草莓组织培养与脱毒技术
草莓茎尖组培脱毒和种苗三级繁育体系的建立

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福 建果树 ・ 第 18期 总 3
Fj nFut20. 实用技 术 ui ri 063・ a s
作者简介 :花秀凤 ( 9 3一) 17 ,女,农 艺师 。从事蔬菜育种与推广研 究 5 6
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福 建果树 ・ 第 1 8期 总 3
F j nFut 2 0 . 实用技术 ui ri 0 6 3・ a s
南 酸 枣 特征 特 性 与栽 培技 术
~
8 月太阳能高温消毒或移栽前用 甲醛消毒。先把
脱毒研究。经过 3年的实践 ,建立 了较为完善 的草
莓脱毒苗三级繁育体系 ,产生了显著的社会效益和 经济效益。现总结如下 :
试管苗从培养室移 到普通室 ,选 晴好 的天气移栽。
将培 养 基 冲 洗 干 净 ,用 10 00倍 甲基 托 布 津 浸 泡 5i mn后直 接 移 栽 室 外 栽 培 基 质 中 ,浇 透 水 后 盖上 小拱 棚膜保 温 保 湿 。 移栽 的头 3 d如果 是晴 天 ,中 午前 后须 盖 遮 阳网 以防 光 照 过 强 ,3 撤 去遮 阳 d后
.
止重新感染病毒 ,在扩大繁殖中必须采取严格的隔
水冲洗 0 5 ,然后在 7 %酒精 中浸泡 l i,再用 .h 5 mn
2 次氯 酸 钠 消 毒 lmn % O i,无 菌 水 冲 洗 3遍 ,在 超
净工 作 台上逐 层剥 去顶 芽外 面 的[ 片 ,用解 剖刀 切 1 - 卜
离措施 。 2 1 土壤 消毒 .
草 莓茎 尖 组培 脱 毒 和 种 苗 三级 繁 育体 系的建 立
脱毒草莓

中的分布是不均匀的,越靠根尖(root tip)、茎尖 (shoot tip)区病毒含量越低,在根尖、茎尖的顶端不 含病毒。 能量竞争,病毒核酸和植物细胞分裂时DNA合成均需要消 耗大量的能量,而分生组织细胞本身很活跃,其DNA合成 是自我提供能量自我复制,而病毒核酸的合成要靠植物 提供能量来自我复制,因而就得不到足够的能量,从而 就抑制了病毒核酸的复制。
草莓脱毒意义
单果加大
产量增加
商品性提高
三、草莓脱毒苗培养流程和工序
脱毒时,最好找出茎原基所
带叶原基的数目与生长点
(茎尖)大小的相关性,这
样在取材时就方便多了
茎尖越小对培养基的要求越 高,剥离技术要求越高,成 功率越低,挑茎尖培养大约 每100个成活60个。
茎尖培养
茎尖在显微镜下挑取, 大约0.1-0.3mm,如针尖 大小,从挑取茎尖培养 成苗需要3个月时间。
茎尖生长一个月后
试管苗批量培 养
试管苗生根后可 以炼苗驯化。
草莓病毒检测
茎尖苗的病毒检测很重要。目前有三种方法进行 草莓茎尖苗的病毒检测:目测法、指示植物嫁接检测 法、血清检测法。
脱毒草莓的血清学检测
血清鉴定(serological test)(抗原抗体反应):病毒抗血
清具有高度的专化性,因而可用于鉴定受感染而没有 症状的带毒植物。
危害园艺植物的病毒数目
植物种 类 染病毒种 植物种 类 类 染病毒种 植物种 类 类 染病毒 种类
菊花
19
矮牵 牛
5
葡萄
26
康乃馨
水仙 唐菖蒲 风信子 月季 天竺葵
11
4 5 3 10 5
马铃 薯 大蒜
豌豆 百合 柑橘 苹果
草莓脱毒组培苗特性及栽培技术探讨

2 1 育 苗 期 生 理 特 性 .
