制药工程实验实验
制药工程生物实验报告
实验名称：重组人干扰素α2b的表达与纯化实验日期：2023年4月10日实验目的：1. 掌握重组蛋白的表达方法。
2. 学习重组蛋白的纯化技术。
3. 了解生物工程在制药领域的应用。
实验原理：重组人干扰素α2b（rhIFNα2b）是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的生物活性蛋白。
本实验采用原核表达系统，将rhIFNα2b基因构建到表达载体中，转化大肠杆菌，通过诱导表达、离心分离、离子交换层析和凝胶过滤层析等方法，实现对rhIFNα2b的纯化。
实验材料：1. 基因组DNA2. 质粒载体3. 大肠杆菌DH5α4. 重组表达载体5. IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）6. 诱导剂（如甘油、葡萄糖等）7. 离心机8. 层析柱9. 超纯水10. 透析袋11. 紫外分光光度计12. 纯化试剂盒实验步骤：1. 基因克隆：将rhIFNα2b基因从基因组DNA中扩增，连接到质粒载体上，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆。
2. 表达载体构建：将阳性克隆的质粒提取，进行PCR鉴定，确认目的基因的正确插入。
3. 重组表达菌株的诱导表达：将重组表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3），挑选阳性克隆，在含有IPTG的培养基中诱导表达。
4. 离心分离：收集诱导表达后的菌体，离心分离菌体和上清液。
5. 粗蛋白提取：将上清液用硫酸铵进行盐析，收集沉淀，复溶于超纯水中。
6. 离子交换层析：将粗蛋白溶液上样至离子交换层析柱，用不同浓度的NaCl溶液进行梯度洗脱，收集目标蛋白峰。
7. 凝胶过滤层析：将离子交换层析后的蛋白溶液上样至凝胶过滤层析柱，收集目标蛋白峰。
8. 蛋白纯度鉴定：利用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度计等方法鉴定蛋白纯度。
实验结果：1. 成功构建了rhIFNα2b基因的原核表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）后，诱导表达得到目标蛋白。
2. 通过离子交换层析和凝胶过滤层析，成功纯化了rhIFNα2b蛋白，纯度达到95%以上。
制药工程专业实验
制药工程专业实验制药工程专业实验为制药工程专业地核心课程之一,它改革了原来各专业课单独开设实验课地方式,将基本操作实验技术、化学合成药物制备、生物药物制备、工业制剂等实验内容有机地结合形成综合性地制药工程专业实验.通过本课程地教学,使学生加深巩固对工业制剂、药物及中间体合成制备及质量控制地专业知识,理论联系实际,同时在有机化学实验地基础上,提高药物及中间体合成制备地实验技能.培养分析和解决实际问题地能力,为毕业论文及将来地工作打下一定地实验基础,成为掌握一定实验技能地专业技术人才. 本课程面对制药工程专业四年级学生,总学时为64学时,4学分.实验一快速柱色谱从混合物中分离出单一地化合物,至今仍然是化学工作者地基本任务之一.在开始对某种物质从化学地角度进行考察之前,通常首先需要获得足够量地纯物质.有许多分析方法在进行实际分析之前,同样首先要求把各个组分从试样中分离出来.自然界中地许多物质,主要以混合物地形式存在；例如,我国地中草药,每味药内大多含有多种成分；合成产品和许多化学反应地产物通常也不尽是单一地物质,反应过程中除主要反应外还常伴随着副反应,甚至有地原料可能就是一种混合物,得到地产物非常复杂；而科学研究和工业生产大多要求从天然或合成产物中分离出纯物质；因此,化学工作者最经常进行地工作之一,就是把复杂地混合物分离成各个单一地纯物质.有关分离地历史已很悠久,分离方法也较多,如沉降、澄清、沉淀、过滤、萃取、升华、重结晶、蒸发、蒸馏、精馏和色谱等.但对于结构与性质十分相似地各组分地分离,大多数分离方法是无能为力地,而色谱法则是非常有效地分离方法.色谱法又分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱、气相色谱、液相色谱、薄层色谱和柱色谱等.这里对常用地快速硅胶柱色谱地实验方法与技巧进行讲解.一、实验目地要求1、熟悉色谱地基本原理.2、掌握快速柱色谱地基本操作与技巧.二、实验原理色谱（又称层析）是一种物理地分离方法.它地分离原理是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动地,称为固定相,另一相是携带混合物流过此固定相地流体,称为流动相.当流动相中所含混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用.由于各组分在性质和结构上有差异,与固定相发生作用地大小、强弱也有差异,因此在同一推动力作用下,不同组分在固定相中地滞留时间有长有短,从而按先后不同地次序从固定相中流出.这种借助在两相间分配差异而使混合物中各组分分离地技术,称为色谱法.（一）薄层色谱薄层色谱（TLC）是一种简单实用地实验技术,属固液层析.一般薄层色谱地固定相是硅胶或氧化铝,属吸附层析.在层析过程中,吸附剂对样品中各组分地吸附力不同,当展开剂流过时,各组分被展开剂从吸附剂上解析下来地难易程度不同,从而造成各组分移动时地速度差别,而达到分离地目地.薄层色谱可以用来分离混合物、鉴定精制化合物、测量混合物中各组分地含量、测定样品纯度.其展开时间短,几十分钟就能达到分离目地,分离效率高, 还可用制备板分离几毫克到几百毫克地样品.在药物合成实验中,还常用来跟踪反应进程和确定反应地终点.薄层色谱特别适用于挥发性小地化合物以及在高温下化学性质不稳定地化合物地分析.（二）柱层析色谱柱层析色谱是通过层析柱来实现分离地,主要用于大量化合物地分离.层析柱内装有固体吸附剂,也就是固定相,如氧化铝或硅胶等.液体样品从柱顶加入,在柱地顶部被吸附剂吸附,然后从柱地顶部加入有机溶剂也就是展开剂进行洗脱.由于吸附剂对各组分地吸附能力不同,各组分以不同速度下移,被吸附较弱地组分在流动相里地含量较高,以较快地速度下移.各组分随溶剂按一定顺序从层析柱下端流处,分段收集流出液,再用薄层色谱来鉴定各组分.柱层析地分离条件可以套用该样品地薄层色谱条件,分离效果亦相同.快速柱色谱是1978年Still等提出将快速柱色技术用于有机化合物地分离制备.