手术室空气微生物监测方法
医院的环境卫生学监测
医院的环境卫生学监测医院的环境卫生学监测包括对空气、物体表面、医护人员手、医疗器材和使用中的消毒液等的监测。
应定期对手术室、重症监护病房/室（ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、治疗室、换药室、微生物室等重点部门进行环境卫生学监测，主要是通过细菌培养检测菌落总数。
当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素有关时，应及时进行监测并鉴定流行菌株。
一、新的医院环境分类及菌落总数卫生标准1.1类环境为采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术部和其他洁净场所，如层流洁净手术室，层流洁净病房。
空气菌落总数应≤4CFU/皿，30分钟，≤150CFU/m3。
物体表面≤5CFU/cm2。
2.2类环境为非洁净手术部（室），如普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、导管室、血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区、重症监护病房等。
空气菌落总数应15分钟≤4CFU/皿。
物体表面≤5CFU/cm2。
3.3类环境为母婴同室，消毒供应中心的检查包装灭菌区和物品存放区，血液透析中心（室），其他普通住院病区等。
空气菌落总数应5分钟≤4CFU/皿。
物体表面≤10CFU/cm2。
4.4类环境为普通门（急）诊及其检查室、治疗室、注射室、换药室、传染病科门诊及病房。
空气菌落总数应5分钟≤4CFU/皿。
物体表面≤10CFU/cm2。
二、空气微生物污染检查方法按国标（GB 50333）方法进行。
（一）采样时间1类环境在洁净系统自净后于从事医疗活动前采样。
2、3、4类环境在消毒或规定的通风换气后和从事医疗活动前采样。
1类环境可采用培养平皿暴露法和空气采样器法。
（二）培养平板暴露法1.室内面积＞30cm2者设内，中，外对角线三点，内、外点应距墙壁1m。
2.室内面积＞30cm2者设四角和中央五点，四角应距墙壁1m用直径90mm的平皿采样，高度为距地面0.8～1.5m暴露时间为2类环境15分钟，3类及4类环境5分钟。
空气微生物检测实验设计
空气微生物检测实验设计一、实验背景空气中存在着各种各样的微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
这些微生物可能会对人类健康、环境质量和工业生产等方面产生重要影响。
例如，在医院、食品加工厂、实验室等场所，空气中的微生物污染可能导致疾病传播、食品变质和实验结果误差等问题。
因此，对空气微生物进行检测和监测具有重要的意义。
二、实验目的本实验的目的是检测空气中微生物的种类和数量，评估空气质量，并为采取相应的控制措施提供依据。
三、实验原理空气微生物检测通常采用培养法和非培养法。
培养法是将空气中的微生物采集到培养基上，在适宜的条件下培养，然后通过观察菌落形态、数量和特征来鉴定微生物的种类和数量。
非培养法包括基于分子生物学的方法（如 PCR 技术）、显微镜观察法等。
本实验采用培养法，利用空气采样器将空气中的微生物收集到琼脂培养基上，经过一定时间的培养，计算菌落形成单位（CFU）来表示微生物的数量。
四、实验材料和设备1、培养基营养琼脂培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基（用于真菌检测）2、采样器撞击式空气微生物采样器3、培养箱恒温培养箱（设定温度 37℃用于细菌培养，28℃用于真菌培养）4、无菌器材无菌平皿移液器无菌吸管5、其他器材酒精灯记号笔计数器五、实验步骤1、培养基的制备按照培养基的配方准确称取所需的成分，溶解于适量的蒸馏水中。
加热至完全溶解，调节 pH 值至合适范围。
分装到无菌平皿中，约 15-20ml 每皿，待冷却凝固后备用。
2、采样点的选择根据检测场所的特点和目的，选择具有代表性的采样点。
例如，在医院可以选择病房、手术室、走廊等；在食品加工厂可以选择加工车间、包装间、仓库等。
3、采样操作打开撞击式空气微生物采样器，将采样器放置在选定的采样点，距离地面约 15 米的高度。
设置采样时间和流量，通常采样时间为 5-15 分钟，流量为 100-200L/min。
启动采样器，让空气通过采样器撞击到培养基表面，完成微生物的采集。
空气培养方法
空气培养方法空气中存在着各种细菌，而细菌培养可以帮助我们检测出这些微生物。
以下是细菌培养的具体流程和注意事项：流程：1.领取培养基并放入冰箱保存。
