芥子油苷测定方法
原子吸收光谱检测芥子气
原子吸收光谱检测芥子气
原子吸收光谱检测芥子气（Mustard Gas）是一种常用的方法来确定空气或其他环境中是否存在芥子气。
芥子气是一种有毒的有机化合物，具有强烈的刺激性和毒性。
原子吸收光谱方法通过测量芥子气在特定波长的光吸收程度来检测其存在。
这种方法利用了芥子气分子和金属原子之间的相互作用。
在光谱分析中，芥子气分子的吸收谱线通常位于可见光或紫外光区域。
实施原子吸收光谱检测芥子气的基本步骤如下：
1. 收集空气或其他样品，并将其通过一系列的化学步骤进行前处理，以将芥子气转化为气体态。
2. 将气体样品导入原子吸收光谱仪中，通常为火焰式原子吸收光谱仪。
该仪器中的样品通常与金属或金属化合物（如钠、铜、锌）相互作用，产生原子化的金属。
3. 通过将样品与特定波长的光传入样品室，并测量通过样品的光的强度来测定芥子气的吸收程度。
4. 分析测得的吸收光谱，通过与标准曲线比对或计算样品中芥子气的浓度。
原子吸收光谱方法在环境监测和军事防护等领域中得到广泛应用。
它具有高选择性、高灵敏度和较高的可靠性。
然而，该方法的主要限制是需要昂贵的仪器以及复杂的样品处理过程。
因此，在进行原子吸收光谱检测芥子气时，需要合适的设备和专业人员进行操作。
保健食品中大蒜素的测定等15个保健食品功效成分或标志性成分检测方法
附件：一、保健食品中大蒜素的测定1 范围本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，C6H10S3）的含量测定。
本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL；取100mg试样，提取定容5.0mL时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为0.20g/100g。
本方法最佳线性范围： 0.320mg/mL～3.00 mg/mL。
2 原理：根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。
3 试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。
3.1 无水乙醇3.2 正己烷3.3 标准溶液：称取0.1000g标准品，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mL。
此溶液可在冰箱中保存七天。
取该溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，此溶液含大蒜素浓度为1.0mg/mL。
4 仪器4.1 气相色谱仪：附氢火焰（FID）检测器4.2 数据处理机或积分仪4.3 分析天平：万分之一4.4 超声清洗机4.5 离心机：3000r/min5 分析方法5.1 试样提取5.1.1 固体试样：称取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），加无水乙醇适量，密塞，超声70min，取出冷却，加正己烷定容（调节大蒜素含量约为1mg/mL），振摇，静置分层后，取上层溶液进样。
5.1.2 液体试样吸取试样适量（相当于含大蒜素5mg，精确至0.001g），置于分液漏斗中，加5mL正己烷振摇提取1min，静置（或离心）分层后，取上层溶液进样。
5.2 气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：HP-5(30m×0.25mm)5.2.2 柱箱温度：100℃（3min）5.2.3 进样口温度：220℃5.2.4 检测器温度：250℃5.2.5 载气：氮气（1mL/min）5.2.6 氢气：40mL/min；空气：400mL/min5.2.7 进样量：1μL5.3 定性分析：在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间定性。
