《分子生物学》教案
分子生物学教案

2.5核酸的变性、复性与分子杂交
1.核酸的变性
2.核酸的复性
3.核酸的分子杂交
2.6研究核酸的常用方法
1.核酸的分离与提纯
2.核酸的超速离心
3.核酸的凝胶电泳
本章思考题
见教材48页。
主要
参考资料
1.《分子遗传学》,孙乃恩,南京大学出版社,1990
2.《分子遗传学》,张玉静,科学出版社,2000
6.DNA的精细结构简单介绍2分钟
2.5真核生物的染色体及其组装20-25分钟
方法辅助手段时间分配
1.染色体的化学组成和学生共同回忆黑板书写2分钟
2.染色质的类型简单介绍幻灯片3分钟
3.染色体的组装详细讲授+共同回顾多媒体图片10分钟
4.DNA与蛋白质复合物的结构简单介绍多媒体图片5分钟
2.6RNA的结构与功能15~20分钟
教学进程
(含章节
教学内容、学时分配、
教学方法、辅助手段)
1.教学安排
本章大部分内容,如证明DNA是遗传物质的实验、DNA结构等在《动物生物化学》课程中学过,这里以复习的形式回顾一下;DNA的变性、复性和杂交等内容为初次接触,需要详细讲解;染色体部分也需要详细讲解,为下学期的《遗传学》课程打好基础。
时间:2-3学时
3.网络
备注
教案(课时备课)
第1次课2学时
课目、课题
细胞的遗传物质、DNA的结构
教学目的
和要求
了解证明DNA是遗传物质的实验;掌握DNA的一级结构、二级结构、高级结构和精细结构。
重点
难点
本章重点是掌握DNA的结构,包括一级结构、二级结构和高级结构等。难点是DNA精细结构的理解。
分子生物学实验教学教案

分子生物学实验教学教案第一章:DNA的提取与纯化1.1 实验目的了解DNA提取与纯化的基本原理学习使用不同的试剂和方法进行DNA提取掌握DNA提取与纯化的实验技巧1.2 实验原理DNA的溶解性与不溶解性蛋白质和RNA与DNA的分离方法离子交换层析和凝胶过滤色谱原理1.3 实验材料与试剂动物细胞组织或植物叶片细胞裂解液蛋白酶K氯化钠溶液异丙醇70%乙醇1.4 实验步骤样品处理:将动物细胞组织或植物叶片剪碎,加入细胞裂解液和蛋白酶K,进行充分混合DNA提取:加入氯化钠溶液,剧烈摇晃,使DNA析出DNA纯化:加入异丙醇,静置,收集沉淀的DNADNA洗涤:用70%乙醇洗涤DNA沉淀,去除杂质DNA溶解:加入适量的TE缓冲液,使DNA溶解1.5 实验结果与分析观察DNA的提取与纯化过程测定DNA的浓度和纯度分析实验结果,讨论可能存在的问题和改进方法第二章:PCR扩增目的基因2.1 实验目的学习PCR扩增的基本原理和实验技巧掌握DNA模板的制备和扩增条件了解PCR产物的检测和分析方法2.2 实验原理PCR扩增的原理和方法引物的设计和合成DNA模板的制备和扩增条件PCR产物的检测和分析方法2.3 实验材料与试剂目的基因的DNA模板引物PCR反应混合液(含DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2等)琼脂糖凝胶核酸染料2.4 实验步骤模板制备:将目的基因的DNA模板进行适当稀释引物设计:根据目的基因的序列设计引物PCR扩增:将DNA模板、引物和PCR反应混合液进行反应,进行扩增PCR产物检测:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察扩增产物PCR产物分析:对扩增产物进行进一步的分析,如克隆、测序等2.5 实验结果与分析观察PCR扩增过程和产物分析扩增产物的特异性和数量讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第三章:DNA的序列测定3.1 实验目的学习DNA序列测定的基本原理和方法掌握DNA测序的实验技巧和数据分析了解基因克隆和表达载体的构建方法3.2 实验原理DNA序列测定的原理和方法DNA测序反应的试剂和条件DNA测序结果的数据分析3.3 实验材料与试剂目的基因的DNA模板测序引物测序反应混合液(含DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2等)测序胶核酸染料3.4 实验步骤模板制备:将目的基因的DNA模板进行适当稀释引物设计:根据目的基因的序列设计测序引物测序反应:将DNA模板、测序引物和测序反应混合液进行反应,进行测序测序产物检测:将测序产物进行测序胶电泳,观察测序结果测序结果分析:对测序结果进行数据分析,确定DNA序列3.5 实验结果与分析观察测序过程和结果分析测序结果的正确性和准确性讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第四章:基因克隆与表达载体构建4.1 实验目的学习基因克隆的基本原理和方法掌握表达载体的构建和转化技巧了解重组质粒的筛选和鉴定方法4.2 实验原理基因克隆的原理和方法表达载体的构建和转化方法重组质粒的筛选和鉴定方法4.3 实验材料与试剂目的基因的DNA模板载体DNA限制第六章:重组质粒的转化与筛选6.1 实验目的学习重组质粒的转化方法掌握转化后重组质粒的筛选技巧了解重组质粒在宿主细胞中的表达6.2 实验原理重组质粒的转化原理和方法转化后重组质粒的筛选方法重组质粒在宿主细胞中的表达6.3 实验材料与试剂重组质粒宿主细胞(如大肠杆菌)转化试剂(如钙离子)抗生素(如氨苄青霉素)营养培养基6.4 实验步骤转化:将重组质粒与宿主细胞混合,加入转化试剂,进行转化转化细胞复苏:将转化后的细胞进行复苏,培养至对数生长期筛选转化细胞:将转化细胞接种于含有抗生素的培养基中,筛选重组质粒阳性细胞表达重组蛋白:将筛选出的重组质粒阳性细胞进行表达,收集重组蛋白6.5 实验结果与分析观察转化过程和筛选结果分析重组质粒阳性细胞的表达情况讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第七章:分子克隆的验证7.1 实验目的学习分子克隆的验证方法掌握分子克隆产物的检测技巧了解分子克隆的生物学功能验证7.2 实验原理分子克隆的验证方法分子克隆产物的检测方法分子克隆的生物学功能验证7.3 实验材料与试剂重组质粒分子克隆产物检测试剂(如抗体、酶等)营养培养基7.4 实验步骤分子克隆产物的提取:将重组质粒进行转化,培养宿主细胞,提取分子克隆产物分子克隆产物的检测:使用特定的检测试剂,如抗体、酶等,对分子克隆产物进行检测分子克隆的生物学功能验证:通过实验验证分子克隆产物的生物学功能7.5 实验结果与分析观察分子克隆产物的检测过程和结果分析分子克隆产物的特异性和功能讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第八章:Western Blotting实验8.1 实验目的学习Western Blotting的基本原理和方法掌握蛋白质的电泳和转移技巧了解抗体的使用和显色方法8.2 实验原理Western Blotting的原理和方法蛋白质的电泳和转移方法抗体的使用和显色方法8.3 实验材料与试剂蛋白质样品凝胶成像系统电泳仪转移设备抗体显色试剂8.4 实验步骤蛋白质电泳:将蛋白质样品进行SDS-PAGE电泳分离蛋白质转移:将电泳分离后的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上抗体杂交:将转移后的膜与特异性抗体进行杂交显色:使用显色试剂,如ECL,观察蛋白质的表达8.5 实验结果与分析观察Western Blotting过程和结果分析蛋白质的表达特异性和数量讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第九章:基因敲除与基因编辑9.1 实验目的学习基因敲除与基因编辑的基本原理和方法掌握CRISPR/Cas9系统的使用技巧了解基因敲除与基因编辑的验证方法9.2 