2.关闭门窗，使用紫外线进行1小时消毒。
3.操作者洗净双手，取出培养基进行取样。
4.打开培养基，将其置于距离地面80-150cm高度的平面上。
对于室内面积≤30㎡的空间，取对角线上的3个点，选择中心点和两端距离墙壁1m处的点。
对于室内面积＞30㎡的空间，取东西南北中5个点，其中东西南北点距离墙壁1m。
将培养基盖打开，盖子向下扣放于平板旁。
5.对于手术室、分娩室、胃镜室、门诊人流室（面积＞30㎡），同样取东西南北中5个点。
对于口腔科、母婴同室（面积≤30㎡），取内、中、外对角线上的3个点。
手术室和分娩室暴露15分钟后盖上培养皿，口腔科、母婴同室、胃镜室和门诊人流室暴露5分钟后盖上培养皿，并及时送检。
注意事项：1.取培养基时，应用手托住底座，避免污染。
2.打开培养基时，盖子应向下扣放于平板旁。
3.取样后应盖好培养基盖子，方可离开治疗室。
4.送检时间不得超过6小时。
若样品保存于2-8℃条件下，送检时间不能超过24小时。
5.送检过程中如盖子不慎打开，应重新留取标本送检。
另外，我们还可以通过物体表面培养来检测细菌。
具体流程如下：流程：1.到检验室取细菌培养试管，并向其中放入10ml生理盐水。
2.使用消毒液擦拭治疗台面。
3.用浸有生理盐水的无菌棉签在50×5cm的无菌范围内横竖往返各涂抹五次，并随之转动棉签。
对于物体表面面积＜100c㎡时取全部，≥100C㎡时取100C㎡。
4.用酒精灯来回烧烤瓶口、瓶塞三次。
5.剪去手触部分，将无菌棉签放入盛有10ml生理盐水的细菌培养试管中，并及时送检。
注意事项：1.采样应在台面的工作区或需重点监测的区域进行。
2.送检时间不得超过6小时。
若样品保存于1-4℃条件下，送检时间不能超过24小时。
手术室院感检查标准
手术室院感检查标准一、引言手术室是医院中最重要的环境之一，对于手术室的院感检查标准的制定和执行，可以有效降低院内感染的风险，保障患者的安全和健康。
本文旨在详细描述手术室院感检查的标准内容，以确保手术室的卫生和安全。
二、手术室环境检查1. 空气质量检查：- 使用空气质量检测仪器，检测手术室内空气中的微生物浓度和颗粒物含量。
- 根据相关标准，手术室内的微生物浓度应控制在一定范围内，颗粒物含量应低于规定标准。
2. 温湿度检查：- 使用温湿度计检测手术室内的温度和湿度。
- 手术室内的温度应保持在适宜的范围，通常为20-25摄氏度；湿度应保持在30%-60%之间。
3. 光照检查：- 检查手术室内的照明设备是否正常工作，光照是否均匀。
- 手术室内的照明应充足，无暗角和阴影，以保证医生操作的准确性和安全性。
4. 噪音检查：- 使用噪音测量仪器检测手术室内的噪音水平。
- 手术室内的噪音应控制在一定范围内，以提供良好的工作环境。
三、手术室设备检查1. 手术台和手术灯：- 检查手术台的稳定性和高度是否适宜，手术灯的照明是否均匀。
- 手术台应稳固可靠，高度可调，手术灯应提供充足的照明，无闪烁和阴影。
2. 麻醉设备：- 检查麻醉设备的工作状态和清洁程度。
- 麻醉设备应正常工作，清洁无污染，材料应符合相关标准。
3. 手术器械：- 检查手术器械的完整性和清洁程度。
- 手术器械应完整无损，清洁无污染，材料应符合相关标准。
4. 消毒设备：- 检查消毒设备的工作状态和消毒效果。
- 消毒设备应正常工作，消毒效果应符合相关标准。
四、手术室卫生检查1. 地面清洁：- 检查手术室地面的清洁程度和无尘情况。
- 手术室地面应保持清洁无尘，使用专用清洁剂进行清洁。
2. 墙面和天花板清洁：- 检查手术室墙面和天花板的清洁程度和无尘情况。
- 手术室墙面和天花板应保持清洁无尘，使用专用清洁剂进行清洁。
3. 空调和通风系统清洁：- 检查手术室空调和通风系统的清洁程度和正常工作情况。
检验科微生物室院感监测标准操作程序文件
检验科微生物室院感监测标准操作程序文件一、【环境采样的一般原则】1、具有代表性和一定的数量2、送检时间＜6h3、分析样本污染的来源（是来源于环境，病室空气、病人本身）二、【空气采样及检查方法】1、监测对象：手术室、治疗室、抢救室、病房、换药室等2、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动之前进行。
3、采样的高度：与地面垂直高度80～150cm。
4、布点方法房间面积≤30m2采三点（内、中、外对角线三点，内、外距墙1米。
）房间面积＞30m2采东、西、南、北、中，其中东、西、南、北距墙1米。
5、采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检。
6、检验方法将采样平板置37℃培养箱，24小时观察结果并计数5个（3个）平板中的平均菌落数。
