~(99)Tc~m直接法标记Octreotide

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^(99)Tc^m-谷胱甘肽一步法药盒的制备和实验研究

^(99)Tc^m-谷胱甘肽一步法药盒的制备和实验研究陈跃;莫廷树;匡安仁;范成中【期刊名称】《中华核医学杂志》【年(卷),期】1999(19)1【摘要】目的对新型亲炎症或感染显像剂９９Ｔｃｍ谷胱甘肽（ＧＳＨ）的制备、质控及药代动力学进行研究。

方法用氯化亚锡作还原剂，制备冷冻干燥９９ＴｃｍＧＳＨ一步法药盒，用纸层析法鉴定９９ＴｃｍＧＳＨ标记率及标记稳定性。

测定标记物９９ＴｃｍＧＳＨ的理化性质、生物学特性。

结果室温下该药盒与９９ＴｃｍＯ－４混合３０ｍｉｎ后，９９ＴｃｍＧＳＨ标记率大于９９％，标记方法简便；标记后２４ｈ测定其标记率仍大于９８％，标记产物稳定性好；药盒放置６个月后，标记率大于９９％。

９９ＴｃｍＧＳＨ血中清除快，主要经肾清除，其余器官浓聚少。

松节油和金黄色葡萄球菌实验炎症模型显像，示踪剂定位明显，Ｔ／ＮＴ值高（３ｈ为４６５）。

药盒的各项技术指标符合药典体内诊断试剂的规定。

【总页数】3页(P31-33)【关键词】谷胱甘肽;锝99m-GSH;药盒;制备【作者】陈跃;莫廷树;匡安仁;范成中【作者单位】华西医科大学第一附属医院核医学科;泸州医学院附属医院核医学科【正文语种】中文【中图分类】R981.9;R817.9【相关文献】1.99mTc—谷胱甘肽药盒的制备和实验研究 [J], 陈跃;莫延树2.炎症显像剂99mTc—HIG一步法药盒的制备和实验研究 [J], 陈方;张裕民3.亲肿瘤显像剂<sup>99m</sup>Tc（V）DMSA一步法药盒的制备及动物实验[J], 李云龙;李洪玉;景慧;郭红源;刘英妹;赵晖;4.炎症显像剂^（99m）Tc－HIG一步法药盒的制备和实验研究 [J], 陈方;张裕民;周前;孙平侠;周辉;李军5.^(99)Tc^m-抗CD20单克隆抗体的制备和动物实验研究 [J], 袁志斌;Noboru Oriuchi;Nasim Khan;Tetsuya Higuchi;Keigo Endo因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

醋酸奥曲肽

发病机制：“共同通道”学说 ①.壶腹部出口不畅引起胆道内压升高，胆汁逆流 ②.Oddi括约肌松弛引起十二指肠液返流，激活胰酶→AP ③.胆道炎症
2，酗酒与暴饮暴食：
①刺激胰液及胰酶分泌增多 ②十二指肠乳头水肿及Oddi括约肌痉挛 ③蛋白栓子阻塞胰管 3，胰管阻塞：结石、蛔虫、狭窄、肿瘤 4 ，手术与创伤、ERCP术后
二，鉴别诊断：
1. 急性胃肠炎 2. 消化性溃疡急性穿孔 3. 胆石症和急性胆囊炎 4. 急性肠梗阻 5. 心肌梗死 6. 肠系膜缺血性疾病：动脉急性栓塞，粥样硬化，静脉血栓形成
【治疗】大多数水肿型为自限性；出血坏死型应积极抢救治疗。一，内科治疗㈠，临床动态监护㈡，维持水电解质平衡，维持有效血容量，早期给予营养支持治疗，若需长期禁食患者，可早期放置空肠营养管，给予肠内营养。㈢，解痉镇痛：疼痛剧烈者可用哌替啶

不完全统计,94年以来有关奥曲肽的中文文章有2406篇: 其中有关治疗消化道出血136篇(门脉高压性出血65篇,溃疡病54篇) 有关治疗胰腺炎文章265篇其他文章:对肝细胞癌的抑制作用、胰高糖素瘤的治疗、化疗相关性腹泻的治疗

