赛娃草莓脱毒快繁关键技术研究

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草莓脱毒技术研究进展

草莓脱毒技术研究进展彭芳芳，魏召新※，洪林，杨蕾（重庆市农业科学院，重庆 401329）摘要草莓味道甜美、营养丰富，还有较高的药用价值，深受广大消费者的喜爱。

但草莓病害较多，生产用药较为频繁，严重影响了果实食用安全性。

随着消费者的食品安全意识不断提高，对草莓的品质也提出了更高的要求。

脱毒苗的应用满足了绿色农业及草莓产业现代化发展需求，对产业兴旺起到积极促进的作用。

从组织培养脱毒、热处理脱毒、超低温脱毒等方面综述草莓脱毒技术研究进展，并提出展望。

关键词草莓；组织培养脱毒；热处理脱毒；超低温脱毒中图分类号：S668.4 文献标志码：C DOI ：10.19415/ki.1673-890x.2019.25.009彭芳芳,魏召新,洪林,等.草莓脱毒技术研究进展[J].南方农业,2019,13(25):32-35.收稿日期：2019-06-13基金项目：2019年重庆市财政农业发展专项资金项目“无病毒果树种苗快繁产业化示范”（NKY-2019AB006 ）。

作者简介：彭芳芳（1987—），女，内蒙古呼和浩特人，硕士，助理研究员，主要从事果树脱毒与快繁研究。

E-mail: 615971356@ 。

※为通信作者，E-mail: 30601043@ 。

近年来，在发展特色效益农业政策的引导下，草莓产业发展越来越受到新型农业经营主体的青睐和重视，草莓种植面积日益扩大，随之而来的病害发生日渐频繁，植株矮化、产量下降、品质变劣等负面效应接踵而至[1]。

目前，已报道的草莓病害有25种之多，造成草莓大幅减产，经济损失巨大[2]，其中已查明的4种病毒病严重威胁着草莓产业的发展：草莓斑驳病毒病、草莓轻型黄边病毒病、草莓镶脉病毒病、草莓皱缩病毒病[3]，植株一旦染病，很难防治。

目前，草莓脱毒苗的增产效应日益凸显，与常规苗相比，脱毒苗的抗病性强、苗株高、长势强、产量好、果实可溶性固形物含量高[4]，因此，培养和推广脱毒苗是提高草莓产业经济效益的必经之路。

草莓脱毒栽培技术研究进展

草莓脱毒栽培技术研究进展作者：王佳程芳梅张营营来源：《安徽农学通报》2021年第04期摘要：该文介绍了国内外草莓脱毒栽培技术发展概况，分析了江苏省草莓产业发展现状及国内草莓脱毒技术的发展趋势，并对今后江苏省草莓脱毒栽培技术的研究与应用进行了展望。

关键词：草莓;脱毒栽培;发展趋势中图分类号 S436.68 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）04-0044-02随着现代高效农业的不断发展，草莓产业已成为一门迅速发展的新兴产业。

尤其是近年来，高新农业技术的发展突飞猛进，草莓脱毒栽培关键技术的研究不断深入，优质高效的脱毒栽培技术对于草莓生产起到了重要作用。

为此，许多国家和地区都正积极开展草莓脱毒栽培关键技术集成创新等方面的探索。

1 国内外发展概况草莓为蔷薇科草莓属多年生草本植物，是温带地区的一种重要水果，原产于南美洲的智利，果实柔软多汁，外观艳丽，营养丰富，商品性和经济价值极高，在国际市场上具有重要地位。

自20世纪后期以来，草莓产业在全球范围内得到了迅速发展，目前全世界草莓栽培面积超过20万hm2、产量突破300万t [1]。

但日本等发达国家草莓生产老龄化现象日趋严重，导致栽培面积处于稳定甚至紧缩状态。

草莓生产重点已由过去的增加面积、追求数量转变为稳定栽培面积、提高单产、改进品质，提高整体经济效益[2]。

世界各国陆续在草莓脱毒栽培技术集成等方面开展了深入研究，如日本早在20世纪60年代就开始了利用组织培养技术获得无病毒草莓植株的研究[3]，现已建立了草莓脱毒技术及苗木繁育体系，并通过花药培养获得了正常八倍体脱毒草莓植株，脱毒率高达100%[4]。

