口蹄疫专项培训--口蹄疫概述及特点、口蹄疫病毒类型、侵入途径、理化性质

二 口蹄疫病毒

病毒粒子装配与成熟
随着病毒感染细胞胞浆中病毒蛋白和囊泡中RNA的积累，病毒蛋白的 加工和部分细胞元件的积累，病毒粒子开始装配和成熟。

遗传变异
口蹄疫病毒有高度变异性，有7个血清型，血清型之间互不交叉保护，有 多个亚型和变异毒株，以及不计其数的新分离毒株。抗原多样性使得 口蹄疫免疫预防越来越困难，世界各地采用有限的疫苗株防疫大量的 田间流行病毒。免疫效果不佳是预防异变RNA病毒的最大挑战。口蹄 疫病毒没有独立自主的繁衍增殖体系，必须依赖宿主，利用宿主细胞 部分功能复制繁衍，病毒自身核酸物质不断遗传稳定的功能，所以病 毒快速大量繁殖，在生存环境中优胜劣汰，从而决定了病毒的遗传变 异多样性。
二 口蹄疫病毒


分类：
口蹄疫病毒属微RNA病毒科，包括46个种，分属于26个属。 血清型：A、O、C 、SAT1、SAT2、SAT3、亚洲1。

口蹄疫病毒形态结构和理化性质。
1、电子显微镜观察，口蹄疫病毒颗粒呈圆形，表面光滑，直径为2730nm。病毒粒子无囊膜，呈二十面体对称，由蛋白衣壳包裹基因组 RNA组成核衣壳。采用X线晶体衍射技术对多个血清型病毒衣壳的精细 结构进行了解析，衣壳由60个VP1、VP2、VP3和VP4分子组成，其中 VP1~3位于病毒粒子表面，VP4位于内部，并有一个十四烷基基团共价 键链接到其氨基端。表面结构蛋白VP1、VP2和VP3立体结构相似，是 由8个链状β折叠桶组成，β折叠桶之间，由表面环结构所连接，表 面环含有病毒重要的表位。完整病毒粒子蔗糖密度梯度中的相对沉降 系数为146S，分子量为8.08×106u，完整病毒颗粒146S或75S空衣壳 在酸性、碱性或一定温度条件下降解为12S和5S粒子，降解后小分子 无免疫原性。
二 口蹄疫病毒

口蹄疫病毒无囊膜，由衣壳蛋白包囊核酸组成。所以对脂 溶性有机溶剂不敏感．对紫外线、蛋白酶和蛋白凝固剂有 一定抗性，但对pH比较敏感，pH大于9、小于6将迅速灭 活病毒，屠宰动物尸体酸化可以杀灭肌肉中病毒，但淋巴 结、骨髓等部位病毒不受影响。常用口蹄疫病毒灭活剂为 2％醋酸或食醋，0.2％柠檬酸，2％氢氧化钠，4％碳酸氢 钠。值得注意的是口蹄疫病毒在含有有机质的环境中对碘 制剂、季铵盐类、次氯酸和酚制剂有一定的抵抗力，实际 工作中应根据病毒理化特性选择正确的消毒剂。
临床症状
牛：潜伏期一般为24h-8天，表现为体温升高，精神萎顿， 食欲障碍，内唇，齿龈，舌面，颊部粘膜发生水疱，流涎呈 白色泡沫挂满嘴边，并串珠状滴下，鼻镜干涸，流脓性鼻涕， 眼角有黄白色排泄物，被毛粗乱。水疱破裂后形成浅表的， 边缘整齐的红色糜烂。有时舌面，口唇等处水疱连成一片， 整个舌粘膜脱落，舌呈鲜红色的柔嫩组织，病牛摇头不安， 痛苦万分，蹄叉发病形成跛形，蹄冠，蹄叉，蹄踵部皮肤发 生水疱，破溃后形成鲜红烂斑，有感染则化脓，坏死，可造 成蹄壳脱落，有时乳房上也出现水疱破溃后形成鲜红烂斑。 但一般呈良性经过，死亡率低。但牛的恶性口蹄疫可侵害心 肌，使死亡率提高。 羊：症状同牛，但比牛轻，主要是跛行。羔羊的死亡率 高。
一 口蹄疫概述
口蹄疫病毒类型
1、七个血清型：A、O、C、亚洲一型（Asial）、南非一型（SAT1）、南 二型（SAT2） 、南非三型（SAT3） 2、有多种亚型，其流行具有明显的地域性，其中A、O两型流行区域广泛 非
口蹄疫的危害
1、全世界每年因此病造成的直接经济损失达数百亿美元。口蹄疫爆发可使农场 破产，发病地区和国家畜牧业乃至整个国民经济遭受巨大打击。 2、中国是世界上猪、牛、羊养殖大国，根据国家统计局数据，2013年，中国肉 类总产量8535万吨，居世界第一位；奶类总产量3650万吨，居世界第三位； 如果口蹄疫病毒在中国流行，除口蹄疫本身引起的动物高发病率和死亡、钟 畜失去利用价值、患病期间肉和奶生产量降低、国家财政拨付大量资金补贴 宰杀疫区动物、发病地区的畜牧业面临奔溃的危险外，还会引起其他间接损 失，包括对肉品加工业、冷藏冷冻业、饲料业、皮革加工业等150种行业发展 将受到影响。
病理变化