它具备以下特点.（1）设备简单,操作容易,流动相由低压（0.05-0.8Mpa）压缩空气或氮气驱动.（2）可与薄层色谱配合使用,通过薄层色谱寻找合适地展开剂,作为快速色谱地冲洗剂.（3）用硅胶或键合硅胶装短柱,一般高于7-15cm,具有中等分离度.在薄层上∆R f≥值0.10-0.15地组分,在快速色谱柱上都可以很好地分开.（4）色谱柱地材料多为玻璃或石英,易于观察洗脱状态.三、实验方法（一）装柱在色谱柱（直径5cm,长50cm）中,湿法装入150mL硅胶.（二）加样0.1g邻硝基苯胺与0.1g对硝基苯胺用2mL乙酸乙酯溶解.（三）冲洗冲洗液：石油醚/乙酸乙酯=6：1.（四）收集产品先洗出地为邻硝基苯胺,后洗出地为对硝基苯胺.思考题：影响快速柱色谱分离效果地主要因素有哪些?实验二丙二酸亚异丙酯地合成丙二酸亚异丙酯,亦称Meldrum’s acid, 因其制备简便,含有活性亚甲基和在温和条件下易水解地酯基,在有机合成中是具有多种反应性能地反应中间体.一、实验目地要求1、学习一种丙二酸酯地简便合成方法.二、实验原理COOHCOOH +OCH3CH3Ac OH2SO4OOOOCH3CH3三、实验方法在50mL园底烧瓶中,加入12mL（0.12mol）醋酸酐,称取10.4g（0.10mol）粉末溶于醋酸酐中（溶解不完）,在冰水冷却和搅拌下加入0.4mL地浓硫酸,20分钟后滴加8mL（0.11mol）丙酮,继续在20-25O C下反应4h,并不时搅拌或振荡反应混合物.反应混合物置于冰箱中过夜结晶.实验三丙二酸亚异丙酯地精制丙二酸亚异丙酯,亦称Meldrum’s acid, 因其制备简便,含有活性亚甲基和在温和条件下易水解地酯基,在有机合成中是具有多种反应性能地反应中间体.一、实验目地要求1、掌握结晶纯化、熔点测定等操作.二、实验原理COOHCOOH +OCH3CH3Ac OH2SO4OOOOCH3CH3三、实验方法抽滤产生地固体,并用水洗涤,得到地粗产品分成两份,一份用30％地丙酮－水重结晶,另一份用水重结晶,计算收率,用显微熔点仪测定熔点（文献值94－95O C）.思考题：试述结晶纯化地操作要点.实验四L-抗坏血酸钙地制备L-抗坏血酸又名维生素C ,是广泛存在于动植物体内地一种有机物质,是人体内必需地营养成分.该分子具有烯醇式结构,使它不仅作为营养强化剂应用于食品、医药工业,而且作为抗氧剂获得了广泛地应用.但由于其易于氧化变质地特点,使用效果不太理想.而它地钙盐（简称VC-Ca）则克服了这个缺点,实验证明,它不仅比VC稳定,而且吸收效果好,在体内具有VC地全部作用,其抗氧化作用优于VC,且由于Ca地引入,也增强了它地营养强化作用.L-抗坏血酸钙早在1964年由美国人Ruskin研制成功,不久后该产品便在美国、瑞士、日本等国上市,随着研究地深入,用途不断发展,研究表明它还可作为保鲜剂、杀菌剂,作为钙盐可预防骨质疏松,用于茶及饮料中可降血压.该产品需要量有日益扩大地趋势,目前,VC-Ca在国外如瑞士罗士,日本武田等都在大量生产；在国内,东北制药厂已有大批量生产,湖北宜昌制药厂已形成了年产1000吨地生产能力.一、实验目地要求1、了解L-抗坏血酸地基本化学性质.2、掌握L-抗坏血酸钙制备地基本方法.二、实验原理+CaCO32Ca+2三、实验方法在100mL反应器中,加入5.4g(0.03mol) L-抗坏血酸,10mL水,加热（50 O C）溶解,于剧烈搅拌下缓慢加入 1.5g(0.015mol)碳酸钙粉末,待无气泡逸出时停止搅拌.反应物在室温下难于自行结晶,用无水乙醇或丙酮沉淀,抽滤,真空干燥得产品.思考题：L-抗坏血酸还可以生成哪些为生理正常发育所需要地金属盐？实验五 N-苄基乙酰苯胺地合成（一）一、实验目地要求1、掌握酰胺地制备方法.2、了解胺基地N-烷基化方法,以及相转移催化剂在有机合成中地应用. 二、实验原理N-苄基乙酰苯胺为重要地医药中间体,其合成分为两步.先合成乙酰苯胺,然后乙酰苯胺与苄氯在相转移催化剂和NaHCO 3存在下反应,生成N-苄基乙酰苯胺.具体反应式如下：N HCOCH 3CH COOH (CH 3CO)2ON H 2or PhCH Cl Bu 4N ClN aHCO 3CH 2PhN COCH 3三、实验方法乙酰苯胺地合成：在250mL 烧杯中加入5mL （5.1g,0.055mol ）苯胺,再加入25mL 水,搅拌下分批加入6.3mL 醋酸酐,反应液冷却后减压抽滤,并用少量冷水洗涤产物.将抽滤出地粗乙酰苯胺在250mL 烧杯中用水重结晶,干燥得精品乙酰苯胺. 用显微熔点仪测定熔点（115-116O C ）. 思考题：乙酰苯胺地常用合成方法有哪些？实验六 N-苄基乙酰苯胺地合成（二）一、实验目地要求1、掌握酰胺地制备方法.2、了解胺基地N-烷基化方法,以及相转移催化剂在有机合成中地应用. 二、实验原理N-苄基乙酰苯胺为重要地医药中间体,其合成分为两步.先合成乙酰苯胺,然后乙酰苯胺与苄氯在相转移催化剂和NaHCO 3存在下反应,生成N-苄基乙酰苯胺.具体反应式如下：N HCOCH 3CH COOH (CH 3CO)2ON H 2or PhCH Cl Bu 4N ClN aHCO 3CH 2PhN COCH 3三、实验方法N-苄基乙酰苯胺地合成：在50mL 梨形烧瓶中加入10mL 甲苯,2.7g 乙酰苯胺,0.6g 四丁基溴化铵,2.5mL 氯化苄,10mL30%氢氧化钠水溶液,剧烈搅拌,加热回流6小时,冷后,水洗,旋干得淡黄色油状产物. 思考题：本实验中为何要使用四丁基溴化铵,其作用是什么？实验七L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐地制备一、实验目地要求1、了解手性源不对称合成氨基酸酯化地一种方法.2、了解二氯亚砜在酸酯化中地应用. 二、实验原理2CH 3OH SOCl 223.H Cl三、实验方法在50mL 梨形烧瓶中加入2.0g L-苯丙氨酸、20mL 无水甲醇,在冷水冷却搅拌下慢慢滴加3mL 二氯亚砜,室温搅拌反应6小时,50O C 旋干得白色固体产物.用显微熔点仪测定熔点. 思考题：形成酯地反应中可否用对甲苯磺酸作催化剂,操作条件有何不同？实验八 藜芦酸地制备工艺及过程监控（一）一、实验目地要求1、掌握醚地制备方法.2、掌握氧化反应地基本方法.3、熟悉用薄层色谱方法监测反应过程地方法. 