甜菜碱对奶牛瘤胃体外发酵参数的影响

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过瘤胃氯化胆碱对奶牛生产性能的影响

过瘤胃氯化胆碱对奶牛生产性能的影响

过瘤胃氯化胆碱对奶牛生产性能的影响徐晓明;徐国忠;范占炼;梅银财【摘要】选取40头健康荷斯坦泌乳盛期奶牛完全随机分为2组,每组20头.对照组牛群饲喂基础日粮,试验组牛群在基础饲料中添加20 g/(日·头)的瘤胃保护胆碱,分三次饲喂,瘤胃保护胆碱直接投喂于TMR粮上.试验期60d.测定了产奶量,牛奶中的乳脂率、乳蛋白、体细胞数.试验结果表明:在本试验的条件下,试验组牛群在基础饲料中添加20 g/(日·头)的瘤胃保护胆碱后,奶牛的平均产奶量显著提高了1.6%(P<0.05),乳脂率提高了0.06%(P<0.05);乳蛋白率、乳蛋白量、乳脂量、体细胞数均无显著差异(P>0.05).【期刊名称】《乳业科学与技术》【年(卷),期】2010(033)006【总页数】3页(P284-286)【关键词】过瘤胃氯化胆碱;奶牛;奶产量【作者】徐晓明;徐国忠;范占炼;梅银财【作者单位】上海市奶牛研究所,上海200072;上海市奶牛研究所,上海200072;上海市奶牛研究所,上海200072;浙江康德权科技有限公司,浙江杭州311107【正文语种】中文【中图分类】S816.7胆碱是一种在新陈代谢上与蛋氨酸和维生素B12非常接近的类似于维生素的复合物[1]。

奶牛的饲料含有游离的胆碱和磷脂酰胆碱[2];尽管如此,由于植物里的胆碱和磷脂酰胆碱的含量是相当少,而胆碱和磷脂酰胆碱在瘤胃中降解率是非常高的[2],小肠吸收的量不能提供给运动组织足够的需要。

在啮齿目动物中,15 %到40 %的日常胆碱需要是通过蛋氨酸的生物合成得到的[3]。

据推测胆碱的再次生物合成对泌乳奶牛是相当重要的。

尽管胆碱一般是不会缺乏的,但是像妊娠和泌乳这样的正常生理状态增加了胆碱的需要量[4, 5]。

蛋氨酸和赖氨酸对于奶牛泌乳来说是两种限制性氨基酸[6]。

因此,补足的胆碱可以节省用于合成胆碱所消耗蛋氨酸的那部分,这样就可以让更多的蛋氨酸用于产奶需要。

外源纤维酶对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能影响的研究的开题报告

外源纤维酶对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能影响的研究的开题报告

外源纤维酶对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能影响的研究的开题报告一、研究背景及意义奶牛瘤胃是奶牛的重要消化器官,能够发酵纤维素、蛋白质等复杂碳水化合物,为奶牛提供能量和营养物质。

然而,瘤胃内环境的复杂性和种类繁多的微生物群体构成,导致了奶牛易患饲喂不足、消化不良、胃肠炎等疾病,进而影响奶牛的生产性能。

外源纤维酶作为一种生物制剂,可以加速纤维素酶解,使粗饲料能够更快被分解,提高其养分利用率,增强奶牛的消化能力和生产性能。

因此,研究外源纤维酶对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能的影响,对提高奶牛饲养效益和降低环境污染具有重要意义。

二、研究内容与目的本研究将采用崔氏法测定奶牛瘤胃内微生物总数、pH值、挥发性脂肪酸(VFA)含量、淀粉酶、纤维素酶等活性、粪便质量和产奶量等指标,探究不同外源纤维酶剂量对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能的影响,同时比较不同剂量间的差异性。