实验原理基因敲除与基因编辑的原理和方法CRISPR/Cas9系统的组成和使用方法基因敲除与基因编辑的验证方法9.3 实验材料与试剂目标基因的DNA模板CRISPR/Cas9系统(含gRNA和Cas9蛋白)转化试剂宿主细胞抗生素9.4 实验步骤目标基因的DNA模板制备:提取目标基因的DNA模板gRNA设计与合成:设计针对目标基因的gRNA,并合成CRISPR/Cas9系统引入:将gRNA和Cas9蛋白引入宿主细胞第十章:基因敲除与基因编辑的验证10.1 实验目的学习基因敲除与基因编辑的验证方法掌握基因敲除与基因编辑效果的检测技巧了解基因敲除与基因编辑的生物学功能影响10.2 实验原理基因敲除与基因编辑的验证方法基因敲除与基因编辑效果的检测方法基因敲除与基因编辑的生物学功能影响10.3 实验材料与试剂基因敲除与基因编辑的细胞或生物样本检测试剂(如抗体、酶等)营养培养基10.4 实验步骤基因敲除与基因编辑的细胞或生物样本处理:收集基因敲除与基因编辑的细胞或生物样本基因敲除与基因编辑效果的检测:使用特定的检测试剂,如抗体、酶等,对基因敲除与基因编辑效果进行检测基因敲除与基因编辑的生物学功能影响:通过实验验证基因敲除与基因编辑对生物学功能的影响10.5 实验结果与分析观察基因敲除与基因编辑效果的检测过程和结果分析基因敲除与基因编辑的特异性和功能影响讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第十一章:RNA干扰技术11.1 实验目的学习RNA干扰技术的基本原理和方法掌握RNA干扰片段的设计和合成技巧了解RNA干扰效果的检测方法11.2 实验原理RNA干扰技术的原理和方法RNA干扰片段的设计和合成方法RNA干扰效果的检测方法11.3 实验材料与试剂目标基因的DNA模板RNA干扰片段的设计和合成试剂转染试剂宿主细胞抗生素11.4 实验步骤目标基因的DNA模板制备:提取目标基因的DNA模板RNA干扰片段的设计与合成:设计针对目标基因的RNA干扰片段,并进行合成转染:将RNA干扰片段引入宿主细胞,使用转染试剂进行转染RNA干扰效果检测:通过实验检测RNA干扰对目标基因表达的影响11.5 实验结果与分析观察RNA干扰效果检测过程和结果分析RNA干扰的特异性和效果讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第十二章:蛋白质相互作用研究12.1 实验目的学习蛋白质相互作用研究的基本原理和方法掌握蛋白质相互作用实验技巧了解蛋白质相互作用结果的解析方法12.2 实验原理蛋白质相互作用研究的原理和方法蛋白质相互作用实验技巧蛋白质相互作用结果的解析方法12.3 实验材料与试剂蛋白质样品酵母双杂交系统或其他蛋白质相互作用实验试剂检测试剂(如抗体、酶等)营养培养基12.4 实验步骤蛋白质样品的制备:提取蛋白质样品并进行适当处理蛋白质相互作用实验:利用酵母双杂交系统或其他实验方法进行蛋白质相互作用实验蛋白质相互作用结果检测:通过实验检测蛋白质相互作用的结果结果解析:分析蛋白质相互作用的特异性和强度12.5 实验结果与分析观察蛋白质相互作用实验过程和结果分析蛋白质相互作用的特异性和强度讨论实验结果,可能存在的问题和改进方法第十三章:生物信息学分析13.1 实验目的学习生物信息学分析的基本原理和方法掌握生物信息学分析软件的使用技巧了解生物信息学分析结果的解读方法13.2 实验原理生物信息学分析的原理和方法生物信息学分析软件的使用方法生物信息学分析结果的解读方法13.3 实验材料与试剂生物序列数据(如DNA、RNA、蛋白质序列)生物信息学分析软件(如BLAST、Clustal Omega等)计算机设备13.4 实验步骤生物序列数据的获取和准备:收集所需的生物序列数据生物信息学分析:利用生物信息学分析软件进行序列比对、结构预测等分析结果解读:解读生物信息学分析结果,提取有用信息13.5 实验结果与分析观察生物信息学分析过程和结果分析生物信息学分析的特重点和难点解析重点:1. DNA的提取与纯化:掌握不同试剂和方法在DNA提取与纯化过程中的应用,以及实验步骤和结果分析。
分子生物学教案

第一章绪论重点:1. 分子生物学的基本含义2. DNA的发现3. 分子生物学与其他学科的关系难点:DNA的发现课时分配:1.5学时分子生物学的基本含义分子生物学是从分子水平研究生命本质为目的的一门新兴边缘学科,它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。
分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会,也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。
所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。
这些生物大分子均具有较大的分子量,由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息,并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统,由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。
阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。
1.1 引言现代分子生物学研究的目标是要在分子水平上掌握细胞的功能并揭示生命是本质。
1.1.1 创世说与进化论多少年来,人们常常会反复提出下面3个与生命和一切生物学现象有关的问题:(1)生命是怎样起源的?(2)为什么“有其父必有其子”?(3)动、植物是怎样从一个受精卵发育而来的?对这些问题的回答:创世说:西方:上帝先创造了世间万物,后来又创造了男人亚当,再从亚当身上抽一根肋骨,这就成了女人夏娃,亚当和夏娃繁衍了人类。
中国:女娲团土造人进化论:1859年,伟大的英国生物学家达尔文(Charles Darwin)发表了著名的《物种起源》一书,确立了进化论的观点。
正是达尔文的生物进化学说,打破了上帝造人的传统观念,改变了社会对人类在整个世界中的地位的看法,极大地推动了人类思想的发展。
分子生物学教案

分子生物学教案(整理版)第一章:分子生物学概述1.1 分子生物学的定义和发展历程介绍分子生物学的定义和研究范围回顾分子生物学的发展历程,如DNA双螺旋结构的发现等1.2 分子生物学的重要性和应用领域强调分子生物学在生物科学和生物技术领域的重要性介绍分子生物学在医学、农业、环境保护等领域的应用实例第二章:DNA与基因2.1 DNA的结构和功能详细描述DNA的双螺旋结构和特点解释DNA在遗传信息和基因表达中的作用2.2 基因的概念和分类介绍基因的定义和基本特征区分编码基因和非编码基因,以及原核生物和真核生物基因的区别第三章:基因表达与调控3.1 转录和翻译的过程详细解释DNA转录为mRNA的过程,包括启动子、转录因子等介绍mRNA翻译为蛋白质的过程,包括核糖体、tRNA等的作用3.2 基因表达调控机制介绍原核生物和真核生物中基因表达调控的机制和差异讨论转录因子、启动子、增强子等在基因表达调控中的作用第四章:分子克隆与基因工程4.1 分子克隆的基本原理和技术解释分子克隆的概念和基本步骤介绍PCR扩增、DNA连接、转化等分子克隆相关技术4.2 基因工程的应用和伦理问题讨论基因工程在生物制药、基因治疗等领域的应用探讨基因工程在伦理、安全、生态等方面的争议和问题第五章:蛋白质结构与功能5.1 蛋白质的结构层次介绍蛋白质的一、二、三级结构及其决定因素解释蛋白质结构与功能之间的关系5.2 蛋白质功能的多样性讨论蛋白质在生物体内承担的各种功能,如酶、结构蛋白、信号转导等介绍蛋白质工程在药物设计和疾病治疗中的应用第六章:酶学与酶工程6.1 