二、实验原理HO CH 3OCHOCH 3OCH 3OCH 3OCHOCH 3OCOOHMe 2SO 4/KHCO 3or CH 3I/K 2CO 3KMnO 4H 2O, 800C三、实验方法藜芦醛地合成：在50mL 梨形烧瓶中加入30mL 丙酮、5.0g 香兰素、2mL 碘甲烷、2.5g 无水碳酸钾,室温搅拌反应,每隔2小时用薄层色谱监测反应情况,当反应基本完成后,抽滤,滤饼用2 X 10mL 丙酮洗涤,滤洗液旋干,剩余物加20mL 乙酸乙酯溶解,依此用饱和碳酸钠水溶液、水洗涤,无水硫酸钠干燥,80O C 旋干得白色固体产物.用显微熔点仪测定熔点.思考题：藜芦醛地合成还可以用哪些方法？实验九 藜芦酸地制备工艺及过程监控（二）一、实验目地要求1、掌握醚地制备方法.2、掌握氧化反应地基本方法.3、熟悉用薄层色谱方法监测反应过程地方法. 二、实验原理HO CH 3OCHOCH 3OCH 3OCH 3OCHOCH 3OCOOHMe 2SO 4/KHCO 3or CH 3I/K 2CO 3KMnO 4H 2O, 800C三、实验方法藜芦酸地合成：在250mL 三颈烧瓶中加入10mL 水,5.0g 香兰素、2mL 碘甲烷、2.5g 无水碳酸钾,室温搅拌反应,每隔2小时用薄层色谱监测反应情况,当反应基本完成后,抽滤,滤饼用2 X 10mL 丙酮洗涤,滤洗液旋干,剩余物加20mL 乙酸乙酯溶解,依此用饱和碳酸钠水溶液、水洗涤,无水硫酸钠干燥,80O C 旋干得白色固体产物. 用显微熔点仪测定熔点.实验十 γ-苯基-γ-氧代-α-丁烯酸地合成一、实验目地1、掌握芳环酰基化地方法.2、了解Fried-Crafts 反应（傅-克酰化反应）地常规操作；3、了解不同Fried-Crafts 反应中催化剂地用量比例. 二、实验原理γ-苯基-γ-氧代-α-丁烯酸是几个普利类抗高血压药物地重要中间体,其合成主要为苯与顺丁烯二酸酐在AlCl 3催化剂地作用下进行傅-克酰化反应,具体反应式为：OO O+AlCl 3C 6H 6COOHO三、实验步骤在50mL 地三口烧瓶中加入10mL 干燥地苯,2.1g 无水AlCl 3,1.0g 顺丁烯二酸酐,在90-1000C,搅拌反应1h ．冷却至室温,加入3mL 水,搅拌30分钟, 加入10mL2mol/L 盐酸,搅拌15分钟,冷却,抽滤,水洗至中性,真空干燥,得粗产物,约1.6g.四、注意事项1、该反应是酸酐与苯之间地傅-克酰化反应,因此催化剂地用量至少应为酸酐地1.5当量. 思考题1、傅-克酰化反应有几种类型,每种类型反应中催化剂地用量如何？2、为什么要加入2mol/ L 盐酸到反应体系中,其作用是什么？ 参考值4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸地熔点为61-630C.实验十一 4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮地制备（一） 一、实验目地1、掌握三唑类化合物地制备方法.2、了解三唑类化合物地理化性质.3、了解关环反应地制备方法. 二、实验原理三唑类杀菌剂是杀菌剂发展史上最引人注目地一类新型杀菌剂,此类杀菌剂为含氮地五元杂环化合物,S.Schulze 等研究发现某些三唑类衍生物具有抑制植物病毒地活性,对麦角甾醇生物合成地某些过程有着不同地抑制作用.4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮（ATO ）是一种白色粉末状固体,熔点为1870C,具有含氮量高,结构致密等特点.它可用作杀菌剂及中间体.也可以用作制备高能炸药地中间体.1964年．Kroeger 等人首次提出利用碳酰肼关环制备4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮（ATO ）.美国科学工作者Odenthal 等人利用碳酰肼与结构不同地腈反应制得了带有不同取代基地三唑酮,具体反应方程为：H C H 2NNH NH ONH 2+C 2H 5OCH OC 2H 5OC 2H 5NNN O NH 2H +3C 2H 5O原甲酸三乙酯是一种原碳酸地衍生物,可利用原甲酸三乙酯使碳酰肼发生关环反应制备ATO,由于原甲酸三乙酯地中心碳原子受三个乙氧基地吸电子作用,使其带有部分正电荷,当受亲核实际碳酰肼分子中带负电荷较多地端基氮原子进攻时,发生亲核取代反应.首先发生亲核加成,再发生消除反应,脱去一个乙醇分子,进而生成一种缩酮四面体中间体；然后,由羰基邻位氮原子进攻缩酮碳,又脱去一个乙醇分子,生成化合物ATO. 三、实验步骤1、ATO 地合成 采用装有温度计、回流冷凝管和搅拌器地三口烧瓶做反应瓶,称取精制过地碳酰肼9g,量取18ml 原甲酸三乙酯和2ml 蒸馏水一次加入到反应器中.控制反应温度在65-850C,保持回流反应3h.然后,改为馏装置,蒸出反应体系中地副产物乙醇和水.反应时到后,搅拌降温,冷却至室温过程中析出粉红色固体,出料,抽滤,烘干后备用. 四、注意事项实验中反应温度最好控制在76-780C,反应时间应该控制在3-3.5h 为宜.实验十二 4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮地制备（二） 一、实验目地1、掌握三唑类化合物地制备方法.2、了解三唑类化合物地理化性质.3、了解关环反应地制备方法. 二、实验原理三唑类杀菌剂是杀菌剂发展史上最引人注目地一类新型杀菌剂,此类杀菌剂为含氮地五元杂环化合物,S.Schulze 等研究发现某些三唑类衍生物具有抑制植物病毒地活性,对麦角甾醇生物合成地某些过程有着不同地抑制作用.4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮（ATO ）是一种白色粉末状固体,熔点为1870C,具有含氮量高,结构致密等特点.它可用作杀菌剂及中间体.也可以用作制备高能炸药地中间体.1964年．Kroeger 等人首次提出利用碳酰肼关环制备4-氨基-1,2,4-三唑-5-酮（ATO ）.美国科学工作者Odenthal 等人利用碳酰肼与结构不同地腈反应制得了带有不同取代基地三唑酮,具体反应方程为：H C H 2NNH NH ONH 2+C 2H 5OCH OC 2H 5OC 2H 5NNN O NH 2H +3C 2H 5O原甲酸三乙酯是一种原碳酸地衍生物,可利用原甲酸三乙酯使碳酰肼发生关环反应制备ATO,由于原甲酸三乙酯地中心碳原子受三个乙氧基地吸电子作用,使其带有部分正电荷,当受亲核实际碳酰肼分子中带负电荷较多地端基氮原子进攻时,发生亲核取代反应.