4食品中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚的测定
中药鉴定学考卷(附答案)
4、以花入药的药材是……………………………………………………………………………………（E）
5、以花粉入药的药材是…………………………………………………………………………………（C）
6~10题A.车轮纹B.方胜纹C.罗盘纹D.云锦花纹E槟榔纹
基，中部略粗，尾部渐细。表面淡黄白色，粗糙，全体有细纵皱纹或纵沟，并有棕黄色或白色点状皮孔和须根痕。质坚硬而脆，易折断，断而皮部浅黄白色，木质部黄色，气特异，味微甜。
（3）成分比较：南沙参的主要成分:其轮叶沙参含三萜类皂甙。北沙参根含生物碱和淀粉，并含微量挥发油及佛手柑内酯，果实含珊瑚菜素等。
（4）性味功效：南沙参性微寒、味甘，具有养阴润肺，化痰止咳功效。而北沙参性微寒，味甘微苦，具有养阴润肺，养胃生津功效。
云锦花纹e槟榔纹6蕲蛇??????????????????????????????????????b7商陆??????????????????????????????????????c8肉豆蔻?????????????????????????????????????e9广防已?????????????????????????????????????a10何首乌????????????????????????????????????d三共术语解释本大题共10分每一小题2分1怀中抱月
仙灵脾淫羊藿，子芩黄芩，枣皮山茱萸，国老甘草。
5、三七根据其加工入药的部位不同有剪口、筋条、绒根、头子。
6、中药延胡索的止痛成分中止痛作用最强的是延胡索乙素。
7、著名的“四大怀药”有怀菊花、怀地黄、怀山药和怀牛膝。
二、选择题（本大题共30分）
大黄鉴定
理化鉴别
• 微量升华：本品粉末少量，进行微量升华，可见菱状 针晶或羽状结晶，加碱显红色。（蒽醌类成分）
• 荧光鉴别：
– 药材新鲜断面于紫外光灯下观察，显浓棕色荧光。 – 粉末的稀乙醇（40%）浸出液，滴于滤纸上，再滴加稀乙醇扩
散后呈黄色或淡棕色环，置紫外光灯下观察，显棕色或棕红 色荧光，不得显持久的亮蓝紫色荧光。
• 检查羟基蒽醌衍生物：
– 粉末用稀盐酸与乙醚提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠试液， 碱液层显红色。
第15页/共21页
薄层鉴别：
对照品：大黄酸、大黄药材 吸附剂：硅胶H薄层板 展开剂：石油醚-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）
供 – 在与大黄酸对照品色谱相应的位置
试
上， 显相同的橙黄色荧光斑点。
品
（置氨气中熏后，日光下检视，斑
大 黄
分枝帖于茎，花小，紫红色或
带紫红色。
唐古特大黄——极似掌叶大黄，
但其叶片掌状深裂，裂片再分
裂，裂片通常窄长，呈三角状
药 用
披针形或窄线形（呈鸡爪状，
大
故名鸡爪大黄）。
黄
药用大黄——与掌叶大黄相近，
但本种叶片浅裂，（一般仅达
1/4）浅裂片大齿形或宽三角
形，花较大，黄白色。
第5页/共21页
产地
• 掌叶大黄 主产于甘、青、藏、川等地，多为栽培。 • 唐古特大黄 主产于青、甘、藏、川等地，野生或栽培。 • 药用大黄 主产于川、贵、云、鄂、陕等省，栽培或野生。
而波叶组植物主含土大黄甙，不含或仅含微量结合性蒽醌（为正品的 1/30）故无大黄的泻下作用，不能作大黄用，应注意区别。
正 品大黄
伪品大黄
来源 掌叶大黄、唐古特大黄、药用大黄
天然药物化学 第五章 蒽醌类化合物
第四节 鉴定
一、薄层色谱 二、纸色谱
第五节 结构测定
四大波谱： 紫外光谱（UV） 红外光谱 (IR） 核磁共振谱（NMR） 质谱（MS）
第六节 实例
大黄中游离蒽醌化合物的提取分离
Байду номын сангаас
OH O OH
大黄酸(rhein)
R1
R2
-H
-COOH
大黄素(emodin)
-OH -CH3
R1
O
芦荟大黄素(aloe-emodin) R2 大黄素甲醚(physcion)
-H
-CH2OH
-OCH3 -CH3
大黄酚(chrysophanol) -H
-CH3
蒽醌类化合物酸性强弱规律如下：
含有羧基的醌类化合>物的酸性强。
>
醌类化合物母核上β-羟基的酸性强于α-羟基。 ..酚酸羟性基顺O 数序OO目：H 增-COO多O，H酸＞性2增个强以O 。上β-羟O基＞O 1个HβO-羟基
HO＞2个以上α-羟基＞O1个α-羟基
1依%N次aO可H溶、5于%N：aO5%H水Na溶H液CO3 、 5%Na2CO3 、
两侧苯环上 一侧苯环上
蒽酮
O
二蒽酮
HH