油菜籽中油的芥酸的含量测定气相色谱法编制说明
《油菜籽中油的芥酸的含量测定（气相色谱法）》编制说明1、工作简况（包括任务来源、协作单位、要紧工作进程、国家标准要紧起草人及其所做工作等）本标准方式的制定是依照国家粮食局文件“国粮办发〔2002〕251号《国家粮食局办公室关于做好2002年国家标准制、修订工作的通知》附件二：国家粮食局2002年制、修订国家标准打算”进行的，由武汉工业学院食物科学与工程学院负责《油菜籽中油的芥酸的含量测定》（项目编号：）的制定工作，成立了标准起草工作组，负责进行本标准的各项工作，本标准要紧工作进程为：（1）为了保证本标准为最新国际标准的版本，标准起草工作组查阅了国际标准最新的标准目录，通过国际互联网查阅了最近一段时刻国际标准的修制定情形。
1986年国际标准化组织ISO公布了由ISO农产品食物技术委员会制定的‘动植物脂肪和油：芥子酸的测定’标准（ISO 8209-1986），1994年6月16日该标准被废除，到目前为止，并无公布新的替代标准。
1988年12月22日，由中国农业科学院油料作物研究所负责起草的中华人民共和国国家标准：‘油菜籽中油的芥酸的测定气相色谱法’（GB 10219-1988）开始正式实施，1989年7月1日，该标准被农业部部颁标准‘油菜籽中油的芥酸的测定气相色谱法’（NY/T 91-1988）所替代。
1990年9月，国际标准化组织ISO公布了由ISO农产品食物技术委员会制定的‘动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析’标准（ISO 5508-1990）并替代了初期版ISO 5508-1978。
1998年，由国内贸易部谷物油脂化学研究所负责起草的中华人民共和国国家标准：‘动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析’（GB/T17377-1998）开始正式实施，该标准等效采纳ISO 5508-1990。
经对照分析，确信本国家标准在现有NY/T 91-1988标准的基础上进行修订。
考虑到NY/T 91-1988标准中‘脂肪酸甲酯的制备及测定’只列出了采纳一般填充柱进行的色谱分析法，而目前毛细管柱的气相色谱分离技术已经被普遍采纳，因此，在本国家标准中的‘脂肪酸甲酯的测定’采纳GB/T 17377-1998方式进行，该方式同时规定了采纳填充柱和毛细管柱的脂肪酸甲酯的气相色谱分析方式。
油菜籽芥酸
GB 10219—881 主题内容与适用范围本标准规定了检测菜籽油中芥酸的方法。
本标准适用于测定油菜籽中油和菜籽油的芥酸含量。
2 原理将菜籽油中脂肪酸甘油酯转化为脂肪酸甲酯后，进行气相色谱测定，按校正峰面积归一化法计算其结果。
3 仪器设备及操作条件3.1 气相色谱仪3.1.1 备有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪。
3.1.2 色谱柱：1～3m×2～4mm（内径）的玻璃柱或不锈钢柱。
3.1.2.1 色谱柱老化条件将色谱柱与检测器相连的一端脱开，在185℃下，老化16h，其载气流速为20～60mL/min。
再将柱箱温度升至195℃，继续老化2h。
3.1.2.2 色谱柱的性能指标配制混有大致等量的硬脂酸甲酯和油酸甲酯的正已烷（或石油醚）溶液。
调节样品浓度、进样量、柱温和载气流速，使硬脂酸甲酯的出峰时间在 15min以内，其峰高应约为记录纸满刻度的四分之三。
用公式（1）计算理论塔板数：…………………………………………………（1）式中：n──色谱柱理论塔板数；S──起点到硬脂酸峰顶间的距离，mm；W1──硬脂酸的峰底宽，mm。