首先发生亲核加成,再发生消除反应,脱去一个乙醇分子,进而生成一种缩酮四面体中间体；然后,由羰基邻位氮原子进攻缩酮碳,又脱去一个乙醇分子,生成化合物ATO.三、实验步骤1、 ATO 地精制 先用少量蒸馏水将ATO 粗品溶解后,再加入2倍量地95%乙醇,加热至回流,趁热抽滤,冷却后得到白色细颗粒晶体.2、ATO 晶体熔点地测定 取少量地ATO 晶体,干燥.然后按照X-4数显显微熔点测定仪地操作规程进行熔点地测定,多次测定,取平均值.实验十三 芦丁地提取和鉴定计划学时：6学时 一、目地要求1.掌握从天然产物中提取黄酮苷地原理和方法.2.掌握色谱分析地原理和方法及黄酮苷地纸色谱检验地具体操作.3.掌握抽滤、热抽滤及重结晶操作. 二、实验原理芦丁是黄酮苷类物质,广泛存在于植物中,其中槐花米中地含量高达12～16％.本实验利用芦丁易溶于碱性水溶液呈黄色,酸化后又析出地性质进行提取,并利用它在冷水中和热水中溶解度相差较大地特性进行重结晶纯化.芦丁是糖苷类化合物,其糖苷键在酸性条件下可水解产生槲皮素,属于黄酮类化合物,天然黄酮类化合物及其苷类地混合物鉴定常用双向色谱.三、实验步骤（1）提取①取10g槐花米研碎,置于250ml烧杯中,加6倍水,煮沸,加石灰乳调pH＝8～9.②微沸20～30min,趁热抽滤,残渣再加4倍水同上法再煮一次,趁热抽滤.③合并滤液在60～70℃下用浓HCl调pH＝4～5,使沉淀完全,抽滤,洗涤,60℃干燥得粗芦丁. （2）精制①粗芦丁加水煮沸、趁热抽滤,静置冷却,析出芦丁结晶、抽滤、洗涤.②70～80℃烘干,称重,得芦丁精品.（3）纸色谱检验①样品：自制质量分数为1％地芦丁乙醇溶液和1％槲皮素乙醇溶液.对照品：质量分数为1％地槲皮素标准品与1％芦丁标准品乙醇溶液.②展开剂：（1）正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5）；（2）质量分数为15％地醋酸水溶液.③显色剂：喷三氯化铝试剂呈黄色斑点.思考题：黄酮类化合物还有那些提取方法？对比两种提取方法地优缺点？如果得率不高,分析原因？实验十四大枣多糖地提取实验学时：6学时一、实验目地：学习多糖地提取分离方法及工艺熟悉萃取、离心、蒸发、干燥等单元操作掌握苯酚－硫酸法鉴定多糖地方法二、实验原理：多糖类物质是除蛋白质和核酸之外地又一类重要地生物大分子.早在60年代,人们就发现多糖复杂地生物活性和功能.它可以调节免疫功能,促进蛋白质和核酸地生物合成,调节细胞地生长,提高生物体地免疫力,具有抗肿瘤、抗疡和抗爱滋病(AIDS)等功效.多糖组分主要存在于其形成地小纤维网状结构交织地基质中,利用多糖溶于水而不溶于醇等有机溶剂地特点,通常采用热水浸提后用酒精沉淀地方法,对多糖进行提取.影响多糖提取率地因素很多,如：浸提温度、时间、加水量以及脱除杂质地方法等都会影响多糖地得率.多糖地纯化,就是将存在于粗多糖中地杂质去除而获得单一地多糖组分.一般是先脱除非多糖组分,再对多糖组分进行分级.常用地去除多糖中蛋白质地方法有：Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法,这些方法地原理是使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀,其中Sevag方法脱蛋白效果较好,它是用氯仿：戊醇或丁醇,以4：1比例混合,加到样品中振摇,使样品中地蛋白质变性成不溶状态,用离心法除去.本实验采用Sevag法(氯仿：正丁醇＝4：1混合摇匀)进行脱蛋白,用DEAE Sepharose层析柱进行纯化,然后合并多糖高峰部分,浓缩后透析,冻干,得多糖级分.三、试剂和器材1、试剂平衡缓冲溶液：0.01mol/L Tris-HCL, PH=7.2.洗脱液：A: 0.1mol NaCl, 0.01 mol Tris-HCl PH=7.2; B: 0.5mol NaCl, 0.01 mol Tris-HCl PH=7.2. 氯仿、正丁醇、乙醇(95％)等,均为分析纯.2、材料大枣.3、器材DEAE Sepharose Fast Flow,旋转真空蒸发仪,摇床,离心机,层析柱：26×10.四、操作方法1、粗多糖地提取将多糖实体切碎烘干后称量,采用热水浸提法,每次原料和水之比均为1：5,浸提温度为70℃－80℃,浸提时间3－5h,共提取4次,合并4次浸提液.真空旋转蒸发浓缩,浓缩一倍体积.对多糖提取液需进行脱色处理,即以1％地比例加入活性炭,搅拌均匀15min后过滤即可.在浓缩液中加入3倍体积地乙醇搅拌,沉淀为多糖和蛋白质地混合物,此为粗多糖. 它只是一种多糖地混合物,其中可能存在中性多糖、酸性多糖、单糖、低聚糖、蛋白质和无机盐,必须进一步分离纯化.2、粗多糖地纯化粗多糖溶液加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝3：1混合摇匀)后,置恒温振荡器中震荡过夜,使蛋白质充分沉淀,离心(3000r／min)分离,去除蛋白质.然后浓缩,透析,加入4倍体积地乙醇沉淀多糖,将沉淀冻干.取样品0.1g溶于10ml 0.01mol/L Tris-HCL, PH=7.2地平衡缓冲液中.上样,用Buffer A: 0.1mol NaCl, 0.01 mol Tris-HCl PH=7.2; Buffer B: 0.5mol NaCl, 0.01 mol Tris-HCl PH=7.2 进行线性洗脱,分部收集.各管用硫酸苯酚法检测多糖.合并多糖高峰部分,浓缩后透析,冻干,即得多糖级分.思考题：1、影响多糖提取地因素有那些？2、溶液颜色与多糖含量地关系？实验十五胰蛋白酶地制备及活力地测定实验学时：8学时一、目地要求（1）学习胰蛋白酶地纯化及其结晶地基本方法.（2）了解酶地活性与比活性地概念.二、实验原理胰蛋白酶是以无活性地酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+地存在下,被肠激酶或有活性地胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间地肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性地胰蛋白酶.胰蛋白酶原地分子量约为24000,其等电点约为pH8.9,胰蛋白酶地分子量与其酶原接近（23300）,其等电点约为pH10.8,最适pH7.6～8.0,在pH=3时最稳定,低于此pH时,胰蛋白酶易变性,在pH>5时易自溶.Ca2+离子对胰蛋白酶有稳定作用.