含中药骨金散血清对大鼠成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

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黑龙江医药科学
２ １年 ６ 第 ３卷 第 ３ ０２ 月 ５ 期
含 中药 骨金 散 血清 对 大 鼠成骨 细胞 Ｏ Ｇ、 ＡＮＫＬ ｍＲ Ｐ Ｒ ＮＡ 表 达 的影 响
张 志长 李 ， 菲。毛金 军 王淑香 江清 林 姚 海涛 赵锦 程 ， ， ， ， ，
（． １ 佳木 斯 大 学基 础 医学 院 ， 黑龙 江 佳 木斯 １ ４ ０ ；． 城 县 第－ Ａ． 医院 ， 东 郯 城 ２ ６ ０ ） ５ ０ ７ｚ 郯 － 民 山 ７ １ ０
备 含 骨 金 散 血 清 。 外 培 养 成 骨 细 胞 ， 察 舍 药 血 清 对 成 骨 细 胞 的 增 殖 和 Ｏ Ｇ、 ＡＮ ＮＡ 的表 达 的 影 响 。 果 ： 假 手 体 观 Ｐ Ｒ ＫＬ ｍＲ 结 与
术 组 相 比 ， 卵 巢 大 鼠股 骨 骨 密 度 明 显 降低 （ ＜ Ｏ ０ ） 去 Ｐ ． １ ，低 剂 量 的 骨 金 散 组 和 高 弃 量 组 大 鼠 股 骨 骨 密 度 高 于去 卵 巢 组 Ｊ （ ＜ ０ ０ ） 低 剂 量 的 骨金 散 组 和 高 荆量 组 血 清促 进 成 骨 细 胞 的 增 殖 （ ＜ ０ ０ ） 升 高 Ｏ Ｇ ＮＡ 表 达 水 平 （ Ｐ ．１ 。 Ｐ ．５ ， Ｐ ｍＲ Ｐ＜ ０ ０ ） ．１，
松的机制。 １ 材 料 和 方 法
１ １ 材 料 ．
接 种 于 ９ 孔 板 中 ， 于 每 孔 中 加 入 １０ Ｌ 的 细 胞 悬 液 。 别 ６ 并 ０９ 分
设 置假手术组 、 型组 、 金散 低剂量 组、 金散高剂量组 ， 模 骨 骨 每 组设 置 ５ 平 行 的 复 孑 。 于 恒温 培 养 箱 中 继 续 培 养 ， 细 个 Ｌ置 待 胞 发 生 贴壁 现 象 后 ， 每 孔 中分 别 加 入 Ｉ ０ Ｌ的 假 手 术 组 血 于 Ｏ＃
１ 日龄 新 生 小 鼠 ６ ， 用 “ 进 二 次 酶 消 化 法 ”“ 复 贴 只 采 改 、反 壁法” 离纯化成骨细胞 。 ２ 分 第 天换 液 ． 去 未 贴 壁 的 细 胞 。 除 以 后 隔 日换 液 １ 。 细 胞 长 满 瓶 底 时 ， ０ ２ ％胰 蛋 白 酶 消 次 当 以 。５ 化、 代， 传 收集 第 三代 细 胞 。 用 碱 性 磷 酸 酶染 色 的方 法 对 成 采 骨 细 胞 进行 鉴 定 ， 性 反应 呈 玫瑰 红 色 。 阳 １２ ４ 含 药 血 清 对 成 骨 细胞 增 殖 的 影 响 ．． 取 处 于对 数 生 长 期 的 成 骨 细 胞 ， 微 镜 下 计 数 。 细 胞 显 将
的 骨 吸 收 作 用 ， 可 能与 其 治 疗 骨 质 疏 松 的 机制 有 关 。 这