用公式（2）计算分辨率：R=2Y/（W+W2） (2)1式中：R──色谱柱分辨率；W1、W2──硬脂酸和油酸的峰底宽，mm；Y──硬脂酸和油酸两峰顶间的距离（见图1），mm。
图 1 色谱柱柱效测定示意图理论塔板数（n）最小应为2000，分辨率（R）最小应为1.25。
且亚麻酸甲酯与花生一烯酸甲酯也应分开。
当色谱柱使用一定期限后，分辨率（R）会逐渐变小。
当小于其规定值时，就必须更换新的色谱柱。
3.1.3 载体：酸洗硅藻土色谱载体（如国产101白色酸洗载体及 Chromosorb W AW 等），60～100目。
3.1.4 固定液：5％～20％的聚酯型固定液，如聚丁二酸二乙二醇酯（DEGS）或聚丁二酸丁二醇酯（BDS）等。
也可使用其他适宜的固定液。
3.2 分析天平：感量0.1mg；3.3 高速捣碎机；3.4 小型粉碎机；3.5 小型榨油机；3.6 电热恒温水浴锅；3.7 电热恒温干燥箱；3.8 冷渗管（见图2）；图 2 冷渗管示意图3.9 酯化瓶：具塞，50～100mL，标准磨口，备有与其相配套的冷凝管；3.10 微量注射器：10μL，最小刻度0.1μL；3.11 研钵；3.12 烧杯、锥形瓶、具塞试管、移液管、量筒等。
实验报告—实验五、果蔬抗氧化物质含量及抗氧化能力测定
实验五、果蔬抗氧化物质含量及抗氧化能力测定一、实验目的了解果蔬中主要活性物质，掌握其测定方法。
二、方法步骤2.1 果蔬汇总活性物质测定2.1.1花青素含量测定1.称取苹果果皮4g，加入适量石英砂，分次加入10ml1%HCl溶液研磨成匀浆，将匀浆液全部转移至100ml三角瓶，再加50-60ml1%HCl溶液抽提40min至样品无色，将抽提液过滤转移至100ml容量瓶，并用1%HCl溶液定容。
2.分别取上清液和1%HCl溶液各1ml，分别加入pH4.5DE 0.4M醋酸钠溶液各4ml；同时取上清液和1%HCl溶液各1ml，分别加入pH1.0的0.25M氯化钾溶液各4ml，摇匀混合平衡40min之后，转入光径1cm的比色皿，于520nm和700nm下测定其吸光度。
提取液的花青素浓度（mg/L）=A/ԑL×103×MW×稀释倍数式中：最终吸光度A=（A520nm，pH1.0-A70nm，pH1.0）-（A520nm，pH4.5-A700nm，pH4.5）苹果主要花青素是1-矢车菊素-3半乳糖苷，以其为标准，MW 为摩尔质量502.5，ԑ为摩尔吸光系数30200，L为比色皿光路长（1cm），最终以1g试样含有花青素的量（mg）来表示。
2.1.2类黄酮含量测定1.芦丁标准曲线精确称取芦丁标准样品（105°C干燥至恒重）0.0592g，加入60%乙醇，加热使其样品溶解，定量转移至200ml容量瓶中，配置成0.296g/L的标准溶液。
分别取上述芦丁标准溶液0、1、2、3、4、5ml，用30%乙醇补充至10ml，分别加入1ml5%NaNO2，摇匀后放置5min，加入1ml10%Al （NO3）3，6min后在加入5ml1MNaOH，混匀，用30%乙醇定容至100ml，10min 后于波长510nm下测定吸光值，绘出芦丁标准曲线。
2.称取4g番茄样品，加少量石英砂和5-10ml30%乙醇研磨成匀浆，用30%乙醇定容至100ml，过滤至三角瓶中后，取绿野和30%乙醇各2ml，分别加蒸馏水3ml、5% NaNO2 0.3ml，摇匀静置5min，加入10%Al（NO3）3 0.3ml，放置6min，再加1MNaOH 2ml摇匀，5min后于510nm波长下测定吸光值，以芦丁曲线作标准曲线计算类黄酮含量。
菜籽中芥酸含量的快速测定
率+热收缩率以金属模具的线膨胀系数1.1×10-5/°C来计时,则热收缩率=(制品的线膨胀系数-1.1×10-5/°C)×(成型温度-20)×100过高的成型温度除使制品收缩率增大,还易造成制件表面产生花斑,失去光泽。