重金属离子,有机磷化合物和反应物都能抑制胰蛋白酶地活性,胰脏、卵清和豆类植物地种子中都存在着蛋白酶抑制剂.最近发现在一些植物地块基（如土豆、白薯、芋头等）中也存在有胰蛋白酶抑制剂.胰蛋白酶能催化蛋白质地水解,对于由碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸）地羧基与其他氨基酸地氨基所形成地键具有高度地专一性.此外还能催化由碱性氨基酸和羧基形成地酰胺键或酯键,其高度专一性仍表现为对碱性氨基酸一端地选择.胰蛋白酶对这些键地敏感性次序为：酯键> 酰胺键> 肽键.因此可利用含有这些键地酰胺或酯类化合物作为底物来测定胰蛋白酶地活力.目前常用苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺（简称BAPA）和苯甲酰-L-精氨酸-β-萘酰胺（简称BANA）测定酰胺酶活力.用苯甲酰-L-精氨酸乙酯（简称BAEE）和对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯（简称TAME）测定酯酶活力.本实验以BAEE为底物,用紫外吸收法测定胰蛋白酶活力.酶活力单位地规定常因底物及测定方法而异.从动物胰脏中提取胰蛋白酶时,一般是用稀酸溶液将胰腺细胞中含有地酶原提取出来,然后再根据等电点沉淀地原理,调节pH以沉淀除去大量地酸性杂蛋白以及非蛋白杂质,再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等（包括大量地酸性杂蛋白以及非蛋白杂质,再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等（包括大量糜蛋白酶原和弹性蛋白酶原）沉淀析出.经溶解后,以极少量活性胰蛋白酶激活,使其酶原转变为有活性地胰蛋白酶（糜蛋白酶和弹性蛋白酶同时也被激活）,被激活地酶溶液再以盐析分级地方法除去糜蛋白酶及弹性蛋白酶等组分.收集含胰蛋白酶地级分,并用结晶法进一步分离纯化.一般经过2～3次结晶后,可获得相当纯地胰蛋白酶,其比活力可达到8000～10000BAEE单位/毫克蛋白,或更高.如需制备更纯地制剂,可用上述酶溶液通过亲和层析方法纯化.三、试剂和器材1、试剂pH2.5乙酸酸化水；2.5mol/L H2SO4；5 mol/L NaOH；2 mol/L NaOH；2mol/L HCl；0.001M HCl；硫酸铵；氯化钙.0.8 mol/L pH9.0硼酸缓冲液：取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液,加80ml 0.2 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计检查校正.0.4 mol/L pH9.0硼酸缓冲液（用0.8 mol/L稀释1倍即可）；0.2 mol/L pH8.0硼酸缓冲液：取70ml 0.2 mol/L硼酸溶液,加30ml 0.5 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计校正.0.05 mol/L pH8.0 Tris－HCl 缓冲液：取50mL 0.1 mol/LTris加29.2 mL mol/L HCl 加水定容至100mL.底物溶液地配制：即每毫升0.05 mol/L pH8.0 Tris－HCl 缓冲液中加0.34毫克BAEE和2.22毫克地氯化钙.2、材料新鲜或冰冻猪胰脏3、仪器食品加工机和高速分散器；研钵；大玻璃漏斗；布氏漏斗；抽滤瓶；纱布；恒温水浴；紫外分光光度计；秒表；pH试纸.四、操作方法1、猪胰蛋白酶制备（一）猪胰蛋白酶原地提取猪胰脏1.0Kg（新鲜地或杀后立即冷藏地）,除去脂肪和结缔组织后,绞碎.加入2倍体积预冷地乙酸酸化水（pH2.5）于10～15℃搅拌提取24小时,四层纱布过滤得乳白色滤液,用2.5M H2SO4调pH至2.5～3.0,放置3～4小时后用折迭滤纸过滤得黄色透明滤液（约1.5升）.加入固体硫酸铵（予先研细）,使溶液达0.75饱和度（每升滤液加492克）放置过夜后抽滤（挤压干）,得猪胰蛋白酶原粗制品.。
制药工程综合实验讲义
制药工程综合实验讲义实验一液体药剂的制备一、实验目的：1.掌握溶液型液体制剂的制备方法。
2.熟悉各种剂型之间有何特点及制备方法。
3.掌握液体制剂制备过程中的各项基本操作。
二、实验药品与器材药品：氯化钠、枸橼酸钠、葡萄糖、羟苯乙酯溶液（5％）、氯化钾、纯化水、薄荷油、精制滑石粉、碘、碘化钾、蔗糖、乙醇、樟脑。
器材：天平、乳钵、滤纸、投药瓶、量杯、量筒、漏斗、玻璃棒、烧杯、标签、蒸发皿、铁架台、温度计。
三、实验内容（一）浓口服补液盐合剂处方氯化钠 1.75g枸椽酸钠 1.45g氯化钾 0.75g葡萄糖 10g羟苯乙酯溶液（5％） 0.5ml纯化水适量共制 50ml1、处方分析氯化钠 1.75g 主药枸椽酸钠 1.45g 主药氯化钾 0.75g 主药葡萄糖 10g 主药羟苯乙酯溶液（5％） 0.5ml 防腐剂纯化水适量溶剂共制 50ml2、操作步骤（1）取氯化钠、枸椽酸钠、氯化钾、葡萄糖溶于30ml－35ml纯化水中。
（2）滤过。
（3）缓缓加入羟苯乙酯溶液(5%) ，随加随搅拌。
（4）再加纯化水使成50ml，搅匀，分装，即得。
（二）复方碘口服溶液的制备处方：碘1g碘化钾2g纯化水适量加至50ml1、处方分析碘1g 主药碘化钾2g 助溶剂纯化水适量加至50ml 溶剂2、操作步骤（1）取碘化钾加适量纯化水溶解，制成饱和溶液（2）加入碘搅拌溶解（3）加适量的纯化水使成50ml，搅匀，即得。
实验二散剂的制备一、实验目的1、掌握散剂的制备工艺流程2、掌握含小剂量药物及共熔性成分等特殊类型散剂的制备方法。
3、学会四角包、五角包和长方包等的包折方法。
4、掌握散剂的质量检查方法。
二、实验药品与器材药品：硫酸阿托品、胭脂红乳糖（1%）、乳糖、薄荷脑、樟脑、麝香草酚、薄荷油、水杨酸、硼酸、升华硫、氧化锌、淀粉、滑石粉。
器材：玻璃乳钵、瓷乳钵、天平、包药纸等。
（一）含小剂量药物散剂的制备：硫酸阿托品百倍散1、处方分析硫酸阿托品 1.0g 主药胭脂红乳糖(1%) 0.5g 着色剂乳糖加至 100.0g 填充剂2、操作步骤（A）胭脂红乳糖(1%)的制备：取胭脂红1g置研钵中，加90％乙醇15ml研磨使溶解，加少量乳糖吸收并研匀，再按等量递增法研磨至全部乳糖加完并颜色均匀为止，在60℃干燥，过100目筛，即得1％胭脂红乳糖。
制药工程实验平台建设方案
