流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量检测方法验证方案新
实时荧光PCR技术快速鉴别检测H5、H9、H7亚型禽流感灭活疫苗的研究
利用 K>6L(%. G$17%1J 上公布的 68= ;6 基因序列， 软件进行比对， 找到其保守区， 根据 !.)*$. MNO.$// 分别设计 ;9、 PQ: 软件， ;<、 ;5 亚型特异性引物和 （ 上 游 引 物） 、 （下 游 引 RG7 探 针， ;9 亚 型： !9S !9P 物） 、 （RG7 探针） ； !92 ;< 亚型： !<S、 !<P、 !<2； ;5 亚 型： 引物和探针由上海基康生物技术 !5S、 !5P、 !52， 有限公司合成， 探针 9T 端标记的荧光报告 基 团 是 +6R， 2T 端标记的荧光淬灭基团是 RG7。以下是引 物和探针序列： !9S： 9T’ """66"66?666G6GG6G"?6"66?6 ’2T !9P：9T’ ?G66?"""""6"6G?6""666’2T !92：9T’ ?6""66""66G66G6?"’2T !<S：9T’ "?6""66?"66"666"?""6"6G66 ’2T !<P：9T’ ?GG"6?G?G?"6"6GG66"6 ’2T !<2：9T’ ?G?6G6"6"G"?66"6G6 ’2T !5S：9T’ ???"6?6"??"?GG""6??G"6 ’2T !5P：9T’ "G"6?G???""6??"??"6"6 ’2T
甲流疫苗说明
甲型H1N1流感病毒裂解疫苗说明书（暂定）警示语本品按照国家统一的免疫策略和接种方案使用【药品名称】通用名称：甲型H1N1流感病毒裂解疫苗英文名称：H1N1 Influenza A Vaccine (Split Virion)，Inactivated汉语拼音：Jiaxing H1N1 Liugan Bingdu Liejie Yimiao【成份与性状】本品系采用世界卫生组织（WHO）推荐的甲型H1N1流感病毒株接种鸡胚，经病毒培养、收获病毒液、灭活病毒、浓缩、纯化、裂解后制成。
本品主要成分为甲型H1N1流感病毒血凝素抗原。
辅料为氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。
含硫柳汞防腐剂。
本品外观为轻微乳白色液体。
【接种对象】本品用于3岁以上人群的预防接种。
【作用与用途】接种本疫苗后，可刺激机体产生针对甲型H1N1流感病毒的抗体，用于此型病毒所致流感流行的免疫预防。
【规格】本品为每瓶或每支0.5 ml。
每1次人用剂量为0.5ml，含甲型H1N1流感病毒血凝素15µg。
【免疫程序和剂量】本疫苗接种1剂，每一次人用剂量0.5ml。
于上臂外侧三角肌肌内注射。
【不良反应】基于对1080例3岁以上受试者免疫接种的临床试验结果，本品可能发生的不良反应有：下述不良反应中：“常见”：是指发生率1%-10%（含1%）；“偶见”：是指发生率0.1%-1%（含0.1%）。
局部不良反应：常见疼痛、偶见硬结、红斑、肿胀、皮疹、瘙痒。
全身不良反应：常见发热，偶见头痛、乏力、呕吐、咳嗽、腹泻、变态反应。
以上不良反应以轻度为主，主要发生在接种后24小时内。
如出现以上未提及的不良反应，应及时与医生取得联系。
据文献记载，接种季节性流感疫苗还可能发生罕见的不良反应，如：休克、血管炎样一过性肾功能受损，神经系统疾病，例如脑脊髓炎、神经炎、神经痛、感觉异常、惊厥、一过性血小板减少、格林-巴利（Guillain-Barre）综合征等。
接种本疫苗时，应注意密切观察。
单向免疫扩散测定四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝素含量
单向免疫扩散测定四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝素含
