兰花杂交育种技术
兰花杂交育种技术精选
文档
TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-
兰花杂交育种技术
长期以来，兰花的育种以自然选种为主，自种子无菌萌发成功后，开展了兰花品种间、种间及属间的杂交育种。选育新品种在附生兰的品种改良上已获得了巨大成功。
据有关记载，人工杂种兰花约在4万种以上，而且还以每年1000种以上的速度增加。仅远缘杂交就已育成由7个属杂交产生的集体杂种。
利用杂交育种，可创造出新的株型、花色、花型、花序排列及分叉性、花朵寿命（切花及盆花）、增强香气、抗病虫性等。
兰花杂交育种程序
确定育种目标
选配杂交亲本
配制杂交组合
培养杂交种子
杂种后代的选择
优良株系的繁殖和鉴定
品种命名和登录
新品种的繁育和推广?
育种目标
育种目标是指要选育的新品种应该具有什么样的性状。它是新品种选育工作的首要环节，是选配杂交亲本和选择杂交方式的主要根据。因此，育种目标是否可行直接关系到杂交育种工作的成败。
兰花的香味，花色、花型、株型、叶部性状、抗性等都是重要的育种目标。
同时，兰花育种的目标也应根据市场需求而定。
亲本选配
亲本选配是兰花杂交育种最重要的环节之一。
亲本选配一般应遵循以下原则：
（l）选配的亲本应具有育种目标所需要的优良性状，且遗传传递力强。
（2）杂交双亲在地理上较远，在生态类型上有所不同。
（3）选配的亲本遗传传递力要强。
（4）选择亲本一般配合力要高。
在兰花亲本选配过程中，除了要遵循上述原则外，还应注意以下几点：
（l）选择种子易于萌发的品种作亲本，对那些种子萌发比较困难的兰花（如拖鞋兰），尤其需要注意。
（2）亲本应落实到具体的品种，而不是集体杂种。
（3）选择可育的兰花作亲本。
（4）避免选用第一次开花的兰株作亲本。
杂交种子的培养
杂交种子的培养是兰花育种工作最重要的环节之一，它关系到兰花杂交育种工作的效率和成败。中国兰杂交种子培养比洋兰困难，杂交种子萌发需要的时间长，种子萌发率低，植株再生困难。
张志胜等对中国兰花远缘杂交种子培养结果表明：杂交种子萌发的难易随杂交组合的不同有很大差异，墨兰和大花蕙兰的杂交种子萌发容易，种子萌发后形成原球茎，而国兰种间和品种间的杂交种子萌发难，种子萌发后形成根状茎。
兰花杂交育种始于１９世纪５０年代，是以基因型不同的品种进行交配形成杂种，通过培育选择，获得新品种的较为常用、效果较好的途径之一。１８５６年，英国兰花种植者ＪｏｈｎＤｏｍｉｎｙ成功地将一杂交植株培养开花，揭开了兰花杂交育种新篇章［１］，至２００４年在英国皇家园艺学会（ＲＨＳ）上登陆的杂交种已超过１１万个［４］，而收稿日期：２００７－１１－２８基金项目：广东省科技攻关项目（２００７Ａ０２０２００００４－１０）作者简介：张孟锦（１９８０－），男，
研究实习员广东农业科学２００８年第２
期
１２０
且每年以１０００种以上的速度增加。目前，常见的洋兰栽培品种几乎全是杂交种，包括了品种间杂交、种间杂交和属间杂交，其中卡特兰（Ｃａｔｔｌｅｙａ）３０９１０个，蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ）２４１２８个，兰属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）１１５３８个［４］。中国兰花有２０００多年的栽培历史，但其育种起步较晚，品种改良缓慢，直到２０世纪８０年代，随着兰花产业的发展，国内一些研究者才开始新品种培育，何嵩等［５］报道了春兰（Ｃ．ｇｏｅｒｉｎｇｉｉ）×墨兰（Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｅ）的杂交获得成功；李芳等［６］报道了台兰（Ｃ．ｆｌｏｒｉｂｕｎｄｕｍ）×蕙兰（Ｃ．ｆａｂｅｒｉ）杂交组合；张志胜等［７］报道了墨兰×大花蕙兰（Ｃ．ｈｙｂｒｉｄｉｕｍ）、建兰（Ｃ．ｅｎｓｉｆｏｌｉｕｍ）×蝴蝶兰杂交组合；朱根发等先后报道获得了墨兰×大花蕙兰［８］、建兰×纹瓣兰（Ｃ．ａｌｏｉｆｏｌｉｕｍ）［９］杂交后代；余朝秀等［１０］报道了黄蝉兰（Ｃ．ｉｒｉｄｉｏｄｓ）×素花虎头兰（Ｃ．ｈｏｏｋｅｒｉａｎｕｍ）杂交组合。由于国兰杂交种试管苗生产率低，育种周期长等因素，其育种研究仍处于后代培育及筛选阶段，至今登陆的新品种寥寥无几。近几年遂着政府部门支持和人们意识的提高，兰花育种已逐渐开展起来，如汕头市农科所自１９９８年起引进蝴蝶兰品种并开展杂交育种，至２００６年累计组配杂交组合５００多对，种植杂交后代近１００万株，已育成汕农凤凰等５个具有自主知识产权的新品种；广东省农科院花卉所已有４个蝴蝶兰２个大花蕙兰和３个春石斛兰新杂交种通过了英国皇家园艺学会国际兰花新品种登录
兰花育种技术研究进展