模温过低,物料交联固化不完全,强度受影响,制件也变暗。
选择合适的模温还可改进制品两侧的波纹现象。
3.3 保压时间成型时需要一定的保压时间。
保压时间由制件厚度和成型温度所决定,保压时间一般为0.5～1.5m in/m m,制件能充分固化,有良好的光洁度和平整性。
当BM C用高反应性的U PR和T BPB 时,将BMC料放入已预热好的模具内,迅速合模,按下列条件压制成型,可获得尺寸精度高和表面光亮平整的制品。
成型压力:10～20M Pa模温:150±5°C,下模温应高些,但上下模温相差在10°C以内。
保压时间:1.0～1.2min/mm厚度3.4 模具的要求要获得光亮平整的制品,要求模具的精度和光洁度愈高愈好,最好模具能淬火或模腔内能镀铬。
参考文献1 高分子材料,1986;2:1-52 强化·É ¡¤ ,1982;28(4):148-1523 Burns R.P olyester M o lding Com po unds.1982: 694 沈开猷.不饱和聚酯树脂及其应用.北京:化学工业出版社,1988:115 强化·É ¡¤ ,1989;35(3):73-786 强化·É ¡¤ ,1972;18(4):150-1597 ·É ¡¤ ,1985;36(8):40-44修稿日期:1997.6.30菜籽中芥酸含量的快速测定陈西鸾(陕西省粮油科学研究所 西安710082) 摘要 研究了快速测定菜籽中芥酸含量的方法,测定单样仅在7min内即可完成,且绝对误差小于5%。
硫苷分解产物
硫苷分解产物
硫苷，也叫芥子油苷，是十字花科类植物中的一种特殊物质。
当硫苷分解时，会产生一些具有特殊气味的物质，如异硫氰酸酯、腈和氰酸盐等。
这些物质是构成蔬菜（如芥末、辣根、白色花菜、萝卜等）特殊风味的原因之一。
此外，硫苷的分解产物也具有一定的生物学活性。
例如，异硫氰酸酯能干扰甲状腺素的合成，导致甲状腺肿大。
腈则可能对动物肝脏和肾脏造成一定的损害。
需要注意的是，硫苷的分解产物可能对某些人产生不良影响，如出现过敏反应或消化不适等症状。
因此，在食用含有硫苷的蔬菜时，建议根据自身情况适量食用。
芥末油_青芥辣_冲菜的挥发性风味成分的SPME_GC_MS测定
44 中 国 调 味 品
总第 304 期
异硫氰酸丁酯 、二烯丙基二硫化物也是三者共 有的风味成分 ,但含量比例不同 。还有一些组 分 ,由于其谱库检索相关性太差 ,质谱图较为 复杂 ,无法准确定性 。
图 1 芥末油 、青芥辣 、冲菜的挥发性 风味物质的总离子流色谱图 (a 为芥末
127
二烯 丙 基 二 硫
0. 14 Diallyl disulphide 化物
C6H10S2 146
0. 2
N , N - N ,N - 二甲基 Dimethyldecanamide 癸胺
C12H25NO
199
11. 68
2. 2 芥末油的挥发性风味成分 (见图 1a 、表2) 芥末油中检出 3 种异硫氰酸酯类物质 :
( %)
化合物名称 Compound name
分子式 分子量 Molecular Molecular structure weight
1
1. 98
14. 37 Carbon disulfide 二硫化碳
CS2
76
异硫 氰 酸 烯 丙
2
7. 42
73. 45 Allyl isothiocyanate 酯
油 ,b 为青芥辣 ,c 为冲菜) Table 1 Total ion chromato gram of volatile
flavor compounds from mustard oil , wa sabi , ‘chongcai’leaf mustard (a - mustard oil ;