研究目的:1.评估外源纤维酶对奶牛瘤胃微生物总数、pH值、VFA含量、酶活性及粪便质量的影响。

2.研究外源纤维酶对奶牛产奶量的影响。

3.比较不同剂量外源纤维酶对奶牛瘤胃发酵、消化代谢及生产性能的差异性。

三、研究方法与步骤1.材料准备:选取30头健康泌乳期奶牛,均年龄3-4岁,体重500-600kg,平均产奶量30kg/d,按照体重分为三组,每组10头。

2.试验方案设计:外源纤维酶剂量分为低、中、高三组,分别为0.5、1.0、1.5g/头。

试验期为60天,前30天为适应期,后30天为采食试验期。

3.试验结束后,采集奶牛的瘤胃内容物和粪便样品,测定微生物总数、pH值、VFA含量、酶活性等指标;每日记录奶牛的产奶量并计算平均值。

4.数据处理与分析:采用SPSS统计软件,进行方差分析(ANOVA)及显著性检验,比较不同剂量之间的差异性,并绘制相关指标变化趋势图。

四、研究预期结果和成果本研究通过探究不同外源纤维酶剂量对奶牛瘤胃微生态、代谢和生产性能的影响,预期可以:1.评价外源纤维酶剂量的最佳应用水平,提高奶牛瘤胃发酵效率和饲料利用率,降低奶牛疾病患病率,提高奶牛产奶量和品质。

动物医学自考生毕业论文设计选题

动物医学自考生毕业论文设计选题

动物医学自考生毕业论文(设计)选题序号毕业论文(设计)题目1不同来源木聚糖酶对猪生长性能和肠道微生物区系的影响2不同营养水平对小鼠初情期启动的影响研究-计燕3糖蜜不同吸附载体对奶牛瘤胃发酵参数的影响4壳聚糖对仔猪肠上皮细胞系MyD88和sIgA蛋白表达的影响5巴克夏猪的繁殖、生长及胴体性能测定6大围子猪的繁殖性能测定及其相关分析7不同硒源对肉鸽生产性能及肉蛋中硒沉积量影响的研究8奶牛围产期养殖技术规程9不同来源酵母和酵母培养物对奶牛生产性能和血液参数的影响10糖蜜不同吸附载体对奶牛体外发酵的影响11环境温度和营养水平与生长育肥猪生长性能的关系研究12大白母猪不同妊娠期的背膘厚与产仔数的关系13饲粮配制技术(1)14低蛋白日粮对肠道上皮细胞分化过程的影响及其机制研究15外源瘦素抗体干预对小鼠初情期启动的影响及其机制研究16日粮中饲料苎麻与精料不同比例对朗德鹅生产性能和养分利用率影响的研究17通过原位小肠结节灌注技术研究抗菌肽在控制仔猪腹泻上的作用及机理18不同来源酵母培养物对奶牛体外发酵的影响19不同初配日龄对大白猪繁殖性能的影响20猪GPI1基因SNPs与仔猪腹泻的关联分析21猪肌内脂肪含量与肌肉品质的关联分析22牛膝多糖对对断奶仔猪营养物质消化率的影响(岳鹏)23壳聚糖对仔猪肠上皮细胞系凋亡的影响24植物多糖对断奶仔猪回肠末端氨基酸的影响25饲粮配制技术(2)26熊果酸在体内营养物质调配过程中作用研究27不同季节对猪场粪污中碳氮气体释放量的影响28猪场粪污中碳氮物质对碳氮气体释放量的影响29山羊PRKAG3基因5'调控区C-225T突变位点的遗传结构分析。

30不同体重奶牛CH4排放规律的研究31环境温度和营养水平与母猪繁殖性能的关系研究32蛋鸡日粮添加复合调控剂对鸡蛋DHA含量的影响33浏阳黑山羊G-蛋白偶联受体介导的营养物质感应机制研究34猪背膘厚的QTL遗传效应和连锁位置分析。