兰花育种技术研究进展 吴根良1,商世能2,沈国正1,孙 瑶1 (1.浙江省杭州市农业科学研究院,杭州310024;2.浙江省杭州万向职业技术学院,杭州310023) 摘要:综述了兰花的种子离体萌发、利用生化技术和分子标记进行兰花种质资源分类和种间品种间鉴别。同时概述了调控花色素合成酶、花器官形成、子房发育和胚珠发育以及构成建兰花叶病毒(CyMV)等特异基因分离克隆,以及转基因技术等研究进展,并对我国兰花育种进行了展望。 关键词:兰花;离体萌发;分子标记;基因分离;基因转化;育种 中图分类号:S682.31文献标识码:B 文章编号:1001-0009(2006)04-0115-03 兰花一般是指兰科植物(Orchidaceae),它是鲜花植物中 最大科之一,全世界约有800多属,25000多种,分布于世界 各地,大多数种类分布于东南亚、澳大利亚、中南美洲、非洲 和马达加斯加。我国的野生兰科植物约有173属,1240多 种[1],在南北各地均有分布,但以云南、台湾、海南最为丰富。 兰花是珍贵的观赏花卉,此外还有作为药用的天麻(G astro2 dia elata)、白芨、红门兰等和作香料的香子兰等,有极高的 经济价值。 具有观赏和药用价值的兰科植物目前在国际、国内市场 上占有重要地位。保护和利用我国的野生兰科植物,并拥有 和选育新的种源,才能在世界各国兰花业竞争日益激烈的今 天占有一席之地。 1兰花种子的离体萌发 远缘杂交和品种间杂交是兰花育种的重要方法之一。 兰花种子萌发是兰花杂交育种的重要环节,因为在自然条件 下兰花种子的萌发率很低。 1.1共生萌发 Bernard在1899年首次分离出兰花的根菌,并用其感染 兰花的种子进行萌发试验,从而创立了兰花种子共生萌发的 方法。他指出:在自然条件下兰科植物种子萌发需要适宜的 真菌感染,它促进种子萌发就在于把胚和基质连接起来,形 成共生系统。在这个共生系统中真菌促进了种子的糖异生 及贮藏物质的利用,并在它开始光合作用前,持续提供营养 物质。我国兰科植物菌根菌研究发展很快,天麻菌根菌已经 应用于天麻种子萌发和人工栽培。徐锦堂等从天麻原球茎 中分离出紫萁小菇(Mycana osmudicola), 用天麻种子拌该 第一作者简介:吴根良,1963年10月 生,本科,高级农艺师,主要从事蔬菜花 卉栽培技术研究和技术推广工作,主持 完成的相关重要科研项目有国家重大 科技产业工程《工厂化高效农业科技示 范工程》专题一项;省级重点项目“切花 月季高产、优质栽培技术开发”,“主要鲜切花新品种引种与优质高效栽培技术研究”等,曾荣获省市各类科技进步奖五项,现主持浙江省科技厅重点项目“名贵花卉卡特兰产业化关键技术研究”等项目。 3基金项目:杭州市科技发展计划(200462N08)。 收稿日期:2006-01-14菌,播种后种子的萌发率可达20%以上,为此促进了天麻的人工栽培。郭顺星等对白芨种子的共生萌发进行了研究,拌菌后的种子萌发率、原球茎和营养器官生长速率显著高于对照。郭顺星等对真菌在石斛(Dendrobium)种子萌发中的作用进行了研究。在种子共生萌发研究中,尚有很多问题需要进一步深入探讨,如兰科植物菌根菌的种类和特点、兰科植物与真菌的相互作用机制、优良共生菌的筛选、兰科菌剂的研制等。 1.2非共生萌发 Bernard以眉兰(Ophrys)的块茎配制培养基,使卡德丽亚兰(Cattleya)与蕾丽亚兰(Laelia)杂交种的种子成功萌发,开创了非共生萌发的先例。随后,Arditti用非共生萌发对齿瓣兰(Odontoglossum)、蝴蝶兰(Phalaenopsis)、石斛兰、文心兰(Oncidium)等种子进行萌发研究,得到了正常的种苗。 兰花中有些种类未成熟或接近成熟的种子比成熟种子更容易萌发。仙人指甲兰(Aerides)、白拉索兰(Brassavola)、布鲁通氏兰、卡德丽亚兰、厚杯兰、树兰(Epi2 dendrum)、文心兰、蝴蝶兰、肾药兰和万代兰(Vanda)等10个属的19个种和15个杂交种的种子萌发试验证明,未成熟种子能很好萌发,最短的是在授粉后40～50d萌发。 对于萌发难度较大的地生兰,进行适当的种子预处理可以提高萌发率。段金玉等对兰属(Cymbidium)10种植物的种子离体萌发研究表明,用0.1mol/L氢氧化钠浸泡种子10～30min,能使多花兰(C.floribundun)、春兰(C.goeringii )、双飞燕(C.goer.)、线叶春兰(C.goer.var.serratum)、寒兰(C.kanran)、套叶兰(C.cyperifolium)等种子的萌发率提高10倍以上。 大部分兰花种子可通过无菌萌发方式发芽,而萌发率因基因型而异。气生兰及其杂交后代的种子萌发力较强,地生兰种子萌发率普遍较低。即使同为蝴蝶兰不同杂交组合的种子萌发率和幼苗生长发育也不同[2]。一般在种子无菌萌发过程中激素是培养基中不可缺少的成分,但有人认为卡德丽亚兰种子萌发可采用不含激素的MS培养基[3]。杨美纯等认为在MS、KC和花宝三种培养基中,MS最适合蝴蝶兰种子的萌发,香蕉汁150g/L可明显提高种子萌发率并促进幼苗生长[4]。 2兰花的分类鉴定 511 北方园艺2006(4):115～117 ?园林花卉?