量
单向免疫扩散测定四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝
素含量
帅旗余军杨文彬吴富强吴建华蒋正东杨宪普赵越赵静付建林225300泰州,江苏金迪克生物技术有限公司
【摘要】【摘要】目的四价流感病毒裂解疫苗在三价疫苗中新增一个谱系的 B 型血凝素抗原,单向免疫扩散法(single radial immunodiffusion,SRID)是否能准确测定四价疫苗中两种谱系的B型血凝素抗原含量。
方法采用江苏金迪克生物技术有限公司研制的四价流感病毒裂解疫苗,运用SRID进行测定。
结果在正常检测范围内(10～40μg/ml)比较标准品抗原对照、单价样品、B1+B2单价样品的血凝素测定值差异无统计学意义(P＞0.05)。
在10～160μg/ml检测范围内分别以三价苗和固定浓度30μg/ml的B型血凝素为基质稀释待测的另一B 型血凝素,与该B型不同稀释度的单一血凝素测定结果进行比较,以测定两种B 型流感血凝素有无互相干扰。
在流感疫苗血凝素检测范围10～40 μg/ml之内时,检测的血凝素含量与沉淀环直径呈正比关系(决定系数R2=0.998),而在10～160 μg/ml检测范围内,三元线性回归方程拟合度最高(决定系数R2=0.999)。
结论单向免疫扩散法检测B1和B2毒株的血凝素抗原在10～40μg/ml和10～160μg/ml范围内和存在其他三种血凝素或另一B型血凝素时,均未见互相干扰。
【期刊名称】中华实验和临床病毒学杂志
【年(卷),期】2018(032)006
【总页数】6
【关键词】【关键词】四价流感病毒裂解疫苗；B型血凝素含量；单向免疫扩。
2024年广东省广州市中考二模语文试题(解析版)
2023学年第二学期语文科九年级第二次学业水平综合测试一、选择题8分1. 下列词语中，每对加点字的读音都相同的一项是（）A. 行头/行业拜谒/声嘶力竭B. 伫立/贮存劳累/伤痕累累C. 啜泣/辍学喷薄/日薄云天D. 证券/豢养禁锢/忍俊不禁【答案】C【解析】本题考查读音。
A.xíng/háng，yè/jié；B.zhù/zhù，lèi/lěi；C.都读chuò，都读bó；D.quàn/huàn，jìn/jīn；故选C。
2. 下列词语中，没有错别字的一项是（）A. 秘决雕梁画栋舵手险象叠生B. 惦记不屑置辩亵渎哗众取宠C. 意蕴栩栩如生幅射不径而走D暇想变换多姿渊博身临其境【答案】B【解析】考查字形。
A.秘决——秘诀，险象叠生——险象迭生；C.幅射——辐射，不径而走——不胫而走；D.暇想——遐想，变换多姿——变幻多姿；故选B。
3. 下列句子中，加线词语使用最恰当的一项是（）A. 为了尽快找到一本论文集或目标参考书，我经常会在学校图书馆里漫不经心地浏览。
B. 这幅油画作品在勾勒轮廓的同时施以平涂的色彩，着色相得益彰，有点类似中国画。
C. 这出原创音乐剧中，每一首歌的歌词都富有创新意识，多首歌已成为炙手可热的单品。
D. 中西方“庙会”尽管表现方式大相径庭，但其形式之美，及其个体冀望都是相通的。
【答案】D【解析】本题考查成语运用。
A．漫不经心：随随便便，不放在心上。
与前半句“为了尽快找到一本论文集或目标参考书”说法不符；B．相得益彰：指互相帮助，互相补充，更能显出各自的长处。
用来形容“着色”不合适；C．炙手可热：手一挨近就感觉热，形容气焰很盛，权势很大。
不能形容歌曲受到追捧，使用有误；D．大相径庭：形容彼此相差很远。
使用正确；故选D。
4. 下列句子中，没有语病的一项是（）A. 大量的历史文献和法律文件，强烈地证明钓鱼岛及其附属岛屿都是中国的固有领土。
新冠疫苗质量生物检测方法
新冠疫苗质量生物检测方法
1. 酶联免疫吸附测定法，这就好像是免疫系统的“侦探”，能精准找出新冠疫苗中的特定成分呢！比如检测疫苗中是否有特定的蛋白存在。