从育 苗期 观察记 载情 况看 ,脱毒 组培 苗生 长 旺 盛 ,匍匐 茎 出生 早 、数量 多 。特别是 第 1 原原 种 代 母苗 的匍 匐茎要 比第 2代原 种母 苗 的匍匐茎 发 生量 更多 ,成 苗率更 高 。与常 规母 苗相 比 ,一 代原 原种 母苗 的匍 匐茎 出生期 早 1 ,二代原 种母 苗匍 匐茎 2d 的 出生 期 早 7 d 。一 代 原 原 种 单 株 母 苗 匍 匐 茎 多 5 5条 ,匍 匐 茎 苗 多 4 . 棵 ,每 6 7 m . 08 6 增 加
条 ,既可保 持 产量 ,更 可 以提 供 新 梢 的有 机 养 分 , 保持新 梢 正常生 产 。所 以功能 叶 的份 额千 万不 能过
早减 少 ,更 不 能 为 图 嫁 接 操 作 方 便 ,进 行 简 化 嫁 接 ,否 则 将 严 重 影 响 成 活 率 以 及 造 成 新 梢 机 械 损伤 。
式 为 大棚促 成栽 培 。随着种 植年份 的增 加 ,草莓 品 种 的植 株病 毒逐 年加 重 ,种 性退 化 ,影 响草 莓 的产
量 和 品 质 。 因 此 , 改 良 品 种 和 种 苗 的 提 纯 复 壮
别旺盛 ,营养生 长与生 殖生 长不 协调 ,影 响花芽 分
化和花 朵 生 育 不 良 ,花 药 花 絮 萎 缩 或 推 迟 花 芽 分 化 ,后 遇低 温 侵 袭 不 能 结 果 。 由 于 在 应 用 脱 毒 组培苗 中出现 的这些 不 良现象对 草莓 生产 起不 到实 际效 果 ,也抑制 了草莓 脱 毒组培 苗 的推广 ,为 正确 应用 草莓 脱毒组 培苗 ,特 对草莓 脱毒 组培 苗进行 栽
草莓脱毒种苗繁育技术

草莓脱毒种苗繁育技术你们爱吃草莓吗?那红红的、甜甜的草莓,咬一口满是香甜的果汁,可美味啦。
可是你们知道吗,要种出这么好吃的草莓,有一种很特别的种苗叫草莓脱毒种苗,今天我就来给大家讲讲它的繁育技术。
我们先来说说为什么要有脱毒种苗呢。
就像我们人会生病一样,草莓也会生病。
有些病毒会让草莓长得小小的,结的果实也不好吃。
有个爷爷,他种了一大片草莓,可是他发现那些草莓越来越小,而且很多都长了奇怪的斑点,他以为是自己照顾得不好。
后来才知道是草莓感染了病毒。
那怎么得到脱毒种苗呢?这就像是一场奇妙的旅程。
首先要找到健康的草莓母株,就像在一群小朋友里找到最健康、最活泼的那个小伙伴一样。
这个母株要没有被病毒感染,要长得特别强壮。
比如说,茎要粗粗的,叶子要绿绿的,看起来就充满生机。
然后呢,要把这个母株的一部分,就像从一棵大树上剪下一根小树枝那样,取一小段茎尖。
这个茎尖可神奇了,它就像一个小小的宝藏,里面可能藏着没有病毒的细胞。
把这个茎尖放到一个特别的地方,这个地方就像一个小小的魔法屋,里面有适合它生长的营养物质和环境。
在这个魔法屋里,茎尖会慢慢长大,会长出根和新的叶子。
这时候就像看着一颗小种子慢慢发芽,一点点变成小幼苗,特别有趣。
不过这个过程要很小心,温度啊、光照啊都要刚刚好。
就像我们照顾小宠物一样,冷了不行,热了也不行,光照太强或者太弱都不好。
等小幼苗长大了一些,就可以把它移栽到小盆子里啦。
这就像给小朋友换了一个更大的房间,可以让它有更多的空间生长。
这个小盆子里面的土也要很有营养,就像我们吃的饭要营养丰富一样。
慢慢地,这些小幼苗会长成大的草莓苗,这个时候它们就可以被种到田地里啦。
种到田地里之后,它们会长出好多好多的草莓。
这些草莓因为是脱毒种苗长出来的,所以会长得又大又甜。
#草莓组培