7、结果计算公式：A:平板面积，cm2； T为平板暴露时间，min； N为平均菌落数,cfu/平皿。
三、【物体表面采样及检查方法】1、采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。
2、采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。
3、采样方法用5cm×5c m 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。
门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。
4、检验方法将每个采样管敲打80次，10倍递次稀释。
每个稀释度，分别取1ml放灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，置37℃温箱，培养24小时观察结果，每个稀释度作平行样品2～3个。
取菌落数为30～300个的平板计数，求出平均菌数。
结果计算四、【医务人员手采样及检查方法】1、采样时间：在接触病人，从事医疗活动前进行采样。
2、采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样的试管内送检。
院感空气培养的标准
院感空气培养的标准
1. 样本采集，在特定的时间和地点采集空气样本，通常会选择
高风险区域进行采样，如手术室、重症监护室等。
2. 样本处理，将采集到的空气样本通过特定的方法进行处理，
通常是通过吸附在培养基上或者通过过滤器进行捕捉。
3. 培养条件，将处理后的样本进行培养，通常会在适当的温度、湿度和氧气条件下进行培养，以促进微生物的生长。
4. 结果解读，对培养后的结果进行解读，通常会观察培养基上
是否有细菌、真菌等微生物的生长，根据生长的数量和类型来判断
空气中微生物的污染情况。
5. 标准参考，空气培养的标准通常会参考相关的法规和标准，
如医院感染控制相关的法规和指南，以确保采样和培养的过程符合
规范和要求。
总的来说，院感空气培养的标准涉及到样本采集、处理、培养
条件、结果解读和标准参考等多个方面，以确保空气样本的采集和培养过程符合规范，并能够准确反映空气中微生物的污染情况。
空气培养ppt课件
THANKS
感谢观看
研究新型培养基和优化培养条件，以 缩短微生物的培养时间，提高检测效 率。
自动化与智能化
引入自动化和智能化技术，实现空气 培养的自动化采样、检测和数据分析 ，提高工作效率。
拓展应用领域
探索空气培养技术在其他领域的应用 ，如环境监测、食品安全、生物安全 等领域。
空气培养与其他技术的结合应用
Hale Waihona Puke 与分子生物学技术结合01
利用分子生物学技术对空气中的微生物进行鉴定和分类，提高
检测准确性和分辨率。
与质谱技术结合
02
利用质谱技术对培养出的微生物进行代谢产物分析，以更深入
地了解微生物的生理特性和代谢途径。
与传感器技术结合
03
开发基于传感器技术的便携式空气培养设备，实现快速、现场
检测。
空气培养在未来的应用前景
公共场所监测
环境科学
通过空气培养研究环境中 的微生物群落结构、生态 分布和演化规律等。
毒理学研究
通过空气培养获取有毒有 害气体和颗粒物样品，用 于毒理学研究和实验。
03
空气培养的实验方法
实验前的准备
实验器材
准备无菌培养皿、灭菌棉签、灭 菌镊子、恒温培养箱等。
实验试剂
准备营养琼脂培养基、生理盐水等 。
实验对象
空气培养的目的
检测空气中的微生物 污染情况，评估环境 卫生状况。
研究空气中微生物的 分布和传播规律，为 预防和控制感染提供 科学依据。
监测空气洁净度等级 ，控制洁净室的微生 物数量。
空气培养的原理
空气培养基于微生物在空气中存活和 传播的原理，通过收集空气中的微生 物，在特定的培养条件下进行培养， 观察微生物的生长情况。
沉降菌检测标准
沉降菌检测标准
沉降菌检测标准是针对医疗保健环境中空气微生物污染的检测方法。
它通过将一定量的空气通过培养基或其他介质过滤，使空气中的微生物沉降到介质表面，然后对沉降的微生物进行计数和鉴定，以评估空气微生物污染的程度。
沉降菌检测标准通常包括以下几个方面：
1. 采样点的选择：应根据医疗保健环境的特点和污染源的位置选择合适的采样点。
一般来说，采样点应选择在人员活动频繁、通风不良或容易产生微生物污染的区域。
2. 采样时间和频率：采样时间应选择在人员活动较少的时段进行，以避免人员活动对采样结果的影响。
采样频率应根据实际情况确定，一般建议每周至少进行一次采样。
3. 采样方法：常用的采样方法包括平板沉降法、空气撞击法等。