微生物育种技术研究进展
微生物育种技术研究进展 摘要：生物育种是运用遗传学原理和技术对某种具有特定生产目的的菌株进行改造，去除不良性质，增加有益新性状，以提高产品的产量和质量的一种育种方法。微生物的育种技术已从常规的突变和筛选技术发展到基因诱变、基因重组和基因工程等，育种技术的不断成熟，大大提高了微生物的育种效果。但是有时候微生物育种也不是单一的一种方法，有的是需要多种方法综合使用。本文将各种微生物育种技术进行总结和细致分析。 关键词：微生物育种；诱变育种；基因重组育种；基因工程育种 1.常规育种 常规育种是以不经过人工处理，利用微生物自发突变为基础，从中筛选出具有优良性状菌株的一种育种方法一般情况下，由于DNA的半保留复制以及校正酶系的校正作用和光修复、切除修复、重组修复、诱导修复等作用，发生自然突变的几率特别低，一般为106～1010/BP，而且用于工业生产的菌株的性状往往由单一或少数基因控制，所以常规育种时间较长，工作量较大。，通过常规育种提高菌种生产能力、筛选高产菌株的效率较低，效果不明显。因此在生产实践中，常规育种的主要目的是用来纯化、复壮、稳定菌种。 2. 诱变育种 1927年MILLER发现X-射线能诱发果蝇基因突变之后人们发现其他一些因素 也能诱导基因突变，并逐渐弄清了一些诱变因素的机理，为微生物诱变育种提供了前提条件根据育种需要，有目的地使用诱变因素，可使菌株的基因发生突变以改良其生产性状.凡能诱发基因突变，并且突变频率远远超过自发突变的物理因子或化学物质被称为诱变剂。根据诱变剂的不同可以将诱变育种的方法分为：有物理因子诱变育种和化学因子诱变育种。，前者包括激光、X-射线、"r-射线、快中子等)后者主要是烷化剂（包括EMS、EI、NMU、DES、MNNG、NTG等），天然碱基类似物，亚硝酸和氯化锂在物理诱变因素中，紫外线比较有效、适用、安全，其他几种射线都是电离性质的，具有穿透力，使用时有一定的危险性,化学诱变剂的突变率通常要比电离辐射的高，并且十分经济，但这些物质大多是致癌剂，使用时必须十分谨慎.目前，多种诱变剂的诱变效果、作用时间、方法都已基本确定，人们可以有目的、有选择地使用各种诱变剂，以达到预期的育种效果. 2.1物理因子诱变 2.1.1 UV 所有传统的物理诱变手段中，使用得最为普遍的就是紫外线辐照，它是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。对于紫外线的的作用有很多解释，但研究最清楚的是它可引起DNA结构的变化，尤其是可使DNA分子形成胸腺嘧啶二聚体，即两个相邻的嘧啶共价连接，二聚体的出现会减弱氢键的作用，引起双键结构变形，就可能影响胸腺嘧啶(T)和腺嘌呤(A)的正常配对，破坏了腺嘌呤的正常掺人，复制就在这一点上突然停止或错误地进行。如果错误地进行复制，且在新形成的链上有一个改变了的碱基次序，则在随后的复制过程中，碱基次序已改变的DNA链照常进行复制，产生了一个在两条链上碱基次序都是错误的分子而引起突变归J。利用紫外诱变的方法可选育出大量产量高，活性强的菌种，由于其设备简单，诱变效率高，操作安全而被广泛应用。白兰芳等用紫外线单因子处理、光复活处理西罗莫司产生菌Streptomyces hygro—scopicus得到了一正变株UV-8-61，效价比出发菌株提高了2—3倍。近些年来紫外线作为一种基本的诱变因子，也常常和其他一些诱变因子联合作用于微生物而提高诱变效果。胡永兰等用UV和DES(硫酸二乙酯)复合处理梧宁霉素产生菌，得到一株较高的突变株，效价比出发菌株提
兰花的种植方法
兰花的种植方法 兰花喜湿润,忌渍涝.盆土水分过大,易烂根和叶片发黄.浇水要见干见湿,冬季少水,最好用雨水和河水,用自来水要存放数日,浇水不要弄到叶片上.一般生长期每月施一次腐熟稀薄豆饼水,平时不施. 兰花性喜凉爽,忌高温,入冬放入室内注意通风,温度最好在10度左右,春季室外达10度时移到室外. 兰花喜阴,忌阳光直射,耐阴以墨兰最甚,秋兰次之,春兰夏兰需阳光略多一点,因此要根据品种严格控制光照量. 养兰花是一个较为复杂的过程,单靠简单述说很难凑效,需要阅读大量有关养殖和管理兰花的资料,掌握许多知识,并且通过实践,才能取得成效. 一、对栽培基质的要求: 野生兰花生长在背阴、通风、不积水的山地，因此栽培基质要求:通气、松软、漏水性好，呈微酸性。兰花唷?缁揭碎石土、红土砖碎石，也有人用带丛生杂草的土壤经火烤后成碎烤土，以上几种栽培基质都附合通气、透水、微酸等特点，且磷、钾肥丰富，可作兰花栽培基质，但要适当补充氮肥。近几年随着港台及国外养兰选进方法的传入，室内养兰得到较大推广，因此，采用水苔、珍珠岩、火山喷积石、颗粒砖块、颗粒仙土、颗粒泥炭等成为理想栽培的基质。它们的最大优点是便于水份管理和通气。 二、对温度的要求: 温度是生物生存发展的命脉。有生命的兰花，它的生存和发展与温度息息相关。温度适宜，它就生长繁茂;温度过高，它就生长停滞，甚至因闷热伤害而夭折;温度低了，它就进人休眠状态，过低了，它就会因为受到冻害而枯死。 (一) 兰花生根、发芽和正常生长的最佳生长温度为20,28度;2O?以下，虽可生长，但生长缓慢;28?以上，虽生长迅速，但也容易因气温过高而被迫进人休眠状
态。因此，每当气温高于32?时，则应采取加大遮阳密度、增加通风量和提高空气湿度的措施，以保证兰花有高速生长的生态条件。 (二)休眠的适温;兰花休眠期适温为昼温10,16?，夜温5,1O?。但春兰休眠期的适温应控制在10?以下、3?以上，才能度过春化阶段，保证正常开花。休眠期气温过高，虽可打破休眠，提高发芽率，增加发芽次数，但有容易早衰和缩短寿命的弊端。 (三)兰花可耐受的最低温度，春兰为-4?，建兰为-2?，墨兰为2?。 根据我国的地理位置，全国各地很难有全年理想的温度，各地的气温也是不一致的，因此，要根据兰花对温度的需求，应进行必要的人工调节，创造适合兰花生长、休眠的温度。当养兰场所出现不利兰花生长温度时，碰到温度较低时，就要人工加温。兰场较小的话，可用空调、电热器、暖气等加温。如兰场较大，可安装暖气设备，用暖气来加温。在夏天，兰场的温度在30多度时，注意通风一般问题也不大，兰花也能抗一定的高。碰到温度特别高，那就要采取人工降温措施，可用空调、电扇、排风扇、地上喷水、面盆里放水、冷气等等来降温。 三、对湿度的要求: 兰花原生长在深山野林中，周围环境湿度较大，一般为75,一90,之间。兰花70%时生长良好，过干或过湿都易引发兰病。因此，室内外在空气相对湿度60-- 栽培要创造一个适于兰花生长的逐部湿度小气候。兰花下山之后(尤其是种在阳台或房屋平台上，如不采取加湿措施，棚内湿度多低于60,。因此要因地制宜，采取有效方法，提高养兰场所的湿度，以达到合适兰花生长的温度要求，即75,左右，接近兰花原生地的环境湿度。这样兰花生长良好，叶色翠绿，有生气，发芽率高，叶面不起黑点，叶尾不焦黄，开花也多。