草莓茎尖组培脱毒和种苗三级繁育体系的建立花秀凤1 陈 铣1 许 玲2(1福建省福州市蔬菜科学研究所,福建福州 350012;2福建省农业科学院果树研究所) 收稿日期:2006-07-18 作者简介:花秀凤(1973-),女,农艺师,从事蔬菜育种与推广研究 草莓常通过无性繁殖为生产提供种苗,而长期使用无性繁殖种苗易使品种退化,病毒感染严重,抗病力减弱,产量、质量、效益锐减,成为生产上迫切需要解决的问题。
组织培养(简称组培)技术是草莓脱除病毒的一种最经济有效的途径。
专家证明,草莓脱毒苗生长势强,抗病力提高,大果率增加,能增产30%~80%。
为此,福建省福州市蔬菜科学研究所从2000年开始进行草莓茎尖组培脱毒研究。
经过3年的实践,建立了较为完善的草莓脱毒苗三级繁育体系,产生了显著的社会效益和经济效益。
现总结如下:1 原原种的获得111 培养基的配制草莓茎尖组织培养需要配制2种培养基:Ⅰ,诱导分化和继代增殖培养基MS +6BA 1mg/L +NAA 011mg/L +3%蔗糖+017%琼脂;Ⅱ,壮苗生根培养基MS +115%蔗糖+017%琼脂。
112 接种母株的选择与处理选取生长健壮、能充分表现本品种优良性状的植株为母株。
为了避免因材料带菌而产生污染,须对母株进行杀菌,每周用500倍甲基托布津处理1次。
113 接种、增殖、生根培养5~6月取刚抽生的匍匐茎茎尖约1c m ,用流水冲洗015h,然后在75%酒精中浸泡1m in,再用2%次氯酸钠消毒10m in,无菌水冲洗3遍,在超净工作台上逐层剥去顶芽外面的叶片,用解剖刀切下带一个叶原基(长012~013mm )的生长点,立即接种于培养基Ⅰ上进行光培养。
2个月后愈伤组织周围长满丛生芽,把芽逐个切下,每瓶放5~6个芽继续增殖,每25d 可增殖1代(约5倍),一般增殖3代(约125倍)就可以获得所需的数量。
然后转入培养基Ⅱ进行生根培养。
一个月后根长2~5c m 时即可出瓶移栽。
草莓组培脱毒技术及其在生产上的应用

草莓组培脱毒技术及其在生产上的应用摘要草莓在生产中极容易退化,累积大量病毒,从而影响产量和品质。
详细介绍了草莓的组培脱毒技术以及草莓从瓶苗到生产用苗的炼苗驯化过程,以期为广大农户提供优质高产的草莓原原种种苗。
关键词草莓;组培脱毒;生产应用近些年,我们进行了大量的研究,以期能快速繁殖并培育出优良草莓品种。
经过大量的科学试验,总结出草莓的组培苗生产、驯化和移栽等一系列技术,不仅能快速培养出大量脱毒苗,而且能取得较好的社会和经济效益。
1试验准备(1)材料。
以江苏省盱眙三河农场主要栽培的丰香、溢香、幸香等品种为试验材料,进行组织培养繁殖育苗试验。
(2)取材。
5~6月晴天下午选取生长健壮、匍匐茎充实、尖端生长良好、无病虫害的优良植株,取其匍匐茎前端部分6cm左右,置于黑色塑料袋中,放入冰箱冷藏备用。
(3)培养基配置。
用于草莓茎尖培养诱导分化的基本培养基为MS,附加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂粉6.5g/L、pH值5.8~6.0。
在草莓茎尖的扩大繁殖阶段,采用MS培养基附加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.01mg/L。
扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5~7株切成1块,转入继代培养基。
在转苗过程中,去掉原生叶片有利于新苗分化,在扩大繁殖中随时清除愈伤组织,有利于新苗增值和生长。
诱导生根培养基用1/2MS附加不同浓度IBA。