加拿大利用抗性资源杂交选育出了“全明星”“维斯塔尔”等30余个抗逆性强、产量高的草莓新品种。

荷兰对引进的“埃尔圣塔”等品种资源开展了栽培技术集成与种质创新研究，推广生产的草莓品种具有长势强、产量高及成熟快等优点，并在世界各地进行了产业化示范栽培。

草莓“梦”脱毒苗生根和移栽技术研究

草莓“梦”脱毒苗生根和移栽技术研究作者：艾尚杰张玉连孙玺如金枝闫洪波来源：《种子科技》2018年第05期摘要：为提高脱毒草莓“梦”组培苗的成活率，降低生产成本，对组培苗的生根配方和炼苗移栽技术及其影响因素进行了探讨。

结果表明： 1/2 MS+0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA+8 g琼脂，生根率可达100%，平均生根数达12.8，根系生长良好。

生根生长25 d 后，脱毒苗在珍珠岩+蛭石+草炭土（1∶1∶1）上按照“浅不露根、深不埋心”的原则，保持90%左右的空气湿度，进行移栽时可以使成活率达91.2%。

该方法对其他草莓品种生根和移栽具有借鉴意义。

关键词：草莓；脱毒苗；生根；移栽文章编号： 1005-2690（2018）05-0114-02 中图分类号： S668.4 文献标志码： B草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年草本植物，在浆果类水果中总栽培面积和产量居于世界第二。

草莓的适应性广、容易栽培，结果早、产量高、效益好，经济价值相当高。

草莓“梦”休眠浅、香味浓、清脆可口、风味独特，适宜鲜食；果实较硬，耐贮运，综合性状优良；果实偏圆锥形，果型中等大小，果面橘红色、平整，种子小，果肉淡红色。

由于连年种植使得草莓带毒，造成生长量减少、植株矮化、产量下降、品质变劣等不良后果。

我们利用茎尖培养和超低温处理相结合的方法实现了快速繁殖，实践中组培苗根系的强弱和数量以及移栽技术是草莓苗成活的最主要原因[1～6]。

为此，笔者总结出一套适宜于脱毒“梦”组培苗生根和炼苗移栽的技术和方法。

1 材料与方法1.1 试验材料供试材料取自平山草莓联盟种植基地的草莓品种——梦。

1.2 方法1.2.1 生根培养将本实验室新生的3～4 cm 长的小苗接种到以MS+8 g琼脂和1/2 MS+8 g琼脂为基础的培养基中，分别加入浓度为0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.15 mg/L IBA 和0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L NAA中，研究其对新生苗生根诱导情况。

草莓病毒病及脱毒技术研究进展

草莓病毒病及脱毒技术研究进展
董佳鑫;刘鹏丽;吴景莹;张抗萍;王璐;张晶晶
【期刊名称】《现代园艺》
【年(卷),期】2024(47)9
【摘要】草莓()是一种多年生草本植物。

由于草莓具有栽培方式简单、生长周期短、产量高、休眠期短、繁殖速度快等特点,成为我国水果产业中发展最快的新兴果种。

但是,草莓无性繁殖方式容易导致病毒积累,产生品种退化现象,造成品质降低和产量下降,影响了商品价值和经济价值。

近年来,通过对草莓病毒的检测和试验,草莓脱毒技术被不断应用到生产当中,通过脱毒处理的草莓苗表现出长势旺盛、抗病性强、
亩产量高等特点,具有良好的栽培前景。

本研究综述了4种草莓病毒、4种草莓脱
毒技术和脱毒苗栽培繁育的内容,有助于掌握草莓病毒和草莓脱毒技术研究最新进展,为草莓脱毒技术进一步发展提供理论参考。

【总页数】3页(P75-77)
【作者】董佳鑫;刘鹏丽;吴景莹;张抗萍;王璐;张晶晶
【作者单位】太原学院
【正文语种】中文
【中图分类】S66
【相关文献】
1.草莓病毒病及其脱毒与检测技术研究进展
2.草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展
3.草莓病毒病、脱毒技术及病毒检测研究进展
4.草莓病毒病及脱毒技术研究现状
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草莓、大花蕙兰脱毒培养