一.奥曲肽在消化道出血的应用: 1.门脉高压性出血: 患者有肝炎、肝硬化病史,出现消化道出血应首先考虑到门脉高压性食管、胃底静脉破裂出血. 其他原因所致门脉高压:
5，内分泌与代谢障碍：高钙血症高脂血症
6，感染：少见 7，药物：糖皮质激素、硫唑嘌呤、磺胺，四环素等 8，血管疾病： 9，其他：遗传性、特发性
【病理】 1，水肿型（间质型）：胰腺肿大、间质水肿、充血 2，出血坏死型胰腺腺泡、脂肪组织、血管坏死出血，细胞结构消失，坏死灶周围炎细胞浸润，病程中可见脓肿、假性囊肿或瘘管形成

99mTc-葡庚糖酸盐的直接标记方法

实验七 99m Tc-葡庚糖酸盐的直接标记方法学生：学号：同组：一、实验目的1. 掌握配体直接标记法的原理和技术。

2. 熟悉锝的价态和行为。

二、实验原理 1. 锝的价态锝属于第七副族，是第二过渡系元素，原子序数为43。

中性气态锝原子在基态的电子组态是[Kr]4d 55s 2，锝的七个价电子都可以成键，形成-1～+7价的化合物。

稳定价态为+4和+7价，但其他价态可通过加入配体形成配合物得到。

在实际操作中，用生理盐水淋洗99Mo-99m Tc 发生器可以得到高锝酸根（99m TcO 4－），它是锝在水溶液中存在的最普遍、最稳定的形式。

在无还原剂存在下，99m TcO 4－在水溶液中能够稳定存在。

当有还原剂如Sn 2+存在时，99m TcO 4－会发生还原反应，形成各种低价态的锝化合物或配合物，这是制备各种锝放射性药物的基础。

对于锝放射性药物的制备方法，按照反应前后锝价态的变化，原则上可以分成三类：还原方法、还原交换方法和配体交换方法。

在探索锝放射性药物的过程中，大多以99m TcO 4－为起始原料，在配体存在下还原Tc （Ⅶ）制备各种低价态的锝配合物。

目前，制备锝药物的还原剂报道很多，如Sn 2+、Cu +、Fe 2+等金属离子还原剂、钠汞齐等金属还原剂、HX （X=Cl ，Br ，I ）、二氧化硫（SO 2）、硼氢化钠（NaBH 4）、硼氢化钾（KBH 4）、肼（NH 2NH 2）、羟胺（NH 2OH ）、连二硫酸钠（Na 2S 2O 4）、次亚磷酸（H 3PO 2）、巯基化合物（RSH ）、抗坏血酸、甲脒亚磺酸（HN=C （SO 2H ）NH 2、）、有机膦和胂等。

当99mTcO 4－还原时，最终的还原产物依赖于还原剂的性质、配体的种类和合成中的条件等。

在各种还原剂中，用的最多的是亚锡离子。

本次实验采用的锝直接标记法属于还原方法，即葡庚糖酸钠（Na-GH ）在SnCl 2存在条件下，将99m TcO 4－淋洗液加入，形成99m Tc-GH 放射性药物，反应为：299994mSnmTcO GH Tc GH +-+−−−→-2. 影响标记率的因素在实际标记反应中，影响标记率的因素主要有配体用量、反应温度、反应时间、还原剂用量以及反应体系PH 值影响等。