1、蒽醌类
O
8
1
7
9
2
6
10
3
5
O
4
1、4、5、8 — α位 2、3、6、7 —β位 9、10 — γ位，又称中位
根据羟基在蒽醌母核上的分布情况，可将 其分为两种类型：大黄素型、茜草素型。
大黄素
大黄、虎杖、何首乌、 决明子等中有泻下 作用的1，8-二羟 基蒽醌衍生物均属 大黄素型。
snhclohohchohohohoh大黄酚蒽酮蒽酚或蒽酮不稳定易氧化ohglohgl番泻苷a反式番泻苷c反式番泻苷b顺式番泻苷d顺式二升华性游离蒽醌有升华性提取鉴别三溶解性羟基蒽醌及苷可溶于碱性溶液用于提取分离四酸碱性一酸性酸性顺序
高效液相色谱法测定番泻甙及其代谢产物番泻素
高效液相色谱法测定番泻甙及其代谢产物番泻素
孙艳;李雪驼;虞星炬
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】2004(22)1
【摘要】采用高效液相色谱法分离测定番泻甙A和B及其代谢产物番泻素A和B,其色谱条件为:色谱柱Spherisorb C18不锈钢柱(250 mm×4.6 mm i.d., 10 μm),柱温40 ℃;检测波长 360 nm;流动相A为1.25%(体积分数)乙酸水溶液,流动相B 为甲醇,线性梯度程序为100%A20 min100%B.该方法快速、准确,能够对番泻甙的整个代谢过程进行实时分析.
【总页数】3页(P48-50)
【作者】孙艳;李雪驼;虞星炬
【作者单位】中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大连,116023;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁,大
连,116023
【正文语种】中文
【中图分类】O658
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定麻仁丸中番泻甙A的含量 [J], 单爱云
2.HPLC测定番泻总苷提取物中番泻苷A、番泻苷B的含量 [J], 何伟;张现涛;严军;张朝波;柳燕
3.高效液相色谱法测定大黄及含大黄中成药中番泻甙A的含量 [J], 马鹏;罗丽
4.高效液相色谱法测定麻仁丸中番泻甙A的含量 [J], 张庆生;王宝琴
5.HPLC法测定番泻豆荚中番泻苷A和番泻苷B [J], 李静;车景超;曲佳;宛贵安;寿国香
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同方法炮制大黄中总蒽醌含量比较论文
不同方法炮制的大黄中总蒽醌含量比较【摘要】中药经不同辅料、不同方法炮制后，在性味、功效、作用趋向、归经和毒副作用方面都会发生某些变化，从而最大限度的发挥疗效。
本文运用hplc法测定了不同炮制方法的大黄中蒽醌的含量[1-2]。
实验表明，经不同方法炮制的大黄，游离蒽醌、结合蒽醌含量变化有差异：酒炙大黄结合性葸醌有所减少，大黄素、大黄素甲醚等游离葸醌总量几乎没有影响；炒大黄：葸醌减少约50%，结合性葸醌转化成为游离蒽醌增多；醋炙大黄：总蒽醌、结合型葸醌含量较生品明显下降，游离型蒽醌含量有所增加；炭炒大黄炭：结合葸醌含量极少，大黄酸含量增加，以上内容为揭示大黄不同炮制品的科学内涵提供实验依据。
【关键词】大黄；炮制品；游离型蒽醌；结合型蒽醌；液相色谱大黄为蓼科植物大黄的干燥根及根茎，具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。
现代研究表明大黄含有蒽类衍生物，包括大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚等，还含有苷类化合物、鞣质类、有机酸类、挥发油类等成分[1]，常用于便秘及各种急腹症如急性胰腺炎、急性胆囊炎、肠梗阻；急慢性肾功能衰竭急性感染性疾病及各种菌痢肠炎；各种出血性疾病及胃溃疡、高脂血症、病毒性肝炎、子宫内膜异位症、慢性前列腺炎等疾病的治疗。
本文以购得的生大黄药材为原料，按照《中国药典》、《全国中药炮制规范》[10]相关项目下的酒炙、醋炙、蒸制、炒炭等不同炮制方法，运用高效液相色谱法对生大黄以及制备的大黄饮片中游离蒽醌、结合蒽醌的含量进行了定量研究，对大黄蒽醌类成分的药理活性及其作用机理研究、大黄资源的进一步开发和利用具有重要的价值。
1研究思路及内容1.1大黄炮制购买市售生大黄，采用酒炙、醋炙、蒸制、炒炭等炮制方法制备不同的大黄炮制品种，用粉碎机将生大黄饮片及各种炮制品制成粉末，并过四号筛备用。
1.2不同炮制品中游离蒽醌、结合型蒽醌的测定购买大黄素、大黄素甲醚（游离型蒽醌）、番泻苷a（结合型蒽醌）的对照品，制备各对照品贮备液。