主要有四种：小茎尖分生组织培养脱毒、花药和叶片培养脱毒、主要有四种：小茎尖分生组织培养脱毒、花药和叶片培养脱毒、热处理加小茎尖脱毒。热处理加小茎尖脱毒。
（1）小茎尖分生组织培养脱毒）于每年6月 ①培养程序于每年月～8月，选取生长充实的匍匐茎月选取生长充实的匍匐茎( 温室的材料一年四季都可取材)或新长成的小秧苗或新长成的小秧苗。温室的材料一年四季都可取材或新长成的小秧苗。材料取回后，用手剥去外层大叶，在自来水下冲洗2h～料取回后，用手剥去外层大叶，在自来水下冲洗～ 8h，然后，将材料进行表面消毒。消毒的药品及其使用，然后，将材料进行表面消毒。浓度有多种。常用有两种：用％酒精漂洗一下，浓度有多种。常用有两种：a.用70％酒精漂洗一下，再％～0.2％升汞或6％～％～8％次氯酸钠浸泡，用0.1％～％升汞或％～％次氯酸钠浸泡，浸泡时％～间依材料老嫩而异，一般为2min～10min，然后把材料间依材料老嫩而异，一般为～，移到超净工作台上操作。先用先用70％酒精漂洗一下，移到超净工作台上操作。b.先用％酒精漂洗一下，0.1 新洁尔灭浸泡15min～20min，再用％过氧乙酸浸泡％新洁尔灭浸泡～，再用1％ 2min～5min，移到超净工作台上操作。～，移到超净工作台上操作。
3.继代培养及诱导发根继代培养及诱导发根
无论是由茎尖、无论是由茎尖、花药或叶片培养得到的再生植株都可根据需要进行数次继代培养以增加无毒苗的繁殖系数。待茎、加无毒苗的繁殖系数。待茎、叶分化的小植株长满瓶后即可分株转入新鲜培养基上培养在早春1月份月份～月份可集中一批试管苗诱。在早春月份～2月份可集中一批试管苗诱导发根(发根培养基发根培养基1/2MS+IBA0.2mg/L)。导发根发根培养基。为的是其下一步驯化移栽整齐度高，为的是其下一步驯化移栽整齐度高，秋季再集中第二批发根，集中第二批发根，其余则可根据需要继代繁殖。

草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立

草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立草莓(Fragaria×ananassa Duch.)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。

其果实鲜嫩多汁、色泽艳丽、香气怡人、口感酸甜适中,是我国传统的优秀浆果果品之一。

其繁殖主要采用传统的分株繁殖或匍匐茎埋压,这种无性繁殖的方式提高了病毒侵染植株的几率。

避免病毒给生产带来巨大的经济损失,实现草莓无病毒苗栽培生产化,必将是我国草莓业目前势在必行的发展趋势和目标。

而超低温疗法是一种新型、高效脱除植物病毒的新技术,备受各研究科学者的亲睐。

本试验以‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.cv. Benihoppe)品种大田茎尖为试验材料,对超低温疗法关键程序(预培养、预处理和化冻条件)进行了筛选和优化,并以茎尖脱毒法为对照,建立起完善的超低温疗法脱毒技术体系。

在此基础上,研究者对多重RT-PCR病毒检测体系相关参数(Mg2+浓度、引物浓度、PCR程序等)进行了优化和改进,以期建立完善的多重RT-PCR病毒检测体系。

最后利用DNA相关软件筛选分析SSR-PCR引物,分析超低温疗法脱毒苗遗传性状的稳定性,实验结果如下：1.适合‘红颜’草莓苗的超低温疗法脱毒技术体系为：在含0.3 mo.L一预培养基上暗培养7 d,室温下LS装载60 min,0℃下PVS2脱水1 h,液氮处理1 h,40℃水浴化冻120 s,用含1.2 mol·L-1蔗糖的液体MS 培养基洗涤两次,每次10 mmin。

该体系同时脱除草莓四种主要病毒(草莓镶脉病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒和草莓斑驳病毒)的比率高达100%,成活率为69.03%。

将该体系再用于‘蜀丰’‘丰香’以及‘章姬’,其存活率分别为68.15%、71.00%和69.78%,达到预期的试验目标。

2.适用于多重RT-PCR检测体系的引物是SC1/SC2、SM1/SM2、SY1/SY2、SV1/SV2、A1/A2,目的片段大小分别是345 bp、394 bp、861 bp、271 bp和295 bp；多重RT-PCR病毒检测体系是1μl cDNA、2 μl 10×PCR bufer、2.0 mmol·L-1 MgCl2、 0.2 mmol·L-1 dNTPs、0.5UTaq酶,引物浓度0.2 μmol·L-1 (SCV 0.25 μmol·L/1),最后用超纯水补至20μl; PCR程序：94℃预变性3 min,94℃变性1 min,55℃退火40 s,68℃延伸40s,35个循环,72℃再延伸5 min。