99Tcm标记抗人膀胱癌单抗放射免疫显像

99Tcm标记抗人膀胱癌单抗放射免疫显像潘雪娜;叶炯贤;贾少微;高凤彤【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2007(27)5【摘要】目的探讨99Tcm-BDI-1在荷人膀胱癌裸鼠体内的分布及对肿瘤的导向定位性能.方法用亲和层析法得到单克隆抗体BDI-1,用99Tcm标记BDI-1,并以99Tcm-免疫球蛋白作为对照,进行荷人膀胱癌裸鼠的放射免疫显像.用感兴趣区技术获得全身和肿瘤放射性计数及T/NT.显像24 h后处死裸鼠测定体内放射性分布及每克组织,百分注射剂量率(%ID/g)、肿瘤与正常组织的放射性比值(T/NT).结果99Tcm-BDI-1的标记率为(67.3±7.1)%和99Tcm-球蛋白的标记率为(66.4±6.9)%,放化纯度均＞90%.荷人膀胱癌裸鼠放射免疫显像结果显示,静脉注射99Tcm-BDI-1后肿瘤显影清楚,而99Tcm-球蛋白注射后肿瘤无明显显影.全身和肿瘤的放射性计数均随时间的延长而减低,注射99Tcm-BDI-1的裸鼠的T/NT随时间增高,而注射99Tcm-球蛋白的裸鼠的T/NT随时间降低.99Tcm-BDI-1注射24 h后肿瘤%ID/g为22.7,除肾脏以外,肿瘤与全身其他正常组织有较高的比值(T/NT＞5),而99Tcm-球蛋白注射24 h后肿瘤%ID/g为0.33,除肾脏以外,肿瘤与全身其他各正常组织的比值均较小(T/NT＜5.12).结论 99Tcm-BDI-1显示了良好的免疫活性和良好的肿瘤导向定位的特性,有望成有膀胱癌早期诊断的有效方法.【总页数】2页(P437-438)【作者】潘雪娜;叶炯贤;贾少微;高凤彤【作者单位】吉林大学中日联谊医院核医学科;北京大学深圳医院,广东,深圳,518036;北京大学深圳医院,广东,深圳,518036;吉林大学中日联谊医院核医学科【正文语种】中文【中图分类】R737.14【相关文献】1.131Ⅰ标记抗TPS单抗在荷人乳腺癌裸鼠体内的放射免疫显像及生物学分布 [J], 常伟勤;姜瑛;刘金田;周及彤2.131I标记抗CEA单抗在荷人乳腺癌裸鼠体内的放射免疫显像及生物学分布 [J], 姜瑛;常伟勤;刘洋3.^(131)I标记抗CEA、TPS及混合单抗在荷人乳腺癌裸鼠体内放射免疫显像及生物学分布 [J], 常伟勤;刘元元;许天敏4.^(99m)Tc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫显像 [J], 仇凯;王博诚;陈志南;方平;刘成钢;万卫星;刘彦仿5.^(131)I标记抗人成骨肉瘤单抗荷瘤裸鼠体内分布和放射免疫显像研究 [J], 李劲松;吴靖川;王红;傅宏亮;吴真;杜学亮;张文竹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

^(99)Tc^m-抗血栓成分单克隆抗体对动物血栓的放免显像研究

^(99)Tc^m-抗血栓成分单克隆抗体对动物血栓的放免显像研究季顺东;刘晓健;张荣军;万卫星;金坚;阮长耿【期刊名称】《苏州医学院学报》【年(卷),期】2000(20)1【摘要】目的评价９９Ｔｃｍ标记抗血栓成分（血小板和纤维蛋白）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＳＺ－５１和ＳＺ－６３，对实验性动物（兔、狗）股动脉和股静脉血栓模型显像的作用。