中国兰花杂交育种的研究
摘要杂交育种是兰花育种最重要的方法，利用该方法已培育出10万多个洋兰新品种。中国兰花是兰花中重要的观赏种类，但中国兰花的杂交育种工作还刚刚起步。本文根据兰花杂交育种工作环节，结合自己的研究工作，提出了兰花杂交育种程序，并对各工作环节的内容进行了论述。 关键词中国兰花；杂交育种：程序 兰花是兰科植物的总称，它以其优美的花型、丰富的花色、清幽的香气和高尚的品格，深受各国人们的喜爱，在世界花卉中占有十分重要的地位。在兰花业形成和发展的过程中，新品种的选育起着最重要的作用，比如新加坡兰花业的兴旺发达和我国台湾蝴蝶兰产业化的兴起都与其新品种选育工作的进步密不可分。 兰花新品种的选育方法有多种，目前杂交育种是最重要的育种方法。到1995年，在《兰花评论》上登录的杂交种（包括杂交属和集体杂种）已超过10万个（Hunt，1995）。目前每年全世界用杂交方法培育的兰花品种超过3000个。 兰花在我国已有1000多年的栽培历史，栽培的种类以中国兰花为主，在长期栽培过程中，也选育出一些优良品种，这些品种都是利用自然变异用选择育种的方法育成的，已命名的兰花品种在500种以上（陈心启、吉占和，1995）。近年来，不少单位已开展兰花杂交育种工作，有些单位（如四川农科院）也选育出了一些兰花新品种，但总的来说，中国兰花杂交育种工作还刚刚起步，处于探索阶段。本文结合近几年的科研结果，系统地介绍兰花杂交育种方面的知识，以推动我国兰花杂交育种工作的开展。 一、兰花杂交育种程序 兰花杂交育种和其它花卉一样，其育种程序大致包括以下几个步骤：确定育种目标，选配杂交亲本，配制杂交组合，对杂种后代进行选择，品种登录和新品种的繁育和推广。但兰花和其它花卉不同的是，其杂交种子很小，没有胚乳，在自然条件下很难萌发，因此需要通过共生萌发或试管培养的手段培养杂交种子，才能获得杂种植株。兰花的杂交育种程序见图1。 确定育种目标 l 选配杂交亲本 l 配制杂交组合 l 培养杂交种子 1 杂种后代的选择 l 优良株系的繁殖和鉴定 1 品种命名和登录
兰花组织培养技术
兰花组织培养技术 摘要：在适宜的条件下，将兰花植株的外植体在无菌环境中应用人工培养基，通过外植体的采集与处理、培养基的制作、外植体的接种、继代增殖以及驯化移栽等操作技术，可在短期内获得大量幼小的无病毒植株，从而达到增殖扩繁的目的。组织培养技术是经济有效快速繁殖优良品种的方法，也是产生脱毒苗的重要途径。 关键词：组织培养兰花外植体试管苗 花属兰科多年生草本植物，中国兰花为兰科属中的地生兰。其香味怡人，花色淡雅，品种丰富，素有“花中君子”之称。具有很强的观赏价值和经济价值，深受人们的喜爱。此外，其也是目前世界上栽培较广的切花材料之一，兰花的切花生产，需要大批量的种苗，要获得优质高产，兰花种苗必须具备种性一致，生长齐一，长势旺盛的特点。在种苗生产上运用最广泛的是组培快繁和分株。生产实践证明，运用组织培养快繁技术生产种苗，其长势旺盛，品种复壮，抗病性强，切花质量好，对加快优良品种的培育，挽救珍惜濒危种类等起到十分重要的作用。 兰花在植物分类学上属于单子叶植物中的一个科，为多年生草本植物，附生、地生或腐生。兰花根呈圆柱状，属肉质组织，茎很短，高度约为2～3cm，兰叶大多叶边全缘，有的略有锯齿。其花属于不整齐花范畴，总状花序。兰属植物的果实为蒴果，呈三角或六角形，俗称“兰荪“。 一、无菌培养物的建立 （一）培养容器的洗涤及培养基的制作 1.培养容器的洗涤 容器的洗涤是否干净直接影响组织培养的成败，为保证培养材料在瓶内生长健壮，在培养前期一定要对容器进行彻底的洗涤与灭菌。以达到“瓶壁锃亮、水膜均匀，不挂水珠”为标准。洗涤时用洗衣粉水洗刷，再用清水冲洗3～4次，干燥后备用。 2.培养基的制作 培养基是植物组织培养的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到外植体的生长于分化。组培快繁中最常用的培养基主要是MS培养基。母液要根据药剂的化学性质分别配置，一般配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类母液。其配置方法是先进行大量元素的配置，称量时应注意多余的药品不能回放在瓶中，应做其它处理。电子天平在使用时先对其进行调平，然后进行微量元素母液、有机物母液的配制。 当MS母液配好以后，则可进行培养基的制作，继之对琼脂和蔗糖进行称取、溶解，琼脂呈现半透明状时将糖加入容器中溶解，再加入事先吸取好的各类母液混合均匀后转入1L容量瓶中对其进行定容，然后根据培养基的要求对PH进行调整（PH值控制在5.6～5.8测定不得少于3～4次）。进行分装时，一般以培养瓶的1/4～1/3为宜，分装后立即进行灭菌。
兰花育种计划书
杂交育种报告 题目：兰花杂交育种计划书指导老师：周开兵 班级：2012级花卉一班 学号：20120203310032 姓名：于济生
兰花杂交育种计划书 一、兰花杂交育种的目标 通过市场分析和查阅资料发现，蕙兰的花型较大，色泽淡雅，花瓣圆阔丰满，多有香气，且花期长。大一品是蕙兰中八大名品之一，具有高雅的幽香，绝佳的梅瓣，优美的叶态，较高的观赏性等。但是其花芽分化能力较弱，花朵较少，花期较短，经过长期栽培表现出抗性较差，栽培困难的缺点。薛利蝴蝶兰则开花数目极多，单株可超过百朵，且抗性表现较好。本次杂交用薛利蝴蝶兰和大一品蕙兰杂交，希望可以培育出开花数目多，花色淡雅，花期长，适应性强且有香气的新品种。 二、资源收集 通过对育种目标的分析，我选择薛利蝴蝶兰和大一品蕙兰做育种亲本材料。 蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｆａｂｅｒｉ）又称九子兰、九节兰、夏兰。为兰科兰属的地生种。假鳞茎不显著，根粗而长，有分支。茎直立，高约３０～８０ｃｍ，叶５～９枚，长２５～８０ｃｍ，宽０．６～１．４ｃｍ。直立性强，基部常对褶，横切面呈Ｖ形，边缘有较粗的锯齿。花常为浅黄绿色，有深紫红色的脉纹和斑点；花通常香气浓郁。一茎多花，常６～１２朵，萼片长圆披针形或带状披针形；花瓣稍小于萼片；唇瓣３裂不明显，中裂片长椭圆形，有许多透明小乳突状毛，端反卷，边缘有短缘毛，白色，有紫红色斑点［２］。花期３～５月。蕙兰原分布于秦岭以南、南岭以北及西南广大地区，是