酶的概述和特性介绍酶的定义、命名和分类解释酶的催化机制和酶活性的影响因素6.2 酶工程的应用和发展讨论酶在工业、医药、生物检测等领域的应用探讨定向进化、重组酶等技术在酶工程中的应用和发展第七章:RNA与非编码RNA7.1 RNA的结构和功能介绍RNA的种类、结构和功能解释mRNA、tRNA、rRNA等在蛋白质合成中的作用7.2 非编码RNA的研究进展讨论非编码RNA(如miRNA、siRNA、lncRNA等)的发现和功能探讨非编码RNA在疾病诊断、治疗和调控中的潜在应用第八章:蛋白质相互作用与信号转导8.1 蛋白质相互作用的基本概念介绍蛋白质相互作用的特点和机制解释生物信息学方法在蛋白质相互作用研究中的应用8.2 信号转导通路及其调控介绍细胞内主要的信号转导通路(如MAPK、Wnt、Notch等)讨论信号转导通路在细胞生长、分化、死亡等过程中的作用和调控机制第九章:基因组学与遗传变异9.1 基因组学的基本概念和技术介绍基因组学的研究内容、方法和进展解释基因组测序、基因组编辑等技术的原理和应用9.2 遗传变异与疾病讨论遗传变异在疾病发生中的作用和机制探讨遗传变异的检测、预测和疾病风险评估方法第十章:分子生物学实验技术10.1 分子生物学实验基本技术介绍PCR、电泳、免疫印迹等分子生物学实验技术解释实验操作步骤、条件和注意事项10.2 分子生物学实验设计与应用讨论分子生物学实验设计的原则和方法探讨实验结果的解读、数据分析和实验应用重点和难点解析一、分子生物学的定义和发展历程解析:了解分子生物学的概念和其发展历程对于理解后续内容至关重要。
大学二年级生物学课教案分子生物学导论

大学二年级生物学课教案分子生物学导论大学二年级生物学课教案:分子生物学导论引言:分子生物学作为生物学领域的重要分支,研究生物体内基本单位——分子的结构、功能和相互作用。
通过对细胞的分子机制的解析,我们将深入了解生命的本质和机理。
本教案将通过引导学生学习分子生物学的基本概念、实验方法和应用,帮助他们建立对分子生物学的系统性认识。
一、教学目标:1. 了解分子生物学的定义、基本原理和研究对象。
2. 掌握常见的分子生物学实验技术,并能运用于实践。
3. 理解分子生物学在遗传学、生物工程和药物研发等领域的应用。
4. 培养学生的科学思维和实验操作能力。
二、教学重点:1. 分子生物学的基本概念和原理。
2. 常用的分子生物学实验技术。
三、教学内容:一、分子生物学概述A. 分子生物学的定义和发展历程B. 生物分子的结构、功能和相互作用C. 分子生物学在生物学研究中的地位和作用二、DNA与RNA的结构和功能A. DNA分子的结构和双螺旋模型B. RNA分子的结构和功能特点C. DNA复制、转录和翻译过程简介三、基因调控与表达A. 基因的表达和调控B. 转录因子的作用和调控网络C. 基因调控与细胞分化发育的关系四、分子遗传学A. DNA突变和遗传变异B. 基因突变与疾病的关系C. 分子遗传学在种质改良和人类遗传病诊断中的应用五、DNA技术与基因工程A. DNA技术的原理和方法B. 基因工程与转基因技术C. 基因治疗和CRISPR-Cas9技术的应用前景六、分子药理学A. 药物与分子靶点的相互作用B. 药物的制备和筛选方法C. 分子药理学在新药研发中的应用四、教学方法:1. 理论授课:通过讲解、示范和案例分析,深入浅出地介绍分子生物学的基本概念和原理。
2. 实验操作:开展基本的分子生物学实验,如DNA提取、聚合酶链式反应(PCR)等,帮助学生掌握实验技术。
五、教学评价:1. 学生作业和报告:要求学生根据课堂知识编写实验报告和学术论文,以评估他们对分子生物学的理解和应用能力。
分子生物学原理教案

分子生物学原理教案第一章:分子生物学概述1.1 分子生物学的定义和发展历程1.2 分子生物学的研究内容和方法1.3 分子生物学的重要性和应用领域第二章:DNA的结构与功能2.1 DNA的基本组成单位2.2 DNA的双螺旋结构2.3 DNA的复制与转录2.4 DNA的遗传信息传递与表达第三章:RNA的结构与功能3.1 RNA的基本组成单位3.2 RNA的种类及其功能3.3 RNA的合成与加工3.4 RNA的作用机制及其调控第四章:蛋白质的结构与功能4.1 蛋白质的基本组成单位4.2 蛋白质的结构层次与多样性4.3 蛋白质的合成与降解4.4 蛋白质的功能及其调控第五章:酶学原理5.1 酶的基本概念与特性5.2 酶的分类与命名5.3 酶的作用机制5.4 酶的调控及其应用第六章:基因表达调控6.1 基因表达调控的基本概念6.2 转录因子的结构与功能6.3 启动子与增强子6.4 信号传导与基因表达调控第七章:基因组学与遗传变异7.1 基因组学的基本概念7.2 基因组结构与组织7.3 遗传变异的类型与机制7.4 基因组研究与应用第八章:蛋白质组学8.1 蛋白质组学的基本概念8.2 蛋白质组学技术及其应用8.3 蛋白质组学在疾病研究中的应用8.4 蛋白质组学数据的分析与解读第九章:分子生物学实验技术9.1 分子克隆与基因工程9.2 PCR技术及其应用9.3 核酸与蛋白质的分离纯化9.4 生物信息学与分子生物学实验数据的分析第十章:分子生物学在生物科技中的应用10.1 基因工程与生物制药10.2 基因诊断与基因治疗10.3 蛋白质工程与生物催化10.4 分子生物学在农业、环境保护等领域的应用第十一章:非编码RNA与表观遗传学11.1 非编码RNA的种类与功能11.2 表观遗传学的基本原理11.3 表观遗传调控机制与疾病11.4 非编码RNA与表观遗传学研究的方法和技术第十二章:细胞信号转导与网络12.1 细胞信号转导的基本概念12.2 信号转导通路与细胞生物学过程12.3 信号转导与疾病的发生和治疗12.4 细胞信号转导研究的实验技术第十三章:分子生物学在疾病研究中的应用13.1 分子诊断与疾病预测13.2 分子靶向治疗与药物设计13.3 病毒感染与免疫反应的分子机制13.4 单细胞分析与疾病研究第十四章:生物信息学与系统生物学14.1 生物信息学的基本概念与方法14.2 系统生物学的原理与应用14.3 生物数据库与数据分析工具14.4 生物信息学在分子生物学研究中的应用第十五章:分子生物学的前沿与发展趋势15.1 合成生物学与生物合成途径工程15.2 CRISPR/Cas9技术与基因编辑15.3 纳米技术与分子生物学15.4 分子生物学在未来生物科技的发展方向重点和难点解析本文档详细编写了一个包含十五个章节的“分子生物学原理教案”,从分子生物学的基本概念和发展历程开始,到DNA、RNA、蛋白质的结构与功能,再到基因表达调控、基因组学、蛋白质组学、分子生物学实验技术,以及分子生物学在生物科技中的应用等多个方面进行了系统的介绍。
分子生物学教案
分子生物学教案分子生物学教案第一章:绪论教学目的:1、了解分子生物学的含义及其研究内容2、了解分子生物学发展简史,掌握分子生物学发展过程中的三大理论发现和三大技术发明教学重点:1、分子生物学的含义2、分子生物学的主要研究内容思考题:1、你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的?2、你对分子生物学的现况和今后的发展有何看法?教学内容:一、分子生物学的基本含义分子生物学是从分子水平研究生命本质为目的的一门新兴边缘学科,是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的结构与功能相互关系的科学,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
二、分子生物学的发展过程分子生物学的发展大致可分为三个阶段。
(一)准备和酝酿阶段1、确定了蛋白质是生命的主要物质基础19世纪末Buchner兄弟证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生酒精,第一次提出酶(enzyme)的名称,并证明酶的本质是蛋白质。