试验表明:以IBA 0.1mg/L的浓度处理的生根率最高,为100%,平均根条数为2.4条;不加IBA及IBA浓度超过0.2mg/L,多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织,随后在愈伤组织上分化生根,致使成活率大大降低。
(4)无菌水准备。
烧制培养基的同时,装几瓶清水置于高压锅内于120℃、10 132.5Pa下灭菌15min左右。
2组培脱毒关键技术(1)消毒。
将匍匐茎切至2cm大小,置于流动的清水中冲洗4~6h,接着放在75%酒精中浸泡30s左右,不宜过长;否则会杀死茎尖组织,大大降低成活率。
脱毒苗培养
2、指示植物鉴定法:利用特定的易于感染某些 病毒的指示植物的特征进行病毒鉴定。
指示植物
CMV病毒感染的植株叶片
3、抗血清鉴定法:利用抗原和抗体的特异性反应原理 进行病毒鉴定。用已知病毒的抗血清(antiserum)鉴 定未知病毒。
近年来又在此基础上发展出酶联免疫法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA),方法是将抗 原固定在支持物上,加入待检血清,然后加入酶(过氧 化物酶或碱性磷酸酶)标记的抗体,使待检血清与对应 抗原的特异性抗体结合,最后用分光光度计进行诊断。
二、脱毒方法:
(一)茎尖分生组织培养脱毒: 1. 脱毒原理:病毒在植物体内的分布不均匀,越靠近
顶端区域,带毒越少,顶端分生组织(0.2-0.5 mm)不带 病毒或含病毒量极低。因此,分离分生组织细胞进行培 养,可以获得无病毒种苗。
2. 茎尖分生组织培养脱毒的基本程序:
一般包括培养基选择和制备、带脱毒材料的表面、灭 菌、茎尖分生组织分离、接种和培养、诱导芽分化和小 植株增殖、诱导生根、驯化移栽等环节。 茎尖分生组织的分离需要在超净工作台上借助体视显 微镜进行。茎尖放在培养皿内进行解剖,一只手用镊子 固定,另一手用解剖针将叶片和叶原基层层剥掉,当露 出半圆形顶端分生组织时,将分生组织切下,接种与培 养基上。
(四)其他脱毒方法:
1. 花器官培养脱毒:由植物的花器官培养脱分化形成愈伤 组织,然后再分化不定芽,可以获得无毒苗。如草莓花 药培养。 2. 珠心胚培养脱毒:柑橘类珠心胚与微管组织没有联系,一 般不带毒,可以利用珠心胚进行培养获得。
3.化学脱毒:采用病毒唑等试剂处理材料或添加到培养基中可 以钝化病毒,达到一定的脱毒效果。
(2)茎尖嫁接:在超净工作台上,将幼苗的上胚轴和子叶去掉, 根系截短,在离上胚轴顶端越0.5cm处斜向下切一深达木质 部,长2-3cm的切口,在斜切口末端横切一刀,用去掉切下 部分。在体视显微镜下,从待脱毒样品上切取0.2mm的茎尖 分生组织,小心放于切口的水平面上,切面向下并与砧木切 口形成层组织紧密贴合,然后接于培养基上。
脱毒技术及组织培养操作
(二)诱导、继代培养
在无菌条件下,用剪刀将外植体茎段切成0. 5~1
cm 长小段,水平放置接种;叶片切成5mm×5mm小
块,下表皮朝下水平放置接入初代培养基中,接种完
成后即转入培养室进行初代培养,培养温度22~28 ℃,
光强1000~4000 Lx。
1.间接再生途径
培养温度为(25±2)℃,光照强度2000Lx,光照时间为
12h/d,空气相对湿度为65%左右。培养基pH值为5.8~
6.0。培养25d后出现黄绿色的愈伤组织块,诱导率高。
(三)分化、继代培养
将上步得到的愈伤组织转接在诱导丛生芽 的分化培养基MS+6-BA2.0+NAA0.1上,培养1周左 右,观察到愈伤组织表面陆续长出不定芽,继续 增殖培养达到所需芽丛数。
组培快繁技术