35中草药制剂对优质黑凤鸡产蛋性能影响的研究36中草药添加剂对于育肥猪生长效果研究37炎热气候条件下母猪妊娠后期不同组织中GRαmRNA的表达规律研究38GABA对妊娠母猪繁殖性能的影响39MT对荷斯坦奶牛抗氧化应激酶活性的影响40不同纤维来源日粮对奶牛甲烷产生及产甲烷菌影响的研究41不同除臭剂对猪生产性能和猪舍环境的影响研究42中草药对猪生产性能和饲料养分利用的影响43壳聚糖对仔猪肠上皮细胞系增殖的影响44植物聚合多酚对黄羽肉鸡生产性能的影响45日粮不同添加水平N-氨甲酰谷氨酸对断奶仔猪饲养效果研究-陈修寄46微生态制剂对猪生产性能和肉品质的影响47不同季节对猪场粪污中碳氮物质含量的影响48不同处理阶段对猪场粪污中碳氮物质哈量的影响49不同排放方式对养猪场废水中氮磷含量及有效性的影响50肠康灵对母猪繁殖性能的影响研究51不同来源木聚糖酶酶学特性的研究52MYF6基因多态性与大约克夏猪胴体性状的关联分析53猪DECR1基因Exon8多态性与长白猪胴体性状的关联分析54大蒜粉对蛋鸭生产性能、蛋品质及蛋黄胆固醇含量的影响55不同年份发酵床中N、P含量变化规律56不同产奶量下的奶牛CH4排放规律研究57不同处理阶段对猪场粪污中碳氮气体释放量的影响58贡溪鸡蛋品质调查与分析59精氨酸影响断奶仔猪天然免疫和炎症反应的研究60鸡囊胚细胞冷冻及其嵌合体技术研究61不同品种(组合)猪的屠宰测定比较分析62山羊PRKAG3基因5'调控区C-525A突变位点的遗传结构分析。

胆碱和赖氨酸过瘤胃保护效果及对奶牛生产性能的影响

胆碱和赖氨酸过瘤胃保护效果及对奶牛生产性能的影响

胆碱和赖氨酸过瘤胃保护效果及对奶牛生产性能的影响王诚,丁博群,董桂红,王玲,范秋苹,孔德玲山东健源生物科技有限公司,山东泰安 271000摘要[目的]评估过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸产品的保护率、降解率及其对生产性能的影响,旨在为过瘤胃技术的发展及应用提供参考。

[方法]通过瘤胃稳定性试验、体外模拟小肠消化试验对过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸产品的过瘤胃保护效果进行测定,同时以荷斯坦奶牛为例,选取体质量为600 kg左右且泌乳期约60 d的健康荷斯坦奶牛40头,随机分为4组,每组10头,分别为胆碱组(日粮中补充30 g/(头·d)过瘤胃胆碱)、赖氨酸组(日粮中补充30 g/(头·d)的过瘤胃赖氨酸)、胆碱+赖氨酸组(日粮中补充过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸各30 g/(头·d))和对照组(不添加过瘤胃胆碱与赖氨酸),分别测定日均干物质采食量、日均产奶量、乳脂率、乳蛋白率。

[结果]过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸处理2 h的过瘤胃保护率均在84%以上,2 h时小肠降解率分别为79.23%和81.76%;与对照组相比,日粮中添加过瘤胃胆碱、过瘤胃赖氨酸、过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸的干物质采食量分别显著增加11.20%、8.06%、11.76%,日均产奶量分别显著增加8.02%、7.86%、9.53%;各组之间乳蛋白率没有显著差异。