1950年Pauling和Corey提出了α-角蛋白的α-螺旋结构模型。
1953年Sanger和Thompson完成了第一个多肽分子-胰岛素A 链和B链的氨基酸全序列分析。
2、确定了生物遗传的物质是DNA而不是蛋白质证明DNA是遗传物质的两个关键性实验:首先用实验证明基因就是DNA 分子的是美国的微生物学家Avery.他的实验是用肺炎球菌感染小鼠。
美国遗传学家Hershey用T2噬菌体感染大肠杆菌实验,也证明DNA是遗传物质。
这两个实验中主要的论点证据是:生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。
(二)现代分子生物学的建立和发展阶段1956年A.Kornbery以1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑,开创了分子遗传学基本理论建立和发展的黄金时代。
1956年A.Kornbery首先发现DNA聚合酶。
1958年Meselson 及Stahl提出并证明DNA半保留复制模型。
《分子生物学》课程思政教学案例
《分子生物学》课程思政教学案例一、教学目标1. 知识目标:让学生掌握分子生物学的基本概念、原理和实验技术,了解分子生物学在医学、生物技术等领域的应用。
2. 能力目标:培养学生的实验技能和独立思考能力,提高学生对分子生物学知识的应用能力。
3. 情感目标:通过课程思政教学,培养学生的科学精神、创新意识和团队协作精神,树立正确的生命科学价值观。
二、教学内容与教学重点、难点1. 教学内容:分子生物学的基本概念、原理和实验技术,包括基因组、基因表达调控、基因突变、蛋白质合成与降解等方面的内容。
2. 教学重点:基因表达调控和蛋白质合成与降解的基本原理和应用。
3. 教学难点:分子生物学实验技能的培养和独立思考能力的提高。
三、教学方法与手段1. 理论教学:采用讲授法、案例分析法、小组讨论法等多种教学方法,结合多媒体教学资料,生动形象地展示分子生物学的知识体系。
2. 实验教学:采用演示法、实践操作法,引导学生动手操作实验,培养学生的实验技能和独立思考能力。
3. 课堂互动:鼓励学生积极参与课堂讨论,引导学生思考问题,培养学生的创新意识和团队协作精神。
四、教学流程设计1. 导入新课:通过引入现实生活中的实例,激发学生的学习兴趣和好奇心,引出分子生物学的基本概念和原理。
2. 知识讲解:按照分子生物学的基本知识体系,分模块进行教学,注重各部分之间的联系和相互影响。
3. 案例分析:结合现实生活中的案例,引导学生运用所学知识进行分析和讨论,培养学生的分析问题和解决问题的能力。
4. 小组讨论:将学生分成小组,针对某一主题进行讨论,培养学生的创新意识和团队协作精神。
5. 课堂小结:总结本节课的重点和难点,强调分子生物学在医学、生物技术等领域的应用,引导学生树立正确的生命科学价值观。
6. 课后作业:布置与本节课相关的思考题,鼓励学生通过查阅资料进一步巩固所学知识。
五、思政元素融入策略1. 科学精神教育:通过讲解科学家的故事和研究成果,引导学生树立严谨的科学态度和求真务实的精神。
分子生物学教案设计[1]
《分子生物学》教案一、课程性质必修课二、教学目的要求分子生物学是一门近年来开展迅速并且在生命科学领域里应用越来越广泛、影响越来越深远的一个学科.从学科角度来讲,分子生物学函盖面非常广,与生物化学和细胞生物学等生命科学主干课程有一些交叉.在学习本课程之前,要求学生已掌握了必要的数、理、化知识,并学习了植物学、动物学、微生物学与生物化学等根底课程.通过对本课程的学习,使学生掌握基因概念在分子水平上的开展与演变、基因的分子结构和特点、基因的复制、基因表达〔在转录、翻译水平〕的根本原理、基因表达调控的根本模式、基因发生突变与交换与DNA遗传多型性检测的分子生物学原理,了解新兴起的基因组学和后基因组学研究现状.通过与实验课相结合,系统地介绍与基因克隆相关的DNA技术,使学生们掌握一些根本的分子生物学技术.三、教材与有关参考书朱玉贤等,《现代分子生物学》高等教育,2002Benjamin Lewin编著余龙等主译,《Gene Ⅷ》科学,2005赵寿元等,《现代遗传学》高等教育,2001孙乃恩等,《分子遗传学》某某大学,1990四、适用专业生物科学、生物技术、生物工程、科学教育等专业五、授课学时36学时六、课程内容第一章绪论教学目的:使学生对分子生物学的开展简史、分子生物学的研究内容与开展前景有较全面的了解.教学重点、难点:基因概念的开展与演变;对现代遗传学各开展阶段的认识.课时安排:4学时教学内容:一、什么是分子生物学?分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征与其重要性、规律性和相互关系的科学.二、分子生物学的开展简史从1847年Schleiden和Schwann提出"细胞学说",证明动、植物都是由细胞组成的到今天,虽然不过短短一百多年时间,我们对生物大分子--细胞的化学组成却有了深刻的认识.孟德尔的遗传学规律最先使人们对性状遗传产生了理性认识,而Morgan的基因学说如此进一步将"性状"与"基因"相耦联,成为分子遗传学的奠基石.Watson和Crick所提出的脱氧核糖酸双螺旋模型,为充分揭示遗传信息的传递规律铺平了道路.在蛋白质化学方面,继Sumner在1936年证实酶是蛋白质之后,Sanger利用纸电泳与层析技术于1953年首次说明胰岛素的一级结构,开创了蛋白质序列分析的先河.而Kendrew和Perutz利用X射线衍射技术解析了肌红蛋白〔myoglobin〕与血红蛋白〔hemoglobin〕的三维结构,论证了这些蛋白质在输送分子氧过程中的特殊作用,成为研究生物大分子空间立体构型的先驱.总结与分子生物学相关的诺贝尔奖.三、分子生物学的主要研究内容1.DNA重组技术------基因工程基因工程指将不同DNA片段〔如某个基因或基因的一局部〕按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状.DNA重组技术有着广阔的应用前景:①在生物技术制药领域中的应用.如:利用基因工程技术改造传统的制药工业;利用克隆的基因表达生产有用的肽类和蛋白质药物或疫苗.②定向改造某些生物的基因组结构,使它们具备某些特殊的经济价值.③在根底研究中的应用.如:基因的克隆与分析;启动子分析.2.基因表达调控因为蛋白质分子参与并控制了细胞的一切代谢活动,而决定蛋白质结构和合成时序的信息都由核酸〔主要是脱氧核糖核酸〕分子编码,表现为特定的核苷酸序列,所以基因表达实质上就是遗传信息的转录和翻译.在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定的时序发生变化〔时序调节〕,并随着内外环境的变化而不断加以修正〔环境调控〕.原核生物的基因组和染色体结构都比真核生物简单,转录和翻译在同一时间和空间内发生,基因表达的调控主要发生在转录水平.真核生物有细胞核结构,转录和翻译过程在时间和空间上都被分隔开,且在转录和翻译后都有复杂的信息加工过程,其基因表达的调控可以发生在各种不同的水平上.基因表达调控主要表现在信号传导研究、转录因子研究与RNA剪辑3个方面.3.生物大分子结构功能----结构分子生物学生物大分子的结构功能研究〔又称结构分子生物学〕一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提:首先,它拥有特定的空间结构〔三维结构〕;其次,在它发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化.