b - wa sabi ;c -‘chongcai’leaf mustard)
tigated by SPM E/ GC/ MS. In t he t hree samples , 6 ,12 ,17 constit uent s were identified respectively ; Allyl isot hiocyanate was t he main flavor compound , which accounted for 73. 45 %、64. 25 %、32. 74 % of total volatiles respectively. Furt hermore , carbon disulfide accounted for 14. 37 %、25. 40 %、51. 67 %
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高效液相色谱对芥子油苷的提取和分离I准备阶段:1.水浴锅设置80℃2.配制两瓶70%的甲醇，其中一瓶置于水浴锅中温浴。
3.5mM苄基芥子油昔.2.33mg/ml4.0.5M 醋酸盐(PH=5)[30mlHAC，960ml H2O，力口10-20g NaOH 粉末，调至PH=5]5.20mM的醋酸盐，PH=5：将4中的稀释25倍6.DEAE sephadex A-25 :称取3g 树脂，加90ml 0.5M 醋酸盐(PH=5)室温过夜溶解。
7.硫酸酯酶：15mg溶解于6ml 20mM 醋酸钠中，PH=5 (16100uM/hour/g )II芥子油提取1.取新鲜莲座叶，鲜重5-10mg2.放入1.5mlEP管中，迅速放入液氮。
3.研磨成粉末后并加入1ml预热的70%的甲醇。
4.加入50ul 5mM的苄基芥子油昔5.盖好盖子漩涡震荡置于冰上，剩下的样品重复步骤3-4。
6.所有的样品置于80℃10min。
7. 4000rpm, 10min。
8.将上清液转移至1.5的离心管。
9.用预热的甲醇重新提取两次，收集所有的上清液至4ml, -20℃保存。
m芥子油苷的脱硫纯化1.搅拌DEAE sephadex A-25树脂成溶液，用1ml的移液器取1ml加入BioRad管中，让其沉淀。
2.用5ml的灭菌水清洗（禁止干燥）。
3.加入所有的芥子油昔提取液。
4.用2ml的70%的甲醇清洗两次，2ml的灭菌水清洗5次，2ml 20mM 醋酸盐PH=5清洗一次。
5.加入0.5ml硫酸酯酶，直至上侧的橡胶管中剩余1-2mm的液相。
IV脱硫芥子油苷的洗脱1.用1ml灭菌水洗脱3次。
2.浓缩至EP管中剩余0.5ml液体V HPLC分离脱硫芥子油苷1.取60ul洗脱液于HPLC管中，吸入30ul2.检测：PDA 190nm-370nm （或者DV229nm 和260nm）3.流速：1ml/min4.运行梯度：灭菌水（A）和甲醇（B），60minA100%,B0% 2minA to 60%B 线性48min，60%B to 100% B 线性3minA 0%，B100% 3minB to 100% A 线性4minVI芥子油苷的HPLC-MS5 .取60ul 洗脱液加入HPLC 管中，吸入6ul6 .检测：质谱，[M+Na +]7 .流速：0.25ml/min8 .运行梯度：混有50uM 的醋酸钠灭菌水(A )与甲醇(B ), 60min 40min ，60%B to 100% B 线性 5minA 0%，B100% 5minB to 100% A 线性8min 液相色谱质谱联用分离、鉴定芥蓝中脱硫芥子油昔腊贵晓,方萍,李亚娟,王月1 .芥子油昔的提取和纯化称取0. 20 g 冻干样品，加入3 mL 70%甲醇(甲醇：水二70 ： 30), 在70℃的水浴锅中提取10 min,然后4000 r min- 1离心10 min. 