高效液相色谱法测定大黄中的大黄素、大黄酚的含量
论文标题高效液相色谱法测定大黄中的大黄素、大黄酚的含量班级药学30801专业名称药学系部名称制药工程系河北化工医药职业技术学院毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。
尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。
对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。
作者签名：日期：指导教师签名：日期：使用授权说明本人完全了解大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。
作者签名：日期：学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。
除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。
作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。
本人授权大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。
涉密论文按学校规定处理。
作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日目录摘要 (3)第一章：大黄的概述 (3)§1-1基本信息 (3)§1-2化学成分 (4)§1-3药效作用 (4)1-3-1消化系统的影响 (4)1-3-2对血液系统的影响 (4)1-3-3抗感染作用 (5)§1-4不良反应 (5)§1-5现代研究 (5)第二章：高效液相色谱法测大黄中大黄素和大黄酚的含量 (6)§1-1仪器与试剂 (6)1-1-1仪器 (6)1-1-1试剂 (6)§2-2方法与结果............................................................. (7)2-2-1色谱条件 (7)2-2-2对照品的制备 (7)2-2-3供试品的制备 (7)2-2-4阴性对照溶液的制备 (7)2-2-5干扰试验 (7)2-2-6标准曲线的绘制 (7)2-2-7精密度试验 (7)2-2-8重复性试验 (7)2-2-9稳定性试验 (7)2-2-10加样回收率试验 (8)2-2-11样品的测定 (8)第三章：讨论 (8)§3-1药材含量测定中提取剂的确定 (8)§3-2HPLC法中检测波长的确定 (8)§3-3HPLC法中线形范围的确定 (9)参考文献 (9)第一章：摘要论文题目：高效液相色谱法测定大黄中的大黄素、大黄酚的含量摘要摘要内容：大黄是我国临床常用的中药之一，有“泻热通畅、凉血解毒、逐瘀通经、攻积导滞、利胆退黄”之功效，大黄中的有效成分有蒽醌类、芪类、苯丁酮类、鞣质类、色原酮类、萘类、有机酸、糖、蛋白质、甾醇等150多种成分。
中国药科大学天然药物化学期末参考试题
绪论回答下列问题:1. 简述中药有效成分常用的提取、分离方法。
2. 简述溶剂提取法的原理。
为何采用递增极性的溶剂进行逐步提取？3. 请将常用溶剂按极性由弱到强排序。
并指出哪些溶剂与水混溶？哪些溶剂与水不分层？4. 采用溶剂法提取中药有效成分时，如何选择溶剂？5. 水、乙醇、石油醚各属于什么性质溶剂？有何优缺点？6. “水提醇沉”和“醇提水沉”各除去什么杂质？保留哪些成分？7. 下列溶剂系统是互溶还是分层？何者在上层？何者在下层？①正丁醇-水；②丙酮-水；③丙酮-乙醇；④氯仿-水；⑤乙酸乙脂-水；⑥吡啶-水；⑦石油醚-含水甲醇；⑧苯-甲醇。
8. 简述影响溶剂提取法的因素。
为什么药材粉碎过细，反而影响提取效率？为什么不必要无限制延长提取时间？9. 举例说明酸碱溶剂法在中药有效成分分离中的应用。
10. 溶剂分配法的基本原理是什么？在实际工作中如何选择溶剂？11. 吸附色谱分离中药化学成分的原理是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点。
12. 简述凝胶过滤色谱的原理。
SephadexLH-20与Sephadex G有何区别？在中药有效成分分离中有何应用？13. 简述离子交换色谱法的分离原理及应用。
14. 大孔树脂色谱分离中药化学成分有何特点？简述其操作过程。
15. 简述分配色谱的分离原理。
用水为固定相的纸色谱和用水为固定相的硅胶分配色谱，展开剂应如何处理？16. 在对中药化学成分进行结构测定之前，如何检查其纯度？17. 简述确定化合物分子式的方法。
18. 简述IR、UV、NMR、MS在测定中药化学成分结构中的应用。