本病的病理剖检不重要，重要的变化临床 上都看到了。 只有急性死亡的心肌变化，心包膜上有弥 散性和点状出血，心肌切面灰白色条纹相 间，似虎身上的斑纹，故称“虎斑心”。
主要特征


形态特征 理化待征 抵抗力 抗原性
形态特征

本病毒颗粒的直径为27-30nm。 口蹄疫病毒感染牛或豚鼠的水疱液中，发现2种补 反抗原。一种是可感染的病毒子；另一种为较小 的颗粒，直径7-8 nm，无感染性。这种较小的颗 粒具有优球蛋白特性，对热、酸和酶均较病毒子 稳定，病毒子在宿主细胞的胞浆内复制，常形成 晶体状排列。
二 口蹄疫病毒

口蹄疫病毒复制周期
口蹄疫病毒感染宿主细胞，需经过识别细胞表面 受体，与表面受体发生反应，侵入细胞，衣壳与 核酸分离，病毒基因组翻译，病毒基因组复制， 蛋白的成熟，病毒颗粒装配与成熟，复制出新一 代病毒颗粒等一系列过程，复制周期非常短，最 快可在3小时内复制出完整的病毒颗粒，对细胞造 成致死性病变，造成宿主细胞发生变圆、脱落和 崩解等形态变化，称之为细胞病变（CPE）含有69%蛋白质和31%RNA，病毒子的核酸分子 量为6.9×106，其RNA分子量为2.4×106-2.8×106。用石 炭酸处理能剥去病毒蛋白质外膜，而使单股RNA裸 露。 此核酸有感染性，能侵入细胞并复制出完全病毒。 病毒子沉降系数为140S，无RNA的空衣壳为75S， 其RNA有37S、20S、16S三种，无感染性的亚单位 颗粒为12S。
二 口蹄疫病毒

口蹄疫病毒蛋白
4种结构蛋白：包括VP4、VP2、VP3、VP1 8种非结构蛋白：Lpro蛋白、2A、2B、2C、3A、3B、3C、3D
1、VP1与病毒吸附、侵入、保护性免疫应答和血清型特异性有关，是研究最多 的结构蛋白 2、酸不稳定性不是微RNA病毒的共同特性，肠道病毒属病毒是极度耐酸的，仅 有口蹄疫病毒、心病毒和鼻病毒，病毒颗粒的衣壳对酸极不稳定，pH稍低于 中性即被灭活。口蹄疫病毒对pH敏感的特性，是病毒感染细胞，进入酸化内 涵体，衣壳解离释放RNA所必需，VP3蛋白的第142位组氨酸是病毒粒子解 离成五聚体的关键氨基酸。随着耐酸性毒株的分离鉴定，发现C型病毒和O型 VP1蛋白的N17D突变病毒耐酸能力増强，VP2的H145Y突变有助于提高病毒 耐酸能力，研究结果将有助于提高病毒的稳定性，改进疫苗生产和疫苗效力， 但有可能意外释放田间，造成更难消毒处理的流行毒株。此外，耐酸性变异 的研究也有助于研究病毒衣壳解离和释放RNA启动病毒复制机理的研究。
二