[结论]饲粮中添加过瘤胃胆碱和过瘤胃赖氨酸均具有良好的过瘤胃保护效果和小肠释放效果,可不同程度提高奶牛的生产性能。

关键词奶牛;过瘤胃胆碱;过瘤胃赖氨酸;瘤胃降解率;小肠释放率;生产性能Effects of choline and lysine on protecting rumen and theproduction performance of cowsWANG Cheng, DING Boqun, DONG Guihong, WANG Ling,FAN Qiuping, KONG DelingShandong Jianyuan Biological Technology Co. Ltd., Taian 271000, ChinaAbstract[Objectives] The protection rate, degradation rate of rumen-protected choline and lysine products and their effects on production performance of cows to provide reference for the develop‐ment and application of rumen-protected technology.[Methods] The effects of rumen-protected choline and lysine products on protecting rumen were measured through tests of rumen stability and simulated small intestine digestion in vitro. 40 healthy Holstein cows with a body weight of about 600 kg and a lactation period of about 60 days were selected and randomly divided into 4 groups including the 收稿日期:2023-12-19基金项目:山东省科技型中小企业创新能力提升工程(2023TSGC0594)作者简介:王诚,男,1980年生,高级工程师。

瘤胃保护性胆碱对奶牛的作用

瘤胃保护性胆碱对奶牛的作用

化 合物 一乙酰 胆 碱 , 一 种 中心 神 经 及 周 边 神经 系 是
统 的神经 传导 素 , 神 经 肌 肉节 的收 缩 有 非 常重 要 对
饲喂 的 日粮 胆碱 , 比如 富含 胆 碱 的 饲料 原 料 或 氯 化
胆碱 , 只能 轻 微 地 增 加 瘤 胃后 胆 碱 的 流 量 。Atis kn
的作用 。乙酰 胆 碱 由胆 碱 与 乙酰 C A 在 神 经 元 中 o
合成 。胆碱 是合 成磷脂 与神 经传 递 素 的关 键 性化 合
物 , 碱支 持 细 胞 膜 结 构 的 完 整 性 , 演 信 号 的 角 胆 扮 色 , 响胆 碱 能 神经 传 递 与 识 别 , 且 胆 碱 是 甜 菜 影 而 碱 甲基化途 径所 需 甲基 的主要来 源 。虽然 十二指 肠
病 。胆碱 是 卵磷 脂 、 鞘磷脂 的组 成部 分 , 形成 乙 酰 是 胆 碱 的必 备 物质 , 作 为 甲基 供 体 。胆 碱 能够 缓减 可 肝 脏 中的脂肪 酸 的积 累 , 改善 围产 期奶 牛健 康 , 而 从
提 高生产 性能 。
这样 的合成 途径 并不 意味着 提高 日粮 供 给 的和肠 道
胆碱 除具 有特 殊 生理 功 能外 , 奶 牛 围产 期 、 在 泌 乳初 期等 生理 阶段 , 胆碱对 奶 牛脂 肪肝 、 病等 的 预 酮 防具 有重 要意 义 。而 胆 碱 在 瘤 胃中 降解 性 过 高 , 常 需要 采用 过瘤 胃保 护 的方 式饲 喂 。在 围产 期或 泌乳 初 期 , 牛为满 足 胎 儿 生 长 和乳 腺 组 织 泌 乳 的 能量 奶 需要 , 往往 发生对 体 内脂 的过度 动用 , 终 导致 非酯 最 化 脂肪酸 在 肝 脏 中的 积 累而 发 生 脂 肪 肝 等 代 谢 疾

瘤胃保护性胆碱对奶牛的作用

瘤胃保护性胆碱对奶牛的作用

瘤胃保护性胆碱对奶牛的作用夏科;赵宏波;郗伟斌;王志博;王燕;张永根【摘要】本文简单介绍了胆碱的生化功能及其在瘤胃中代谢特性,并对瘤胃保护性胆碱在围产期奶牛生产上的应用及研究进展进行综述.【期刊名称】《中国牛业科学》【年(卷),期】2010(036)005【总页数】5页(P38-42)【关键词】瘤胃保护性胆碱;围产期奶牛;脂肪肝;产奶量;产后健康【作者】夏科;赵宏波;郗伟斌;王志博;王燕;张永根【作者单位】东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030;沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁,沈阳,110161;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030【正文语种】中文【中图分类】S816.79胆碱除具有特殊生理功能外,在奶牛围产期、泌乳初期等生理阶段,胆碱对奶牛脂肪肝、酮病等的预防具有重要意义。