19. 从某中药中分离得到一种结晶性化合物，如何弄清它的化学结构？(c) 2008 中国药科大学中药学院.(c) 2008 中国药科大学中药学院.(c) 2008 中国药科大学中药学院.萜类化合物习题三萜及其苷类习题问答题 1. 为什么含有皂苷的中药一般不能作成注射剂？为什么含人参皂苷能作成注射剂？ 2. 简述三萜皂苷的检识方法。
一测多评法测定首荟通便胶囊中4种大黄素类成份含量
一测多评法测定首荟通便胶囊中4种大黄素类成份含量马云;韩振明;马健;张微;关永霞;张贵民【期刊名称】《中国合理用药探索》【年(卷),期】2022(19)12【摘要】目的:基于高效液相色谱(HPLC)法建立一测多评法(QAMS)测定首荟通便胶囊中的4种大黄素类成份。
方法:考察不同提取方法、色谱条件、洗脱梯度等因素,优化色谱条件,并通过多点校正法计算相对校正因子,建立QAMS含量测定方法。
结果:通过对提取方法、色谱条件、洗脱梯度等方面的考察,建立了同时测定首荟通便胶囊4种大黄素类成份的方法,进一步以大黄酚为内标参照物,通过多点校正法确定了芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素的相对校正因子(f_(k/s))分别为3.65、4.29、0.77,相对保留值(RRT)分别为0.83、0.86、0.97;采用QAMS测定14批首荟通便胶囊样品中4种成份的含量,并与外标法(ESM)的含量测定值进行对比,结果无统计学差异,表明QAMS测定结果可靠。
结论:基于HPLC建立了首荟通便胶囊的QAMS含量测定方法,该方法准确、成本低,可更全面地反映首荟通便胶囊的内在品质,为进一步提升首荟通便胶囊质量标准提供了技术依据。
【总页数】10页(P107-116)【作者】马云;韩振明;马健;张微;关永霞;张贵民【作者单位】鲁南厚普制药有限公司;中药制药共性技术国家重点实验室;鲁南制药集团股份有限公司【正文语种】中文【中图分类】R286.0【相关文献】1.一测多评法测定黄蛭内异胶囊中5种蒽醌类成分含量2.一测多评法测定清火胶囊中5个大黄蒽醌类成分含量3.“一测多评”法测定腰痹通胶囊中5种皂苷类成分的含量4.一测多评法测定血塞通胶囊中5种皂苷类成分的含量5.一测多评法测定疏风清热胶囊中五种蒽醌类成分的含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
附件2食品中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚的测定BJS 2019171范围本方法规定了食品（含保健食品）中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚含量的高效液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于饮料、代用茶等食品及片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等剂型的保健食品中番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚含量的测定。
2原理试样经甲醇-甲酸铵溶液（9:1）超声提取、离心、过滤后，滤液供高效液相色谱-质谱联用仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1试剂3.1.1 甲酸（HCOOH）：色谱纯。
3.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.3 甲酸铵（CH5NO2）：色谱纯。
3.2 试剂配制3.2.1 甲酸溶液（0.1%）：取甲酸（3.1.1）1.0mL用水稀释至1000mL。
3.2.2 甲酸铵溶液(2mmoL/L)：称取甲酸铵（3.1.3）0.13g（精确至0.01g），溶于水并稀释至1L。
3.2.3 甲醇-甲酸铵溶液（9:1）：取甲醇（3.1.2）900mL，加入100mL甲酸铵溶液（3.2.2），混匀。
3.3 标准物质番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1。
番泻苷B和番泻苷A的纯度均≥95.0%，大黄素甲醚纯度≥99.0%。
3.4 标准溶液配制3.4.1 番泻苷A标准储备液（40μg/mL）：准确称取番泻苷A（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，置250mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）200mL，超声（40℃）使溶解，冷却至室温，用甲醇-甲酸铵溶液定容至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期3个月。