方法以亚氨基噻吩盐酸盐（２－ＩＴ）修饰，９９Ｔｃｍ标记葡庚糖酸钠（ＧＨ）配体交换法标记ＳＺ－５１和ＳＺ－６３。

狗、兔股动脉和股静脉血栓模型制备完毕后，耳缘静脉注入９９Ｔｃｍ－ＳＺ－５１或９９Ｔｃｍ－ＳＺ－６３进行ＳＰＥＣＴ显像。

９９Ｔｃｍ标记非特异性鼠ＩｇＧ作为阴性对照。

结果９９Ｔｃｍ－ＳＺ－５１和９９Ｔｃｍ－ＳＺ－５１／６３对狗新鲜血栓均显示清晰，其最佳显像时间分别为注射后２～４ｈ和０．５～２ｈ，而陈旧血栓未见显像。

９９Ｔｃｍ－ＳＺ－６３兔陈旧血栓显示清晰，其最佳显像时间为注射后２～４ｈ。

结论９９Ｔｃｍ－ＳＺ－５１和９９Ｔｃｍ－ＳＺ－６３具有活体内血栓定位导向能力，显像时间短，用于血栓性疾病的放免显像有一定的可行性。

【总页数】4页(P4-7)【关键词】单克隆抗体;放射免疫显像;血栓形成;^99Tc^m【作者】季顺东;刘晓健;张荣军;万卫星;金坚;阮长耿【作者单位】苏州医学院附属第一医院;无锡核医学国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R543;R817.4【相关文献】1.99Tcm-抗血栓成分单克隆抗体对动物血栓的放免显像研究 [J], 季顺东;刘晓健;张荣军;万卫星;金坚;阮长耿2.犬颈内动脉血栓^(99m)Tc-SZ-51放免显像研究 [J], 李文;包仕尧;何广仁;邵国富;吴锦昌;张志琳3.^（99m）Tc抗人活化血小板单克隆抗体SZ－51对狗动、静脉血栓的放免显像研究 [J], 吴锦昌;何广仁;阮长耿4.血栓动物模型的^(99)Tc^m-重组水蛭素显像研究 [J], 万卫星;张荣军;谭成;蔡刚明;范益军;季顺东;韩玉珉;金坚5.^(99)Tc^m-抗人活化血小板单抗SZ-51对犬冠状动脉血栓的放免显像研究 [J], 吴锦昌;沈利明;陆之安;阮长耿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

放射性^(99m)Tc标记的NMDA受体配基N_2S_2-Memantine的合成

放射性^(99m)Tc标记的NMDA受体配基N_2S_2-Memantine的合成张建康;周杏琴;钦晓峰;邹美芬;徐希杰【期刊名称】《化学试剂》【年(卷),期】2008(30)11【摘要】以美金刚胺为原料,先与氯乙酰氯反应,再与二硫二氮缩合,最后与醋酸汞硫化氢反应脱巯基保护基得到标记前体N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基甲酰甲基]-N-(2-巯基乙基)-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺。

关键化合物N-[2-((2-(S-(4-甲氧基苄基)巯基)乙基)氨基)乙酰基]-S-(4-甲氧基苄基)-2-氨基乙硫醇和N-[2-(S-(4-甲氧基苄基)硫基)乙基]-N-[(N-(2-(S-(4-甲氧基苄基)硫基)乙基)氨基)甲酰甲基]-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺得到核磁和质谱表征,总收率为32%。

【总页数】3页(P842-844)【关键词】NMDA受体;放射性配基;美金刚胺;双氨基乙硫醇类;^99m锝标记;合成【作者】张建康;周杏琴;钦晓峰;邹美芬;徐希杰【作者单位】江苏省原子医学研究所【正文语种】中文【中图分类】O625.72;R981【相关文献】1.~(123)I和~(99)Tc~m标记的吲哚类σ_2受体放射性示踪剂的设计、稳定化合物的合成及体外生物评价 [J], 李艳;贾红梅;Deuther-Conrad Winnie;Brust Peter;Steinbach Joerg;刘伯里2.多巴胺D_2受体配体的合成及^(99m)Tc标记(Ⅰ)——悬挂式设计 [J], 贾芳;刘正浩;唐志刚;张小波;刘伯里3.^(99m)Tc直接标记抗体用于放免显像时放射性本底的促排 [J], 李宏利;吴永慧;刘元方4.心血池显像剂^(99m)Tc-DMP-HSA的研制(Ⅰ)——DMP-HSA的合成及^(99m)Tc标记 [J], 刘华;王学斌;吴战宏;刘国鹏5.新型^(99m)Tc标记肾显像剂的研究——Ⅰ.^(99m)Tc—MAG_3的合成和初步生物评价 [J], 罗顺忠;刘中林;赵鹏骥;付依备因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

国产^(99)Tc^(m)-DTPA注射液的生物分布研究

国产^(99)Tc^(m)-DTPA注射液的生物分布研究张春丽;贾娟娟;施亚琴;王玉琦;孙宏伟;闫平;王荣福【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2022(29)10【摘要】目的建立锝[^(99m)Tc]喷替酸盐(^(99)Tc^(m)-DTPA)注射液的生物分布测定方法,测定国产^(99)Tc^(m)-DTPA注射液的生物分布,为《中国药典》“放射性药物质量标准”中^(99)Tc^(m)-DTPA注射液的生物分布测定项的制定提供方法学依据及参考值。

方法测定测量仪器(CRC-55tR活度计与HRS-2000锝分析仪)的可检测范围。

选择国内常用的3个厂家的DTPA药盒,采用^(99)Tc^(m)进行标记,得到^(99)Tc^(m)-DTPA注射液。

将^(99)Tc^(m)-DTPA注射液经尾静脉注射于小鼠体内,测定注射后不同时间^(99)Tc^(m)-DTPA在小鼠血液、肾脏、肝脏、膀胱中的摄取值(%ID)。