比较耐寒的兰花品种之一。 蝴蝶兰（Phalaenopsis aphrodite Rchb. F.）为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。分布在泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚，及中国台湾。 茎很短，常被叶鞘所包。叶片稍肉质，常3-4枚或更多，上面绿色，背面紫色，椭圆形，长圆形或镰刀状长圆形，长10-20厘米，宽3-6厘米，先端锐尖或钝，基部楔形或有时歪斜，具短而宽的鞘。 花序侧生于茎的基部，长达50厘米，不分枝或有时分枝；花序柄绿色，粗4-5毫米，被数枚鳞片状鞘；花序轴紫绿色，多少回折状，常具数朵由基部向顶端逐朵开放的花；花苞片卵状三角形，长3-5毫米；花梗连同子房绿色，纤细，长2.5-4.5厘米；花白色，美丽，花期长；中萼片近椭圆形，长2.5-3厘米，宽1.4-1.7厘米，先端钝，基部稍收狭，具网状脉；侧萼片歪卵形，长2.6-3.5厘米，宽1.4-2.2厘米，先端钝，基部收狭并贴生在蕊柱足上，具网状脉；花瓣菱状圆形，长2.7-3.4厘米，宽2.4-3.8厘米，先端圆形，基部收狭呈短爪，具网状脉；唇瓣3裂，基部具长约7-9毫米的爪；侧裂片直立，倒卵形，长2厘米，先端圆形或锐尖，基部收狭，具红色斑点或细条纹，在两侧裂片之间和中裂片基部相交处具1枚黄色肉突；中裂片似菱形，长1.5-2.8厘米，宽1.4-1.7厘米，先端渐狭并且具2条长8-18
蝴蝶兰组织培养研究进展_综述_
2006,35(1):71-74. Subtropical Plant Science 蝴蝶兰组织培养研究进展(综述) 郑玉忠，张振霞，陈泽华 (韩山师范学院生物系, 广东潮州 521041) 摘要：本文从蝴蝶兰外植体的选择、不同基本培养基、激素及添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治以及生根壮苗方法等，概述蝴蝶兰组培快繁方面的研究进展，为其组培技术研究提供参考。 关键词：蝴蝶兰；组织培养；原球茎 中图分类号：Q943.1；S682.31 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2006)01-0071-04 Progress in Tissue Culture of Phalaenopsis spp. ZHENG Yu-zhong, ZHANG Zhen-xia, CHEN Ze-hua （Department of Biology, Hanshan Teachers College, Chaozhou 521041, Guangdong China） Abstract: The research progress of tissue culture of Phalaenopsis, including the effects of explants sources, culture mediums, hormones and nutrition compositions on multiplication and differentiation of protocorm-like body, the inhibition on browning of explants and methods of rooting and seedling strengthening before transplanting, are reviewed. Some reference materials are also provided for further study in tissue culture of phalaenopsis. Key words:Phalaenopsis spp.; tissue culture; protocorm-like body 蝴蝶兰（Phalaenopsis spp.）属热带或亚热带的兰科植物，其花形奇特，姿态优雅，色彩鲜艳，花期长久，素有“兰花皇后”之美誉，观赏价值极高，深受人们的喜爱，国内外市场的需求量越来越大。蝴蝶兰的传统繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数低，速度慢，不能满足日益增长的市场需求。因此，研究和开发蝴蝶兰具有重要的意义。 组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径，主要通过两条途径：一是利用种子无菌发芽，二是从离体器官诱导产生原球茎，通过原球茎的增殖培养，得到大量幼苗[1]。早在1949年，Potor[2]利用无菌培养技术成功地促使蝴蝶兰花梗上的休眠芽发育成完整植株，该方法经过其他研究人员改进后，曾一度成为蝴蝶兰的主要无性繁殖方式。1974年，Intuwong等[3]利用蝴蝶兰茎尖诱导产生了原球茎状体，再由原球茎分化成植株，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。原球茎是一类呈珠粒状的幼嫩器官，在兰科植物中多以这种器官发育、增殖和分化。 蝴蝶兰的组织培养中有几个关键的时期：原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件，国内外研究人员对蝴蝶兰组织培养进行了广泛的研究，并取得了一定的成效。本文就近年来蝴蝶兰组培快繁技术的研究现状进行综述，包括外植体的选择，不同基本培养基、激素、添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治，以及生根壮苗的方法等。同时展望未来的发展趋势，为该研究领域今后的发展提供有益的信息。 1 外植体的选择 诱导蝴蝶兰原球茎采用的外植体主要有根段[4]、花梗苗根尖[5]、花梗腋芽[6]、茎尖[7]、叶片[8-10]、胚 收稿日期：2005-08-03 基金项目：韩山师范学院青年基金项目（QN200503）资助 作者简介：郑玉忠(1977-), 男, 广东潮阳人, 硕士, 从事植物生物技术研究。 注：张振霞为通讯作者。
分子蒸馏技术及其应用的研究进展(精)