草莓脱毒种苗生产技术规程

草莓脱毒种苗生产技术规程草莓脱毒种苗生产技术规程是指在种苗生产中使用一系列科学、规范的技术手段，通过对草莓病毒进行有效的检测、隔离和消除，生产出无病毒、高品质的草莓脱毒种苗。

以下是草莓脱毒种苗生产技术规程的相关参考内容：一、材料准备1.苗圃地选择：应选用土层深厚、排水良好、无严重盐碱、沙质和亏空等土壤,并考虑到旱涝保收的因素。

2.种原选择：应选择育性好、病毒感染少的良种，且种间要有足够的差异化。

3.器具用品：种植盘、播种机、菜刀、消毒酒精等。

二、种苗生产1.草莓母株生产：在母株生产过程中，必须进行病毒检测，对发现的病毒进行适当的处理和隔离。

2.草莓继代繁殖：通过草莓继代繁殖的过程，可以有效地将病毒消除，并获得健康、无污染的种苗。

3.草莓继代繁殖条件：应在无菌环境下，使用7~10天的苗阶段进行，温度为22~25℃，光照强度为2000~3000lx，相对湿度为70%以上。

4.草莓种苗培育：在培育过程中，要进行各种专业技术操作，如播种、移栽、水肥管理、病虫害防治等。

5.草莓种苗质量检测：进行病毒检测、品质检验以及结构外观检测等。

三、病毒检测1.草莓脱毒种苗生产的核心是病毒检测，必须在科学的检测方法和严格的操作流程下进行。

2.目前常用的病毒检测方法包括酶联免疫吸附实验、荧光抗体法、聚合酶链反应法等。

四、隔离1.草莓脱毒种苗的隔离是指将健康的草莓种苗与有病毒的草莓种苗相互隔离，使其不受病毒感染。

2.隔离方法包括地理隔离、物理隔离、化学隔离等。

五、消除1.草莓种苗的消毒是指对存在病毒感染的草莓种苗进行消毒，以期消除病毒。

2.消毒方法包括化学消毒、热处理等。

六、总结通过草莓脱毒种苗生产技术规程的实施，可以生产出无病毒、高品质的草莓脱毒种苗，为草莓产业的健康发展提供有力支持。

草莓种苗脱毒快繁体系的建立及温室层架栽培技术的应用

莓，蔷薇科草莓属多年生草本植物，果实酸甜可口，营养丰富，富含糖、蛋白质、无机盐、维生素等多种营养物质，在世界小浆果生产中居于首位。

长期以来，中国大多数地区都依靠传统的分株繁殖法生产草莓种苗，导致草莓体内病毒的不断累积，病毒病的发生逐年加重。

利用草莓的脱毒、快繁技术进行草莓苗的规模化生产，既可以保持原品种的种质纯度，又可以提高草莓的繁殖系数，更重要的是可以提高草莓的产量和品质、促进草莓产业化发展。

因此，草莓脱毒快繁体系（图1）的建立可对草莓苗的规模化生产奠定重要的技术基础。

基于无土栽培营养液配方施肥基础上的温室内草莓层架栽培，既体现了农产品的高品质、高产量，也满足了人们日益增加的休闲观光生态采摘需求。

2008’是由中国农业科学院培育生产，是中国太空自育种金奖品种，果实大，一般单果重20~40 g ，最大果重89 g ，果实硬度中等，果皮有韧性，果肉软硬适口，完熟后全果鲜红，采摘后储运期果色不变，果肉红色，果味甜酸，甜味突出；‘玫瑰香’为河南郑州中牟地区广泛种植的品种，果实香味浓郁，果肉香甜（图2）。

草莓种苗脱毒快繁体系的建立及温室层架栽培技术的应用张晖，孙婷婷，祖艳青，赵栋会（鄢陵建业绿色基地建设有限公司，河南许昌 461000）图1 草莓脱毒快繁技术体系流程草莓品种的选择本试验选择3个草莓品种，分别是‘红颜’‘太空2008’‘玫瑰香’等适合温室促成栽培的品种。