• 1.无菌苗培养 • (1)西瓜籽消毒 取无籽西瓜的种子用水浸泡24h, 70%酒精消毒1~2min,再转入0.1%升汞溶液中 消毒15~20 min,无菌水冲洗4~5次,在无菌条 件下剥去种壳,置于无激素的1/2MS培养基中, 直接接受光照或发芽后再行光照培养,30~33℃ 下发芽。 • (2)小腋芽消毒 用于西瓜蔓的消毒剂为滴加少 量吐温-80的4.0%漂白粉溶液。先将西瓜蔓在清 水中漂洗、揩干,再用70%酒精擦净。然后置于 上述消毒剂中消毒15~30 min,在无菌水中漂洗 5次,接种于1/2MS的培养基中或直接放于增殖培 养基中,在25~28℃的条件下培养。
茎段和叶片接种到培养基上,均可以从一周 内,明显可以看到茎段和叶片开始膨大。20d后 产生愈伤组织,30d愈伤组织分化出芽。
2.直接再生途径
茎段和叶片接种到培养基上,均可以从一周 内,明显可以看到茎段和叶片开始膨大。但是 20d后不产生愈伤组织,直接分化出芽。
五种处理对奶油草莓组培苗脱毒效果的影响
李国树,徐成东,王振吉,等 五种处理对奶油草莓组培苗脱毒效果的影响
茎尖脱毒培养、指示植物等对草莓脱毒效果进行 研究,为奶油草莓脱毒苗生产提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料 取于楚雄市白沙冲草莓园连作线的 草莓植株,叶片带有斑驳皱缩、含有病毒奶油草莓 (Strawberry of cream.cv.)。 1.2 方法 取连作 3 年、叶片带有斑驳皱缩、含有 病毒的 2 y 生奶油草莓衰老叶片作为外植体。外 植体经消毒后接种于愈伤诱导、茎叶分化和生根 培养的培养基中,经 65 d 培养成带病毒的草莓试 管苗后,再进行以下研究。 1.2.1 微茎尖培养脱毒 借助体视显微镜,剥取 不同长度带 1~3 个叶原基的茎尖进行接种。每瓶 接种 3 个微茎尖、4 瓶重复,共 12 瓶进行培养。 1.2.2 昼夜变温处理脱毒 在参照超低温保存 和植物昼夜交替生物钟改变的基础上,建立昼夜 温差培养,筛选奶油草莓脱毒效果最佳的昼夜温 差组合,设立试验如下:A1,白天 4℃,晚上 25℃, 连续处理 2 周;A2,白天 25℃,晚上 4℃,连续处 理 2 周。 1.2.3 试管苗三氮唑核苷处理脱毒 已培养 65 d、体内带病毒的幼嫩试管苗为外植体,接种于含 有 三 氮 唑 核 苷(设 0 mg/L、5 mg/L、l5 mg/L、25 mg/L、35 mg/L,5 个浓度梯度)的基础培养基 1/2 MS + 6-BA 0.2 mg/L + IBA 2.0 mg/L 上生根诱导。 切取奶油草莓试管苗 0.3~1.0 cm 长的茎尖接种于 5 种培养基上,每种培养重复 3 瓶,观察记录生长 情况,统计成活率。30 d 后,将生根较明显,根系 发达的试管苗进行移栽 1~2 周左右,观察其外部 形态、长势并且采用指示植物涂抹法进行脱毒效 果检测。 1.2.4 高 温 处 理 脱 毒 分 别 设 置 恒 温 水 浴 锅 40℃、45℃、50℃梯度;早上处理 3 h,下午处理 3 h,晚上组培室正常培养,连续处理 3 d;处理完后 剥取茎尖接种到生根培养基:1/2 MS + 6-BA 0.2
草莓脱毒步骤
草莓脱毒步骤
给草莓脱毒的方法有茎尖培养、热处理法、花药培养法等,其中花药培养法的步骤非常简单,在花粉到单核期时,就将花蕾剥取花药接种。
先清洗消毒,使用专业化学溶剂培养,草莓原种病毒20%以内的感染率才能算作合格。
1、茎尖培养
茎尖培养脱毒法是在短期内加速繁殖草莓优良品种以供商品化生产,挽救严重感染病毒的草莓,并结合辐射诱变进行草莓品种的改良和选育,是目前较为常用的脱毒法。