综述与专论 分子蒸馏技术及其应用的研究进展 陈立军陈焕钦 (华南理工大学化学工程研究所,广州510640 摘要分子蒸馏是一种在高真空下进行的特殊蒸馏技术。分子蒸馏是一项国内外正在工业化开发应用的高新分离技术,尚未实现大规模的工业化。分子蒸馏技术同普通蒸馏技术的差别很大。介绍了分子蒸馏基本原理、技术特点、主要装置和优势。此外还详细介绍了分子蒸馏技术在国内外的应用新进展,并提出了未来分子蒸馏领域的重点研究方向。关键词 平均自由程分子蒸馏应用进展R esearch Progress in the T echnique of Molecular Distillation and its Application Chen Lijun Chen H uanqin (R esearch I nstitute of Chemical E ngineering ,Southern China U niversity of T echnology ,G uangzhou 510640 Abstract The m olecular distillation (short -path distillation or unobstructed distillation is a special separation technique of liquid -liquid and a special distillation technique under the high vacuum.It is an industrializing Hi -tech at home and abroad and not used in
兰花杂交育种技术
兰花杂交育种技术 长期以来，兰花的育种以自然选种为主，自种子无菌萌发成功后，开展了兰花品种间、种间及属间的杂交育种。选育新品种在附生兰的品种改良上已获得了巨大成功。 据有关记载，人工杂种兰花约在4万种以上，而且还以每年1000种以上的速度增加。仅远缘杂交就已育成由7个属杂交产生的集体杂种。 利用杂交育种，可创造出新的株型、花色、花型、花序排列及分叉性、花朵寿命（切花及盆花）、增强香气、抗病虫性等。 兰花杂交育种程序 确定育种目标 选配杂交亲本 配制杂交组合 培养杂交种子 杂种后代的选择 优良株系的繁殖和鉴定 品种命名和登录 新品种的繁育和推广? 2.2育种目标 育种目标是指要选育的新品种应该具有什么样的性状。它是新品种选育工作的首要环节，是选配杂交亲本和选择杂交方式的主要根据。因此，育种目标是否可行直接关系到杂交育种工作的成败。 兰花的香味，花色、花型、株型、叶部性状、抗性等都是重要的育种目标。 同时，兰花育种的目标也应根据市场需求而定。 2.3亲本选配 亲本选配是兰花杂交育种最重要的环节之一。 亲本选配一般应遵循以下原则： （l）选配的亲本应具有育种目标所需要的优良性状，且遗传传递力强。 （2）杂交双亲在地理上较远，在生态类型上有所不同。
（3）选配的亲本遗传传递力要强。 （4）选择亲本一般配合力要高。 在兰花亲本选配过程中，除了要遵循上述原则外，还应注意以下几点： （l）选择种子易于萌发的品种作亲本，对那些种子萌发比较困难的兰花（如拖鞋兰），尤其需要注意。 （2）亲本应落实到具体的品种，而不是集体杂种。 （3）选择可育的兰花作亲本。 （4）避免选用第一次开花的兰株作亲本。 2.4杂交种子的培养 杂交种子的培养是兰花育种工作最重要的环节之一，它关系到兰花杂交育种工作的效率和成败。中国兰杂交种子培养比洋兰困难，杂交种子萌发需要的时间长，种子萌发率低，植株再生困难。 张志胜等对中国兰花远缘杂交种子培养结果表明：杂交种子萌发的难易随杂交组合的不同有很大差异，墨兰和大花蕙兰的杂交种子萌发容易，种子萌发后形成原球茎，而国兰种间和品种间的杂交种子萌发难，种子萌发后形成根状茎。 兰花杂交育种始于１９世纪５０年代，是以基因型不同的品种进行交配形成杂种，通过培育选择，获得新品种的较为常用、效果较好的途径之一。１８５６年，英国兰花种植者ＪｏｈｎＤｏｍｉｎｙ成功地将一杂交植株培养开花，揭开了兰花杂交育种新篇章［１］，至２００４年在英国皇家园艺学会（ＲＨＳ）上登陆的杂交种已超过１１万个［４］，而收稿日期：２００７－１１－２８基金项目：广东省科技攻关项目（２００７Ａ０２０２００００４－１０）作者简介：张孟锦（１９８０－），男， 研究实习员广东农业科学２００８年第２ 期 １２０ 且每年以１０００种以上的速度增加。目前，常见的洋兰栽培品种几乎全是杂交种，包括了品种间杂交、种间杂交和属间杂交，其中卡特兰（Ｃａｔｔｌｅｙａ）３０９１０个，蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ）２４１２８个，兰属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）１１５３８个［４］。中国兰花有２０００多年的栽培历史，但其育种起步较晚，品种改良缓慢，直到
玉米分子育种研究现状
玉米分子育种研究现状 王玲琼 （河西学院农业与生物技术学院，甘肃张掖 734000） 摘要：随着分子遗传学的发展和实验能力的提高，分子标记随之出现并且发展迅速，尤其是在玉米遗传育种上的应用。本文通过阅读大量的文献，介绍了分子标记育种在玉米遗传图谱的构建及基因定位、杂种优势群划分、优良品种的获得等方面的应用。 关键词：SSR AFLP 分子标记玉米育种 1.序言 在学习《植物分子育种技术》的课程中，认识到了分子标记在玉米育种中的重要性，但具体内容仍不了解，所以通过查阅文献增进对分子标记的了解，并将了解的内容进一步整理，写了这篇读书报告。分子标记直接表现在DNA水平上，是一种在分子遗传学快速发展而产生的技术。玉米是重要的粮食与饲料作物, 是世界三大作物之一。但是由于对玉米中许多性状的遗传机制缺乏了解, 从而限制了玉米产量的提高与品质的改善, 阻碍了玉米育种工作的进程。建立在分子遗传学基础上的分子标记技术的迅速发展,促进了作物育种研究各个领域的发展。 2.分子标记概述 分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种新的较为理想的遗传标记形式。随着分子生物学的快速发展，分子标记也同样得到非常迅速发展。根据分子标记所依赖的的生物技术的不同，分子标记经历了三代的变化。1974，Graz- dicker 等人在鉴定温度敏感表形的腺病毒DNA突变体时，利用经限制性内切酶酶解后得到的DNA片断的差异，首创了DNA分子标记，即第一代分子标记——限制性片断长度多态性标记（restrictionfragment lengthpolymorphism，RFLP）。第一代分子标记主要是以分子杂交技术为基础的分子标记，1982 年Hamade发现第2 代DNA 分子标记——简单序列重复标记（Simplesequence repeat，SSR）。第2代分子标记是以聚合酶链式反应（PCR）为基础建立。1990年Williams和welsh 等人发明了随机扩增多态性DNA标记（randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）和任意引物PCR（arbitrary primer PCR，AP-PCR）。1991 年Adams 等建立了表达序列标签（expressed sequen- cetag，EST）标记技术。1993 年Zabeau 和Vos 合作发明了扩展片断长度多态性标记（Amplified fragment lengthpolymorphism，AFLP）。1994 年Ziekiewicz 等发明了简单重复间序列标记（inter-simple sequence repeat，ISSR）。1998 年在人类基因组计划的实施过程中，第3代分子标记——单核苷酸多态性（single nucleotidep-