3.4.2 番泻苷B标准储备液（40μg/mL）：准确称取番泻苷B（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，置250mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）200mL，使其溶解，用甲醇-甲酸铵溶液定容至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期3个月。
3.4.3 大黄素甲醚标准储备液（40μg/mL）：准确称取大黄素甲醚（3.3）10.0mg(精确至0.0001g)，置250mL量瓶中，加入甲醇（3.1.2）200mL，超声（40℃）使溶解，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为40μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期3个月。
3.4.4混合标准中间液（10μg/mL）：分别准确吸取番泻苷A、番泻苷B和大黄素甲醚标准储备液(40μg/mL)各 2.5mL，用甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）稀释至10mL，摇匀，制成10μg/mL 的混合标准中间液，-20℃保存，保存期1个月。
3.4.5混合标准系列工作液的制备：分别准确吸取混合标准中间液（10μg/mL）（3.4.4）适量，用甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）稀释，摇匀，作为系列混合标准工作溶液，浓度依次为各化合物0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、 2.0μg/mL、4.0μg/mL、8.0μg/mL，临用新制或依仪器响应情况配制适当浓度的混合标准工作溶液。
或根据需要采用空白基质提取液（5.1.3），配制适当浓度的基质混合标准工作溶液。
4 仪器和设备4.1 高效液相色谱-质谱联用仪，配有电喷雾（ESI）离子源。
4.2 天平：感量分别为0.00001g和0.0001g。
4.3 超声波清洗器。
4.4 涡旋混匀器。
4.5 离心机：转速≥3000r/min。
5 分析步骤5.1 试样制备5.1.1 固态试样或半固态试样取适量固态试样（代用茶及片剂、胶囊内容物、颗粒剂等保健食品）混匀，研细，或取适量半固态试样（软胶囊）内容物混匀，准确称取1.0g（精确至0.001g），置100mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）80mL，涡旋混匀1 min，超声（40℃）提取60min，冷却至室温，用甲醇-甲酸铵溶液（9:1）定容至刻度，摇匀，以3000r/min离心5min，取适量上清液过0.22 μm有机滤膜，取续滤液，待测。
5.1.2 液态试样取适量试样（饮料、口服液）混匀，准确量取1.0mL，置100mL量瓶中，加入甲醇-甲酸铵溶液（9:1）（3.2.3）80mL，涡旋混匀1min，超声（40℃）提取60min，冷却至室温，定容至刻度，摇匀，以3000r/min离心5min，取适量上清液过0.22μm有机滤膜，取续滤液，待测。
5.1.3 空白基质提取液称取空白试样适量，与试样同法处理，制得空白基质提取液。
5.1.4 空白溶液不加试样，与试样同法处理，制得空白溶液。
5.2 仪器参考条件5.2.1 色谱参考条件a）色谱柱：C18（2.1×50mm，1.8µm），或性能相当者。
b）流动相：A相为甲醇（3.1.2），B相为0.1%甲酸溶液（3.2.1），梯度洗脱程序见表1。
c）流速：0.2mL/min。
d）柱温：40℃。
e）进样量：2μL。
表1 梯度洗脱程序表梯度时间/min 流动相A/% 流动相B/%0 25 7510 25 7515 60 4018 90 1025 90 1026 25 7528 25 755.2.2 质谱条件a) 离子源：电喷雾离子源（ESI源）。
b）扫描方式：负离子扫描（ESI-）。
c) 检测方式：多反应离子监测（MRM）。
d) 干燥气、雾化气、加热气等均为高纯氮气，使用前应调节相应参数使质谱灵敏度达到检测要求，干燥气流速、加热气流速、雾化气流速、接口温度、脱溶剂管温度、加热器温度、碰撞能量等参数应优化至最佳灵敏度，监测离子对和定量离子对等信息详见附录B。
