＰＨ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｒｇｅ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ
ｔ检验。
结果血小板计数（Ｐｉｔ）、血小板平均体积（ＭＰＶ）、血小板体积分布宽度（ＰＤＷ）、 血小板压积（ＰＣＴ）、大血小板比例（Ｐ．ＬＣＲ）、血小板ＰＨ值、血小板ＣＤ６２ｐ
表达率、血小板聚集率（ＰＡＧ）和聚集率单位时间的变化（Ｓｌｏｐｅ）冰冻前后对比均无 统计学意义（尸＞Ｏ．０５）
结论血小板加终浓度为５％ＤＭＳＯ，在一８０＂Ｃ条件下冰冻保存一个月，血小板数
ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ，Ｓｅｔ ｕｐ ａｎ ｉｄｅａｌ ｓｔｏｒａｇｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｆｒｅｅｚｉｎｇ， Ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｌｏｗ—ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
ｔｏ
ｐｒｅｓｅｒｖｅ ｐｌａｔｅｌｅｔ．Ａｎｄ ｔｈｅ ｕｒｇｅｎｔ
ａｄｄ
ｂｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｐｌａｔｅｌｅｔ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｏｗ－ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｄｕｅ ｔｏ ｐｌａｔｅｌｅｔ
ＤＭＳＯ（５％ＤＭＳＯ）ａｔ一８０。Ｃ
Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ：Ｄｅｎｇ
Ｗｅｉ—ｂｉｎ
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＰｒｏｆＬｉ Ｙｏｎｇ－ｐｉｎｇ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ
Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎHale Waihona Puke Baiduｐｌａｔｅｌｅｔｓ ａｔ一８０。Ｃ，ｌｅａｒｎ
ｏｎ
ｐｌａｔｅｌｅｔ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｎａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｗ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ
ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ ＣＤ６２ｐ，ｒｅｌａｔｅｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ
ａｎｄ
ｆｕｎｃｔｉｏｎ（ｕｓｅｄ
ｔｏ
ｍｅａｓｕｒｅ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ
ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，ｕｓｉｎｇ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ
ＣＤ６２Ｐ）ｔｅｓｔ，ａｎｄ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ
Ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｐｌａｔｅｌｅｔ
ｏｆ ｆｒｏｚｅｎ ｐａｉｒｅｄ ｄａｔａ ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｔ ｔｅｓｔ． ｐｌａｔｅｌｅｔ
ｃｏｕｎｔ（Ｐｉｔ），ｍｅａｎ
ｖｏｌｕｍｅ（ＭＰＶ），ｐｌａｔｅｌｅｔ
ｖｏｌｕｍｅ
一８０℃冰冻保存血小板的实验研究
．８０℃冰冻保存血小板的实验研究
研究生：邓为彬
导师：李永萍教授
中文摘要
目的
明确血小板冰冻保存后功能指标的变化，了解低温对血小板的结构、功能和性
质的影响，建立理想的冰冻保存条件和方法，优化低温冰冻保存血小板的技术，并为临
床急需应用冰冻血小板的治疗及抢救提供理论依据和实验数据。
箱保存。血小板的采集到冰冻在６小时内完成，对保存到期的血小板进行复苏，复苏温 度３７－４２＂Ｃ，快速复苏，然后对Ｐｉｔ、ＭＰＶ、ＰＤＷ、ＰＣＴ、Ｐ．ＬＣＲ、ＰＨ值血小板ＣＤ６２ｐ
表达、相关功能如聚集，活化功能（用血小板聚集仪测定血小板聚集功能、用流式细胞
仪ｉ贝｜ｌ定血小板的活化功能｝旨标ＣＤ６２ｐ）进行检测，然后对冰冻前后指标进行配对资料
方法采集健康人新鲜血进行离心，制作富含血小板的血浆（ＰＲＰ），采用全自动血细
胞分析仪检测并比较冰冻保存前后血小板数量ＰＬＴ，ＰＣＴ，ＭＰＶ，Ｐ．ＬＣＩＬＰＤＷ；ＰＨ试 纸测ＰＨ值：相关功能俭测，血小板聚集仪测聚集功能：流式细胞仪测ＣＤ６２ｐ（活化功 能）．将分离的血小板分别加入保护剂二甲基亚飘（５％ＤＭＳＯ）后迅速置于．８０℃低温冰