兰花试管开花
目前全世界兰科（Orchidaceae）植物约有800 属，25000~30000 种。在中国，习惯把兰花分为国兰和洋兰。其中，国兰主要有春兰（Cymbidium goeringii）、蕙兰（Cymbidium faberi）、建兰（Cymbidium ensifolium）、寒兰（Cymbidium Kanran）、墨兰（Cymbidium sinensis）五大类；与之相对，洋兰则主要有：卡特兰属（Cattleya）、蝴蝶兰属（Phalaenopsis）、石斛兰属（Dendrobiun）、文心兰属（Oncidium）、万代兰属（Vanda），拖鞋兰属（Paphiopedilum）等[1]。花的形成是一个高度复杂的生物学过程，植物生理学和遗传学的研究已表明花的形成是高等植物所特有的一种生理现象，受到许多因子的调控[2]。而采用试管开花的技术，对于弄清各因子对花形成的作用具有一些显著的优点。目前，试管开花的研究主要围绕2 个方面：开花诱导和成花决定的表达。开花诱导是通过控制培养条件和培养基组成，诱导处于营养生长期的试管苗开花。成花决定的表达是从处于生殖生长的植株上采取花序、花柄、苞叶等作外植体，研究外部因子对花芽再生的影响[3]。在兰花离体培养中，常有试管开花现象的报道；离体培养开花系统，是研究兰花花的分化和发育的理想系统，可以用来探明兰花从营养生长向生殖生长的转变机制。通过研究各种因素对兰花试管开花的影响，进而阐明其调控机理，这在理论和应用上都具有重要的意义。 1 兰科植物试管开花概述 最早进行兰科植物试管开花研究的是法国的Julien Costantin[4]，他发现兰花在离体培养条件下缺少 菌根可以促进开花。利用激素调控兰花试管开花方面，一直是研究的突破口，Goh C J[5]在研究单茎型杂种兰花整体植株花芽诱导和发育的调节作用时，发现了石斛兰整体植株的花芽发端，而且通过添加6-BA还可以促使花芽发育成熟并开花。冯莹等[6]在研究适宜春石斛开花的培养基中同样认为6-BA 有促进花芽的诱导，但是不能正常开放。随后李璐等[7-8]对春石斛试管开花进一步研究证实了冯莹的观点，并认为N、P、K 比例、NH+-N：NO3--N、TDZ、PP333、椰汁对春石斛开花有显著影响；而且在铁皮石斛成花诱导率上获得显著提高。这与王再花等[9]的研究结果一致。在光周期途径诱导成花中，Kerbauy G B10]以文心兰为材料进行试管开花试验，结果表明不同的光强和光周期有可能加快其开花进程[。王熊等[11]探讨了素心建兰生长发育及花芽形成规律，并成功诱导出素心建兰的试管开花。Duan J X等[12]在离体条件下诱导了Doriella Tiny （五唇兰属Doritis pulcherrima × Kingiella philippinensis）花芽的形成。随后，陆续有兰科植物试管开花的研究报道出现。目前为止，已成功诱导试管开花的兰科植物有：建兰[11]、寒兰[13-14]、春兰×大花蕙兰杂种[15]、大根兰、蝴蝶兰[16-17]、Doriella Tiny[12]、文心兰[10]、Psygmorchispusilla[18-19]、Epipogium roseum[20]、Cymbidiumniveo-marginatum Mak.[21]、Bulbophyllum auricomum Lindl[22]、Doritaenopsis and Phalaenopsis[23]以及石斛属中的部分品种（如春石斛[7-8,24-25]、铁皮石斛[8,26]、细茎石斛[9]、金钗石斛[27]、霍山石斛[28]、叠鞘石斛[29]、报春石斛[30]、Dendrobium Madame Thong-In[31-32]、Dendrobium Sonia17[33]、Dendrobium Chao Praya Smile[34]、Friederick’s Dendrobium[35]等）。 2 兰科植物试管开花的成花调控 2.1 植物生长调节剂对试管开花的影响 植物生长调节剂是一类由人工合成的具有类似植物激素生理活性的化合物。植物花芽的分化与内源激素水平关系密切，因此可通过施用外源激素解除休眠、促进花芽分化达到提早开花。 2.1.1 细胞分裂素的影响 细胞分裂素具有诱导器官分化的作用。在研究兰科植物试管开花时，通过调节细胞分裂素比例，诱导其花芽形成和开放。Duan J X等[12] 在研究Doriella Tiny ( 五唇兰属Doritispulcherrima×Kingiella philippinensis)的试管开花中，发现6-BA对花芽的形成有重要作用，在VW培养基中通过添加适量的BA 和蔗糖比例，可促进花芽的形成。另外，研究还发现在没有添加6-BA 的H培养基中，花芽能正常开放，而加入了6-BA后，花芽则不能开放；随后，Duan J X[16]在蝴蝶兰的试管开花中也得出类似结论。说明6-BA 可诱导花芽形成，但对其开花起抑制作用。朱国兵等[13]在对寒兰的快繁和试管成花研究中发现，随着6-BA 浓度的提高其花芽的诱导率呈抛物线状变化，当6-BA 浓度为2.0 mg/L 时，且蔗糖浓度为3.5%时，花芽诱导率达最高。冯莹等[6-8]在对春石斛离体开花研究中发现，6-BA必须在高浓度下才可以促进春 石斛顶端花芽发育成熟并开花，但是高浓度6-BA会导致培养基出现不同程度的褐化，从而影响植株的各种代谢活动，间接影响试管苗开花；随后，进一步研究发现TDZ可高频诱导铁皮石斛试管开花；同时对春石
分子蒸馏技术的原理和应用(精)
分子蒸馏技术的原理和应用 分子蒸馏技术简介 分子蒸馏是一项较新的尚未广泛应用于产业化生产的分离技术，能解决大量常规蒸馏技术所不能解决的题目。分子蒸馏是一种特殊的液－液分离技术，能在极高真空下操纵，它依据分子运动均匀自由程的差别，能使液体在远低于其沸点的温度下将其分离，特别适用于高沸点、热敏性及易氧化物系的分离。由于其具有蒸馏温度低于物料的沸点、蒸馏压强低、受热时间短、分离程度高等特点，因而能大大降低高沸点物料的分离本钱，极好地保护了热敏性物质的特点品质，该项技术用于纯自然保健品的提取，可摆脱化学处理方法的束缚，真正保持了纯自然的特性，使保健产品的质量迈上一个新台阶。 分子蒸馏技术，作为一种对高沸点、热敏性物料进行有效的分离手段，自本世纪三十年代出现以来，得到了世界各国的重视。到本世纪六十年代，为适应浓缩鱼肝油中维生素Ａ的需要，分子蒸馏技术得到了规模化的产业应用。在日、美、英、德、苏相继设计制造了多套分子蒸馏装置，用于浓缩维生素Ａ，但当时由于各种原因，应用面太窄，发展速度很慢。但是，在过往地三十多年中，人们一直在不断地重视着这项新的液－液分离技术的发展，对分离装置精益求精、完善，对应用领域不断探索、扩展，因而一直有新的专利和新的应用出现。特别是从八十年代末以来，随着人们对自然物质的青睐，回回自然潮流的兴起，分子蒸馏技术得到了迅速的发展。 对分子蒸馏的设备，各国研制的形式多种多样。发展至今，大部分已被淘汰，目前应用较广的为离心薄膜式和转子刮膜式。这两种形式的分离装置，也一直在精益求精和完善，特别是针对不同的产品，其装置结构与配套设备要有不同的特
