消化道寄生虫的病原检查

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消化道寄生虫的病原检查

对消化道寄生虫感染或寄生虫病的病原检查,主要是根据寄生虫排离阶段可随粪便排出体外,如蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片,原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊,以及某些节肢动物;有些虫体如雌性蛲虫可在肛周产卵,牛带绦虫孕节片主动从肛门逸出过程中被挤破、虫卵可散落在肛周,因而可从肛周检获虫卵或虫体。所以,采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫是对消化道寄生虫检查的主要手段。要取得粪便检查的准确结果,必须注意:

①保证粪便新鲜,送检时间一般不超过24小时,尤其对原虫滋养体检查,必须在粪便排出后半小时内进行,或暂时保存在35℃~37℃条件下待查;

②盛粪便的容器须干燥、洁净,无尿液或水混入,以及无药物、泥土和杂质污染;

③容器外贴有标签,注明受检者姓名和受检目的等;

④受检粪量一般为5~10g (约姆指末节大小),若要求作粪便自然沉淀或血吸虫毛蚴孵化,受检粪量一般不少于30g,检查蠕虫成虫或绦虫节片则留检一日内全部粪量;

⑤要严格按照粪检程序进行操作,特别是镜检时要熟悉各病原体形态特点并遵顺序观察的原则,以免漏检。人体常见寄生虫的形态特征及鉴别见下表。

人体常见寄生虫卵的鉴别

蠕虫卵与异物的区别

粪便直接涂片法检查消化道寄生虫

适用于检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法虽简便,由于取材较少,故检出率较低,若连续涂片3 张,可提高检出率。

1.检查蠕虫卵

在洁净的载玻片中央,滴一滴生理盐水,用竹签或牙签挑取米粒大小的粪便,置于生理盐水中均匀涂抹。其厚度以载玻片置于报纸上,能透过粪膜隐约辨认玻片下的字迹为宜。一般在低倍镜下检查,如发现可疑虫卵转用高倍镜观察时,需加盖玻片,以免污染镜头。镜检时光线要适当,过强的亮度会影响观察效果。应注意虫卵与粪便中的异物区别,可依据虫卵的形状、大小、颜色、卵壳(包括卵盖等)和内含物等特征加以鉴别。由于雌性蛔虫产卵量较大,该法特别适用于检查蛔虫卵,涂片1张的检出率约为85%,涂片3张的检出率可达90%~95%。

2.检查原虫

可根据原虫不同的排离阶段,采用不同的方法。

(1)活滋养体检查:方法同检查蠕虫卵,但涂片要薄而均匀。要求粪便新鲜,不能混入尿液和水。若为检查溶组织内阿米巴,对其粘液血便标本,要取粘液部分。在气温较低时,要注意保温,必要时可用保温台保持温度,或先将载玻片和生理盐水略加温,为使滋养体保持活动状态,便于观察。

(2)包囊碘液染色检查:以碘液代替生理盐水滴加于载玻片上,挑取米粒大小的粪便置于碘液中,调匀涂片,加盖玻片。若需同时检查滋养体,可在玻片的另一侧滴一滴生理盐水,同上法涂抹粪便标本,再加盖玻片。这样可使一侧查活滋养体,而加碘液的另一侧查包囊。染色后的包囊呈黄色或棕黄色,糖原泡为棕红色,囊壁、核仁和拟染色体均不着色。

碘液配方:碘化钾4g ,溶于100 ml 蒸馏水中,再加入碘2g ,溶解后贮于棕色瓶中即可使用

厚涂片透明法检查消化道寄生虫

该法即改良加藤法(modifieD Kato’s thick smear),适用于检查蠕虫卵。用大小约4cm×4cm的100目/英寸的尼龙网覆盖在粪便标本上,用塑料刮片在网上刮取粪便约50mg,置于载玻片上,用浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片覆于粪便上,以胶塞轻压使粪便展开约20mm×25mm大小模块。置于30℃~36℃温箱中约30分钟,或25℃约1 小时,待粪膜稍干并透明即可镜检。

本法要注意掌握粪膜的合适厚度和透明时间,若粪膜过厚,透明时间短,虫卵难以发现;若透明时间过长,虫卵则变形,也不易辨认。如检查钩虫卵时,透明时间一般不要超过30 分钟。

玻璃纸制备:将玻璃纸剪成大小约22 mm×30 mm 的小片,浸于甘油-孔雀绿溶液(含纯甘油100 ml,水100 ml 和3%孔雀绿1 ml)中,浸泡24小时以上,直至玻璃纸呈现绿色

定量透明法检查粪便虫卵及计数

定量透明法适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数,可测定人体内蠕虫的感染度(虫荷Worm burden),也可判断药物驱虫效果。此法系在厚涂片透明法的基础上,定量刮取粪便,并检出粪内全部虫卵予以计数。应用改良聚苯乙烯作定量板,大小为40 mm ×30 mm×1.37 mm,模孔为一长圆孔,孔径为8 mm×4 mm,两端呈半圆形,孔内平均可容纳粪样41.7 mg。操作时将定量板置于载玻片上,用手指压住定量板的两端,自筛网上刮取的粪便填满模孔,刮去多余的粪便。掀起定量板,载玻片上留下一长条形的粪样。将浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸(5cm×2.5cm)覆盖在粪样上,用胶

塞轻轻加压,使粪样展平铺成一长椭圆形,在25℃经1 小时后即可镜检,顺序观察并记录粪样中的全部虫卵数。将虫卵数乘以24,再乘以粪便性状系数(成形便1,半成形便1.5,软湿便2,粥样便3,水泻便4),即为每克粪便虫卵数(eggs per gram,EPG)。并根据排便量和常见蠕虫的每条雌虫每天的排卵数(见下表)计算出虫荷。其他注意事项同厚涂片透明法。

常见蠕虫每条雌虫每日排卵数估计

饱和盐水浮聚法(brinefloatation)检查线虫卵此法利用某些蠕虫卵的比重小于饱和盐水,虫卵可浮于水面的原理。此法适用于检查各种线虫卵,尤以检查钩虫卵的效果最好,也可检查带绦虫卵和微小膜壳绦虫卵,但不适宜检查吸虫卵和原虫包囊。蠕虫卵及原虫包囊的比重见下表。

蠕虫卵及原虫包囊的比重

用竹签挑取黄豆大小(约1g)粪便置于盛有少量饱和盐水浮聚瓶内(高3.5 mm,直径2cm的圆筒形小瓶),也可用青霉素小瓶代替,将粪便充分捣碎并与盐水搅匀后,加饱和盐水至瓶口,用竹签挑取浮于水面的粪渣,再慢慢加饱和盐水至稍高于瓶口而不溢出为止。在瓶口轻轻覆盖一载玻片,注意勿使产生气泡;如有较大气泡,应揭开载玻片加满饱和盐水后再覆盖之。静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转,置镜下观察饱和盐水的配制:烧杯中盛有清水煮沸后,慢慢加入食盐并不时搅动,直至食盐不再溶解为止,冷却后的液体即为饱和盐水。100 ml沸水约加食盐35~40g 。

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