将不同剂量的^(99)Tc^(m)-DTPA注射液经尾静脉注射于小鼠体内,分别于注射后10~15min及24h测定小鼠体内的放射性活度,计算24h小鼠体内的残留率。

评估测定结果及实验方法的可靠性。

结果小鼠静脉注射740kBq(20μCi)的^(99)Tc^(m)-DTPA,肾脏、肝脏、血液、膀胱在注射后2min、15min、30min的放射性计数均在测量仪器的检出限以上,而24h血液和膀胱中的放射性计数低于测量仪器的检出限;静脉注射6.606~7.646 MBq(179~207μCi)后24h小鼠体内的放射性活度在测量仪器的检出限以上。

静脉注射^(99)Tc^(m)-DTPA后2min肾脏的摄取率各药盒差异很大,15min与30min的差异减小,15min与30min肾脏的摄取率分别在2.10%ID~4.41%ID与1.65%ID~2.11%ID;24h小鼠体内残留率在1.635%~4.141%,符合美国药典(USP41)的标准。

^(99m)Tc直接法标记抗体的3个常用还原剂的评价

^(99m)Tc直接法标记抗体的3个常用还原剂的评价
张汝森;刘长征
【期刊名称】《核技术》
【年(卷),期】2000(23)5
【摘要】比较了^（９９ｍ）Ｔｃ直接法标记抗体的３个常用还原剂：氯化亚锡（ＳｎＣｌ_２），２－巯基乙醇（２－ＭＥ）和抗坏血酸（ＡＡ）的^（９９ｍ）Ｔｃ标记率、标记抗体的稳定性及免疫活性。

结果显示。

２－ＭＥ是一个良好的
还原剂，当抗体／２－ＭＥ摩尔比为１∶２０００时，抗体的标记率可达到９５％以上，胶体形成量少于５％，^（９９ｍ）Ｔｃ－ＢＡＣ_５肿瘤放射免疫显像，
鼻咽癌移植瘤影像清晰。

【总页数】4页(P312-315)
【关键词】同位素标记抗体;放射免疫显像;鼻咽癌;锝-99
【作者】张汝森;刘长征
【作者单位】广州市红十字会医院;中山医科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R817.1;R739.6
【相关文献】
1.99mTc直接法标记抗体的3个常用还原剂的评价 [J], 张汝森;刘长征
2.^(99m)Tc标记葡萄糖^(99m)Tc-EC-DG肿瘤显像的可行性评价 [J], 唐军;刘增礼;杨仪
3.^(99m)Tc直接法标记单抗3H11及其初步临床应用 [J], 杨志;林保和;张梅颖;韩燕;张青;牟阿平;许小宝;董志伟
4.^(99)Tc^(m)直接法标记单克隆抗体的研究Ⅱ.抗坏血酸在直接法标记过程中的作用 [J], 桑立新;吴永慧;刘斌;刘元方;张梅颖;林保和;杨志;方永鑫
5.新型^(99m)Tc标记肾显像剂的研究——Ⅰ.^(99m)Tc—MAG_3的合成和初步生物评价 [J], 罗顺忠;刘中林;赵鹏骥;付依备
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第13卷第3期2000年8月同　位　素Jou rnal of Iso topesV o l.13　N o.3A ug.2000 99Tc m直接法标记Octreotide武鸿文,管昌田,梁正路(华西医科大学第一附属医院核医学科,四川成都　610041)摘要:建立了99T c m直接标记O ctreo tide的方法,并选出了最佳标记条件。

在最佳标记条件下,标记率为7816%,纯化后放化纯度为9318%。

纯化后的标记物室温下放置4h,或分别与过量D T PA、H SA 和L2半胱氨酸37℃孵育4h,其放化纯度为9211%～9316%,无显著改变。

99T c m直接标记O ctreo tide方法可行,标记肽稳定性好,可望用于生长抑素受体显像。

关键词:99T c m;标记;O ctreo tide中图分类号:R817;O61417+12 文献标识码:A 文章编号:100027512(2000)0320152205肿瘤生长抑素受体显像是目前国内外肿瘤核医学研究领域的热点之一[1,2],但大多采用111In2D T PA2octreo tide作为显像剂。