而胆碱在瘤胃中降解性过高,常需要采用过瘤胃保护的方式饲喂。

在围产期或泌乳初期,奶牛为满足胎儿生长和乳腺组织泌乳的能量需要,往往发生对体内脂的过度动用,最终导致非酯化脂肪酸在肝脏中的积累而发生脂肪肝等代谢疾病。

胆碱是卵磷脂、鞘磷脂的组成部分,是形成乙酰胆碱的必备物质,可作为甲基供体。

胆碱能够缓减肝脏中的脂肪酸的积累,改善围产期奶牛健康,从而提高生产性能。

1 胆碱概述胆碱分子式为(CH3)3N+CH2CH2OH,即三甲基乙醇胺,是哺乳动物日粮中重要的成分,为正常细胞功能所必须。

胆碱由Strecker于1862年发现,但是直到1998年才被认为是人类必需的营养素。

胆碱最先被确认对鼠和狗脂肪肝的预防有非常重要的作用[1]。

胆碱是合成两种重要分子——磷脂酰胆碱与乙酰胆碱的关键性化合物。

磷脂酰胆碱是反刍动物体内主要的磷脂,对脂肪的吸收与转运、细胞膜的构成、细胞信号传递和脂蛋白的合成有非常重要作用[2]。

体外法研究酵母复合物对泌乳早期奶牛日粮降解特性和瘤胃发酵参数的影响

体外法研究酵母复合物对泌乳早期奶牛日粮降解特性和瘤胃发酵参数的影响张炯奇;徐晓锋;林涛;屠焰;刁其玉;毕研亮【期刊名称】《饲料工业》【年(卷),期】2024(45)11【摘要】试验旨在利用体外法研究日粮中添加酵母复合物对泌乳早期奶牛日粮降解特性和瘤胃发酵参数的影响。

试验采用单因素试验设计,分为3组,每组每个发酵时间点(6、12、24、30、48 h)3个重复。

对照组为基础日粮,试验1、2组在基础日粮中添加1%酵母复合物,发酵12 h后试验2组再添加1%酵母复合物。

结果显示:与对照组相比,试验1、2组发酵液中12~48 h各时间点的酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)、粗蛋白(CP)和12 h干物质(DM)降解率以及12~30 h各时间点的氨态氮(NH3-N)浓度均显著提高(P<0.05);6、48 h乙丙比显著降低(P<0.05)。

与对照组相比,试验2组发酵液中24 h乙酸、丙酸、戊酸、己酸、异丁酸和异戊酸浓度以及30、48 h DM降解率均显著提高(P<0.05)。

说明在日粮中添加1%酵母复合物可有效提高泌乳早期奶牛日粮中DM、NDF、ADF和CP降解率及发酵液中NH3-N和挥发性脂肪酸(VFA)浓度,发酵12 h后再添加1%酵母复合物效果更好。

【总页数】7页(P62-68)【作者】张炯奇;徐晓锋;林涛;屠焰;刁其玉;毕研亮【作者单位】宁夏大学动物科技学院;中国农业科学院饲料研究所;北京加佳农生物科技有限公司【正文语种】中文【中图分类】S816.6【相关文献】1.日粮粗蛋白水平及降解率对泌乳奶牛瘤胃发酵和氮利用的影响2.日粮中添加牛至对泌乳奶牛瘤胃发酵、生产参数及乳脂肪酸组成的影响3.体外法研究不同水平中性洗涤纤维日粮对泌乳高峰期奶牛瘤胃发酵和产气量的影响4.日粮添加干玉米酒糟对泌乳奶牛干物质采食量、泌乳性能和瘤胃发酵的影响5.酵母培养物对泌乳奶牛体外瘤胃发酵特性、采食量和产奶量的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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动物营养学报2015,27(11):3541⁃3548ChineseJournalofAnimalNutrition 

doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2015.11.027甜菜碱对奶牛瘤胃体外发酵参数的影响