其中，平板沉降法是最常用的方法之一，它通过将一定量的空气通过培养基或其他介质过滤，使空气中的微生物沉降到介质表面，然后对沉降的微生物进行计数和鉴定。
4. 结果判定：根据国家相关标准，医疗保健环境中的沉降菌数不应超过一定的限值。
一般来说，对于手术室、ICU等高风险区域，沉降菌数应控制在每立方米空气中不超过10个；对于普通病房等中低风险区域，沉降菌数应控制在每立方米空气中不超过50个。
空气培养的采样方法
空气培养的采样方法在我们的日常生活和工作环境中，空气质量的好坏对我们的健康有着至关重要的影响。
为了评估空气质量，了解空气中微生物的种类和数量，空气培养采样是一种常用且有效的方法。
下面，就让我们一起来详细了解一下空气培养的采样方法。
空气培养采样的目的是收集空气中的微生物样本，以便在实验室中进行分析和检测。
通过对采样结果的分析，可以判断环境中是否存在细菌、真菌等微生物的污染，从而采取相应的措施来改善空气质量，保障人们的健康。
在进行空气培养采样之前，需要做好充分的准备工作。
首先，要选择合适的采样地点。
一般来说，选择人员活动频繁、通风不良或者容易受到污染的区域，如医院病房、手术室、食品加工车间、学校教室等。
其次，要准备好采样所需的设备和材料，包括采样器、培养基、无菌棉签、无菌容器、酒精灯、酒精等。
目前，常见的空气培养采样方法主要有以下几种：沉降法沉降法是一种较为简单的空气采样方法。
其原理是利用空气中的微生物自然沉降到培养基表面，经过一定时间的培养后，计算培养基上的菌落数，从而推断空气中微生物的含量。
具体操作方法如下：将装有培养基的平皿放置在采样地点，打开平皿盖，使其暴露在空气中一定时间，一般为 5 分钟至 30 分钟不等。
采样结束后，盖上平皿盖，将平皿带回实验室，在适宜的温度下培养一定时间，通常为 24 小时至 48 小时，然后观察并计数菌落。
沉降法操作简便，成本较低，但由于其依赖微生物的自然沉降，采样效率相对较低，容易受到气流、温度等环境因素的影响，因此结果的准确性相对较差。
撞击法撞击法是利用采样器内部的加速装置，使空气以高速撞击到培养基表面，从而将空气中的微生物采集到培养基上。
常见的撞击式采样器有安德森采样器和狭缝式采样器。
以安德森采样器为例，其工作原理是将空气吸入采样器，通过多级筛孔，使气流中的微生物逐级撞击到不同孔径的培养基上。
在使用撞击法进行采样时，首先要根据采样环境和要求选择合适的采样器和培养基。
医院感染监测方法
1 医院感染监测相关1.1空气培养检测标准操作程序临床意义：医院是病原微生物聚集的场所，患者和病原携带者体内的微生物能以多种形式排出体外污染周围环境，如不及时将其杀灭，可能导致医院感染的发生，对其他患者甚至医护人员造成危害。
手术室空气中细菌可能直接沉降到伤口上，或沉降到医务人员的手和器械上，能引起伤口感染。
监护病房中病人抵抗力极差，易发生呼吸道和其他部位感染，定期监测可及时发现消毒和通风系统存在的问题。
原理：用9 ㎝直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检。
置于37℃培养箱孵育，按照相应公式计数菌落总数（N）。
采样原则：1. 采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。
2. 采样高度：与地面垂直高度80～150cm。
3. 布点方法：室内面积≤30 ㎡，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙1m处各取一点；室内面积>30m2，设东、西、南、北、中各5 点，各个点均距墙1m。
4. 采样方法：用9 ㎝直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检培养。
检查原则：采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24 小时。
菌落总数计算：空气细菌菌落总数（cfu/m3）＝50000×N/AT式中：A---平板面积，cm2；T---平板暴露时间，min;N---平均菌落数，cfu/m3规定使用9cm 平板，暴露5min，所以经换算，公式简化为：空气细菌菌落总数（cfu/m3）＝157.25×N报告结果和解释：1. 有细菌生长：参照菌落总数计算公式进行计算。
2. 无细菌生长：置于35℃温箱继续孵育24 小时后再观察结果。
3. 若培养48h 后仍无细菌生长，报告：无菌生长。
注意事项：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。
1. 溶血性链球菌检查：参照《细菌鉴定的标准操作程序执行》。
2. 沙门氏菌检查：参照《细菌鉴定的标准操作程序执行》。