由于111In系加速器生产,价格昂贵,不易获得;D T PA2 octreo tide制备复杂,成本较高,故难以推广应用。

99T c m显像性能优良,且价廉易得,因而99T c m 标记O ctreo tide及其类似物已经成为该领域的研究重点。

目前,国外99T c m标记生长抑素类似物方法大致有三种。

第一种是直接法,方便迅速,不需要对有关基团加保护和去保护,产率较高,标记肽有O ctreo tide,RC2160,但直接法只能对具有环状二硫键的肽进行标记。

第二种是间接法,标记前须在肽的末端氨基酸连接一个双功能螯合剂,如N3S、H YN I C、CPTA,适合于对含和不含环状二硫键的肽进行标记,然而此法有以下缺点:所用的双功能螯合剂无市售产品,必须自行合成,且用量较大;制备过程长而复杂,需要经过H PL C纯化、冻干和质谱分析以确保产品质量和纯度;标记产率低。

第三种是环状肽标记法,简单可靠,但必须人工预先设计合成环状肽(如P587和P829),这样99T c m只是结合到人工合成附加在肽键非活性中心基团的氨基酸序列上,以维持药效基团构型,不至影响与受体的亲和力。

在综合比较三种方法可行性的基础上,本工作选用直接法进行99T c m标记O ctreo tide。

1　主要试剂及仪器O ctreo tide:系市售药用注射剂,Sandoz公司(瑞典)提供;抗坏血酸钠:化学纯,Sigm a公司(美国)提供。

其余化学试剂均为国产分析纯或化学纯。

实验所需用水均为重蒸水。

收稿日期:2000201230;修回日期:2000207203基金项目:国家自然科学基金资助项目(39470219)作者简介:武鸿文(1967～),男(汉族),四川人,主治医师,临床核医学专业,现在四川省肿瘤医院核医学科工作 99M o 299T c m 发生器由中国核动力研究设计院第一研究所生产;OA S IS TM HLB 小柱:W aters 公司(美国)提供;AA 2250型11000电子天平:D enver 仪器公司(美国)提供;FJ 22008自动免疫计数器:西安国营二六二厂提供,探测效率70%。

2　实验方法211　基本标记法在文献[3]报道的标记方法基础上做了具体改进,即甘氨酸、肌醇、水合四硼酸钠各2m g 预先装入小瓶中,然后加入新鲜配制的1m o l L 抗坏血酸钠溶液10ΛL 、50g L 的连二亚硫酸钠溶液20ΛL (溶于0101m o l L pH 615醋酸钠溶液)、含10Λg O ctreo tide 的溶液100ΛL 和所需放射性活度的新鲜淋洗液99T c m O -4100ΛL ,反应体系pH 418,用019%N aC l 调总体积至500ΛL ,反应混和物沸水浴15m in 完成标记。

212　最佳标记条件选择为筛选影响标记率的反应因素,以上述标记方法为基础改变一系列反应条件,观察标记率变化。

①反应体积:向反应体系加入不同体积的缓冲液,使反应总体积分别为0125、015、110、210、310mL ;②O ctreo tide 加入量分别为5、10、15、20、40Λg ;③1m o l L 抗坏血酸钠溶液加入量分别为5、10、20、40、60ΛL 以及50g L 连二亚硫酸钠溶液加入量分别为10、20、30、40、60ΛL ;④醋酸钠缓冲液pH 分别为318、418、518、618、718;⑤甘氨酸、肌醇、水合四硼酸钠三种化合物加入与否以及只加其中一种化合物;⑥反应温度分别为20、40、60、80℃以及沸水浴反应15m in 。

以上实验均重复3次。

213　产品纯化采用OA S IS TM HLB 小柱去除未结合99T c m 。

按下列步骤进行:先用1mL 无水甲醇预洗小柱,然后用1mL 重蒸水平衡小柱,随后加入标记肽,并用1mL 5%甲醇淋洗去除99T c m O -4,最后用1mL 无水甲醇洗脱标记肽,收集洗脱液,热水浴蒸干甲醇,加适量生理盐水备用。

214　99Tc m -octreotide 鉴定21411　99T c m 2octreo tide 标记率　分别选用以下两个系统对标记物进行硅胶G 薄层层析。