沉淀再按照上述方法提取2次,合并上述提取液.同时做2个平行.取 2 mL 提取液流经DEAESephadex A-25萃取柱，待提取液全部流出小柱 后，加入200 L 硫酸酯酶(0. 1%)溶液.室温反应16 h 后用4X 0. 5 mL 超纯水洗脱.洗脱液过0. 45 〃 m 微膜,4℃下保存,待HPLC 分析.利用 2-丙烯基芥子油昔(sinigrin)作为外标进行定量.2 .芥子油昔的测定与鉴定测定芥子油昔的主要方法包括气相色谱法测定其降解产物异硫代氰 酸盐化合物;高效液相色谱法测定脱硫芥子油昔和完形芥子油昔.对 芥子油昔的鉴定一般采用质谱法,包括化学电离、快速原子轰击电离A100%,B0%2minA to 60%B 线性及热喷雾电离等方法.1.超高效液相色谱法测定拟南芥芥子油昔［J］东北农业大学学报，石璐，李梦莎，国静等摘要：将已有的拟南芥芥子油昔高效液相色谱(HPLC)检测方法转换为超高效液相色谱(UPLC)方法，通过条件优化改进，建立拟南芥芥子油昔UPLC检测方法。
该方法采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(50 mmX2.1 mm, 1.8 p m),以超纯水和甲醇为流动相进行梯度洗脱，流速为0.40 mL-min-1,检测波长229 nm,进样量5 p L,内标为苯甲基芥子油昔。
2.芥蓝芥子油昔提取条件优化研究腊贵晓1,孔海民2,方萍3,杨铁钢1*摘要:采用正交试验设计，研究了提取温度、提取剂甲醇浓度(V/V)、提取时间和待测物质与提取液比例(简称“物液比”)对芥蓝菜薹中芥子油苷(总芥子油昔含量、总脂肪族芥子油苷和总吲哚族芥子油甘)提取效果的影响。
结果表明，物液比和提取温度对总芥子油昔、总脂肪族芥子油昔和总吲哚族芥子油昔提取效果影响显著(P<0. 05)，而甲醇浓度和提取时间对芥子油昔提取率无显著影响(P>0.05)。
综合考虑提取效果和成本，芥蓝中芥子油昔最佳提取条件为75℃,物液比1 ：45( g : mL),甲醇浓度70%,提取时间5 min。
在该条件下，总芥子油昔提取量为8. 31 p mol/g DW,总脂肪族芥子油昔提取总量为7. 58 p mol/g DW,总吲哚族脂肪族芥子油昔提取总量为0. 73 p mol/g DW。
3.中国甘蓝型油菜硫甘含量及组份分析李培武1, 2,赵永国2,张文2,丁小霞2,杨湄3,汪雪芳3,谢从华1,傅廷栋1 (1)硫昔提取：准确称取0.2000 g已制备好的样品至离心管中，于75℃水浴中保温杀活1 min,加入2 ml 70%甲醇提取液和200 pl内标，离心、转移上清液至试管中，再加入2ml 70% 甲醇提取并离心，共重复3次，混合上清液，取2 ml溶液上醋酸型DEAE-Sephadex A-25 阴离子交换柱，加硫酸酯酶500 pl,于36℃培养箱中酶解20 h后取出，用1 ml纯水冲洗，待流干后再用1 ml纯水冲洗，共冲洗3次，混匀收集的洗脱液，用0.45 pm的微孔滤膜过滤、封口，待上液相色谱仪分析。
(2)高效液相色谱分析：使用美国Waters公司的液相色谱仪，包括两台高压泵，自动进样器，二极管阵列检测器，色谱柱为Spherisorb C18柱(150 mmX4 mm),流动相为20% 乙腈，检测波长229 nm,柱温为30℃,进样量10 pl,所有样品重复2次，按照国际标准方法进行硫昔分量色谱峰定性。