2. 实时荧光定量 PCR 检测法，哎呀，这就如同一个超厉害的“追踪器”，能快速锁定疫苗里的核酸信息呀！像确定疫苗的基因片段是否符合标准。
3. 胶体金免疫层析法，哇塞，这简直就是快速分辨疫苗质量的“小能手”呀！比如可以迅速看出疫苗有无异常。
4. 中和试验法，这可类似于一场疫苗和病毒的“战斗”呢！看疫苗是否能有效中和病毒，保证质量哦！
5. 细胞培养法，就好像为疫苗创造了一个“成长乐园”，观察它在细胞环境中的表现，从而判断质量呢！比如看看疫苗对细胞有没有不良影响。
6. 间接免疫荧光法，这不就是照亮疫苗的一盏“明灯”嘛！能够清晰显示疫苗中的相关物质呀！像发现疫苗中是否有异常反应。
7. 血凝抑制试验法，嘿，这就像是给疫苗设置的一道“关卡”，只有质量好的才能通过呢！比如检测疫苗对血凝的作用是否正常。
8. 蛋白印迹法，这真像给新冠疫苗质量做的一个“深度检查”！能确切地知道疫苗中特定蛋白的情况呢！像是不是存在一些无法达标的蛋白。
我的观点结论就是：这些新冠疫苗质量生物检测方法都各有其独特的作用和重要性，它们共同为我们的疫苗质量保驾护航，让我们能更放心地接种疫苗，抵御新冠病毒呀！。
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封面 文件名称 Doc.Name 流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量检测方法验证方案 版本号
Version 07/00
文件编号 Doc.Code 起草人 Author 提交日期
SubmitDate 文件类型 Doc.Type 验证\（程序、方法）验证方案\分析方
法\质量检定室 起草日期 CreateDate 生效日期
PublishDate 起草部门 CreateDept. 质量检定室 有效期至
Valid until 分发部门 DistribDept. 疫苗检定室;质量保证部 复审日期
ReviewDate 支持资料 SupportInfo. 验证,《药品生产质量管理规范（GMP）》，《中国药典（2015版）》第三部
支持资料编号 SupportInfo.No 备注信息 Comment
审批信息 Approval information No 审批人 Appr.Name 审批人部门 Approver Department 审批人作用 Approver Function 审批人签名 Appr. Signature 审批日期 Appr.Date
1 杨红育 质量检定室 内容审核(质量检定室主任)
2 褚东琳 质量保证部 内容审核(质量保证部QA) 3 张波 质量保证部 内容审核(质量保证部验证专员) 4 高恩鹏 质量保证部 内容审核(质量保证部验证组组长) 5 姜崴 质量保证部 内容审核(质量保证部经理)
长春生物制品研究所有限责任公司 Changchun Institute of Biological Products Co.,Ltd. 文件编号：VP AM-05-012-2017-01 版本号：07\00
[第1页\共27页] 1.目的Objective： 本验证方案的目的是为了评价流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量测定的专属性，线形，准确性、重复性和中间精密度参数，以满足流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量测定的检测要求。验证的检测结果将按照该验证方案进行记录。 2.范围Scope： 本次验证针对流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量测定的方法学验证，检测流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量测定方法的专属性，线形，准确性、重复性和中间精密度。 3.职责Responsibility：