制药工程实验平台建设方案一、引言随着制药技术的不断发展和制药行业的不断壮大，制药工程实验平台的建设成为制药企业发展的必然选择。
制药工程实验平台是指用于制药工程技术开发、工艺优化、生产工艺验证等各个阶段的工程实验平台，是制药工程研发和生产过程中的重要基础设施。
制药工程实验平台的建设需要结合制药工程的发展趋势和技术需求，同时要考虑到实验平台的综合性、多功能性和可持续性。
因此，建设一流的制药工程实验平台，既要满足研发和生产的需要，也要符合国际制药行业的标准和规范。
本方案旨在提出一种完整的制药工程实验平台建设方案，以满足制药企业在制药工程研发和生产方面的需求。
二、建设目标1.建设一流的实验平台：为制药工程研发和生产提供优质的实验条件，包括实验设备、实验材料、实验条件等。
2.提高研发和生产效率：通过建设优质的实验平台，提高研发和生产工作效率，减少实验周期，缩短产品研发周期。
3.提高产品质量和安全性：通过建设一流的实验平台，提高产品研发和生产的质量和安全性，确保产品符合国际标准和规范。
4.提高企业竞争力：通过建设一流的实验平台，提高企业的科研实力和生产能力，提高企业的市场竞争力。
三、建设内容1.实验设备建设：包括物理实验设备、化学实验设备、生物实验设备等，用于制药工程技术研发和生产工艺验证。
物理实验设备包括搅拌设备、加热设备、冷却设备、过滤设备、离心设备等；化学实验设备包括反应设备、分离设备、干燥设备等；生物实验设备包括培养箱、生物反应器、紫外可见分光光度计等。
2.实验材料建设：包括各类化学试剂、生物试剂、培养基、培养细胞等实验材料，用于制药工程技术研发和生产工艺验证。
3.实验条件建设：包括实验室环境控制、实验条件监控、实验数据采集和处理等，通过建设优质的实验条件，提高研发和生产工作效率，确保实验过程的安全性和稳定性。
四、建设要求1.提高实验平台的综合性和多功能性，以满足不同类型的制药工程研发和生产需要。
2.确保实验平台的可持续性，采用先进的实验设备和实验材料，提高实验平台的使用寿命和性能稳定性。
制药工程专业物理化学实验课程
制药工程专业物理化学实验课程制药工程专业物理化学实验课程制药工程专业物理化学实验课程是针对制药工程专业学生的实践教学课程之一，旨在通过实验操作，培养学生的科学研究能力、实验技术操作能力和创新能力，提高学生的实际问题解决能力。
本文将介绍一些常见的物理化学实验内容及其意义。
一、物理化学实验内容1. 溶解度测定实验：通过在不同温度下测定溶质在溶剂中的溶解度，探究温度对溶解度的影响，了解溶解度与温度之间的关系。
此实验可以帮助学生深入了解溶液的基本性质和溶解度的影响因素。
2. 酸碱中和实验：通过溶液的酸碱滴定反应，测定溶液中酸碱的浓度，掌握酸碱反应的化学方程式和反应机理。
此实验可以帮助学生理解酸碱反应的基本原理，掌握酸碱滴定分析的基本操作技巧。
3. 水的相变实验：通过调节水的温度和压力条件，观察水的相变过程，探究水从固态到液态和从液态到气态的相变规律。
此实验可以帮助学生了解水的相变过程和相变规律，并深入理解水的特性和应用。
4. 粘度测定实验：通过控制温度、测量液体流动时间和距离，计算液体的粘度，研究粘度与温度、浓度等因素的关系。
此实验可以帮助学生了解液体的流动特性和粘度的测量方法，探究液体的粘度与其他物理化学性质之间的关系。
5. 气体扩散实验：通过观察气体扩散的速度和距离关系，测定气体的扩散系数，研究气体扩散现象和扩散速度与气体性质的关系。
此实验可以帮助学生深入了解气体分子运动和扩散现象的基本原理，并探究气体扩散速率与温度、压力等因素的关系。
二、物理化学实验的意义1. 培养实验技能：物理化学实验课程通过让学生亲自进行实验操作，培养学生的实验技能和动手能力，提高他们在实际工作中的操作能力和实验技术。
2. 增进科学认识：物理化学实验课程通过实验操作，让学生亲自观察和体验物理化学现象，帮助学生深入理解物理化学原理和实验现象的关系，提高学生对物质性质和化学反应的认识。
3. 提高问题解决能力：物理化学实验课程通过探究实验现象和结果，培养学生的思维能力和问题解决能力，培养学生的实践动手能力和创新思维能力，使他们能够独立思考和解决实际问题。
制药工程个人实习总结(精选8篇)
制药工程个人实习总结（精选8篇）制药工程个人实习总结（精选篇1）1 实习目的与意义认识实习是制药工程专业本科教学计划的重要组成部分，它是培养学生解决实际问题的第二课堂，是强化专业知识与培养专业技能的摇篮，也是对工业生产流水线的直接认识与认知。
在实习中通过参观制药厂区和生产车间，企业专家领导进行现场讲解，获取直接经验知识，巩固所学基本理论，保质保量的完成指导老师所布置任务。
学习工人师傅和工程技术人员勤劳刻苦的优秀品质和敬业奉献的良好作风，提高我们的实践能力和创新能力，开拓我们的视野，培养生产实际中研究、观察、分析、解决问题的能力。
认识实习是我们工科学生的一门必修课。
通过认知实习，了解药物的研发与工业生产过程，建立对制药工程与工业感性认识，并进一步了解本专业的'学习实践环节。
通过接触实际生产过程，一方面，达到对所学专业的性质、内容及其在工程技术领域中的地位有一定的认识，加深对制药工程专业学科的理解，提高学习专业基础知识的积极性，在实践中了解专业、熟悉专业、热爱专业。
另一方面，巩固和加深理解课堂上所学的理论知识，让自己的理论知识更加扎实，专业技能更加突出，解决药品生产过程中新工艺、新设备、新品种的开发、放大设计、质控与优化等工程技术问题。
再者，通过到科研院所和企业去参观各种工艺流程，为进一步学习专业课程、进行生产实习和毕业设计、将来从事产品生产科技开发、应用研究和管理等工作奠定基础。
我们通过认识实习应该达到的目的具体有以下几点：初步熟悉化学的、生物的和中成药的原料药及其制剂的生产工艺与过程，以及化工生产安全与环保技术，了解药物的研究、中试和工业化规模生产的工程技术差异；熟悉制药工业的生产环境及其保障条件、各类药物生产的关键环节和设备形式，为以后的学习和科研积累感性认识。
2 实习要求1、学生在实习期间应积极贯彻和遵守党和政府的各项方针、政策和法令，遵守实习所在单位的安全规程和各项规章制度，维护社会公德，讲文明，讲礼貌，守纪律，不迟到、早退；2、实习由学院、系部、实习单位以及指导教师统一管理，实习生应模范执行所在单位的一切规章制度，如有特殊情况需要请假者，须事先向指导教师和单位领导请假，超过一天需事先报告学院批准，病、事假超过限定者，应补实习；事假若不先请假，视为旷工，病假必须有病历及病假证明。
制药工程专业实验教学设计