青花菜：在青花菜芽菜中共发现了 7种芥子油苷，3种脂肪类芥子油苷，S4,S5和T4以及4种“吲哚类芥子油苷” :4OHIM, IM,1IM和4IM.芥子油若IM:呻噪基-3-田基芥子油昔；4IM: 4-甲氧呻喙基-3-甲基芥子油昔：1IM:鼠甲第呻噪基-3-甲基芥子油普；Sue:蔗糖；Glu：葡萄糖；Fru：果糖； Man:甘露嚼：F/G:果糖/葡萄糖）.:GS:芥子油音；S4:4.甲基亚磺酰丁基芥子油菩（萝卜硫昔）;S5: 5-甲基亚潢酰戊基芥子油苓;T4: 4-甲硫丁基芥子油甘；40HIM: 4-泾基-吗|噪基-，甲基2233黑芥子酶活性测定300mg植物材料用500回pH = 6.5的0.1 M磷酸舶缓冲液冰浴研磨，将提取液转移至离心管中，15000g： 4 c离心20m m,取上清液，即为黑芥子醯提取液「在90m黑芥子酶提取液中加入10 p,L 10 mM sinigrin于37 "C反应15 mim 95匕煮沸5 mm终止反应，10000 g4C离心5 min,加入2 mL甲醇在227 mn 时测定OD】值,在配置好反应液后直接95 t戢沸5 min使酶失活，J0000 g：4 ℃ 离心5 min,加入2 mL甲醒在227 nm时测定OS值，1个酶活单位相当于每mg蛋白中每分钟转化1 nm sinigrin的量。
晦活性=（ODj-OD±） /蛋白含量。
(Kim, Cben, Wang & Choi, 2006)2.231芥子油苔的分离纯化与分析测定200 mg样品加入3 mL煮沸的ddHzO沸水浴10 min后，收集上清液，再加入3mL煮沸的ddH 式）沸水浴lOmim 合并两次的提取液即为粗提液.将活化后DEAE-Sephadex 35 mg加入纯化柱中,用500 mM醋酸叱唉冲洗3次后，再用 ddHQ冲洗3次，然后取1 mL提取液过纯化柱，加入20 mM醋酸叱唳冲洗3 次，ddHtO冲洗2次，加入0.1%SugtasE过夜14h,用1 mL ddHQ分两次洗脱，即为脱硫芥子油苔,芥子油昔的分析采用高效液相色谱（HPLC）法,采取Waters 2996 二极管阵列检测器（Waters Corp., Milfbrd, USA）.色谱柱为C18（5 jim,4.6 mm x 250 mm>Elite ），流动相为乙胞和 ddHaO,分析条件为：0-5 min 9&5% ddH2O; 5-20 min 98.5%-80% ddH2O; 20-32 min 80% ddH3O,流速为i mL/min, 检测波长226 nm,进样量20 R L.以sinigrin为内标计算芥子油甘含量口每个样品取四个重复.拟南芥中芥子油甘：图3.2 JA处理对拟南芥芥子油普突变体地上部中呻噪类芥子油甘含量的影响（GS:芥子油昔；IM:呻噪基-3•甲基芥子油苔；4IM: 4-甲氧呻味基・3-甲基芥子油苔；1IM: I-甲氧呻噪基3甲基芥子油昔）.323.1芥子油普的分离纯化200 mg样品加入1 mL煮沸的ddHQ沸水浴10 min后，收集上清液，再加入1 mt煮沸的ddHQ 沸水浴lOmim 合并两次的提取液即为粗提液,将活化后DEAE-Sephadex 35 mg加入纯化柱中，用500 mM醋酸叱唳冲洗三次后，再用ddH/)冲洗3次，然后取1 mt提取液过纯化柱，加入20mM醋酸毗喔冲洗3 次，ddH±O冲诜2次；加入0.1% Su曲出e过夜14h,用1 rnLddHg 分两次洗脱，即为脱硫芥子油苔.323.2芥子油普的分析测定芥子油爸的分析采用高效液相色谱(HPLC)法，采取Shimadzu SPD-M20A 二极管阵列检测器(Shimadzu Corp., J&panK 色谱柱为CIS ( 5 Jim, 4.6 mm 250 mm, Elite),流动相为乙牖和 ddH?O,分析条件为：0-5 min 98.5% cidHzO； 5-20 min98.5%-80% ddK>0: 20-32 mm 80% ddHsO.流速为 1 mL/min,检测波长 226 皿，进样量20N L.以巴典为内标计算芥子油昔含量,,每个样品取五个重复.拟南芥：2.2.7芥子油昔的提取和检测(1)品准备(1)配制70%甲醇.(2)5mM的黑芥子昔标准品。