田 雨1 杨 榛2 韩兆玉2∗(1.南京卫岗乳业有限公司,南京210014;2.南京农业大学动物科技学院,南京210095)

摘 要:本试验旨在通过体外产气法研究甜菜碱对奶牛瘤胃体外发酵参数的影响。试验分为3组,对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,分别添加0、1.2、3.6mg甜菜碱于45mL瘤胃发酵液和300mg奶牛全混合日粮中进行发酵,于3、6、12、18和24h读取产气量,并测定6、12、和24h的

pH,干物质降解率,氨氮、挥发性脂肪酸、乳酸和菌体蛋白含量。结果表明:1)在各时间点试验组

的产气量均高于对照组,其中试验Ⅱ组在3和6h显著高于对照组(P<0.05)。2)随着发酵时间延续,发酵液的pH逐渐减小,且在6h试验Ⅱ组显著低于对照组(P<0.05);试验组的干物质降解率和菌体蛋白含量均高于对照组,其中在6h达到显著水平(P<0.05);试验组在12h氨氮含量极显著高于对照组(P<0.01),试验Ⅱ组24h显著高于对照组(P<0.05)。3)试验组发酵液中的挥发性脂肪酸含量较对照组有增加趋势;在6h,试验Ⅱ组的丁酸含量显著高于对照组(P<0.05);在12h,试验组的异丁酸含量极显著高于对照组(P<0.01),异戊酸含量显著高于对照组

(P<0.05),戊酸含量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),乙酸/丙酸极显著高于对照

组(P<0.01)。结果提示,添加1.2和3.6mg的甜菜碱可以降低瘤胃体外发酵pH,提高产气量,干物质降解率,氨氮、菌体蛋白、挥发性脂肪酸含量,并呈现剂量依赖性。关键词:奶牛;甜菜碱;瘤胃液;体外发酵中图分类号:S816.7;S823 文献标识码:A 文章编号:1006⁃267X(2015)11⁃3541⁃08

收稿日期:2015-06-03基金项目:江苏省科技支撑计划(BE2014301);江苏省农业三新工程项目(SXGC[2014]207)作者简介:田 雨(1979—),男,贵州遵义人,畜牧师,主要从事奶牛营养与牧场管理工作。E⁃mail:yanzhen0306@sina.com∗通信作者:韩兆玉,副教授,硕士生导师,E⁃mail:zyhan6708@njau.edu.cn

甜菜碱广泛存在于动植物体内,分子结构比较简单,与蛋氨酸、胆碱的化学结构相似,都属季胺碱类物质,是甲基的高效供体,具有抗氧化,调节渗透压,调控动物体内生长调控因子的水平等作用[1]。甜菜碱作为饲料添加剂已经广泛使用于

猪禽等单胃动物,研究表明,甜菜碱可以缓解断奶仔猪应激,降低腹泻率,提高瘦肉率[2],郭建凤

等[3]表明商品瘦肉猪饲粮添加甜菜碱可以显著提高生长速度和饲料报酬;而甜菜碱替代部分蛋氨酸应用于肉鸡生产中,可以降低饲料成本[4];在水

产动物中,张阳军[5]研究表明,添加甜菜碱对罗氏沼虾是很好的诱食剂,并在提高生产性能方面有很好的作用。然而,反刍动物具有复杂的瘤胃微

生态系统,甜菜碱在反刍动物的应用中表明,可以提高生产性能[6],并在一定程度上可以缓解隐性

乳房炎[7]。张丽等[8]研究表明饲粮中添加甜菜碱可以提高奶牛生产性能,降低奶牛外周血中热应激蛋白70(HSP70)含量,缓解奶牛热应激。连红等[9]研究发现复合包膜甜菜碱的添加有积累血浆中总氮的趋势,其中白蛋白和总蛋白含量显著升高,而尿素氮含量显著降低。反刍动物对饲料的消化实际就是瘤胃中的微生物对饲料进行发酵,饲料利用率的高低很大程度上取决于瘤胃发酵的程度。本试验将通过添加不同水平的甜菜碱于体外发酵的瘤胃液中,探讨甜菜碱对奶牛瘤胃发酵参数的影响,为甜菜碱在奶牛上的应用提供参考。