关键词 ： 骨金 散 ； 质疏 松 ； 密度 ； 保 护 蛋 白 ； 卵 巢 大 鼠 骨 骨 骨 去 中 图 分 类 号 ： ２ ５ 文 献标 识 码 ： Ｒ ８ Ａ 文 章 编 号 ： ０ ８ １ ４ ２ １ ） ３ ０ ０ —０ １ ０ 一Ｏ ０ （ ０ ２ ０ — ０ ４ ３ １ ２ ３ 乳 鼠成 骨细 胞 的 分 离 、 养 、 定 ．． 培 鉴
降低 Ｒ ＡＮＫ ＮＡ 的表达水平 （ Ｌ ｍＲ Ｐ＜ ０ ０ ） 使 ｏ ＧｍＲ ． １， Ｐቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＮＡ／ ＡＮＫ ｍＲ Ｒ Ｌ ＮＡ的表达比值升高 （ Ｐ＜ ０ ０ ） 结论 ： ．１ 。 中药骨金
散 能增 加 去 势 大 鼠 Ｂ ＭＤ， 进 成 骨 细胞 增 殖 ， 加 成 骨 细 胞 Ｏ ＧｍＲ 促 增 Ｐ ＮＡ 表 达 。 低 Ｒ 降 ＡＮＫＬ ＮＡ 表 达 ， 挥 抑 制 破 骨 细胞 ｍＲ 发
骨 、 虫 等 十 余 味 中 药 组 成 ， 床 应 用 证 实 可 增 加 骨 质 疏 松 方 临
病 人 的 骨 量 ， 轻 疼 痛 等 症 状 ， 可 促 进 骨 质 疏 松 所 致 骨 折 减 并 的 愈合 。 研 究 通 过 去 卵 巢 手 术 ， 立 大 鼠绝 经 后 骨 质 疏 松 本 建 动 物 模 型 ， 察 含 中 药 骨 金 散 血 清 对 成 骨 细 胞 的 增 殖 及 观 ＯＰ Ｒ Ｇ、 ＡＮＫＬ ｍＲ ＮＡ 表 达 的 影 响 ， 讨 骨 金 散 治 疗 骨 质 疏 探
骨 质 疏 松 症 （ ｓｅｐｒｓ ， ） 一 种 广 泛 发 生 的 骨 吸 Ｏ ｔ ｏｏｉ ０Ｐ 是 ｏ ｓ 收 性 的 疾 病 ， 的 特 征 是 骨 量 减 少 、 组 织 超 微 结 构 发 生 退 它 骨 化 ， 脆性增 加 ， 骨 导致 发 生 骨 折 的 危 险 性 增 高 的 一 种 全 身 性 骨 代 谢 性 疾 病 ［ ， 一 种 老 年 常 见 病 和 多 发 病 ， 最 常 见 的 １是 ］ 其 类 型为 绝 经 后 骨 质 疏 松 。 金 散 由 三七 、 蝎 、 香 、 药 、 骨 血 乳 没 龙
摘要： 目的 ： 本研 究 旨在 探 讨 含 中 药 骨金 散 血 清 对 成 骨 细 胞 的 增 殖 及 ＯＰ ＲＡ Ｇ／ ＮＫＬ 系统 的 影 响 。 法 ： 月龄 雌 性 大 鼠 ４ 方 ６ ８
只 ， 机 分 为 假 手 术 组 、 型 组 、 金 散 低 剂 量组 和 骨金 散 高 剂 量 组 ， 组 １ 只 ， 型 组 、 随 模 骨 每 ２ 模 骨金 散 低 剂 量 组 和 骨 金 散 高 剂 量 组 大 鼠 建 立 去 卵 巢 大 鼠 骨 质 疏松 的 动 物 模 型 ，周 后 低 剂量 骨 金 散 组 和 高荆 量 骨 金 散 组 按 １ ８ ／ｇ和 ３ ６／ ｇ灌服 骨金 散 ， 日一 ４ ．ｇｋ ．ｇ ｋ 每 次 ； 型组 和假 手 术 组 均 每 天 一 次 生理 盐 水 灌 胃。 续 给 药８ 后 处 死 大 鼠 ， 察 骨 金 散 对 去 卵 巢 大 鼠 股 骨 骨 密度 的影 响 ， 模 连 周 观 制