5.3 定性测定按照超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱条件测定试样和标准工作溶液，记录试样和标准溶液中各化合物的色谱保留时间，当试样中检出与某标准品色谱峰保留时间一致的色谱峰（变化范围在±2.5%之内），并且试样色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比（k ）的偏差不超过表2规定的范围，可以确定试样中检出相应化合物。
表2 定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度（%） k ＞50%50%≥k ＞20%20%≥k ＞10%k≤10%允许的最大偏差（%） ± 20± 25± 30± 505.4 定量测定 5.4.1 标准曲线的制作将混合标准工作溶液（3.4.5）分别按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到相应的标准溶液的色谱峰面积。
以混合标准工作溶液的浓度为横坐标，以定量离子的色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
5.4.2 试样溶液的测定将试样溶液（5.1.1-5.1.2）按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到样品溶液中对应组分的色谱峰面积。
根据标准曲线得到待测液中组分的浓度，平行测定次数不少于两次。
对照品色谱图参见附录C 。
5.4.3 空白溶液的测定空白溶液（5.1.4） 同试样溶液测定步骤操作。
6 结果计算将高效液相色谱-质谱联用仪测得浓度代入下式计算含量： (1)式中：X — 试样中各待测物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg 或mg/L ）； c — 从标准曲线中读出的各待测物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL ）； V — 样液最终定容体积，单位为毫升（mL ）；Km V c X ⨯⨯⨯⨯=10001000m —试样的质量或体积，单位为克（g或mL）；K —稀释倍数。
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
8 其他当称样量为1g（精确至0.001g）或1mL，定容体积为100mL时，番泻苷A的检出限为0.050mg/kg(mg/L)，定量限为0.200mg/kg(mg/L)。
番泻苷B的检出限为0.050mg/kg(mg/L)，定量限为0.15mg/kg(mg/L)。
大黄素甲醚的检出限为0.089mg/kg(mg/L)，定量限0.356mg/kg(mg/L)。
空白试验应无干扰。
化合物相关信息表A.1 番泻苷A、番泻苷B、大黄素甲醚标准样品的中、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量质谱参考条件质谱参考条件a)离子源：电喷雾离子源(ESI) ；b)检测方式：多反应监测(MRM) ；c)扫描方式：负离子扫描(ESI-)；d)雾化气流速：3.0L/min；e)加热气流速：10.0L/min；f)干燥气流速：10.0L/min；g)喷雾电压：4.5kV；h)接口温度：300℃；i)脱溶剂管温度：250℃；j)加热器温度：400℃；k)其他质谱参数见表B.1。
表B.1化合物定性、定量离子和质谱分析参数序号化合物名称电离方式母离子( m/z)子离子(m/z)碰撞能量(V)保留时间（min）1 番泻苷B ESI- 861.4 386.2* 4214.74 699.2 292 番泻苷A ESI- 861.4 386.2* 4215.87 699.2 293 大黄素甲醚ESI- 283.3 240.1* 2521.09 183.2 53* 定量离子。
标准色谱图图C.1 番泻苷B、番泻苷A、大黄素甲醚标准物质的总离子流色谱图（1-番泻苷B；2-番泻苷A；3-大黄素甲醚，以下同）图C.2 番泻苷B、番泻苷A标准物质的提取定量离子色谱图图C.3 番泻苷B、番泻苷A标准物质的提取定性离子色谱图图C.4 大黄素甲醚标准物质的提取定量离子色谱图图C.5 大黄素甲醚标准物质的提取定性离子色谱图本方法负责起草单位：山东省食品药品检验研究院。
方法的参与单位：中国食品药品检定研究院、山西省食品药品检验所、福建省食品药品质量检验研究院、河北省药品检验研究院、辽宁省食品检验检测院。
主要起草人为：李启艳、刁飞燕、曹进、卢端萍、高广慧、董培智。