动 物 营 养 学 报27卷

1 材料与方法1.1 试验材料 发酵底物:江苏省南京市某奶牛场精粗比为50∶50,干物质(DM)含量为54.60%,粗蛋白质(CP)含量为17.15%,中性洗涤纤维(NDF)含量

为34.72%的全混合日粮(TMR)经烘干粉碎过1目筛,其组成及营养水平见表1。 甜菜碱:由江苏宜兴天石饲料有限公司提供,

性状为白色均匀圆形颗粒,不溶于水,易溶于有机溶剂,纯度为40%。1.2 试验设计

本试验采用单因素试验设计,试验分为3组,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,均以300mgTMR作为发酵底物,添加到45mL人工瘤胃发酵

液中,各组分别添加0、1.2、3.6mg甜菜碱(纯度为40%)。1.3 试验仪器设备 玻璃培养管:本试验的产气装置为100mL注射器。 在试验之前,进行注射器的前处理及选择工

作。首先将注射器的活塞拔出涂抹凡士林,以增加润滑度,减少摩擦,而后在同样量的底物、瘤胃液和培养液条件下培养一定时间,通过产气量选择出合适的注射器,以此来消除活塞重量不同及其与注射器管壁间的摩擦力的不同造成的误差。产气量的测定是通过发酵产生的气体将活塞顶起的高度,直接从注射器刻度读出。 人工瘤胃培养箱:由恒温水浴振荡器改装成

为水浴恒温培养箱,温度、振荡速度可调。 CO2气罐及气体:采用纯度为99.999%的CO2

气体作为厌氧条件产生和维持的气源。 恒温培养箱:作为预热玻璃培养管的装置,试

验前应将玻璃培养管在预热状态下涂抹适量的凡士林,待加样后将培养管在已调试好的39℃培养箱中预热。 恒温水浴锅:用于采集瘤胃液时的保温。

恒温及磁力搅拌装置:恒温水温箱用于培养管在分液过程中提供缓冲环境并保证培养液的温度保持39℃。磁力搅拌器用于保证培养液的恒温及混合均匀。

表1 全混合日粮组成及营养水平(干物质基础)Table1 Compositionandnutrientlevelsof

theTMR(DMbasis)%

项目Items含量Content原料Ingredients玉米青贮Cornsilage17.20青草Freshgrass4.93啤酒糟Brewersgrain4.78苜蓿草Alfalfahay13.20小麦麸Wheatbran9.57苹果粕Applepomace6.75甜菜粕Beetsugarpulp6.46干草Drygrass4.38棉籽Cottonseed1.76玉米Corn10.70蒸汽压片玉米Steam⁃flakingcorn4.57豆粕Soybeanmeal4.62小麦Wheat2.18棉籽粕Cottonseedmeal3.13大豆粉Soybeanpowder1.56玉米干酒糟及其可溶物CornDDGS1.56磷酸氢钙CaHPO4

0.68

小苏打NaHCO3

0.34

食盐NaCl0.34石粉Limestone0.34氧化镁MgO0.28脱霉素Mouldremovingagent0.05预混料Premix1)0.62

合计Total100.00营养水平Nutrientlevels2)

干物质DM49.7粗蛋白质CP17.3中性洗涤纤维NDF39.8酸性洗涤纤维ADF24.2钙Ca1.0磷P0.6

1)