茎尖越小,脱毒越简单,去掉病毒的几率也就越高。
2、热处理法
热处理法是使病毒不活化、去除母株病毒为目的。
将草莓放在温度38℃环境下的高温中,处理11~13天,基本就能够脱毒。
对于皱缩病毒,则需要50天以上才能够达到脱毒目的。
在叶片喷洒多效唑溶
液可以提升草莓耐热性。
3、花药培养法
花药培养脱毒的有点在于操作简单,可繁殖量较大。
花粉到单核期时,采集花蕾剥取花药接种,经过消毒后使用专业的化学溶液进行培养。
将培养温度稳定在22~28℃,每天光照12~14小时,直到生根后,叶片3~4片时再移植。
4、脱毒生产
栽种出来的脱毒草莓原种,经过定植后,隔离在专门的无菌环境下,继续繁殖脱毒的草莓生产用苗。
这类操作一般会有专业的人工流程,对草莓原种病毒检测,不超过20%感染率才能算是合格。
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人工击卵等),啄木鸟等捕食性鸟类等啄食幼虫, 造成孔洞和生长不良,严重危害时可造成园林景观
树干注药、树干涂白,灯光或者性激素类似物诱杀 极差。对该类有害动物的生态治理,主要是植物合
成虫,饵木诱杀成虫、虫卵、幼虫等。
理配置,合理密植确保通风透光,合理灌溉不积水,
4.3 地下害虫的生态综合治理
饵料诱杀成虫、幼虫等。
的斑驳。在 EMC 上,则产生黄白斑点和明脉。
结论(王国平,1991)。
6.2.2 草莓轻型黄边病毒(SMYEV) 在指示植物 UC4 上,致叶片枯死。在 EMC、UC5、AIP 和 UC10 上,表现叶片边缘失绿,植株矮化。 6.2.3 草莓镶脉病毒(SVBV) 在指示植物 UC5 上, 表现叶片向背面反卷,在 UC6 上,叶片沿叶脉出现 带状褪绿斑,后期变为坏死条纹或条斑。
草莓属于蔷薇科,草莓属,多年生草本植物。 在世界小浆果生产中,草莓荣举首位。草莓是结果 最快、成熟最早、株体最小、周期最短、管理方便、 病虫较少、加工容易,便于调控的一种果树。它一 般栽后数月即可成熟收获,早春 5 月上市供应,填 补水果的淡季市场。它还可以进行促成栽培或在一 年内多次生产,周年供应。草莓繁殖主要靠葡匐茎 分株提供种苗,效率较低,不利于优良品种推广, 而且在长期无性繁殖中,植株往往积累多种病毒, 导致种苗退化,产量和品质下降,已成为阻碍草莓 生产的主要问题。应用离体培养技术,不仅可以快 速繁殖大量优质草莓种苗,有利于品种提纯和更新, 而且可用于脱除病毒和无病毒种苗的繁殖,加快新 品种的推广。1999 年~2002 年,我们在灵宝草莓樱 桃专家大院进行草莓组织培养与脱毒试验研究,利 用培育出的脱毒草莓苗在灵宝市建立草莓园 200 hm2,生长结果良好。
2.Courtyard of the Experts on Strawberry and Cherry in Lingbao,China) Abstract: Through years of experiments and research, we have researched and developed the tissue culture and virus-free technology of strawberry. Using stem tip and anther as explants, choosing MS as the multiplication substrate, taking 1/2MS as the basic culture medium for rootage culture, preserving