人 员 验证管理委员会职责 部 门/ 职 务 职 责
姜崴 验证领导小组组长 质量保证部 经理/质量受权人 1.负责监督验证项目的实施，督促验证工作进展。 2.审核、批准验证方案、验证报告及验证合格证书、现场验证合格证。 3.批准验证相关变更、偏差、CAPA报告。
顾建阳
验证领导小组组员 生产管理部 经理 1.负责监督公司各生产科室/部门验证工作的实施，督促验证工作进展，协调公司内资源。 2.负责审核验证方案、验证报告。 3.参与验证工作相关变更、偏差的调查及评估。 邱野 质量保证部 副经理 杨红育 质量检定室 主任 1.为本部门验证工作总负责人，全面负责监督本科室/部门验证工作的实施，督促验证工作进展，协调公司内资源。 2.负责审核本部门验证方案、验证报告。 3.参与验证工作相关变更、偏差的调查及评估。 4.负责组织车间验证实施小组并明确各组员岗位及职责。
部门验证项目总负责人/实施负责人
孙国业 工程服务部经理 负责公用设施、系统的日常运行、维修管理工作及设备管理工作，配合验证测试工作的实施，提供相关的设备编号和验证所需材料。 柏从 验证实施小组质量检定室 1.协助验证工作实施，负责人对验证实施小文件编号：VP AM-05-012-2017-01 版本号：07\00 [第2页\共27页] 副组长 验证管理员 组人员进行日常管理。 2.负责整理、上报相应范围内变更及偏差申请。 3.协助验证工作实施负责人保管和保护验证项目过程中使用验证测试设备。 4.协助审核以及验证项目相关变更、偏差等文件，并参与变更、偏差的评估及调查。 5.负责提出验证耗材的申请计划。
褚东琳
验证实施小组质量监督员 质量保证部生产监控岗 1.监督（再）验证过程中出现的偏差、变更及CAPA的运行情况。 2.审核及参与（再）验证工作相关变更、偏差的调查及评估。 3.协助审核科室/部门相关标准操作规程和管理规程，保证SOP与（再）验证结果一致。 4.协助负责审核（再）验证方案及所有再验证方案等及（再）验证报告。 5.负责对车间环境日常监测数据及报告进行放行管理。 6.负责车间（再）验证工作中各专项技术培训效果的跟踪确认。
邱璐 质量检定室 质量管理员
张波 验证实施小组技术专员 质量保证部 验证专员 1.参与验证工作相关变更、偏差的调查及评估。 2.协助起草验证方案、会同科室/部门验证实施小组相关成员起草验证报告、验证合格证书及现场验证合格证。 3.负责制定验证项目中培训计划及各专项技术培训实施，并对培训效果进行评估。 4.协助验证工作实施负责人完成验证测试计划，并指导相关测试的实施。
高恩鹏 验证实施小组技术专员 质量保证部 验证组长 1.负责监督公司各生产科室/部门验证工作的实施，督促验证工作进展，协调公司内资源。 2.负责审核验证方案、验证报告。 3.参与验证工作相关变更、偏差的调查及评文件编号：VP AM-05-012-2017-01 版本号：07\00 [第3页\共27页] 估 4.负责验证工作的日常组织管理。
邱璐
验证实施小组 质量检定室 文件管理员 1.本次验证工作进行过程中，负责所有验证工作相关的验证文件登记、入账及临时保存。 2.本次验证工作进行过程中，负责验证测试
设备及验证耗材的进出管理。 3.本次验证工作进行过程中，负责建立验证实施小组人员培训档案，并收集培训材料、登记表及培训效果评估记录。
张波 质量保证部 验证项目文件/设备管理员
1.负责本次验证结束后对验证期间的培训档案、文件进行归档、保存。 2.负责验证设备的入库、校准、借入、归还管理。
闫素志 质量检定室 验证实施人员 1.协助起草本次验证方案及验证报告。 2.参加相关专业验证技术培训或技术讨论会议的责任，并参加对培训效果的考核。 3.负责验证实施过程中的调试及测试工作，并填写原始测试记录，按要求出具检测报告等工作。 4.负责对验证工作中产生的变更及偏差及时申请，填写变更及偏差申请单。