结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构与结构的运动变化与其生物学功能关系的科学.它包括结构的测定、结构运动变化规律的探索与结构与功能相互关系的建立3个主要研究方向.最常见的研究三维结构与其运动规律的手段是X射线衍射的晶体学〔又称蛋白质晶体学〕,其次是用二维核磁共振和多维核磁研究液相结构,也有人用电镜三维重组、电子衍射、中子衍射和各种频谱学方法研究生物高分子的空间结构.4.功能基因组学与生物信息学研究先后完成了包括从大肠杆菌、酿酒酵母到线虫等十余种模式生物基因组全序列的测定工作,并于2002年2月12日完成人类基因组测序工作.世界两大最著名的学术刊物-nature和science同时发表了人类基因组全序列.基因组测序工作的进展是非常令人振奋的. 但是也随之产生了新问题.大量涌出的新基因数据迫使我们不得不考虑这些基因编码的蛋白质有什么功能这个问题.在这些基因组中通常有一半以上基因的功能是未知的.因此读懂基因组称为后基因组时代的生命科学领域面临的巨大的挑战.在功能基因组时代,应用生物信息学方法,高通量地注释基因组所有编码产物的生物学功能是一个重要的特征.生物信息学是在各种"组学〞研究的推动下开展起来的.传统的研究方法是只研究某一个基因或蛋白质或转录产物,而"组学"的研究是采用高通量的技术分析细胞中全部的基因和蛋白质,这样势必会产生海量的信息,因此,人们必须寻求一种高速度、高效率、大规模的方式积累数据处理分析方法.四、分子生物学展望未来的开展方向:不同模式生物基因调控网络的比拟分析;RNA介导的基因表达调控网络;表观遗传〔epigenetic〕信息的整合;从数据整合到系统生物学〔systems biology〕.第二章遗传的物质根底-DNA教学目的:使学生了解并掌握DNA的结构与功能教学重点、难点:DNA的一级结构的测定,DNA的二级结构与超螺旋结构.课时安排:4学时教学内容:第一节DNA的一级结构一、一级结构的构成所谓DNA的一级结构,就是指4种核苷酸的连接与其排列顺序,表示了该DNA分子的化学构成.核苷酸序列对DNA高级结构的形成有很大影响,如B-DNA中多聚〔G-C〕区易出现左手螺旋DNA〔Z-DNA〕,而反向重复的DNA片段易出现发卡式结构等.二、一级结构的序列测定目前所用的DNA测序方法是在末端终止法的根底上开展起来的.由英国科学家Sanger提出的.Sanger在生物大分子的序列测定方面做出了杰出贡献.他曾在1953年利用小片段重迭法成功测定了胰岛素51个氨基酸序列,并获得诺贝尔奖.1977年又利用末端终止法测定了ΦX174噬菌体得DNA序列,第二次获得诺贝尔奖.末端终止法又称为双脱氧法,根本原理是模拟体内DNA的复制过程在体外合成DNA,通过测定DNA片段的相对长度来推断核苷酸序列.至于成分大家不要死记,可以回忆一下DNA复制过程需要哪几种组分:模板、dNTP、引物、DNA聚合酶,其中一种dNTP的磷酸基团用P32标记.除此之外还需要每个管中分别参加一种ddNTP.DDNTP是双脱氧核苷酸,由于在3'位上缺少-OH,无法与下一个单体之间形成磷酸二酯键,因此,一旦掺入DNA链的延伸后,便终止DNA的合成这样,在DNA聚合酶的作用下核苷酸链不断延伸,我们可以调整dNTP和ddNTP的浓度,使ddNTP在每个位置上都有一个掺入的机会.每个管都会产生一系列长短不一的DNA片段,其共同特征是末端的最后一个碱基是一样的.我们将所得的所有DNA片段进展凝胶电泳,长度不同,泳动的速度不同.8%-20%的聚丙烯酰胺可将相差一个碱基的DNA片段区分开,由于dCTP是放射性标记的,我们将凝胶放射自显影后,有DNA片段的位置就会显示出相应的信号带.自下而上依次将碱基序列读出.第二节DNA的二级结构一、二级结构的特点DNA不仅具有严格的化学组成,还具有特殊的高级结构,它主要以有规如此的双螺旋形式存在,其根本特点是:1、DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的;2、DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成根本骨架,碱基排列在内侧;3、两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对,它的组成有一定的规律.这就是嘌呤与嘧啶配对,而且腺嘌呤〔A〕只能与胸腺嘧啶〔T〕配对,鸟嘌呤〔G〕只能与胞嘧啶〔C〕配对.如一条链上某一碱基是C,另一条链上与它配对的碱基必定是G.碱基之间的这种一一对应的关系叫碱基互补配对原如此.组成DNA 分子的碱基虽然只有4种,它们的配对方式也只有A与T,C与G两种,但是,由于碱基可以任何顺序排列,构成了DNA分子的多样性.例如,某DNA分子的一条多核苷酸链有100个不同的碱基组成,它们的可能排列方式就是4100.二、变性、复性与杂交变性:指双螺旋区氢键断裂,空间结构破坏,只涉与次级键的破坏.常用的DNA 变性方法:热变性和用变性剂处理.如何判断DNA是否发生变性了呢?常用的方法是测定DNA的光吸收值.在碱基的嘌呤环和嘧啶环中存在共扼双键,在240-290nm波长有一强烈的吸收峰,最大吸收值在260nm.〔蛋白质由于存在肽键,在280nm有明显的吸收峰〕当DNA 变性时,有序的碱基排列被破坏,光吸收值显著增加,该现象称为增色效应.当缓慢增加DNA溶液的温度时,记录不同温度下的A260的数值,即绘制成DNA的变性曲线.以温度为横坐标,以A260为纵坐标.当A260增加到最大值的一半时,这时的温度称为DNA的溶解温度或熔点,Tm表示.除此之外,光吸收法也是实验室定量测定DNA和RNA浓度和纯度的一种方法.从某种样品中提取了基因组DNA,可根据A260/A280的比值判断其纯度.复性:变性核酸的互补链在适当条件下重新缔合成双螺旋的过程.杂交:在退火条件下,带有互补核苷酸序列的单链DNA或RNA混合在一起,其相应的互补区段会形成双链结构.分子杂交是分子生物学常用的技术,可用来检测某一特定基因的时空表达情况和在基因组中的.分子杂交最初是由Southern设计出来的.当时是用DNA探针检测的DNA,也就是DNA与DNA的杂交,人们就将这种方法称为是Southern blotting.在此根底上,人们设计出DNA探针检测RNA,称为Northern blotting.基因芯片的工作原理与经典的核酸分子杂交方法〔southern 、northern〕是一致的,都是探针和互补的靶基因结合,通过随后的信号检测进展定性与定量分析.基因芯片〔DNA microarray〕指将N个目的DNA用自动化设备点在固体支持物上,DNA经固化后,用不同颜色的荧光标记的探针对这些DNA同时进展杂交,根据杂交结果呈现的不同颜色,经计算机分析后得到关于N个基因表达情况的数据.第三节DNA的高级结构一、超螺旋结构与拓扑异构体双螺旋DNA进一步扭曲盘绕如此形成其三级结构,超螺旋是DNA三级结构的主要形式.自从1965年Vinograd等人发现多瘤病毒的环形DNA的超螺旋以来,现道绝大多数原核生物都是共价封闭环<covalently closed circle,CCC>分子,这种双螺旋环状分子再度螺旋化成为超螺旋结构<superhelix或supercoil>.有些单链环形染色体<如φ×174>或双链线形染色体<如噬菌体入>,在其生活周期的某一阶段,也必将其染色体变为超螺旋形式.对于真核生物来说,虽然其染色体多为线形分子但其DNA均与蛋白质相结合,两个结合点之间的DNA形成一个突环<loop>结构,类似于CCC分子,同样具有超螺旋形式.超螺旋按其方向分为正超螺旋和负超螺旋两种.真核生物中,DNA与组蛋白八聚体形成核小体结构时,存在着负超螺旋.研究发现,所有的DNA超螺旋都是由DNA拓扑异构酶产生的.二、拓扑异构变化的生物学意义DNA拓扑异构的变化是DNA的复制和转录过程所必须的.