‘红颜’是日本草莓品种之一，其果实甜、硬、香，多级花序，结果期长，产量高；‘太空图2 ‘玫瑰香’茎尖脱毒培养本试验中草莓脱毒快繁所取外植体为匍匐茎顶端嫩芽。

从温室中选取形状优良、生长健壮、无病虫危害的草莓母株，截取小叶尚未展开的匍匐茎顶端约2~3 cm 长的顶芽。

首先用0.2%洗洁精水溶液浸泡5 m i n ，然后用软毛刷轻轻刷洗一遍，再用流动清水冲洗2 h ，转入超净工作台中。

在超净工作台中先用无菌的镊子将匍匐茎草温室内选取外植体茎尖脱毒培养脱毒苗快速繁殖脱毒苗生根培养温室驯化移栽定植DOI: 10.16815/ki.11-5436/s.2016.22.010顶端外部的大叶摘除，然后用75%酒精快速灭菌30 s，用无菌水冲洗2遍后，再用0.1%升汞（滴入1~2滴吐温80）振荡灭菌6 min，最后用无菌水冲洗5遍。

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赛娃草莓脱毒快繁关键技术研究
马宗新，李文峰
（安徽省阜阳市农科院，阜阳２３６０００）
摘要：以新优草莓品种赛娃茎尖为试材进行组织培养繁苗试验，结果表明：０．２～０．３咖大小茎尖最适宜培养，脱毒率ｉ００％，成苗率９６。茎尖分化培养基为Ｍｓ＋６＿ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡＯ．１ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ０．０５ｍｇ／Ｌ，增殖培养基为ＭＳ＋Ｂ－ＢＡＯ．５ｍｇ／
ｔｈａｔ：Ｏ．２～０－３ｍｍｓｉｚｅｓｔｅｍｔｉｐｍｏｓｔｓｕｉｔａｂｌｅｃｕｌｔｕｒｅ，ｖｉｒｕｓ — ｆｒｅｅｒａｔｅｗａｓ１００％，ｓｅｅｄｉｎｇｒａｔｅｗａｓ９６％．ＴｈｅｓｈｏｏｔｔｉｐｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｗａｓＭＳ＋６一ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３０．０５ｍｇ／Ｌ，ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｗａｓＭＳ＋６－ＢＡＯ．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／
ｃｕｌｔｕｒｅｓｅｅｄｌｉｎｇｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ａｃｃｌｉｍａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｓｅｒｉｅｓｏｆｋｅｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．
Ｌ＋ＧＡ３０．０５ｍｇ／Ｌｃａｎｂｏｔｈｒｅｇｅｎｅｒａｔｅａｎｄｒｏｏｔｉｎｇ．ＴｈｅＧＡ３ｃａｎｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ｅｎｈａｎｃｅｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒｏｗｔｈｒａｔｅ，ｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｃｏｅｉｃｆｉｅｎｔｗｈｅｎｉｔｗａｓａｄｄｅｄｉｎｔｏｍｅｄｉｕｍ．Ｌｅａｆｃｕｌｔｕｒｅｔｏａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ＰｅｔｉｏｌｅＡｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｔｈａｎｌｅａｆ，ｅｉｃｆｉｅｎｔｖｉｕｓｒ－ｆｒｅｅａｎｄｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｗａｓｅｓｔ￣ｌｉｓｈｍｅｍ，ａｎｄｓｕｍｍｅｄｕｐｔｈｅｓｔｒａｗｂｅｒｒｙｔｉｓｓｕｅ
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓａｉｗａｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ；ｖｉｕｓｒ — ｆｒｅｅ；Ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ；ｋｅｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
草莓（Ｆｒａｇａｒｉａａｎａｎａｓｓａ）是蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）
栽等系列关键技术。
关键词：赛娃草莓，脱毒快繁，关键技术
ｋｂｓｔａｃｔ：Ｔｈｅｎｅｗｓｕｐｅｒｉｏｒｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｓａｉｗａｓｔｒａｗｂｅｒｒｙｓｈｏｏｔｔｉｐａｓｅｘｐｌａｎｔｍａｔｅｒｉａｌｆｏｒｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ
日中性品种，四季开花结果，植株大，生长直立而紧凑，
草莓属的浆果，为多年生草本植物，世界各地均有叶片大而肥厚，叶色浓绿，叶粗短，夏秋可连续抽生栽培。草莓是无性繁殖作物，易感染病毒ｕ叫，我国新茎，分枝力较强；抗旱、抗寒、耐高温，抗病更强。
Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ。０．０５ｍｇ／Ｌ可以兼顾增殖与生根。Ｇ的加入能够促进增殖，提高小苗的生长速度，提高繁殖系数。叶片培
养以不定芽增殖为主，叶柄不定芽诱导率高于叶片，由此建立起高效脱毒快繁体系，并总结出草莓的组培苗生产、驯化和移