邹墅 质量检定室 验证实施人 1.协助起草本次验证方案及验证报告。 2.参加相关专业验证技术培训或技术讨论会议的责任，并参加对培训效果的考核。 3.负责验证实施过程中的调试及测试工作，并填写原始测试记录，按要求出具检测报告等工作。 4.负责对验证工作中产生的变更及偏差及时申请，填写变更及偏差申请单。 4. 术语和定义 Terms and definitions： 在下面的表格中规定了本方案中使用的缩略语。 文件编号：VP AM-05-012-2017-01 版本号：07\00 [第4页\共27页] 缩略语 定义
CCIBP 长春生物制品研究所有限责任公司 GMP 药品生产质量管理规范 SOP 标准操作程序 SFDA 国家食品药品监督管理局 5.法规和指南 Regulations and guidelines: EudraLex-卷4 GMP指南 (SFDA) GMP(2010年修订版) 药品生产验证指南（现行版） 中国药典（2015版）三部
6.方法验证策略描述 : 6.1 方法描述 流感病毒裂解疫苗的卵清蛋白含量测定采用酶联免疫定量检测法检定。抗体结合到某种固相载体表面，保持其免疫活性，并且抗体与某种酶连接成酶标抗体，这种酶标抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗原）和酶标抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。试剂盒中酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度 在450nm处测得吸光度值，用标准品做标准直线计算出流感病毒裂解疫苗的卵清蛋白含量。
6.2 方法特点 6.2.1试剂盒： 卵清蛋白酶联免疫定量检测试剂盒 6.2.2试剂盒内容物 96孔板，洗液（10×），样品稀释液，卵清蛋白标准品1（20.0ng/ml），卵清蛋白标准文件编号：VP AM-05-012-2017-01 版本号：07\00 [第5页\共27页] 品2（10.0ng/ml），卵清蛋白标准品3（5.0ng/ml），卵清蛋白标准品4（2.5ng/ml），卵清
蛋白标准品5（1.25ng/ml），卵清蛋白标准品6(0.625ng/ml），卵清蛋白标准品7（0.31ng/ml），卵清蛋白阳性对照，酶标抗体，底物工作液。终止液。
6.2.3 用卵清蛋白酶联免疫定量检测试剂盒检测到参数应满足如下条件，才能视试验结果有效
参数 标准 标准品1，20ng/ml的OD值 ＞1.5 标准品7，0.312 ng/ml的OD值 ＜0.5 R值 ≥0.99 阳性对照品 5ng/ml≤X≤10ng/ml 样品含量 0.312ng/ml≤X≤20ng/ml
6.3 方法验证策略 6.3.1专属性，准确度的验证 根据中国药典（2015版）三部，流感病毒裂解疫苗成品卵清蛋白含量应不高于500 ng/ml，根据长春生物制品研究所流感裂解疫苗成品内控质量标准，卵清蛋白含量应不高于100 ng/ml，鉴于长春生物制品研究所流感裂解疫苗历年成品卵清蛋白含量不高于50 ng/ml和卵清蛋白酶联免疫定量检测试剂盒中最大标准品浓度为20 ng/ml,在最终4倍稀释样品背景下卵清蛋白的目标浓度为12.5 ng/ml,,因此,用下表中所列的样品背景中浓度级卵清蛋白溶液来进行专属性、准确性的验证。 验证项目 目标浓度的百分比 卵清蛋白浓度 准确度 80% 10.0 准确度 100% 12.5 准确度 120% 15.0 专属性 4倍稀释的样品OD值/0 ng/ml卵清蛋白标准的OD值 6.3.2 重复性，中间精密度的验证 6.3.2.1重复性验证方法：取流感病毒裂解疫苗1批，同一分析人员分别取6次样品，在同一标准曲线下分别测定6次。按《流感病毒裂解疫苗卵清蛋白含量检测标准操作规程》