and propagating the innoxious young plants by using virus measurement technology, 200 hm2 orchard has been established with the tissue cultured young strawberry plants and has had a well-grown achievement. Key Words: Strawberry; Tissue Culture; Virus-free Technology
文章编号:1003-2630(2009)01-0073-03
Tissue Culture and Virus-free Technology of Strawberry
ZHANG Yu-jun1,PENG Xing-long1,ZHANG Zhe-min2,ZHAO Hui1 (1.Forestry Technology Extending Station of SanMenXia, Henan,SanMenXia, Henan 472000,China ;
(责任编辑:王团荣)
UC5 和 UC6 上,导致叶片皱缩,扭曲变形,发病
(上接第 64 页)
潜叶蛾类等。
4.5 其它有害动物的生态综合治理
对该类食叶害虫的生态治理,主要是植物合理
城市园林植物上的有害动物种类主要有:蜗牛、
配置,人工有效销除虫源(包括修剪清除虫害枝、 蛞蝓、马陆、鼠妇等,往往危害植物的根部和嫩叶,
参考文献: [1]郝宝春.草莓高产栽培技术问答[M]. 北京:中国盲文出版 社,2000 年. [2]陈振光.园艺植物离体培养学[M]. 北京:中国农业出版社, 1995 年. [3]李慎英.花果蔬菜快速繁殖新技术[M]. 北京:中国人事出版 社,1996 年.
6.2.4 草莓皱缩病毒(SCrV) 在指示植物 UC4、
0.5
30 123 4.1 良好
后,将苗从瓶中取出,洗去基部的培养基,移栽到 盛有园土掺砂土或蛭石的塑料钵内,置于塑料大棚 或温室中,再加塑料薄膜拱棚保湿,保持 85 %的相 对湿度和 22~25℃,7~10 d 后,试管苗长出新叶、 发出新根,可逐步放风,降低拱棚内的湿度,最后 除去塑料薄膜,经过 20~30 d 的过渡移栽,可移至 田间。过渡移栽的管理,主要是控制小环境的温度、 湿度和光照,过强的光照会使棚内温度过高,需进 行遮荫。其次是防病,湿度过高易引起苗期病害, 除及时放风外,要喷洒杀菌剂。此外,叶面喷肥可 使小苗生长健壮,有利移栽成活。
0
30
162
5.4
0.05
30
39
1.3
0.1
30
0
0
许多草莓品种,因病毒发生严重,生长衰弱, 产量下降与品质变劣,病毒的发生和危害已成为我 国草莓生产上急需解决的问题。目前我国鉴定明确 的草莓病毒及其类似病害有 7 种,其中草莓斑驳病 毒(sMoV)、草莓皱缩病毒(SCrV)、草莓镶脉 病毒(SVBV)和草莓轻型黄边病毒(SMYEV)4 种已使大部分草莓受到侵染,约减产 20 %~50 %。 解决草莓病毒病害的主要途径是培养脱毒与原种、 并建立脱毒苗繁殖与推广体系,定期更新田间种 苗。脱毒苗原种是应用脱毒技术对优良草莓品种脱 除病毒,并进行病毒检测鉴定、确认为无病毒时, 方可作为原种保存和繁殖。为了防止蚜虫传播病 毒,脱毒苗的原种母株应保存在网室或试管内,并 应用离体繁殖技术,扩大繁殖,利用组培苗在田间 产生的匍匐茎进一步扩繁,培育生产草莓果实用的 种苗。草莓的病毒检测,通常用小叶嫁接法,利用 指示植物症状表现,来判断带毒情况。