点，因此，就分子蒸馏装置本身来说，其开发研究的内容尚十分丰富。 在应用领域方面，国外已在数种产品中进行产业化生产。特别是近几年来在自然物质的提取方面应用较为突出，如：从鱼油中提取EPA与DHA、从植物油中提取自然维生素E等。另外，在精细化工中间体方面的提取和分离，品种也越来越多。 我国对分子蒸馏技术的研究起步较晚，八十年代末期，国内引进了几套分子蒸馏生产线，用于硬脂酸单甘酯的生产。国内的科研职员也曾经作过一些研究，但未见产业化应用的报道。 分子蒸馏成套产业化装置具有设计新奇、结构独特、工艺先进，可明显进步分离效率。从小试到产业化生产又到小试的反复循环实验探索中，特别解决了产业化生产中轻易出现的突出题目。如有效地解决了物料返混题目，明显地进步了产品质量，创造性地设计了有补偿功能的消息密封方式；实现了产业装置高真空下的长期稳定运行。该项技术属国内领先、国际先进。 截止目前为止已经开发的产品有二十余种，如：硬脂酸单甘酯、丙二醇酯、玫瑰油、小麦胚芽油、米糠油、谷维素等。并已确定了应用分子蒸馏技术的有关工艺条件，为进行产业化生产奠定了基础。 分子蒸馏的原理和装置的结构决定其有如下特点： １、分子蒸馏的操纵温度远低于物料的沸点： 由分子蒸馏原理可知，混合物的分离是由于不同种类的分子溢出液面后的均匀自由程不同的性质来实现的，并不需要沸腾，所以分子蒸馏是在远低于沸点的温度下进行操纵的，这一点与常规蒸馏有本质的区别。 ２、蒸馏压强低： 由于分子蒸馏装置独特的结构形式，其内部压强极小，可以获得很高的真空，因此分子蒸馏是在很低的压强下进行操纵，一般为×10-1Pa数目级（×10-3为托数目级）。
分子标记在番茄抗性育种研究进展
分子标记在番茄抗性育种中研究进展 摘要：本文综述了近年来RFLP RAPD SSA AFLP CAPS和SNP分子标记技术在番茄抗性育种上的应用，分析了目前的研究进展，对今后研究的重点进行了讨论。 关键词：分子标记；番茄；抗性；进展。 Molecular marker in tomato resistance breeding research progress in Abstract: This paper reviewed recent RFLP RAPD SSA AFLP CAPS and SNP in the application of tomato resistance breeding, analysis of the current research progress, the focus of the future research are discussed. Key words: Molecular markers; tomato; resistance; progress. 番茄既是蔬菜也是水果, 其中含有丰富的维生素C对心血管有良好的保护作用；番茄红素具有良好的抗氧化作用,能清除体内废物,增加免疫力。它也是营养师大力提倡的减肥食品。它早已成为人们日常生活中的不可缺少的食物。 随着遗传学的发展,遗传标记的种类和数量也在不断增加。形态标记、细胞学标记、生化标记都是以基因表达的结果(表现型)为基础,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映。与表型标记相比,DNA分子标记具有能对各发育时期的个体、组织、器官甚至细胞作检测,既不受环境的影响,也不受基因表达与否的限制;数量丰富;遗传稳定;对生物体的影响表现“中性”以及操作简便等特点。分子标记的所有这些特性,奠定了它具有广泛应用性的基础。本文在介绍一些常用的DNA分子标记技术基础上,综述分子标记应用于番茄遗传育种研究的新进展,并就我国今后番茄分子育种主要研究方向进行讨论。 分子标记的介绍 分子标记的概念:广义的分子标记是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。狭义分子标记是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片段。 在番茄遗传育种研究工作中使用的DNA分子标记主要涉及基于Southern杂交的限制性片段长度多态性标记( RFLP)、基于PCR技术的DNA扩增方法的随机扩增多态性DNA标记( RAPD),简单重复序列标记(SSR)、以及基于PCR与酶切相结合的扩增片段长度多态性标记(AFLP)、切割扩增的多态性序列标记(CAPS)和单核苷酸多态性(SNP) 等。 2.分子标记基本原理 RFLP(限制性片段长度多态性, restriction fragment length polymorphism,简称RFLP)基本原理是:植物基因组DNA经限制性内切酶酶切后,通过电泳将大小不同的酶切片段按照各自的长度分离,通过Southern吸印与标记的探针杂交,放射自显影检测酶切片段的多态性,此方法稳定可靠。 RAPD(随机扩增的DNA多态性，random amplified polymorphic DNA,简称RAPD)是以基因组总DNA为模板,利用随机引物对模板进行PCR扩增得到多态性DNA片段,然后通过电泳检测片段的多态性,以此来诊断生物体内在基因排布与外在性状表现规律的技术。它基于PCR,无需预先知道DNA序列信息。 简单重复序列(simple sequence repeats,简称SSR)又叫微卫DNA( microsatellite DNA)。所谓微卫星是由2~ 6bp的重复单位串联而成,一个微卫星长度一般小于100bp,不同品种或个体核心序列的重复次数不同,但重复序列两端序列多是保守的单拷贝序列,通过PCR扩增其间的核心微卫星DNA序列,利用电泳分析不同基因型个体在每个SSR位点上的多态性。 AFLP (扩增片段长度多态性，amplified fragments length polymorphism,简称AFLP)原理是把限制性酶切片段通过PCR反应进行扩增,再把扩增好的酶切片段通过聚丙烯酰胺凝胶等高分辨率的分析胶电泳,最后检出片段的多态性。