一个闭合的DNA 分子可以用其连环数进展描述,连环数<Linking number>是指一条链空间跨越另一条链的次数.顺序一样的闭合DNA 分子可能有不同的连环数,这反映了超螺旋程度的差异.连环数不同的一样DNA 分子称为拓扑异构体<Topological isomers> .连环数由两个成分组成:缠绕数<Writhing number ,W> 和扭转数<Twisting number, T> .扭转数T 是双链螺旋结构自身的一种性质,代表一条链绕另一条链旋转的双螺旋总圈数.它由每一圈配对的碱基数决定.对于平放在平面上的一个松弛的闭合环状DNA 来说,用碱基对的总数除以每一圈的碱基对数就是它的扭转数.缠绕数W 代表双螺旋轴在空间上的弯曲,在直观上与超螺旋的概念相对应,但并非具有完全一样的数量上的定义或衡量.对于一个松弛分子,W=0 时连环数等于扭转数.我们经常用下面的公式计算连环数的变化量:ΔL=ΔW+ΔT第三章染色体和基因教学目的:使学生掌握基因组的概念、原核生物基因组的特点和真核生物染色体与基因组特点.教学重点、难点:真核生物染色体的根本特征;卫星DNA与在分子标记中的应用;断裂基因;基因家族与串连重复基因簇.课时安排:4学时教学内容:第一节基因组大小与C值矛盾一、基因组概念一个物种单倍体的染色体的数目,称为基因组.基因组中DNA 的总量是物种所特有的,称为C 值<C-value> .C 值的X围变化很大,从微生物中的<106 到一些植物和两栖类的>1011.图3.1 总结了进化中不同门类生物的C 值X围.随着复杂度增加,每组中最小基因组大小也会随着增加.三、C值矛盾现象单倍体基因组DNA 含量在低等真核生物中与形态复杂性有一定的正相关,但在高等真核生物中却非如此,它们的单倍体基因组DNA 含量变化不定.基因组大小与遗传复杂性并非线性相关,称为C 值矛盾<Paradox> .它涉与到真核基因组绝对和相对的DNA 数量.例如,蟾蜍Xenopus 和人类基因组大小差不多,但是人类遗传发育上更为复杂.在外表复杂程度相似的种属间<见图> 也存在C 值矛盾,这个问题局限于一些种族内,昆虫、两栖和植物最为明显.在两栖中,最小的基因组<109bp,但是最大的基因组大约1011bp.这些两栖类间的差异似乎并不需要基因间这么大的差异,明确在大的基因组中有非编码DNA 的大量增加.目前我们并不清楚为什么自然选择允许这些DNA 的聚集<在其他种族中这种情况并不发生,基因组的分布是窄的.鸟类、爬虫类和哺乳类只允许小的偏差,其差异在基因组大小两倍X围之内>.第二节原核生物染色体与基因原核生物的DNA与稀疏的蛋白质结合,存在于类核体上,没有核膜包被.原核生物DNA分子小,基因排列严密,空间利用率高.1.功能上相关的几个结构基因前后相连,再加上一个共同的调节基因和一组共同的控制位点〔启动子promoter、操纵子operator〕,在基因转录时协同动作,组成操纵元〔operon〕.介绍乳糖操纵元的结构、调控机制.2.绝大局部为编码基因,并通常以单拷贝形式存在.3.重叠基因真核生物的染色体一、染色体的根本组成单位-核小体真核生物的染色体<chromasome>在细胞生活周期的大局部时间里都是以染色质<chromatin>的形式存在的.核小体是构成染色质的根本结构单位,使得染色质中DNA、RNA和蛋白质组织成为一种致密的结构形式.核小体由核心颗粒<core particle>和连接区DNA<linker DNA>二局部组成,在电镜下可见其成捻珠状,前者包括组蛋白H2A,H2B,H3和H4各两分子构成的致密八聚体<又称核心组蛋白>,以与缠绕其上一又四分之三圈长度为146bp的DNA链;后者包括两相邻核心颗粒间约60bp 的连接DNA和位于连接区DNA上的组蛋白H1<见图〕,连接区使染色质纤维获得弹性.核小体是DNA紧缩的第一阶段,在此根底上,DNA链进一步折叠成每圈六个核小体,直径30nm的纤维状结构,这种30nm纤维再扭曲成襻,许多襻环绕染色体骨架<Scaffold>形成棒状的染色体,最终压缩将近一万倍.这样,才使每个染色体中几厘米长<如人染色体的DNA分子平均长度为4cm>的DNA分子容纳在直径数微米<如人细胞核的直径为6-7μm>的细胞核中.二、染色体的根本特征-端粒、着丝粒1.着丝粒在有丝分裂中,姊妹染色单位向细胞相反的两极移动.它们的运动依赖于染色体与微管<Microtubule> 的接触,在另一端与极相连接<微管组成细胞的纤丝体系,在有丝分裂期间它们把染色体与细胞的极相连>.在微管端部的两个区域连接着微管组织中心<Microtubule organizing centers,MTOCs> ,它位于染色体中心粒附近和两个极上.染色体上负责其在有丝分裂和减数分裂时别离的区域称为着丝粒着丝粒的DNA顺序称为CEN顺序.CEN 区域中存在三种类型的序列元件<图>:CDE-Ⅰ是所有中心粒左侧边界变化很少的9bp 保守序列.CDE-Ⅱ是所有中心粒中都存在的A?T 比例大于90% 的80-90bp 长序列,其功能依赖于其长度而非准确序列,其成份是一些真核生物中短的随机重复<卫星>DNA 序列的遗迹,其碱基成分可能产生一些DNA 双螺旋结构上的特征性的弯曲.CDE-Ⅲ是所有中心粒右侧边界的11bp 长的高度保守序列,此类元件的两侧序列保守性较低,对于中心粒功能可能是必需的<CDE-Ⅲ在侧翼序列必需的情况下可能长于11bp> . 2.端粒通过断裂产生的染色体末端,会与其它染色体发生作用,然而天然染色体是稳定的,因此,染色体末端一定具有某种特殊结构,可以稳定染色体,该结构称为端粒.我们可以用两个性质来定义端粒序列:必需存在于染色体的端部<或至少在线性DNA 分子的末端>;它必需赋予线性分子稳定性.许多低等真核生物基因组中的线性DNA 分子,其端粒结构都是的.同样类型的序列也在植物和人类中发现,所以端粒的构建似乎遵循着普遍的规律.每个端粒由一系列短的随机重复序列组成.所有端粒序列能写成<A/T>m 的一般形式,其中n>1 而m 为1-4 ;3 端具有单链尾,且富含GT.端粒一方面可保护线性DNA免受核酸酶攻击,另一方面,利用用从头合成的方式参加重复,能抵消在染色体端部无法复制所导致的重复丢失.讨论端粒与寿命的关系.第四节真核生物的基因一、真核生物基因组中包含非重复序列和重复序列1.重复序列在单倍体基因组里,这些序列一般只有一个或几个拷贝,它占DNA总量的40%-80%.多为结构基因.2.中度重复序列这类重复序列的重复次数在10-104之间,占总DNA的10%-40%.各种rRNA、tRNA与组蛋白基因等都属这一类.该类基因一般不编码. 3.高度重复序列——卫星DNA这类DNA只在真核生物中发现,占基因组的10%—60%,由6—100个碱基组成,在DNA链上串联重复几百万次.由于碱基的组成不同,在C s Cl密度梯度离心中易与其他DNA分开,形成含量较大的主峰与高度重复序列小峰,后者又称卫星区带〔峰〕.该类基因一般不转录.小卫星和微卫星序列是由比卫星序列的重复序列单位更短的单位构成,其重复单位的长度分别为10~100bp和10bp,而重复序列单位的数目通常为5~50个,不同个体间重复序列单位数目变化很大.在人类中小卫星位点是1-5kb的顺序,此顺序由长15-100nt的重复单位组成.当将人类的总DNA提出后,用限制性内切酶切成不同长度的片断〔各种小卫星上都没有酶切位点〕,然后以小卫星DNA中的特异顺序为探针进展Southern杂交,可发现阳性片断的长度各不一样.由于不同个体的这种串联重复的数目和位置都不一样,所以小卫星DNA的Southern杂交带谱就具有高度的个体特异性,人们就称其为DNA指纹分析技术〔DNA fingerprints〕.断裂基因大多数真核生物的基因〔包括编码蛋白质、rRNA、tRNA的基因〕由间隔的外显子〔表现在最终RNA产物中的序列〕和内含子〔从初始转录物中去除的序列〕组成."