74
河 南 林业科技
第 29 卷
芽茎,分化一般需 40~50 d。
2 培养基的选择
草莓的增殖培养为 MS 培养基,草莓培养的激
素用量一般比较低,以 BA0.5 mg/L、NAA0.02 mg/L
较好。BA 浓度过高,形成的芽丛生长会停滞,呈莲
座状,当 BA 浓度过低时,形成的芽少,但芽长势好。
在培养过程中,应根据腋芽增殖数量和苗的生长状
从被检草莓植株上,采集长成不久的叶,除去 两边的小叶,中央小叶带 1~1.5 cm 长的叶柄,把它 削成楔形作接穗。再除去指示植物复叶中间的小 叶,在叶柄中央部切开 1~1.5 cm,插入接穗,包扎 后,罩塑料薄膜袋,或放在高湿度的室内。若被检 植株带有病毒,嫁接后 1~2 月,在新展开的叶片、 匍匐茎或老叶上,会出现病毒症状。
城市园林植物上的地下害虫种类常见的主要 有:蛴螬类,地老虎类,金针虫类、蝼蛄类等。对
况,来调整 BA 的用量,增殖数量少时,可适当提高
BA 浓度,增殖数量多而苗的生长差时,应适当减少
BA 的用量。培养基中的糖以 30 mg/L 为宜,琼脂 7~8
g/L,pH 5.8。
表 1 BA 的浓度对草莓增殖与生长的影响
BA/(mg/l)
试验 管数
芽增 殖数
平均 数
生长 状况
0.1
30 62 2.066 良好
6.1 小叶嫁接法
5 炼苗和移栽
在瓶内生根培养的试管苗,直接移栽到田间, 不易成活,需经过温室或大棚过渡移栽进行锻炼, 使其逐步适应田间环境条件,最后移栽到田间,以 提高成活率。
生根培养至试管苗根长 2~3 cm 时,将瓶塞除 去,在温室里放置 3~4 d 进行锻炼。用大口罐头瓶 做培养瓶时,除盖后,会因温度降低过快,试管苗 出现失水萎焉现象,需将瓶盖再盖上,或有塑料薄 膜覆盖,待试管苗恢复正常时,再逐渐去盖。锻炼
国平,1991)。
用作草莓病毒检测的指示植物多种,其中 UC5
6.2 草莓病毒在指示植物上的表现
对上述 4 种主要草莓病毒均有较高的敏感性,因此,
6.2.1 草莓斑驳病毒(SMoV) 在指示植物 UC5 的 对草莓病毒的检测,仅用 UC5 一种指示植物就可以
叶片上,出现褪绿斑驳,有时产生黄色形状不整齐 完成,既可减少工作量,又能较快得出有无病毒的
诱导花药产生愈伤组织,选取花粉发育为单核 期花蕾,5~7 ℃低温处理 1~2 d,经 75 %酒精浸数 秒钟,再经 0.1 %升汞消毒 10~15 min,用无菌水冲 洗 3~5 次,剥取花药进行接种培养。诱导愈伤组织 的培养基为 MS+NAA2mg/L,蔗糖 30g/L,琼脂 6~7.5 g/L,pH 5.8。花药接种后 20~60 d,出现愈伤组织, 开始多数在花丝断口处出现,有的从药壁产生,有 的整个花药愈伤组织化。经 1 个月左右,由变褐色 的花药裂口处长出花粉愈伤组织,质地有的致密, 有的疏松,色泽有的鲜明,有的暗褐。将直径 2 mm 左右组织致密,色泽鲜明呈颗粒状的愈伤组织转移 到附加 BA0.5 mg/lMS 培养基上,诱导愈伤组织分化
第 29 卷第 1 期 2009年3月
河南林业科技ence and Technology
草莓组织培养与脱毒技术
Vol. 29 No. 1 Mar. 2 0 0 9
张玉君 1,彭兴龙 1,张哲民 2,赵 珲 1 (1.河南三门峡市林业技术推广站,河南三门峡 472000;2.灵宝草莓樱桃专家大院)
草莓在低温、短日照条件下即进入生理休眠, 在锻炼阶段必须保持长日照和较高的温度,移栽的 季节应安排在初夏,否则要加照明补充光照,延长 光照时间达 16 h,最低温保持 18℃以上。