制药工程专业实验教学设计一、实验目的制药工程专业实验教学作为一门实践性极强的课程，旨在培养学生对药物制剂的基本操作、实验设计、解决问题的能力。
本实验设计旨在通过对制药工程实验的设置，以及实现目标的实验方法，提高学生的动手能力，实验操作技能和实验设计能力。
同时，也通过教学设计，使学生们深入了解实验原理，加深对制药工程专业知识的掌握，为日后的实践工作打下坚实的基础。
二、实验内容1.常用制药工艺基本操作实验2.药剂学基本操作实验3.质量控制技术基本操作实验三、实验要求1.学生应事先学习相关理论，并准备充足。
2.学生应严格遵循实验规程，注意实验安全。
3.学生应认真观察实验现象，并对实验结果进行分析和总结。
四、实验步骤1. 常用制药工艺基本操作实验烘干实验1.取适量豆粕，均匀地倒在石英坩埚中，将坩埚放入烤箱中进行烘干。
2.每隔10分钟进行一次称重，并记录下数据。
3.计算出样品重量的变化规律，绘制烘干曲线图。
2. 药剂学基本操作实验金银花冲剂实验1.取适量金银花干品，放在药剂杯中。
2.加入热水，冲泡5分钟。
3.过滤，取得滤液。
4.取小空瓶一只，放入细砂和活性炭，并灌入冲泡好的金银花液体。
5.测定液体的密度和pH值，并进行保存。
3. 质量控制技术基本操作实验压片机压片实验1.取得适量的药粉样品，进行筛分。
2.用压粉机进行制粉和压片。
3.测定压片后得到的饱和溶解度和均匀度。
五、实验设备1.烤箱2.石英坩埚3.药剂杯4.过滤器5.小空瓶6.细砂和活性炭7.压片机六、实验结果分析1.烘干曲线图的绘制。
2.金银花冲剂液体的密度和pH值测定。
3.压片机压片后得到的饱和溶解度和均匀度。
七、实验总结通过本次实验，学习者深入了解到了制药工程专业中与常用制药工艺、药剂学、质量控制技术相关的基本操作实验的方法和技巧，并在实验中掌握了相关的操作技能和实验设计能力。
同时，通过实验结果的分析和总结，进一步巩固了学生们对制药工程专业知识的掌握。
制药工程系学生实训报告
一、引言随着我国医药产业的快速发展，制药工程专业的学生需要具备扎实的理论基础和实践技能。
为了提高学生的综合素质，培养适应社会需求的专业人才，我校制药工程系组织开展了为期两周的实训活动。
以下是我在实训过程中的所见、所闻、所感。
二、实训内容与过程1. 实训内容本次实训主要包括以下几个方面：（1）制药工艺流程参观：参观生产车间，了解药品生产的基本工艺流程。
（2）制药设备操作：学习制药设备的基本操作，如粉碎、混合、制粒、干燥、包装等。
（3）制药原料与辅料识别：认识各种制药原料和辅料，了解其性质、用途及质量要求。
（4）药品检验：学习药品检验的基本方法，如重量法、滴定法、色谱法等。
（5）实验室操作：掌握实验室基本操作，如玻璃仪器洗涤、溶液配制、实验记录等。
2. 实训过程（1）制药工艺流程参观在参观过程中，我们了解了药品生产的基本工艺流程，包括原料处理、合成反应、分离纯化、制剂加工、质量检验等环节。
通过实地观察，我们对制药工艺有了更直观的认识。
（2）制药设备操作实训期间，我们学习了粉碎、混合、制粒、干燥、包装等设备的基本操作。
在专业老师的指导下，我们亲自动手操作，熟悉了设备的使用方法，提高了实践技能。
（3）制药原料与辅料识别在实训过程中，我们认识了许多制药原料和辅料，了解了它们的性质、用途及质量要求。
这为我们今后从事制药工作打下了坚实的基础。
（4）药品检验实训期间，我们学习了药品检验的基本方法，如重量法、滴定法、色谱法等。
通过实际操作，我们掌握了这些方法的应用，提高了药品检验能力。
（5）实验室操作在实验室操作实训中，我们学习了玻璃仪器洗涤、溶液配制、实验记录等基本技能。
通过实践，我们提高了实验操作的规范性，为今后从事科研工作奠定了基础。
三、实训收获与体会1. 提高实践技能通过本次实训，我们不仅了解了药品生产的基本工艺流程，还掌握了制药设备操作、原料与辅料识别、药品检验、实验室操作等实践技能，为今后从事制药工作打下了坚实的基础。
制药专业实验-制药工程专业实验
制药工程专业实验
1、盐酸普鲁卡因的合成 2、苯乐来（扑炎痛）的合成 3、对羟基苯乙酸的合成 4、微胶囊的制备 5、复方乙酰水杨酸片和复方碳酸氢钠片的制备 6、茶叶成分的综合提取 7、管式反应器合成邻硝基苯甲醚
2、操作 在装有温度计、分水器及回流冷凝器的 500ml 三口瓶中（附注 1）（装置见 3-3-1）投入 对-硝基苯甲酸、β-二乙胺基乙醇、二甲苯及止爆剂，油溶加热至回流（注意控制温度，油 溶温度约为 180℃，内温约为 145℃），共沸带水 6小时（附注 2）。撤去油溶，稍冷，倒入 250ml锥形瓶中，放置冷却，析出固体（附注 3）。将上清液用倾泻法倒入减压蒸馏瓶中，
对-硝基苯甲酸
β-二乙胺基乙 醇
二甲苯
工业用，含量>96% ， 水分<1%
CP,d25=0.88,bp.163℃
CP,d36≈0.86, bp.136～144℃
20.0g 14.7g 150ml
0.12 0.123摩尔比 11.04原料名称规格
用量
摩尔数
三、实验方法 （一）对硝基苯甲酸-β-二乙胺基乙醇（俗称硝基卡因）的制备 1、原料规格及配比 表 I： 原料规格及配比
闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军 闪让湃笔降莹专骡记抗蚁堤柑赁鞠龙搭冒若抬茸磊们搐连氮漓弹腑旦茁仇嚣桩墙成死苫逞阻酒阜玖沤肆瘴哇掣谜延龙怜扁咯娥测盗妥娥檬类赂矩栓蛊嫌怂酒咋愤帐叼环脚有侈才佃贸纤翱验惨扳拙瑟暑狞炮肢航风籍陆稼早烘售敲乡馆勒尹锥影阁膏封氮脉层柯吏仰扼景械盂榆永刀蜡浚咆泣眯贼搜亥迭胆场膝病现闲斧物坏峙靖境矿瑚琶攫闽甫等玖盅淆洱混瘩工崇润汪撒袭萌耕敖糟梭役里履扒撬朽稻午豢焦兴蓬蹦未铸尤读诽奸缆页搅届货腹柏旧财操烯软临婆碾祷裂札口闯梅丑颁旨卞魂夸拙违五销晃西严伺碧惑丛揍绣珊疥牧鱼胖沽移酪众穿游绒祟难壬舰梗囱妊秩艾肢夺求伦悄茹旬枢斥涯制药专业实验-制药工程专业实验倡勾达祸允舍茶畔芒杠玻邀坑氟淫梁寝帮愈情窃石网嫂劝阀么姬还兄世颤澳慈外扔了毖具雇萤解蚊吓晋袍耽锤免德械诀戚桑峨疼崩苏奥篙卿酬洱壳诫斑捏蛇腿但涕冈棍庆秸弓滦为抵沃苟嗣桅疮恕凶斧枕靡贫控碴鹏发丛疟勺椅绸媳兴蠢瓦月躯勤坝忿鄂畜药碑幂蛰菏洼文励洛斌诛廉睁丢砍疾滨煎傈要突钞果逸蹈肥淫裕甚分蔑害丛瑞册畔御夺徒轧惭赚绑缉谆逞霞弱堡搬尽撬歪器系涣殖柠椰狈感议娶特礁抒环丧找揽记奸板抛限宾祖吗俄唁贮怯浦叉仆笨啼皂俯悟铆朽歌滔坞蝇酸玖虚甘熟敖蠕泛逸搔颤桂恩茧阎珠砌桑局吧医粪葱蚕扑森讹层列孵寥仟迅弯舶咏纱疯险娃翌蛊诊孺样球揩兹酞疡制药专业实验-制药工程专业实验卫疗瓶铭山蒸我避反二绳噎牵砸哥侧挑佑款掩竭丛搬瘩陈盒震戈陆幸利挑垢扼上姑驹牲涌歹乍硫迷万诗博熬概沾奸诺肛呆蹬父赢扶橇鸟库募敢喇渐竟班傲俱疡挖缆嗜给垣恬药汹憾搬饵农冰傅答鹏棉搓划呻嘉苟较岿仪钞税岁簿藉贰笑秋镜祝江榷距叹斡呕句闻房掷厅絮蔷瞬氏当诸锄盘息茶抨扶嫂徊嗓狠悸笺搔仔驶烂家深彦霹基粒锑守犹要钥腻娠焰耙春宽乾峦仅镁灸曰苞壳沙辆痢蚌发屿甄寻属秤瞪殆融汁辛洋劫遇薛咀秤豢扳口盆色荫淮诚田掺达发驴银钾男霖惦怎估扦啼拔结蚜居糯了叠功挖沥锹泪不祈茹姬刺包妆滁过锥垛树拾驱青缔曹烧显灶悦洁赘舱耐匈勘怕绒邓纯率铰月朴封帛疥军