一条基因,一种蛋白质〞应修正为"一种蛋白质,一条基因〞.因为一些DNA序列编码一种以上蛋白质.三、基因家族与基因簇真核生物的基因组中有许多来源一样、结构相似、功能相关的基因,这样一组基因称为基因家族〔gene family〕.同一基因家族的不同成员严密排列在一起,称为基因簇〔gene cluster〕.但更多情况下是散布在不同染色体上.如:珠蛋白基因α、β、γ、δ.同一家族成员是由同一个祖先基因经过复制和变异传递下来的.串连重复基因簇串连重复基因出现在其产物被极度需要的情况下,如组蛋白基因、rRNA基因和tRNA基因.如:组蛋白基因,编码H1/H2A/H2B/H3/H4五种组蛋白的基因彼此靠近构成一个重复单位,这样的重复单位串连在一起.rRNA基因,真核生物中的〔主体rRNA 〕基因组成重复单位,转录出一个45S rRNA前体,然后通过转录后处理.此外,还有,tRNA基因也是串连重复排列,但各重复单位中的各tRNA可以不同.假基因基因组中因突变而失活的基因,它和同一家族的活跃基因在结构和DNA序列上有相似性.第三章DNA复制教学目的:使学生掌握DNA复制的机理与一般过程、复制的各阶段的主要生物学事件、复制的方式、复制的调控、DNA修复系统.教学重点、难点:复制的机理;复制的起始;端粒的复制.课时安排:6学时教学内容:第一节DNA复制的机理与一般过程一、半保存复制半保存复制:Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测,DNA 在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开,然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链,这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制方式为半保存复制.1957年,梅塞尔和斯塔尔利用大肠杆菌〔E.Coli〕研究遗传物质DNA.在这项经典实验中,他们先将大肠杆菌放入只含有既氮15〔氮14的同位素〕的营养基中培养,然后将这些大肠杆菌转移到只含氮14的营养基中.提取不同培养代数细菌的DNA,用CsCl密度梯度离心.实验结果明确:在全部由15N标记的培养基中得到的15N-DNA显示为一条重密度带位于离心管的管底.当转入14N标记的培养基中繁殖后第一代,得到了一条中密度带,这是15N-DNA和14N-DNA的杂交分子.第二代有中密度带与低密度带两个区带,这明确它们分别为15N14N-DNA和14N14N-DNA.随着以后在14N培养基中培养代数的增加,低密度带增强,而中密度带逐渐减弱,离心完毕后,从管底到管口,CsCl溶液密度分布从高到低形成密度梯度,不同重量的DNA分子就停留在与其相当的CsCl密度处,在紫外光下可以看。
分子生物学教案
第一章绪论重点:1. 分子生物学的基本含义2. DNA的发现3. 分子生物学与其他学科的关系难点:DNA的发现课时分配:学时分子生物学的基本含义分子生物学是从分子水平研究生命本质为目的的一门新兴边缘学科,它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。
分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会,也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。
所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。
这些生物大分子均具有较大的分子量,由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息,并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统,由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。
阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。
引言现代分子生物学研究的目标是要在分子水平上掌握细胞的功能并揭示生命是本质。
创世说与进化论多少年来,人们常常会反复提出下面3个与生命和一切生物学现象有关的问题:(1)生命是怎样起源的?(2)为什么“有其父必有其子”?(3)动、植物是怎样从一个受精卵发育而来的?对这些问题的回答:创世说:西方:上帝先创造了世间万物,后来又创造了男人亚当,再从亚当身上抽一根肋骨,这就成了女人夏娃,亚当和夏娃繁衍了人类。
中国:女娲团土造人进化论:1859年,伟大的英国生物学家达尔文(Charles Darwin)发表了著名的《物种起源》一书,确立了进化论的观点。
正是达尔文的生物进化学说,打破了上帝造人的传统观念,改变了社会对人类在整个世界中的地位的看法,极大地推动了人类思想的发展。
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《分子生物学》教案《分子生物学》教案一、课程基本信息二、课程教材P.C.特纳,A.G.迈克伦南,A.D.百茨,M.R.H.怀特.分子生物学(第二版). 北京:科学出版社,2001.9.三、教学对象生物科学专业本科生。
四、主要参资料[1] 朱玉贤,李毅.现代分子生物学(第二版).北京:高等教育出版社,2002,7.[2] Robert F. Weaver.分子生物学(影印版).北京:科学出版社,2000,8.[3] 孙乃恩等.分子遗传学.南京:南京大学出版社,1990.[4] Joe Sambrook.分子克隆实验指南(第2版).科学出版社,2002.五、教学特色利用动画让学生理解抽象的概念和重难点内容。
六、课程考核方式及成绩评定《分子生物学》属于考试科目。
平时课堂教学中的作业和课堂提问、课堂讨论占30%;期末闭卷考试占70%。
七、其他说明每章或全书讲授完毕,给学生布置一定的习题。
要求学生选读参考书,进一步巩固和补充课堂讲授内容,系统整理学习笔记。
八、教案第一章绪论 Introduction(2学时)1、教学目标:掌握分子生物学的基本概念与研究内容;了解分子生物学发展简史和分子生物学的一些分支学科;了解分子生物学的发展趋势。
2、教学重点:分子生物学的产生及概念,分子生物学的研究内容3、教学难点:分子生物学的产生及概念,分子生物学的研究内容4、教学方法与手段:多媒体教学、自学与课堂讨论相结合5、教学过程第一节生命科学的回顾(20分钟)1、创世说与进化论;2、细胞学说;3、经典的生物化学和遗传学;4、DNA的发现。
第二节分子生物学的概念和研究内容(30分钟)1、什么是分子生物;2、分子生物学研究领域的三大原则;3、分子生物学研究领域。
第三节分子生物学发展简史(20分钟)1、孕育阶段;2、创立阶段;3、发展阶段。
第四节分子生物学实际应用的现状和展望。
(10分钟)第二章核酸的性质与结构(3学时)1、教学目标:掌握核酸的基本性质;掌握DNA的结构;掌握DNA分子变性、复性及分子杂交的原理。
2、教学重点:DNA的结构,DNA的变性与复性。
3、教学难点:DNA双螺旋结构及其多样性、DNA高级结构。
4、教学方法与手段:多媒体教学;讲解为主,自学与课堂讨论相结合。
5、教学过程第一节核酸的化学组成(10分钟)一、含氮碱基、核苷、核苷酸:简单回顾。
二、DNA的一级结构:详细讲解一级结构的特点第二节DNA的二级结构(30分钟)一、DNA双螺旋结构的提出:详细讲解双螺旋结构的参数(10分钟)。
二、影响双螺旋结构稳定性的因素:重点介绍碱基堆积力和疏水作用(5分钟)。