口蹄疫病毒
受体与吸附
1、口病毒主要感染牛、猪、羊等偶蹄动物，引起口腔、蹄冠、鼻镜、乳 头等上皮组织产生水疱。细胞培养时，病毒可以感染牛、羊和猪源细 胞、BHK－21细胞等易感细胞，而不感染灵长类动物源细胞，可见病 毒感染具有明显的细胞嗜性，这一特性与病毒和细胞受体相互识别和 作用有关。早期研究发现将病毒接种细胞，病毒迅速结合细胞，每个 组胞可以结合103－104个病毒，而且不同血清型的病毒竞争相同的胞 受体。采用胰蛋白酶处理病毒，会破坏病G－H环，病毒失去感染性， 表明病毒染细胞与病表的此环有关。人们在研究纤连蛋白 （ fibronectin）与细胞相互作用时发现，纤连蛋白上的RGD与细胞 表面的受体结合，细胞表面的纤连蛋白受体是一个大的糖蛋白家族， 属于1型糖蛋白，称之为整合素（ Intergen）后来被证明为口蹄疫病 毒的受体
抵抗力





本病毒对乙醚抵抗；在1molMgCl2中对热不稳定； 对酸敏感。根据口蹄疫病毒对酸的敏感性，肉品 可用酸化处理，利用肌肉后熟作用时所产生的微 量酸以杀死病毒； 病毒在PH7.0-7.5时十分稳定； 口蹄疫病毒对碱也很敏感，圈舍消毒通常应用 2%NaOH或KOH，或4%Na2CO3； 本病毒对化学消毒药的抵抗力较强，1：1000升汞、 3%来苏儿6小时不能杀死病毒，在1%石炭酸中5个 月，70%酒精中2-3天病毒尚存活。
口蹄疫
口蹄疫概述及特点、口蹄疫病毒类型、侵入途径、理化性质培训
一 口蹄疫概述


定义：口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄 动物的一种急性、热性、高度接触性传染 和可快速远距离传播的动物疫病。以口腔 粘膜和鼻、蹄、乳头等皮肤形成水疱和烂 斑为特征。 口蹄疫是世界卫生组织法定报告的动物传 染病之一，农业部将口蹄疫病毒列为一类 动物病原微生物。口蹄疫为一类疫病。
一 口蹄疫概述
口蹄疫特点：
一、易感动物种类繁多。重要家畜如猪、牛、羊等都易感，牛最易感，发病率几 乎达到100%；其次是猪；再次是绵羊山羊等。 二、变异性极强。该病毒有7个血清型，型间不能产生交叉免疫，绵羊防治等于7 钟不同的传染病。同型内不同毒株的抗原性也有不同，而新毒株又不断出现，每 出现一种新病毒，疫情就出现一次新高潮。 三、感染性和致病力特别强。如，牛只要吸入10个感染单位的病毒就可发病，而 病畜的排毒量又特别大，一头病猪每天仅从呼吸道排出的病毒就高达108个感染 单位。一头病猪一天呼出的病毒如果全被牛吸入，可使1000万头牛发病。 四、多种传播方式和传染途径。不但可通过与病畜接触传播，还可通过含毒空气 传播。气象条件合适时，病毒可向下风向传播几十千米甚至上百千米的距离。 五、潜伏期短，发病急，动物感染病毒后最快十几小时就可以发病排毒，处于潜 伏期的动物、发病动物及持续感染动物均可引起易感动物发病。 六、动物机体对口蹄疫病毒的免疫应答程度较低。免疫注射动物，甚至发病后康 复动物，再次受到同源病毒攻击时只能保持不再发病，其免疫系统不能完全阻断 病毒感染。
二

口蹄疫病毒
核酸复制
正单股病毒RNA基因组在细胞的膜结构上复制，大多数微 RNA病毒基因组复制的膜是如何形成的还不清楚。 口蹄疫病毒复制膜来源于早期分泌途径的前高尔基体间隔。 以RNA为模板，尿素酸化的VPg蛋白质引物引导下，复制 负链RNA，再以负链RNA为模板合成正股RNA链，在该 过程中常形成双股RNA的复制中间体（RI）。以负链为模 板合成多股正链RNA和病毒蛋白的积累，包装之后形成子 代病毒。