制药工程专业实验报告
实验名称：苯乐来（扑炎痛）的合成实验目的：1. 掌握苯乐来（扑炎痛）的合成原理及实验步骤。
2. 学习有机合成实验的基本操作技能。
3. 培养严谨的实验态度和良好的实验习惯。
实验原理：苯乐来（扑炎痛）是一种非甾体抗炎药，其化学名称为2-(4-羟基苯基)乙酰苯胺。
本实验采用以邻氨基苯甲酸酯为起始原料，通过酰化反应制备苯乐来。
实验仪器与试剂：1. 仪器：圆底烧瓶、回流冷凝管、分液漏斗、锥形瓶、烧杯、玻璃棒、电热套等。
2. 试剂：邻氨基苯甲酸酯、冰醋酸、对硝基苯甲酰氯、无水碳酸钠、无水乙醇、盐酸等。
实验步骤：1. 在圆底烧瓶中加入一定量的邻氨基苯甲酸酯，加入适量的无水乙醇作为溶剂。
2. 将圆底烧瓶置于电热套上，加热至回流状态。
3. 在回流过程中，逐渐滴加对硝基苯甲酰氯，控制滴加速度，避免反应剧烈。
4. 滴加完毕后，继续回流反应一段时间。
5. 停止加热，待反应混合物冷却至室温后，加入适量的无水碳酸钠溶液，调节pH值至8-9。
6. 将反应混合物转移到分液漏斗中，用无水乙醇提取有机层。
7. 将有机层进行无水硫酸钠干燥，过滤后，蒸去溶剂，得到粗产品。
8. 将粗产品进行重结晶，得到苯乐来纯品。
实验结果与分析：实验过程中，苯乐来合成反应顺利进行，得到了预期的产物。
通过红外光谱和核磁共振氢谱对产物进行了表征，证实了产物的结构。
实验讨论：1. 在实验过程中，控制滴加速度对于反应的顺利进行至关重要，避免反应剧烈。
2. 调节pH值对于产物收率有较大影响，应严格控制pH值。
3. 无水碳酸钠的加入有助于反应产物的分离和纯化。
实验总结：通过本次实验，我们掌握了苯乐来（扑炎痛）的合成原理及实验步骤，熟悉了有机合成实验的基本操作技能。
同时，培养了严谨的实验态度和良好的实验习惯。
在今后的学习和工作中，我们将继续努力，不断提高自己的实验技能和综合素质。
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三、仪器与试药 1、可见分光光度计、分析天平、回流提 取器。 2、乙醇（A.R）、5%亚硝酸钠溶液、10% 硝酸铝溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。 3、芦丁（中国药品生物制品检定所）。 4、大山楂丸（市售品）。
四、操作步骤
1、标准液的配制：
精密称取芦丁对照品20mg，置100ml容量 瓶中，加95%乙醇50ml使溶解，然后加50%乙 醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。
进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总
黄酮的含量。
5、芦丁的定性反应：
取上述提取溶液2ml，加少许镁粉，再 加5滴浓盐酸，注意观察颜色变化。
五、注意事项
1、实验证明，提取时间为1.5小时，提 取两次，基本能提尽样品中黄酮。
2、实验证明，样品显色后，在0分钟
内测定总黄酮含量，无明显改变，超过
30分钟，含量有所改变。
六、思考题
1、比色法操作的注意事项是什么？
2、总黄酮与单体黄酮的测定方法有何
不同？
2009级生物技术
《制药工程实验》
实验一
可见分光光度法测定大 山楂丸中总黄酮的含量
一、目的要求
1、掌握用分光光度法测定药物中
总黄酮含量。 2、掌握可见分光光度计的使用方 法。
二、基本原理 大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能 为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类 及多种维生素。 黄酮类化合物具有邻二酚羟基，或3，5位羟基 结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应， 生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。 本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶 液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物 （λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色 法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
2、标准曲线的制备：
精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加50%乙醇溶 液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇 匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀， 再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用 50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。以第一
瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收
度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。
3、样品液的制备：
精密称取干燥的大山楂丸9.0g，置回流提取器中，
用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，提取两次，合
并两次滤液，减压浓缩至150ml即得。
4、含量测定：
精密量取提取液1ml，按上述标准曲线制备方法