每千克预混料含有Onekgofpremixcontainedthe

following:VA1500000IU,VD3300000IU,VE

1800000IU,烟酸nicotinicacid2500mg,Cu1500mg,Fe5600mg,Mn4500mg,Zn9600mg,I150mg,Se40mg,Co60mg。

2)

计算值Calculatedvalues

[10]

医用纱布和漏斗:采用标准的医用纱布用于瘤胃液的过滤,采用瓷制漏斗用于瘤胃液内容物的过滤。 分析天平:用于培养底物的称量。

245311期田 雨等:甜菜碱对奶牛瘤胃体外发酵参数的影响1.4 人工瘤胃发酵液的制备 采用Menke等[11]的方法准备瘤胃发酵液,人工瘤胃发酵液由常量元素溶液(A液)、微量元素溶液(B液)、缓冲液(C液)、指示剂溶液、还原剂溶液配成。各种溶液的配方见表2。将1000mL的分液瓶放入39℃水浴中,用磁力搅拌器搅拌,按以下比例和顺序配制:蒸馏水400mL+B液0.1mL+A液200mL+C液200mL+刃天青溶液1mL+还原剂溶液40mL。加入刃天青溶液后混合液变为红色,通入无氧CO2并预热至39℃后约30min,混合液颜色变淡或无色(在与过滤瘤胃液

混合之前加入还原剂并通CO2气体至溶液褪至完全无色即可用,且用前新鲜配制,再通CO2至饱和)。

表2 人工瘤胃发酵液单一溶液配方Table2 Formulaofsinglesolutioninartificialrumenfermentationfluid

项目Items组成Composition常量元素溶液Macroelementsolution(A)

Na2HPO45.7g、KH2PO46.2g、MgSO4·7H2O0.6g,

加超纯水至1000.00mL微量元素溶液Microelementsolution(B)

CaCl2·2H2O13.2g、CoCl2·6H2O1.0g、MnCl2·4H2O10.0g、FeCl3·6H2O

8.0g,加超纯水至100.00mL

缓冲液Buffer(C)NH4HCO34.0g、NaHCO3

35g,加超纯水至1000.00mL

指示剂溶液Indicatorsolution刃天青100mg,加超纯水至100.00mL还原剂溶液Redactorsolution1mol/LNaOH溶液4mL、Na2S·9H2

O625.0mg,加超纯水至100.00mL

屠宰场选择2头健康奶牛屠杀,打开瘤胃后均匀采样,经4层纱布过滤瘤胃内容物至预热至(39.00±0.25)℃的容器中,迅速带回实验室,将瘤胃液与人工瘤胃发酵液以1∶2的体积比混合,制成混合人工瘤胃发酵液。混合人工瘤胃发酵液边加热边用磁力搅拌器搅拌,同时通入CO2。1.5 分装和培养 准确称取300mg发酵饲料及相应量的反刍动物专用甜菜碱(对照组不添加,试验Ⅰ组添加1.2mg,试验Ⅱ组添加3.6mg)送入100mL玻璃注射器内,用自制加液器向每个培养管(注射器)中分别加入(45±1)mL人工瘤胃发酵液。在注射器活塞前1/3部位均匀涂抹适量医用凡士林,39℃培养。为了保证测试样品具有代表性,每个样本设4个平行。1.6 读取产气量 当培养至3、6、12、18、24h时,取出培养管,快速读取活塞所处的刻度值(mL)并记录。若某一时间点读数超过80mL时,为了防止气体超过刻度而无法读数,应在读数后及时排气并记录排气后的刻度值。1.7 终止发酵 待培养管在体外培养6、12、24h后,将各组其中4个培养管分别取出放入冰水浴中使发酵停止。将培养管中的发酵液排出至已知重量的50mL塑料离心管,立即用pH计测定发酵液pH。发酵液经离心(1500r/min)15min,取上清液分管冷冻保存以备测定发酵液的菌体蛋白、乳酸、氨氮(NH3

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