系统用饱和盐水作展开剂,系统用V (吡啶)∶V (36%醋酸)∶V (水)=5∶3∶15的混合液作展开剂。

21412　稳定性实验　①将纯化后的标记肽室温下放置4h ,观察其放化纯度变化。

②将纯化的标记肽分别与过量D T PA 、H SA 、L 2半胱氨酸(摩尔比为1∶100)37℃温育4h ,观察标记肽放化纯度的变化,进一步考察99T c m 与O ctreo tide 结合的稳定性,从而推测99T c m 2octreo tide 的体内稳定性。

3　结　果311　99Tc m 直接法标记Octreotide31111　最佳标记方法　按基本标记法重复实验5次,标记率为6713%。

为优化标记条件,改变各种反应因素,观察其对标记率的变化,结果列于表1。

从表1中数据可见,为保证获得较高的标记率,反应总体积不能超过015mL ,否则还原剂浓度降低,标记率明显下降;同时,当加入10Λg O ctreo tide 、20ΛL 1m o l L 抗坏血酸钠溶液、20ΛL 50g L 连二亚硫酸钠溶液、反应体系pH 为418时,标记率达到最高(7713%～7911%);反应体系中加入甘氨酸、肌醇、水合四硼351　第3期武鸿文等:99T c m 直接法标记O ctreo tide451同　位　素第13卷　酸钠三种化合物时,标记率高达7811%,而只加其中一种化合物时标记率仅约60%;另外,温度对标记率也有明显影响,反应在室温下进行,标记率为3117%,而沸水浴反应15m in,标记率即可达7813%。

按照上述优选的最佳反应条件标记,实验重复5次,标记率为7816%。

表1　反应因素对99Tc m-octreotide标记率的影响(xθ±s,n=3)总体积 mL标记率 %O ctreo tide用量 Λg标记率 %抗坏血酸钠1)用量 ΛL标记率 % 0127211±01457013±01456519±0130157817±012107911±011107318±0151104013±011157518±012207719±0122.01217±016206012±014407011±013310416±013405817±013606916±018连二亚硫酸钠2)用量ΛL标记率 %醋酸缓冲液pH标记率 %反应温度 ℃标记率 % 107214±0153187116±014203117±012207819±0134187713±018404516±015307412±0185187519±0122605319±016406513±0156186912±016806813±019606411±0187186014±0131007813±110化合物标记率 %甘氨酸5713±014肌醇5811±017水合四硼酸钠6018±013上述三者均加7811±010上述三者均不加5619±0114 注:1)浓度为1mo l L;2)浓度为50g L31112　标记肽纯化　标记肽经OA S IS TM HLB小柱纯化后放化纯度可达9318%,能初步满足临床应用要求。

纯化后的标记肽蒸干甲醇,溶于生理盐水,溶液呈无色、无味、澄清,pH6.5～7.5。

312　99Tc m-octreotide鉴定31211　99T c m2octreo tide标记率　采用硅胶G薄层层析,以放射性计数为纵座标、R f为横座标作图,结果示于图1。

由图1可见,系统I(图1中实线)出现两个峰,第一个峰高而尖锐,是99T c m2octreo tide和99T c m混和物,第二个峰低平,为99T c m O-4;系统 (图1中虚线)同样也出现两个峰,但是第一个峰低平,是还原99T c m,第二个峰尖锐,是99T c m2octreo tide和99T c m O-4混合物。

两个系统两个峰均明显分离无重叠,因此采用这两个系统能完全将99T c m2octreo tide、还原99 T c m、游离99T c m三种化合物区分开来,可较准确获得99T c m2octreo tide的标记率。

31212　稳定性实验　实验重复5次,纯化后标记肽室温下放置4h,放化纯度9211%,与放置前9318%无显著性差异。

纯化后的标记肽分别与过量D T PA、H SA、L2半胱氨酸(摩尔比为1∶100)37℃温育4h,标记肽放化纯度分别为9218%、9311%、9316%,与温育前9314%、图1　99Tc m -octreotide 标记物薄层层析1——系统 ;2——系统9317%、9412%相比无显著差异,可见螯合在octreo tide 上的99T c m 相当稳定,从而推测99T c m 2octreo tide 在体内亦不易解离。

4　讨　论最近国外有关学者采用氯化亚锡作为还原剂,用99T c m 标记O ctreo tide ,虽然标记率很高(>95%),但受体亲和力明显降低,分析原因可能是由于氯化亚锡还原性较强,破坏了O ctreo tide 分子中活性基团赖氨酸上“-Ε氨基”的稳定性,降低了受体配体结合能力[4,5]。