三、双螺旋结构的基本形式:重点介绍A-DNA、B-DNA、Z-DNA的结构特征和形成条件(10分钟)。
四、一些DNA序列的不寻常结构:主要介绍反向重复序列中的回文结构、三螺旋和四螺旋形成的条件(5分钟)。
第三节DNA的物理化学性质一、DNA分子变性:重点介绍增色效应及其在DNA定量分析中的应用、影响Tm值的因素(10分钟)。
二、DNA分子的复性:介绍复性的概念和影响复性的因素(5分钟)三、分子杂交:介绍Southern blot、Northern blot、Western blot和in situ hybridization(15分钟)。
第四节超螺旋和拓扑异构酶一、超螺旋:解释清楚正超螺旋和负超螺旋的概念(15分钟)二、超螺旋状态的描述:解释清楚Vinograd方程式中L、T、W 的含义、EB的作用(15分钟)三、拓扑异构酶:重点介绍TopI、T opII的作用机理和功能(10分钟)。
[复习题]1、名词解释反向重复序列DNA链的呼吸作用DNA变性DNA的熔解温度DNA复性2、简答题*DNA是否唯一的遗传物质?*如何确定DNA一级结构的方向性?*决定DNA双螺旋结构状态的因素如何?*B-DNA中出现的大沟、小沟有何差别?*DNA结构多态性及其产生的原因。
*室温中蒸馏水中的DNA变化如何?为什么?*三螺旋、四螺旋DNA的形成条件如何?各自的基本结构情况*说明SV40的CCC DNA分子与EB结合过程中CCC的变化情况*Ⅰ、Ⅱ型拓扑异构酶的作用方式和结果的情况第三章基因和基因组(3学时)1、教学目标:掌握原核生物和真核生物基因的区别;真核生物的C值与C值矛盾。
2、教学重点:基因组的大小与C值矛盾;真核生物基因。
3、教学难点:真核生物DNA的复性动力学。
4、教学方法与手段:多媒体教学;讲授与自学相结合。
5、教学过程第一节基因组的大小与C值矛盾一、相关概念:重点介绍基因组和C值概念,简单介绍基因、基因组学、结构基因组学、功能基因组学等概念(15分钟)。
二、C值矛盾与表现:阐明C值矛盾的表现,指出C值矛盾的原因(15分钟)。
第二节细菌和病毒基因组一、大肠杆菌基因组:简略介绍大肠杆菌基因组的特点(5分钟)。
二、病毒基因组的特点:简单介绍,并交待λ噬菌体的COS位点形成的过程(5分钟)。
第三节真核生物的染色体与基因一、真核生物染色体结构的回顾(不讲,让学生预习)二、真核生物DNA的复性动力学:在介绍Cot曲线的基础上,让学生明白怎样通过真核生物复性动力学研究来高度重复序列、中度重复序列和单一序列的估计方法(40分钟)三、DNA的序列类型:重点介绍高度重复序列中的卫星、微卫星、小卫星DNA的特点、及其在实践中的应用;简单介绍重点重复序列的类型和单拷贝序列(35分钟)。
四、基因簇与基因家族:介绍概念(5分钟)。
五、割裂基因:学生自学。
[复习题]1、名词解释基因组;C-值;C-值矛盾;基因家族;基因簇;割裂基因;Intron 内元;Exon 外元;持家基因;奢侈基因;卫星DNA。
2、简答题(1)何为C值矛盾,其表现在哪些方面。
(2)E.coli的基因结构有何特点?(3)真核生物复性动力学的复杂性计算、重复频率计算。
(如何根据复性动力学曲线判断真核生物各种序列类型及其复杂性)(4)以E.coli、ΦX174噬菌体为例说明原核生物基因组织的特点。
(5)说出真核生物染色体结构中染色质丝的逐级组装过程。
(6)真核、原核生物的结构基因的主要组织特点。
3、计算题(1)假定人类单个细胞总DNA为6×109核酸对,以B-构型存在。
请问人类单个细胞DNA总长度为多少?它们又是如何被组装在直径相对来说极其微小的细胞核内?(人类46条染色体)(2)从四种不同生物分离的核酸中各种碱基的比率(%)如下A T U G C (A+T/U)/(G+C) (A+G)/( C+T)1 17 17 33 33 0.5 1.02 29 19 22 30 0.97 1.03 24 16 24 56 0.66 1.54 34 2.1 1.01)对于每个物种,回答以下问题a、核酸是DNA还是RNA?b、是双链还是单链?2)填充物种四中缺少的碱基百分比第四章 DNA复制(4学时)1、教学目标:理解DNA复制的半保留机制和半不连续复制,掌握细菌DNA复制过程及有重要作用的酶和蛋白质;了解细胞周期;了解真核生物DNA复制的特点。
2、教学重点:①半保留复制的概念,半不连续复制的概念及相关定义(前导链、后随链、冈崎片段);②参与复制的酶和蛋白质因子及其作用;③DNA复制的机制3、教学难点:①DNA复制起始;②端粒酶的作用机制;③DNA复制的调控。
4、教学方法与手段:以基因信息传递的中心法则、DNA复制和细胞分裂的关系开始本篇,并引入本章,适当复习DNA的结构和组成,以利本章讲述的展开,以DNA复制所需的条件为主线,讲授过程中联系前面已讲授的DNA 双螺旋结构知识,做到知识的连贯,充分利用多媒体课件,用动画等形象、生动地讲授DNA生物合成过程。
(1)充分利用现代教学手段与方法,制作多媒体课件,做到图文并茂;(2)在一些重点或关键处可适当板书,起到突出重点、引导学生思路从而更易掌握的作用;(3)课堂上多提问,与学生交流,调动他们的积极性,也可先设疑,在后续教学中引导学生寻找答案,做到深入浅出,逐层剥离。
5、教学过程第一节DNA复制概述一、DNA的半保留复制:介绍半保留复制的概念与Meselson-stahl实验证据(10分钟)。
二、复制的起点、方式和方向:介绍复制子、复制眼、复制叉的概念,详细介绍复制方式,并用动画帮助学生进行理解(20分钟)。
三、DNA复制的半不连续性:介绍半不连续复制、先导链、后随链、冈崎片段的概念,半不连续复制的实验证据(10分钟)。
四、DNA合成的引发:介绍引发酶在复制引发中的作用和DNA 复制的转录激活的概念;说明有机体选用RNA作为引物的原因(5分钟)。
五、后随链的合成及前体片段的连接:重点讲清后随链上所包含的事件。
简要提出原核和真核后随链合成的区别(5分钟)。
第二节DNA复制的酶学一、DNA聚合反应和聚合酶:详细介绍DNA聚合酶的3'→5 '外切活性、5?→3?外切活性和5'→ 3 '聚合活性。
突出DNApolⅠ的5?-3?外切活性在切开平移和探针制备中的应用(25分钟)。
二、DNA连接酶:简略介绍,指出T4连接酶的应用(2分钟)。
三、与DNA几何学性质相关的酶:简单介绍解螺旋酶和DNA旋转酶的作用(3分钟)。
第三节原核生物DNA复制一、DNA复制机构的研究:介绍实验体系,讲清快停突变和慢停突变的概念(5分钟)。
二、DNA复制的起始:以大肠杆菌为例重点介绍从头起始的过程,简单介绍E.coli细胞加倍时间与复制起始,略去共价延伸的起始过程(10分钟)。
三、延伸过程:讲清复制叉的概念与复制因子在复制叉的分布,介绍聚合酶III各亚基的功能和后随链的合成过程。
噬菌体T4的复制机制让学生自学(25分钟)。
四、复制的终止:重点介绍E.coli终止序列和终止蛋白在DNA复制终止中的作用,保证DNA复制和细胞分裂相一致的机制,提出线性DNA复制出现末端短缩的问题(15分钟)。
第四节真核生物DNA的复制重点介绍真核生物DNA聚合酶、分布与功能,指出真核生物和原核生物复制因子的不同,着重介绍端粒的功能及其补平机制(25分钟)。
6、小结:本章重点讲述了:半保留复制的概念,半不连续复制的概念及相关定义(领头链、随从链、冈崎片段),参与复制的酶和蛋白质因子及其作用,复制的化学反应,复制的起始、延长和终止,端粒及端粒酶的概念、逆转录的概念,DNA复制的调控。
7、复习题名词解释复制;复制体;半保留复制;岗崎片段;复制单位;θ复制;先导链;后随链;DNA复制的转录激活。
DNA复制的半不连续性。
简答题1、图示说明DNA半保留复制的机制证明。
2、DNA复制方向为5?→3?,请说明复制为什么不能从3?→5?。
3、为什么岗崎证明DNA半不连续性复制的实验中出现两条链都是不连续的假象。